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1、,超快速三重四极杆液质联用仪LCMS-8030特点及应用,岛津国际贸易（上海）有限公司 分析仪器市场部 莫海清 2019/6/16,2,对于三重四极杆液质联用仪的要求及应用领域,灵敏度 重现性 速 度 稳定性 操作简便 高性价比,药物研发,生命科学,化 工,分子成像,纳米技术,食品安全,电 子,新能源,环 境,法医学,3,仪器尺寸 (mm) 长: 1180 高: 560 宽: 530 重量: 130 Kg,4,5,岛津LCMS-8030市场定位,MRM 灵敏度,价格,6,LCMS-8030的离子路径,1st 真空室: 100 to 200 Pa,2nd : 5 Pa,3rd : 0.1 Pa,
2、4th : 3 x 10-3 Pa,大气压,由一个机械泵和一个三级差动涡轮分子泵构成的四级真空体系,40 L/S,260 L/S,210 L/S,机械泵,7,离子可以飞多快?,基本电荷: z 加速电压: U 离子质量: m,= 1.602 x 10-19 As = 10 V = 300 g x mol-1 / 阿伏加德罗常数,v = 9130 km/h = 8 马赫 = 253 cm/ms,理论上, 通过MS/MS离子光学系统的时间大约是0.4 ms。,1 米,U = 10 V,8,瓶颈,离子在碰撞室内与气体(氮气或者氩气)碰撞后失去动能 在极端情况下, v = 0 cm/ms 如果碰撞室内没
3、有某种方式给离子加速的话，飞行时 间会增加到50ms。,9,离子,赝势与离子极性无关,赝势横截面图,岛津碰撞室技术,UFsweeperTM 碰撞室技术,通过Pseudo potential（赝势）梯度快速传输离子,10,岛津碰撞室技术,离子传输质量范围: 四极杆 六极杆 八极杆,离子聚焦能力 : 四极杆 六极杆 八极杆,Pseudo-potential；,V*(r) ,1,(IC) 8,IC: 离子导入部分的内切圆,简化方程:,r0: RF离子导入部分的内圆半径 V0: RF 电压 n: 离子导入部分的电极数目,11,为分析物 1 / 碎片 1 设定 Q1, 碰撞室和 Q2 电压,等待片刻 (
4、切换时间或扫描延迟时间),为分析物 1 / 碎片 2 设定 Q1, 碰撞室和 Q2 电压,监测碎片1的信号 (驻留时间),等待片刻 (切换时间或扫描延迟时间),为分析物 2 / 碎片 1 设定 Q1, 碰撞室和 Q2 电压,等待片刻 (切换时间或扫描延迟时间),监测碎片1的信号(驻留时间),为分析物 2 / 碎片 2 设定 Q1, 碰撞室和 Q2 电压,等待片刻 (切换时间或扫描延迟时间),监测碎片2的信号(驻留时间),监测碎片2的信号(驻留时间),MRMs分析状态下的质谱仪工作流程,12,传统的RF电压切换方式,LCMS-8030采用的超快速RF电压切换方式,RF 稳定时间 2.5 msec
5、.,RF 稳定时间 0.4 msec.,离子强度稳定时间小于1 msec.,离子强度稳定时间约3 msec.,延迟时间（Pause Time）,实际离子强度,如果采用较短的延迟时间: 重现性更好,如果采用较长的延迟时间: 重现性变差。,驻留时间（Dwell Time）,14,实现高速离子传输的碰撞室 加速离子在碰撞室内的传输从而实现更快的MRM测定 快速响应的四极杆质量过滤器(Q1和Q3) 延迟时间最小化以获得更好的重现性,LCMS-8030 融合上述关键技术，即便是正负极性同时测定条件下，也可以实现更快速的MRM测定。,关键技术,15,无需妥协!,%RSD: 1.92,%RSD: 0.79,
6、%RSD: 0.48,阿普唑仑,16,1.00,1.25,1.50,1.75,2.00,min,0,0.5,1.0,1.5,2.0,维拉帕米 1 g/mL m/z 455.2 165.0 延迟时间 3msec 驻留时间 3msec,x106,1.00,1.25,1.50,1.75,2.00,min,0,0.5,1.0,1.5,2.0,x106,Dummy transition m/z 470.0 165.0,SHIMADU LCMS-8030,什么是串扰?,17,出色的线性,孔雀石绿,18,高压电源 实现高速极性切换,LCMS-2010,HV power supply(+),HV power
7、supply(-),positive ion mode,HV power supply(+),HV power supply(-),negative ion mode,LCMS-8030,HV cable,Ionization probe,专利申请中: PCT/JP2005/016526,超快速极性切换技术,19,Ch1 Data,Ch2 Data,Ch2 Vol.,Ch26 Data,NEG Vol.,Ch27 Vol.,Ch27 Data,POS Vol.,Ch1 Vol.,Ch1 Data,数据采集周期,Ch1,驻留时间 延迟时间 极性切换时间,数据采集周期（Loop Time）,超快速
8、MRM和超快速极性切换技术的融合,20,AT 6410 Dwell:5, Pause:5, PN:500,TQD, AT 6430 Dwell:5, Pause:5, PN:20,LCMS-8030 Dwell:3, Pause:1, PN:15,RSD,36.87%,4.62%,2.20%,以各公司的设定值(msec)进行测定 对于尖锐峰也可采集多个数据点数，因此，重现性良好,API-3200 Dwell:5, Pause:5, PN:700,192.66%,0.25,0.50 min,0.30,0.35,0.40,0.45,四唑嘧磺隆,超快速MRM和超快速极性切换技术的融合,21,10 点
9、 峰宽3sec,MRM测定通道数最大化,22,数据采集时间的优化- “MRM 同步” 仅在保留时间窗口范围内采集目标化合物的数据。从而大幅提高了多组分同时分析时的数据采集点数，有助于提高重现性。,数据采集点数最大化,23,传统的MRM事件时间设置方式,数据采集周期 最大 0.662s 316 种化合物,%RSD 平均 12.3%,驻留时间 1msec 延迟时间 1msec,24,MRM同步设置的优势,数据采集周期 最大 0.116s 43 种化合物,%RSD 平均 3.4%,驻留时间 1msec 延迟时间 1msec,25,316种农药: MRM同步测定,相同MRM事件时间,15 point
10、%RSD 5.94% Area 1,176,956 Height 316,707,MRM 同步,106 point %RSD 0.45% Area 1,155,794 Height 329,294,嘧菌胺,26,根据扫描速度和 m/z 两者设置适用于四极杆的电压，使用这种革新方法将灵敏度的损失降至最低。,0.0,1.0,2.0,3.0,4.0,5.0,6.0,7.0,8.0,9.0,0.0,2.5,5.0,7.5,(x100,000),271.1,226.9,TIC,0.0,1.0,2.0,3.0,4.0,5.0,6.0,7.0,8.0,9.0,0.0,1.0,2.0,3.0,(x1,000,
11、000),270.9,226.8,TIC,2:BPA,2:E2,1:BPA,1:E2,使用更高的扫描速度，灵敏度没有损失。,2.超快速扫描技术15,000 u/s,1.传统方法 15,000 u/s,扫描速度u/sec,峰高归一化 125 u/sec,1. 传统方法 15,000 u/s,2. 超快速扫描技术15,000 u/s,专利申请中: PCT/JP2008/001282,超快速扫描技术,27,专利申请中: PCT/JP2008/001282,马修图,原有技术: U/V常数控制,新技术: U/V (RF增益)控制,新技术: RF偏置控制,超快速扫描技术,28,扫描速度比较,LCMS-80
12、30具有目前世界上最快的正负极性切换(15 msec) 和子离子扫描 (15,000 u/sec)速度， 在各种扫描分析时,29,注: 扫描a: 全扫描或选择离子传输 通过所有离子b 或碎片: 在设定的质荷比范围内通过所有离子或碎片 离子碎裂c: 通过与氩气碰撞使离子碎裂 设定d: 设定通过特定质荷比的离子,扫描功能,30,母离子扫描,31,500amu/sec,3,000amu/sec,6,000amu/sec,在不同的扫描速度下没有质量偏差！,Result from Vender X,LCMS-8030,扫描速度比较,32,中性丢失扫描,33,参数设置,34,Q3 SCAN TIC,NL
13、161 u,NL 175 u,NL 145 u,NL 159 u,NL 189 u,compound 6,compound 7,Q3 SCAN,Q3 SCAN,NL 161 u,NL 175 u,compound 6,compound 7,Flow rate: 0.5 mL/min Total interval: 0.185 sec Q3 scan; 0.06 sec CNLS, m/z 500-600, 6000 u/sec NL 161 u; 0.025 sec NL 175 u; 0.025 sec NL 145 u; 0.025 sec NL 159 u; 0.025 sec NL 1
14、89 u; 0.025 sec,各种中性丢失基团研究,35,compound 6,Scan Speed: 6000 u/sec,Scan Speed: 2300 u/sec,Scan Speed: 1100 u/sec,Scan Speed: 500 u/sec,Scan Speed: 6000 u/sec,Scan Speed: 2300 u/sec,Scan Speed: 1100 u/sec,Scan Speed: 500 u/sec,不同扫描速度比较,36,同步检查扫描,下述任一扫描方式: Q3 全扫描 母离子扫描 中性丢失扫描 MRM,均可作为 检查扫描 触发 子离子扫描,37,检查
15、扫描事件参数设定,38,检查扫描事件参数设定,Chapter 11, Page 322, Operation Manual,设定挑选同一母离子的次数,以所选择的母离子质量数为中心设定正负值,在上一次数据采集事件之后对于选定的母离子扣除特定的时间周期,39,检查扫描事件参数设定,质谱图,质量差: m 峰强度比: 相对母离子的同位素丰度%,40,单触式安装或移除,位置调节旋钮: -2mm至+3 mm。,ESI 离子源,全新设计的锥形喷雾毛细管最大限度地减少了样品堵塞。 实现免工具维护。,41,可选离子源,更换离子源简便快速 自动识别 通过软件设置全部参数 电压, 气体流速, 温度,DUIS,APC
16、I,42,长期稳定性,环虫酰肼,43,DL (直管) 无需卸除真空即可更换,孔板 无DL时保护真空,Drying gas in,Drying gas out,模块加热器 Max.500 deg. C (ESI,DUIS) Max.300 deg. C (APCI),专利申请中JP H11118764 ,JP 2006-170689,除溶剂单元: DL,44,45,46,速度无可比拟 耐用性 操作简便 高性价比,第一部分小结,500 MRM通道/秒 超快速扫描 超快速极性切换 超快速RF电源,易于维护 无需卸除真空即可更换DL,47,MRM 优化 同步检查扫描 食品安全分析应用实例,第二部分内容
17、,48,MRM 优化流程,母离子计算,选择拟优化参数,开始MRM 优化,三个参数: I. Q1 预四极偏置电压, II. 碰撞能量, III. Q3 预四极偏置电压,选择子离子扫描参数,49,精确质量数计算(AMC),母离子的质量数仅保留小数点后一位。 (e.g.: 734.46-734.5) 如果仅知道化合物的分子式，AMC也可以计算出所有可能的加和方式。,50,优化模式,步骤 1: Q1 预四极偏置电压,步骤 2: 不同碰撞能下子离子扫描,步骤 3: Q3预四极偏置电压,每一个化合物进样3次,鉴于优越的仪器稳定性，通常可以省略步骤 1 和 3。,52,MRM 优化结果,53,System
18、Configuration,完成优化,55,同步检查扫描,下述任一扫描方式: Q3 全扫描 母离子扫描 中性丢失扫描 MRM,均可作为 检查扫描 触发 子离子扫描,56,食品安全分析应用实例,分析三种蔬菜基质中的农药残留(姜,大葱和韭菜）,化合物表,57,Column : Shim-pack XR-ODSII (2.0 mmI.D. x 75 mmL., 2.2 m) Mobile phase A : 0.1% formic acid Mobile phase B : acetonitrile Gradient program : 0 %B (0 min) - 100 %B (7.0-7.5
19、min) - 0 %B (7.51 - 10 min) Flow rate : 0.5 mL / min Injection volume : 2 L Column temperature : 40 degree C,食品安全分析应用实例,目的: 通过分析三种蔬菜基质中加标样品，考察仪器重现性和准确性。,利用20 ppb 浓度加标样品建立单点工作曲线。 考察测定 5 ppb 浓度加标样品时的准确性。,色谱条件：,58,MRM 优化流程,Q3全扫描,选择拟优化参数,开始MRM 优化,三个参数: I. Q1 预四极偏置电压, II. 碰撞能量, III. Q3 预四极偏置电压,选择子离子扫描参数,
20、59,Fipronil 435.00330.05 (-),Abamectin 890.60145.10 (+),Pyridaben 365.00147.20 (+),Phoxim 299.0077.15 (+),Isofenphos-methyl 332.00231.00 (+),Difenoconazole 406.00251.05 (+),Triazophos 314.00162.05 (+),Diflubenzuron 311.00158.05 (+),Parathion 292.0094.00 (+),Isocarbophos 273.00231.00 (+),Carbaryl 202
21、.00145.15 (+),Pyrimethanil 200.00107.10 (+),Carbofuran 222.00165.10 (+),Aldicarb 116.0089.10 (+),Methyl Parathion 264.00223.15 (+),Acetamiprid 223.00126.00 (+),Imidacloprid 256.00209.05 (+),3-Hydroxycarbofuran 238.00163.10 (+),Methomyl 163.0088.15 (+),Aldicarb sulfoxide 207.00132.05 (+),Omethoate 21
22、4.00125.00 (+),Carbendazim 192.00160.15 (+),Acephate 184.00143.05 (+),Methamidophos 183.0094.10 (+),Standard mix, 1ug/mL,24 种农药混标: 1 ppm,60,一次设定浏览多个数据,定量浏览器,同步化合物名称，色谱图与质谱图以及校正曲线同时显示,校正曲线的修改 直观准确的峰积分计算, %RSD等 从Excel表中拷贝和粘贴 自动判断违禁组分 e.g.; LOD, LOQ, MRL etc,61,Dwell time: 30 msec Accuracy is not so go
23、od.,62,Dwell time: 200 msec Accuracy is getting better.,63,农药标准品线性范围,粗体字表示: Dwell time =200 msec, Others: 30 msec %RSD 以最低浓度点计算(n=6),64,农药标准品线性范围,粗体字表示: Dwell time =200 msec, Others: 30 msec %RSD以最低浓度点计算(n=6),65,农药标准品线性范围,红色斜体字表示: Dwell time = 400 msec, Q3: Low 粗体字表示: Dwell time =200 msec, Others: 3
24、0 msec %RSD以最低浓度点计算(n=6),66,农药标准品线性范围,红色斜体字表示: Dwell time = 400 msec, Q3: Low 粗体字表示: Dwell time =200 msec, Others: 30 msec %RSD以最低浓度点计算(n=6),67,吡虫啉,甲萘威,对硫磷,阿维菌素B1a,30 msec 200 msec 400 msec,不同驻留时间的XICs谱图,30 msec 200 msec 400 msec,30 msec 200 msec 400 msec,30 msec 200 msec,68,姜 大葱 韭菜,分别添加20 g/kg 和 5
25、g/kg 的农药混标 20 g/kg; 建立单点校正曲线 5 g/kg; 测定,在100 L 预处理过的样品中添加100 L 水 (制成20 g/kg 和5 g/kg 溶液),0.45 m 微膜过滤,LCMS-8030进样分析,样品前处理,目的: 通过分析三种蔬菜基质中加标样品，考察仪器重现性和准确性。,利用20 ppb 浓度加标样品建立单点工作曲线。 考察测定 5 ppb 浓度加标样品时的准确性。,69,生姜样品测定结果,20 ppb (100 pg on column), n=6 5 ppb (25 pg on column), n=6,70,生姜样品测定结果,20 ppb (100 pg
26、 on column), n=6 5 ppb (25 pg on column), n=6,71,大葱样品测定结果,20 ppb (100 pg on column), n=6 5 ppb (25 pg on column), n=6,72,大葱样品测定结果,20 ppb (100 pg on column), n=6 5 ppb (25 pg on column), n=6,73,韭菜样品测定结果,20 ppb (100 pg on column), n=6 5 ppb (25 pg on column), n=6,74,韭菜样品测定结果,20 ppb (100 pg on column), n=6 5 ppb (25 pg on column), n=6,75,LCMS-8030 是用于定性定量分析的通用平台。 基于流动注射的MRM优化方式非常容易，并且更加准确。 Quant Browser（定量浏览器） 促进和加速定量数据后处理的工作流程。 即使对于复杂基质样品分析也可以获得非常好的定量结果。,总 结,