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1、第十二章 革兰氏阳性产芽孢杆菌,内容提要,第一节 芽孢杆菌属 炭疽芽孢杆菌 第二节 梭菌属 产气荚膜梭菌 肉毒梭菌 破伤风梭菌,第一节 芽孢杆菌属（Bacillus),炭疽芽孢杆菌,炭疽芽孢杆菌炭疽的病原体人兽共患病,一、形态及染色特性,革兰氏阳性大杆菌，无鞭毛，不运动。形成芽孢、荚膜。,动物组织和血液:单在或呈短链，竹节状、有丰厚的荚膜,人工培养物:形成长链，形成芽胞，一般不形成荚膜,二、培养特性,需氧菌，适温37，营养要求不高,普通肉汤：37，24h培养，上层液透明，形成白色絮状沉淀,普通琼脂：大而扁平、灰白色，不透明、表面干燥、 边缘不整齐 火焰状菌落。低倍镜观察菌落边缘呈卷发状，不溶血
2、。,明胶高层：呈倒置松树状,串珠反应：0.5单位/ml青霉素的培养基中，细胞壁合成受抑制， 菌体膨胀相互粘连形成“串珠状”,串珠反应试验,三、抵抗力,四、抗原结构,是芽胞外膜层含有的抗原决定簇，特异性抗原 具有免疫原性和血清学诊断价值。,荚膜半抗原，与毒力有关，无保护作用 不稳定，反应性特异可用于血清学鉴定,细胞壁及菌体内的半抗原（多糖），与毒力无关 性质稳定（耐腐败、热）Ascoli反应,胞外蛋白质抗原（炭疽毒素），具有免疫原性 免疫保护,五、致病性,本菌可引致各种家畜、野兽和人类的炭疽,感染途径：消化道、呼吸道、皮肤创伤或通过吸血昆虫传播,荚膜多肽：荚膜抗吞噬，抑制抗体的作用，使易于扩散，
3、引起 感染乃至败血症。动物无保护作用，可用于细菌鉴定,毒力因素：,六、免疫性,患过炭疽的动物，能获得坚强的免疫力。,七、微生物学诊断,1.细菌学检查,（1）涂片镜检：,（2）分离培养：,2.动物实验：,第二节 梭菌属 (Clostridium),一、属的特征,二、梭菌分布,三、病原梭菌及梭菌病的诊断原则,产气荚膜梭菌 (Cl. Perfringens),一、形态及染色特性,菌体直杆状，两端钝圆，革兰氏阳性，形成芽胞（中央或近端） 多数菌株在动物体内可形成荚膜,二、培养及生化特性,本菌对厌氧条件要求不太严格加入葡萄糖、血液则生长更好，适温37 ,肝片肉汤；生长迅速，5-6h 出现混浊，产生大量气
4、体,葡萄糖琼脂； 37 ，24h形成 ，勋章样菌落,血液琼脂；灰白色，圆形，边缘呈锯齿状的大菌落， 周围有棕绿色溶血区，出现双层溶血环 为溶血（内环透明，外环淡绿色）。,三、致病性,菌型：根据产生毒素种类，细菌分为A、B、C、D、E 等5个型,* 致病作用主要在于所产生的毒素蛋白质,* 毒素有12种，小写希腊字母表示、.； 其中、 、 和是主要坏死、致死性、溶血性毒素 有些菌株还产生肠毒素,表: 产气荚膜梭菌菌型及所致疾病,四、微生物学诊断,1.细菌学检查,观察要点： 形态及染色特点：革兰氏阳性粗大杆菌 培养特性：厌氧，生长快，不运动，菌落形状，双层溶血环 生化特性：暴烈发酵,细菌分离培养,2
5、.肠内容物毒素检查,肉毒梭菌 (Cl. botulinum),1.形态及染色特性,菌体多呈直杆状，单在或成双，革兰氏阳性。着生周鞭毛 形成芽胞位于菌体近端，大于菌体直径，使细胞膨大,2.培养特性,专性厌氧，适温37（产毒素最适温25-30）， 6.5% NaCl,20% 胆汁，pH8.5抑制生长，营养要求不高,血液琼脂平板：成圆形到扇状（1-6mm），不规则菌落， 溶血,3.抵抗力,4.抗原性及分型,* 根据毒素抗原性分为A、B、C、D、E、F、G等7个型,* 具有良好免疫原性抗毒素，有型特异性，无交叉反应,神经毒亚单位,非毒性亚单位,肉毒毒素前体,小肠吸收 亚单位分解,抗胃蛋白酶水解,淋巴、
6、血流作用于靶器官细胞,阻断乙酰胆碱的释放 导致肌肉弛缓型麻痹,7. 微生物学诊断,主要方法被检材料中检查肉毒毒素,（1）肉毒毒素检测,C.证实试验：,（2）细菌分离与鉴定,破伤风梭菌（Cl.tetani),本菌又名破伤风杆菌，引起人畜破伤风的病原,一.生物学特性,培养特征：,严格厌氧，含有血液、肝汤、庖肉培养基中易生长,肉肝汤和庖肉培养基：轻微浑浊，有颗粒状或粘稠状沉淀，产生 特殊臭味,血液琼脂培养基：形成直径46mm菌落，伴有狭窄溶血环。,二、致病性,破伤风的临床症状特征比较典型，故根据流行病学和临床症状，可以基本确诊。一般不需微生物学诊断。 必要时，可采集创伤部的分泌物或坏死组织进行细菌学检查。另外，还可以检测毒素。,三、微生物学诊断,第十二章 复习思考题,1.试述炭疽芽孢杆菌的抵抗力及其实际意义。 2.试述炭疽的微生物学诊断，采取检验材料应注意哪些事项？ 3.试述产气荚膜梭菌的类型、微生物学诊断程序。 4.试述肉毒梭菌的类型、微生物学诊断程序。,