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1、第一部分 知识落实篇 专题八 生物技术实践 第一讲 微生物的利用和生物技术在食品加工中的应用,1.微生物的分离和培养。 2某种微生物数量的测定。 3培养基对微生物的选择作用。 4利用微生物发酵来生产特定的产物以及微生物在其他方面的应用。,栏目链接,构建网络 内化体系,栏目链接,构建网络 内化体系,栏目链接,构建网络 内化体系,栏目链接,构建网络 内化体系,栏目链接,(1)提示：防止培养皿盖上的水珠滴入培养基造成污染。 (2)提示：一样，都是为了保证菌种单个分布。 (3)提示：掌握取食泡菜的时机。,构建网络 内化体系,栏目链接,考点1 微生物的培养和应用,核心考点 归纳整合,1微生物的分离和计数
2、 (1)土壤中分解尿素的细菌的分离与计数。 筛选菌株：利用选择培养基筛选菌株。 测定微生物数量的常用方法：统计菌落数目和显微镜直接计数。 过程：土壤取样样品的稀释微生物的培养与观察。,栏目链接,核心考点 归纳整合,栏目链接,(2)分解纤维素的微生物的分离。 实验原理：,核心考点 归纳整合,即：可根据是否产生透明圈来筛选纤维素分解菌。 流程： 土壤取样选择培养梯度稀释涂布平板挑选菌落。 2统计菌落数目的方法稀释涂布平板法(也叫活菌计数法) (1)原理。 当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落来源于样品稀释液中的一个活菌，通过统计平板上的菌落数，就能推测出样品大约含有多少个活菌。,栏目链
3、接,核心考点 归纳整合,(2)操作。 设置重复组，增强实验的说服力与准确性。将待测样品经一系列10倍稀释，然后选择三个稀释度的菌液，分别取0.1 mL 接种到已制备好的平板上，然后用无菌涂布棒将菌液涂布整个平板表面，放在适宜的温度下培养，计算菌落数。为使结果接近真实值，可将同一稀释度加到三个或三个以上的平板上，经涂布、培养，计算出菌落平均数。,栏目链接,核心考点 归纳整合,为了保证结果准确，一般选择菌落数在30300个的平板进行计数，若设置的重复组中结果相差太远，意味着操作有误，需重新实验。,栏目链接,核心考点 归纳整合,栏目链接,3无菌技术(消毒和灭菌的区别),核心考点 归纳整合,栏目链接,
4、核心考点 归纳整合,1(2014山东卷)玉米是重要的粮食作物，经深加工可生产酒精、玉米胚芽油和果糖等。流程如下：,对位训练,栏目链接,核心考点 归纳整合,(1)玉米秸秆中的纤维素经充分水解后的产物可被酵母菌利用发酵生产酒精。培养酵母菌时，该水解产物为酵母菌的生长提供_。发酵过程中检测酵母菌数量可采用_法或稀释涂布平板法计数。 (2)玉米胚芽油不易挥发，宜选用_法或_ _ _法从玉米胚芽中提取。 (3)玉米淀粉经酶解形成的葡萄糖可在葡萄糖异构酶的作用下转化成果糖。利用_技术可使葡萄糖异构酶重复利用，从而降低生产成本。,栏目链接,碳源,显微镜直接计数,压榨,萃取(注：两空可颠倒),固定化酶,核心考
5、点 归纳整合,(4)利用PCR技术扩增葡萄糖异构酶基因时，需用耐高温的_催化。PCR一般要经历三十次以上的循环，每次循环包括变性、_和_三步。,栏目链接,(Taq)DNA聚合酶,(低温)复性(或退火) (中温)延伸,核心考点 归纳整合,本题考查了微生物培养技术中培养基的配方、微生物计数、植物成分的提取、固定化酶和PCR技术的条件等内容。难度系数较小。(1)培养酵母菌时，玉米秸秆中的纤维素的水解产物为酵母菌的生长提供碳源。检测酵母菌数量可采用显微镜直接计数法或稀释涂布平板法计数。(2)玉米胚芽油不易挥发，宜选用压榨法或萃取法从玉米胚芽中提取。(3)利用固定化酶技术可使葡萄糖异构酶重复利用，从而,
6、栏目链接,核心考点 归纳整合,降低生产成本。(4)利用PCR技术扩增葡萄糖异构酶基因时，需用耐高温的(Taq)DNA聚合酶催化。PCR一般要经历三十次以上的循环，每次循环包括变性、(低温)复性(或退火)；(中温)延伸三步。,栏目链接,考点2 传统的发酵技术,核心考点 归纳整合,1与传统发酵有关的几种微生物的比较,栏目链接,核心考点 归纳整合,栏目链接,核心考点 归纳整合,醋酸菌和乳酸菌属于原核生物，利用这两类微生物时，环境中一定不要加入青霉素等抗生素。,栏目链接,核心考点 归纳整合,2果酒、果醋、腐乳、泡菜的制作过程的比较及亚硝酸盐含量的检测,栏目链接,核心考点 归纳整合,栏目链接,核心考点
7、归纳整合,栏目链接,3.有关食品加工制作中的注意事项 (1)果酒、果醋的制作。 材料选择与处理。 防止发酵液污染，控制好发酵条件。 (2)腐乳的制作。 材料用量。 防止杂菌污染。,核心考点 归纳整合,栏目链接,控制温度及酒精含量。 (3)制作泡菜并检测亚硝酸盐的含量。 泡菜坛的选择。 腌制条件(无氧)。 测定亚硝酸盐含量的操作。,核心考点 归纳整合,2(2014揭阳二模)下列对果酒、果醋和腐乳制作相关的叙述，正确的是( ) A使用的菌种分别是酵母菌、醋酸菌、乳酸菌 B制果酒所利用的酵母菌是具有细胞壁的真核生物 C无氧条件下，醋酸菌能将乙醇转变为醋酸 D腐乳制作过程中，豆腐装瓶腌制时要敞开瓶口以
8、利菌种繁殖,对位训练,B,栏目链接,核心考点 归纳整合,果酒、果醋和腐乳制作使用的菌种分别是酵母菌、醋酸菌和毛霉等微生物；酵母菌是具有细胞壁的真核生物，制果酒需要利用到它，B正确。醋酸菌进行有氧呼吸，当氧气、糖源都充足时，糖醋酸，当缺少糖源时，乙醇乙醛醋酸；腐乳制作过程中，豆腐装瓶腌制时要密封。,栏目链接,栏目链接,典例精析 新题预测,例1临床使用抗生素前，有时需要做细菌耐药实验。实验时，首先要从病人身上获取少量样本，然后按照一定的实验步骤操作，以确定某致病菌对不同抗生素的敏感性。 回答下列问题： (1)为了从样本中获取致病菌单菌落，可用_法或_法将样本接种于固体培养基表面，经过选择培养、鉴别
9、等步骤获得。,栏目链接,划线,稀释涂布(或涂布),典例精析 新题预测,(2)取该单菌落适当稀释，用_法接种于固体培养基表面，在37 培养箱中培养24 h，使其均匀生长，布满平板。 (3)为了检测该致病菌对于抗生素的敏感性，将分别含有A、B、C、D四种抗生素的滤纸片均匀置于该平板上的不同位置，培养一段时间后，含A的滤纸片周围出现透明圈，说明该致病菌对抗生素A_；含B的滤纸片周围没有出现透明圈，说明该致病菌对抗生素B_；含C的滤纸片周围的透明圈比含A的小，说明,栏目链接,涂布,敏感,不敏感,典例精析 新题预测,_；含D的滤纸片周围的透明圈也比含A的小，且透明圈中出现了一个菌落，在排除杂菌污染的情况
10、下，此菌落很可能是抗生素D的_。 (4)根据上述实验结果，为达到抗菌目的，最好应选用抗生素_。,栏目链接,该致病菌对C的敏感性比A的弱,耐药菌,A,典例精析 新题预测,微生物纯化的方法主要有平板划线法和稀释涂布平板法。根据微生物的特点对其进行一系列浓度梯度稀释，然后用涂布法接种于固体培养基表面，然后在适宜条件下培养；抗生素是由真菌产生的，可以抑制生长、繁殖或杀死细菌等致病菌的一类物质，含A的滤纸片周围出现透明圈，说明有抗生素A的地方该致病菌,回顾纯化微生物的方法作答(1)、(2)；明确透明圈形成的原因作答(3)、(4)。,栏目链接,典例精析 新题预测,受到抑制；B的周围没有透明圈，说明致病菌对
11、抗生素B不敏感，通过C的透明圈要比A的透明圈小，说明该致病菌对C的敏感性比A的弱；D出现了透明圈，说明该致病菌对D敏感，但是在透明圈上出现一个菌落，又排除杂菌污染，判断此菌落的微生物对抗生素D产生了耐药性。根据以上分析，为达到抗菌的目的，最好选择抗生素A。,栏目链接,典例精析 新题预测,例2回答下列有关泡菜制作的问题： (1)制作泡菜时，所用盐水煮沸，其目的是_。为了缩短制作时间，有人还会在冷却后的盐水中加入少量陈泡菜液，加入陈泡菜液的目的是_。 (2)泡菜制作过程中，乳酸发酵过程即为乳酸菌进行_的过程。该过程发生在乳酸菌的_中。 (3)泡菜制作过程中影响亚硝酸盐含量的因素有_、_和_等。,栏
12、目链接,杀灭杂菌,增加乳酸菌的数量,无氧呼吸,细胞质,温度,腌制时间 食盐用量,典例精析 新题预测,(4)从开始制作到泡菜质量最佳这段时间内，泡菜液逐渐变酸，这段时间内泡菜坛中乳酸菌和其他杂菌的消长规律是 _，原因是 _。,栏目链接,乳酸菌数量增多，杂菌数量减少,乳酸菌比杂菌更耐酸,典例精析 新题预测,结合泡菜制作过程的相关知识回答问题。 (1)制作泡菜时需要先形成无菌环境，所用盐水需煮沸，以杀灭盐水中的杂菌。想要缩短制作时间，应该缩短菌株的生长时间，陈泡菜液中含有一定量的乳酸菌，这样菌体数量扩增速度会加快。,根据泡菜制作过程中乳酸菌的来源、呼吸类型、呼吸产物所引起的环境变化回答相应问题，还要
13、注意每步操作的目的以及一些相关物质的变化。,栏目链接,典例精析 新题预测,(2)乳酸菌为厌氧菌，进行无氧呼吸产生乳酸，该过程只能在细胞质中进行。 (3)温度过高、腌制时间过短、食盐用量不足等，容易造成杂菌大量繁殖，亚硝酸盐含量增加。 (4)从开始制作到泡菜品质最佳这段时间内，氧气浓度逐渐降低，泡菜液逐渐变酸，不适宜杂菌生长，而适宜乳酸菌生长，因此乳酸菌数量增加，其他杂菌数量减少。,栏目链接,核心考点 归纳整合,1(双选)下列关于实验的叙述，正确的是( ) A在观察洋葱根尖分生区的有丝分裂实验中，会看到细胞板向四周扩展形成细胞壁 B不同浓度的生长素类似物处理插条，生根效果可能相同 C探究加酶洗衣
14、粉的最适温度时，温度梯度应设置为当地一年四季的平均温度,新题预测,BC,栏目链接,核心考点 归纳整合,D渗透作用的演示实验中，当倒置的漏斗中液面不再上升时，水分子停止移动,观察细胞有丝分裂，我们不能看到一个细胞的连续变化，是因为解离时细胞已被杀死，A错误；生长素对植物的作用有一个最适浓度，最适浓度两侧不同浓度的生长素类似物处理插条，生根效果可能相同，B正确；探究加酶洗衣粉的最适温度时，温度梯度应设置为日常的平均温度，C正确；渗透作用的演示实验中，,栏目链接,核心考点 归纳整合,当倒置的漏斗中液面不再上升时，水分子进出半透膜处于动态平衡，D错误。,栏目链接,核心考点 归纳整合,2(双选)酵母菌是
15、常见的生物材料，有关其说法错误的是( ) A酵母菌在果醋发酵过程中起主要作用 B酵母菌进行有氧呼吸和无氧呼吸都能产生CO2 C果汁发酵后是否产生酒精，可以用重铬酸钾来检验 D不同培养条件下酵母菌种群数量最终都呈现“S”型增长,栏目链接,AD,核心考点 归纳整合,果醋发酵过程中起主要作用是醋酸菌，A错误；酵母菌代谢类型是异养兼性厌氧型，进行有氧呼吸和无氧呼吸都能产生CO2，B正确；酒精在酸性条件下与重铬酸钾反应呈灰绿色，果汁发酵后是否产生酒精，可以用重铬酸钾来检验，C正确；在营养丰富、空间条件充裕、气候适宜、没有其他杂菌污染的条件下，酵母菌种群数量可呈现“J”型增长，在营养不足的情况下，数量会下降，D错误。,栏目链接,