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1、3.2 体外受精和早期胚胎培养,泉州市城东中学生物组：黄鸿玉,1978年7月26日，世界上第一个试管婴儿路易斯在英国出生，至今，全世界已有约三百多万个试管婴儿出生！,1988年3月10日我国首例试管婴儿,1992年我国首例三胞胎试管婴儿,根据资料回答下列问题： 1.资料上用到了什么生物技术？ 试管婴儿技术（包括体外受精、胚胎体外培养）和胚胎移植技术。 2.试管婴儿和母亲正常怀孕，生产的过程有何异同？ 相同之处：都通过有性生殖产生，在母体子宫内发育形成胎儿。 不同之处：受精作用在体外，并在体外发育成早期胚胎进行胚胎移植。,试管动物技术： 通过 使卵子和精子在 下成熟和受精，并通过培养发育成 后，
2、再经移植产生后代的技术。,体外条件,人工操作,早期胚胎,国产奶牛：年均产奶量3000公斤左右 国际良种奶牛：年均产奶量10000公斤左右 引进一头良种成年奶牛需要3万5万元； 牛的生育率低，一头牛一胎只生一只，一生只能生育四五次。 牛的生育率虽然很低，但是牛的卵母细胞却相当的多，其卵巢中卵母细胞数目要比一生中排卵数多1000倍左右； 公牛产生的精子数目就更多了。,一、从试管牛说起,试管动物技术过程：,第一步：体外受精,第二步：胚胎的早期培养,第三步：胚胎移植,胚胎移植,采集优质母牛的卵母细胞,卵母细胞的体外培养,采集优质公牛精子,精子体外获能,体外受精,优质牛体外受精胚胎,受体牛,优质犊牛,成
3、熟期牛,屠宰加工厂,市场,采集卵巢中的卵母细胞,“试管牛”工厂化生产的技术流程图,1982年世界首例试管牛犊问世,实现良种牛快速大量繁殖首先要做的是 和 的培养。,体外受精,早期胚胎,主要包括 、 和 等几个主要步骤 。,概念：采取雌性动物的 和雄性动物的 ，使其在 中受精。,二、体外受精,卵细胞,精子,试管,卵细胞的采集,精子的获取,受精,1.卵母细胞的采集和培养,对不同动物,采集卵母细胞的方法不同。 实验动物如小鼠、兔，以及家畜猪、羊等卵细胞的采集： 最常用的方法是卵巢经过 处理，具体做法是给供体注射 ，使一头母畜一次排出比自然情况下多几倍到十几倍的卵子，之后从 中冲取卵子，直接与获能的精
4、子在体外受精。,超数排卵,促性腺激素,输卵管,大家畜或大型动物，如牛，卵细胞的采集： 从屠宰场已屠宰母畜的 中采集卵母细胞，也可以借助 、 或 等工具确定卵泡位置，直接从活体动物中吸取泡卵液（连同卵母细胞）取出，在体外进行人工培养，使其成熟。,卵巢,超声波(B超)探测仪,内窥镜,腹腔镜,牛卵巢,B超活采仪,B超引导法： 借助超声波探头和屏幕的引导，从活母畜卵巢采集卵母细胞。操作员先将带有超声波探头和采卵针的采卵器通过阴道插入子宫，同时通过将卵巢贴在探头上。根据B超屏幕所显示的卵泡位置，利用采卵针穿刺卵泡并同时抽吸卵母细胞。,活体采集的牛卵母细胞,卵母细胞的成熟培养：CO2培养箱,培养箱,培养箱
5、,2.精子的收集和获能,假阴道法,手握法,电刺激法,在体外受精前，要对精子进行获能处理。通常采用的体外获能方法有 和 两种。 对于 、 和 的精子，一般采用培养法；对于 、 等家畜的精子常用化学法。 培养法：精子在获能液中获能。 化学诱导法：精子一定浓度的肝素或钙离子载体A23187溶液中，用化学药物诱导获能。,培养法,化学诱导法,啮齿动物,家兔,猪,牛,羊,3.受精,获能的精子和培养成熟的卵子，一般情况下在 或 中完成受精过程。,获能溶液,专用受精溶液,三、胚胎的早期培养,概念：是应用人工创造条件，对获取的 进行体外培养。 培养液成分：两“盐” （无机盐、有机盐）；两“素”（维生素、激素）；两“酸”（氨基酸、核苷酸）；另有水、血清等,早期胚胎,不同动物胚胎移植时间不同： 牛、羊：桑椹胚或囊胚阶段 小鼠、家兔：卵裂期或囊胚阶段 试管婴儿：8个或16个细胞阶段,胚胎培养发育到适宜阶段时，可将其取出向受体移植或冷冻保存。,