江苏省启东市高中生物专题5DNA和蛋白质技术课题2多聚酶链式反应扩增DNA片段第1课时PCR的反应过程基础知识练习新人教版选修120170810221.wps

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1、基础知识:PCRPCR 的反应过程 1 在 PCR反应中,只有一个 DNA的片段作为模板,经过一次循环后,含引物 的 DNA单 链占 DNA总链数的( ) A1/2 B.1/4 C.1 D.1/8 2 多聚酶链式反应(PCR)是一种体外迅速扩增 DNA 片段的技术。请回答下列问题: (1)DNA 的两条链是反向平行的,通常将 的末端称为 5,端,当引物与 DNA母链通过碱 基互补配对结合后,DNA 聚合酶就能从引物的 开始延伸 DNA链。 (2)PCR 利用了 DNA的热变性原理解决了打开 DNA双链的问题,但又导致了 DNA 聚合酶失活的新 问题。到 20世纪 80 年代,科学家从一种 Ta

2、q细菌中分离到 ,它的发现和应用解决了 上述问题。要将 Taq细菌从其它普通的微生物中分离出来。所用的培养基叫 。 (3)PCR 的每次循环可以分为 三步。假设在 PCR 反应中,只有一个 DNA 片段作为模板,请 计算在 5 次循拜后,反应物中大约有 个这样的 DNA 片段。 (4)简述 PCR 技术的主要应用(要求答 2 项)_ _ _。 3 在 PCR扩增循环过程中,下列说法正确的是( ) A在每次循环中,变性所用的时间是一样多的 B在每次循环中,复性所用的时间是一样多的 C在每次循环中,延伸所用的时间是一样多的 D以上说法都不正确 4 PCR 技术的操作步骤依次是( ) A高温变性、中

3、温延伸、低温退火 B高温变性、低温退火、中温延伸 C中温延伸、高温变性、低温退火 D中温延伸、低温退火、高温变性 5 分离血红蛋白溶液时,离心后试管的溶液分四层,血红蛋白在第( )层。 A一 B二 C三 D四 6 在血红蛋白的整个提取过程中,不断用磷酸缓冲液处理的目的是( ) A防止血红蛋白被氧化 B血红蛋白是一种两性物质,需要酸中和 C磷酸缓冲液会加速血红蛋白的提取过程 D让血红蛋白处在稳定的 pH 范围内,维持其结构和功能 7 在 PCR的实验操作中,下列说法正确的是( ) 1 PCR 所用的缓冲液和酶要在常温下储存 离心管的盖子一定要盖严 用手指轻弹离心管壁 离心的目的是使反应液集中在离

4、心管的底部 A B. C. D. 8 PCR 过程与细胞内的 DNA 复制过程相比,主要有两点不同,它们是( ) PCR 过程需要的引物是人工合成的单链 DNA 或 RNA PCR 过程不需要 DNA 聚合酶 PCR 过程中 DNA 的解旋不依靠解旋酶,而是通过对反应温度的控制来实现的 PCR 过程中,DNA不需要解旋,直接以双链 DNA为模板进行复制 A B. C. D. 9 PCR 技术的操作步骤依次是( ) A高温变性、中温延伸、低温复性 B. 高温变性、低温复性、中温延伸 C中温延伸、高温变性、低温复性 D. 中温延伸、低温复性、高温变性 10 关于 DNA 粗提取与鉴定实验的有关说法

5、正确的是( ) 充分溶解 DNA的盐溶液是 0.14mol/L的 NaCl溶液 实验中提取较纯净的 DNA利用了 DNA不溶于酒精的特点 对最后提取出 DNA用二苯胺试剂鉴定时需用酒精灯直接加热 实验操作过程中先后两次加入蒸馏水的作用相同 参考答案: 1 答案: B 解析: 经过一次循环后,DNA单链共 4条,含引物 的 DNA单链只有 1 条。 2 答案: 磷酸基团 3端 耐高温的 TaqDNA 聚合酶 选择培养基 变性、复性 和延伸 32 遗传疾病的诊断、刑侦破案、古生物学、基因克隆和 DNA序列测定等(要求 答 2 项) 解析: 本题考查 PCR技术有关知识。DNA 的两条链是反向平行的

6、,通常将含有游离的磷酸基团 的末端称为 5,端,而 DNA 聚合酶从引物的 3开始延伸 DNA链;在体外扩增 DNA时不用解旋酶 而是用热变性处理的方法打开 DNA双链,因此需要使用耐高温的 DNA聚合酶;PCR 的每次循环 可以分为变性、复性和延伸三个步骤,五次循环后得到 25个 DNA片段。PCR 技术有广泛的应用, 可以用于遗传疾病的诊断、刑侦破案、克隆基因等方面。 3 答案: D 解析: 2 4 答案: B 解析: PCR技术的操作步骤依次是:高温变性、低温退火、中温延伸。 5 答案: C 解析: 分离血红蛋白溶液时,离心后可明显观察到试管中液体分四层,从上向下数依次为: 无色透明的甲

7、苯层,白色薄层固体(脂溶性物质的沉淀层)、红色透明液体(血红蛋白水溶液)、 暗红色沉淀物(其他杂质),故血红蛋白分布于第三层。 6 答案: D 解析: 利用磷酸缓冲液模拟细胞内 pH环境,保证血红蛋白的正常结构和功能,便于分离观 察和研究。 7 答案: C 解析: PCR 所用的缓冲液和酶需装成小份,并在-20储存;盖严离心管口的盖子,防止实验中外 源 DNA污染;用手指轻轻弹击管的侧壁,使反应液混合均匀;离心的目的是使反应液集中在离心 管的底部,提高反应效果。 8 答案: C 解析:PCR 过程与细胞内的 DNA 复制过程相比较,主要有两点不同:(1)PCR 过程需要的引物是人 工合成的单链 DNA或 RNA,长度通常为 2030 个核苷酸。(2)PCR过程中,DNA解旋不依赖解旋酶, 而是通过对反应温度的控制来实现的 9 答案: B 10 答案: B 3

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