C8肠杆菌.ppt

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1、1,C8学习目标,1、肠科菌分类与主要种类（属）、通性、检验一般程序 2、沙门菌所有内容掌握 3、大肠菌鉴定依据、致病性大肠菌分组、卫生细菌学意义 4、志贺菌鉴定依据、标本采集注意 5、变形菌、鼠疫菌、克雷伯菌特点,2,第八章 肠杆菌科 第1节 概述,一、分类与命名 31个属、120多个菌种 （P102表8-1） 对人类致病力强的四种（属）： 埃希菌、志贺菌、沙门菌、耶尔森菌； 与医院感染有关的八种条件致病菌（属）： 枸橼酸杆菌、克雷伯菌、肠杆菌、泛菌、沙雷菌、 变形杆菌、普罗威登菌、摩根菌； 其他：巴特维菌、布丘菌、西地西菌、爱德华菌、欧文菌、爱文菌、哈夫尼亚菌、克卢瓦菌、勒克菌、勒米诺菌、

2、穆勒菌、肥杆菌、普拉奇菌、光杆菌、普城菌、兰恩菌、塔特姆菌、致病杆菌、约根菌。,3,为了量化肠杆菌科成员在临床标本中出现的概 Farmer等根据60篇文选中的资料，提出了一个“相关频率”（relative frequency) 010级的评估法： 相关频率10：最常见的细菌，1种，大肠杆菌 相关频率8：十分常见的细菌，2个种，肺炎克雷伯菌、 奇异变形杆菌 相关频率7：常见菌，弗氏枸橼酸杆菌、阴沟肠杆菌、 产气肠杆菌、粘质沙雷菌、产酸克雷伯菌等 相关频率6：有时可见，如异型枸橼酸杆菌、聚团肠杆 菌、蜂窝哈夫尼亚菌等,4,相关频率5：不常见，如液化沙雷菌、产碱普城菌、 无丙二酸盐、 枸橼酸杆菌等

3、相关频率4：少见，每年至多几次，如迟钝爱德华菌、红色沙雷 菌、摩氏摩根菌等 相关频率3：很少见，一年以上遇到1次，如坂崎肠杆菌、弗氏 耶尔森菌、雷极普城菌 相关频率2：十分罕见，大多数实验室1年也不见到1次， 如戴氏西地西菌、痰踏特姆菌等 相关频率1：已知只有少数临床分离物，如无花果沙雷菌、赖氏 西地西菌 相关频率0：临床标本中未曾发现只从环境、昆虫和无脊柱动物 中分离，如产粘变形杆菌、致病杆菌属等,5,二、临床意义,致：化脓性疾病、肺炎脑膜炎菌血症以及伤口、 泌尿道和肠道的感染；还是医院感染重要病原。 1、人类肠道外感染大、肺克、产酸克、产、阴、黏质沙雷菌 伤口、泌尿道、呼吸道和中枢神经系统

4、感染、 医院感染、 鼠疫 2、人类肠道感染埃、志、沙、耶 急、慢性肠道感染、 食物中毒、 旅行者腹泻、 肠热症,6,肠科常见菌致病性比较 属名 所致疾病 致病因素 埃希菌属 肠外感染 肠道感染 菌毛、K、肠毒素、内 沙门菌属 伤寒、副伤寒(肠热症) Vi-Ag、内、肠毒素 菌/败血症 胃肠炎 携带者 志贺菌属 细菌性痢疾(急、慢）携带者 菌毛、内、外毒素 耶尔森菌属 鼠疫 肠炎 菌/败血症 FI / V/W/pgm/C/F/Pu/T、内、鼠毒素 枸橼酸杆菌属 腹泻 菌血症 脑膜炎 脑脓肿 内 克雷伯菌属 肺炎 肠炎 菌血症 脑膜炎 泌尿道感染 荚膜 变形杆菌属 泌尿道感染 菌血症 脑膜炎 肠炎

5、 食物中毒 菌毛、 内,7,三、生物学特性 (1) 形染结构特征：G- 杆菌,多有周H、有菌毛、无芽胞，部分菌株有荚膜、包膜 (2) 培养特性：兼、低求,液培混浊,多用“选择鉴定培养基”(?) 如: SS、EMB、MAC、中国兰等 (3) 生化反应活跃： 触+ 氧- 葡F 硝+ G- 杆定科依据 （痢疾志贺菌1型、发光致病杆菌触-；欧文菌、致病杆菌、臭鼻杆菌、多源杆菌属和耶尔森菌属某些菌株硝酸盐-） 经典：KIA、MIU、 I M V C U S P L O A 靛甲伏枸尿硫苯赖鸟精；,8,(4) Ag结构：复杂, “O” Ag菌体抗原，LPS，内毒素，耐热； “H” Ag 鞭毛抗原，Pro.

6、，不耐热； 表面AgViAg、K Ag等，可阻止O-AgAb反应； (5) 抵抗力：不强；耐胆盐；,9,四、 M学检验,（一）标本采集 肠外标本（取自感染部位）、肠道标本（早期新鲜脓血黏液） （二）检验程序 （三）标本直接检查：难以鉴别 （四）分离培养 生化（常规+试剂盒） 与鉴定 血清学 分子生物学 （五）抗菌药物敏感试验 （六）抗体检测,10,G- 杆菌鉴定一般操作流程 标 本 分离培养 G 染色镜检：G- 杆菌 （SS、MAC、EMB、中国兰、普、血） 纯培养（KIA、MIU、H-L） 增菌培养 初步多价血清凝集 （GN、SF、TT） 葡O/F、 氧化酶 、触、硝酸盐 F 、- 、+、+

7、 接种肠杆菌科细菌生化编码鉴定管（15E） 血清学玻片凝集：多价、O、K、H 单价 + 编码册+各菌鉴别特点 ,11,分离培养,选择性培养基 原色：SS红、 EMB淡紫兰、MAC淡红、中国兰紫蓝 特点：加抑制剂促进剂，乳糖指示剂 致病菌/非：乳 -/+ 无色菌落/有色菌落 非致病菌菌落颜色： SS、 MAC、远藤氏红色 EMB紫蓝带金属光泽 中国兰紫蓝,12,生化反应 KIA： 克氏双糖铁斜面 原色：为浅红色，PH7左右,中性红指示剂 用途：1、 增菌 2、生化反应： 结果判断：斜面：乳糖 黄+、红- 底层：葡萄糖 黄有气裂+、黄+、红- 动力穿刺线模糊/清晰 + / - H2 S 黑柱+、无

8、- MIU：动力吲哚尿酶 原色: 黄红色，酚红指示剂 结果判断：1看穿刺线（M）2看颜色（红U+）3加I试剂红I+,13,鉴定步骤：定科属种（群、型）,1、定科： 触+ 氧- 葡F 硝+ G- 杆周H或无 2、定属（1）依PAD、VP试验结果分三组 PAD、VP 第一组： - - 埃 志 沙 枸 爱 第二组： - + 克 肠 哈 泛 沙 耶 第三组： + - 变 摩 普 （2）依PAD、葡萄糖酸盐 试验结果分三组： 变 普 摩 克 肠 沙 哈 埃 志 沙 枸 爱 耶 苯丙氨酸脱A酶 + + + - - - - - - - - - - 葡萄糖酸盐 - - - + + + + - - - - -

9、-,14,肠杆菌科主要致病菌生化特性比较表 属名 生化反应 葡 乳 动 I M V C U S L O A 埃希菌属 + + + + + - - - - + +/- -/+ 沙门菌属 +/+ - + - + - + - + + + +/- 志贺菌属 + - - -/+ + - - - - - - - 耶尔森菌属 + - - - + - - - - - - -,15,第二节 埃希氏菌属 种类？ 大肠杆菌：1885年德Escherich发现 一、临床意义 致病物质： 侵袭力（K、菌毛）、内、肠毒素（LT、ST） 所致疾病： 肠道外感染（各种？炎） 肠道内感染（腹泻）,16,五组致病性大肠杆菌比较

10、（1955年Neter提出肠致病性大肠杆菌概念） 种类及英文缩写 致病因素 疾病 产毒素性大 定植因子抗原(CFA或称粘附素) 儿童急性腹泄、 ETEC 肠毒素(ST及LT:似霍乱肠毒素) 旅游者腹泄 肠致病性大 粘附因子(EAF) 流行性婴幼儿腹泄 EPEC 微量ST、LT (又称:EPEC肠炎、夏季腹泄、婴儿霍乱) 肠侵袭型大 侵袭力(毒力标记Ag) 肠炎(似志贺氏菌) EIEC 食物中毒 肠出血型大 志贺氏菌样毒素 出血性肠炎 EHEC ( N、Cell、肠毒) 肠道聚集-粘附性大 外毒素 小儿顽固性腹泄 EAggEC (似志贺氏菌样毒素,损伤肠细胞) 旅行性腹泄,17,二、生物学性状,

11、1、G-短小杆菌周H有菌毛微荚膜； 2、低求，普平长灰白菌落，血平溶血 选择性培养基呈有色菌落： SS、MAC粉红色； EMB蓝紫色+金属光泽 3、葡乳麦甘+蔗+/-，IMVCUS+-， KIA：斜A底A+气 ；MIU+- 4、抗原：O：K：H，,18,三、微检 标本？程序？报告？ 致病性大肠杆菌检查: 18 分离培养、生化反应、血清学分型 、毒力检测 EPEC:生化反应+血清学分型 （O、H分型） ETEC:生化反应+血清学分型+肠毒素LT、ST检测 EIEC:生化反应+血清学分型+毒力测定； 生化似志(H-乳-/迟+葡+)，但赖(L)- 鉴别：醋酸盐 、葡萄糖胺利用、粘质酸盐产酸 + 毒力

12、试验(Sereny，豚鼠眼结膜试验)+ EHEC:生化反应+血清学分型；（O157 H7 最常见） 山梨醇麦康凯（SMAC）培基(动-山-，无色菌落),19,大肠埃希菌鉴定依据 1. 先确定为肠科菌: G- 杆状cb-触+硝+葡F 2. 菌落扁平有色不透明 3. KIA: 底A+气斜A无黑柱(+-+)； MIU+-、 IMVCUSLOA+- + +/- -/+ 详细生化反应结果查编码册得埃希氏菌属 4. 致病大肠菌鉴定: 血清学反应分型+毒力检测,20,第三节 沙门氏菌属 一、分类 种类？P113表8-7 二、临床意义 致病物质： 侵袭力（ Vi-Ag ） 内毒素致肠热症主要因素 肠毒素类似E

13、TEC的LT及志贺菌ST 所致疾病： 胃肠炎（食物中毒）：鼠、猪、肠炎沙门菌 菌/败血症：猪、丙、鼠、肠炎沙门菌 肠热症：伤寒、甲乙丙副伤寒菌 带菌者 免疫性：牢固；CMI,21,三、生物学性状,1、G-杆菌周H、菌毛； 2、抗原：O、H、表面（Vi、M、5）抗原 3、变异性:S-R、H-O、位相、V-W变异 4、菌落无色或淡或中心黑、小、半透 葡麦甘+乳蔗-，IMVCUSLOA-+-+-+/- ；KIA：斜K底A或A+气）;MIU:+- 5、抵抗力：不强,22,23,各抗原特点 Ag 菌体“O” 鞭毛“H” 毒力 Vi 化学成分 糖-脂-蛋 蛋白质 LPS 存在部位 菌体表面 鞭毛 O以外

14、特异性 较低,分群 一相高,二相低 用噬菌体分型 与Ab凝集 颗粒状 絮状 热 耐 敏 敏 其它 每种菌有数种 O Ag； 酒精石炭酸破坏 少数初分离 甲醛可固定 时有人工培养消失 Vi” 可阻止OAg Ab凝集,并有抗吞噬作用,24,常见沙门菌的抗原组分 组 菌名 O抗原 H抗原（1相/2相） A组 甲型副伤寒沙门菌 1，2，12 a / - B组 乙型副伤寒沙门菌 1，4，5，12 b / 1,2 鼠副伤寒沙门菌 1，4，5，12 i / 1,2 C组 丙型副伤寒沙门菌 6，7， Vi c / 1,5 猪霍乱沙门菌 6，7 c / 1,5 D组 伤寒沙门菌 9，12， Vi d / - 肠

15、炎沙门菌 1，9，12 g,m / -,25,四、微检 （一）标本采集 原则: (1) 依病程不同采相应标本:第12周,血液; 第23周,粪便和尿液；全程可取骨髓。 (2) 未用药前采, 无菌器皿装, 及时送与检。 （二）检验程序 （三）标本直接检查 显微镜检查 抗原检测（胶乳凝集法） （四）分离培养与鉴定,26,增菌液： SF（亚）、GN、TT（四） 胆汁葡萄糖肉汤（血骨髓标本） 分离培养基： MAC、EMB、SS 亚硫酸铋琼脂（BS，适于伤寒沙门菌） 孔雀绿琼脂（其他沙门菌）,27,鉴定 病原体检查 分离鉴定: 形态、菌落、生化反应 血清学鉴定: 玻片凝集定抗原 1.以AF多价O诊断血清定

16、属 原则 2.用沙门氏菌单价因子O诊断血清定群 3.确定鞭毛抗原以分型(先一相后二相) 4、查Vi-Ag 特异抗体的检查 WT （原理、方法、结果、报告？）,28,WT 原理：直接试管凝集试验（测抗体及效价？） 抗原：伤寒菌0、H，甲副H、乙副H （4种） 方法： （影碟WJ12及实验课） 结果：凝集程度？+？效价 结果解释注意： （影碟KJ20） Eg: 1 2 3 4 5 6 7 8 效价？ TO + + + + + + - - TH + + + + + + + - PA + + + - - - - - PB + + + - - - - - 诊断：,29,或 “TH” 伤寒 “H” 或 “

17、PA”则: 感染 副甲 可能性大 “O” (单项) 或“PB” 副乙 “H” 则: 伤寒、副伤寒早期 或沙门氏菌属其他细菌感染引起的交叉反应 “H” 则: 感染伤寒、副伤寒的可能性小。 “TH” 伤寒 “O” “H” 或“PA” 则: 曾经感染 副甲 “H” (单项) 或“PB” 副乙 或 非特异性回忆反应 “H” (三项同时) 则: 疫苗接种的结果,30,Eg: 30 病人：甲 乙 丙 丁 戊 己 庚 辛 TO 1：320 1：640 1：320 1：640 1：40 1：40 1：40 1：40 TH 1：80 1：1280 1：80 1：40 1：320 1：80 1：40 1：320

18、PA 1：40 1：80 1：160 1：40 1：40 1：640 1：80 1：160 PB 1：40 1：40 1：40 1：640 1：80 1：40 1：320 1：160 诊断：,31,伤寒沙门氏菌鉴定依据： （1）符合肠杆菌定科依据： G-杆,葡F,氧-触+硝+； （2）菌落典型：SS、EMB、MAC、中国兰等选择性培养基：生长出无色或淡黄色或中心黑色、半透明菌落； （3） 生化符合：KIA底A无气斜K（葡+乳-）MIU+-， IMVCUSLOA-+-+-+/- 微量生化编码检索查为伤寒沙门氏菌； （4）玻片凝集试验：能与沙门氏A-F多价O诊断血清、 Vi血清、O9、Hd因子血清

19、凝集。,32,第四节 志贺氏菌属 一、分类 A、B、C、D四群(志、福、鲍、宋) 二、临床意义 致病因素: 内+菌毛+外(志1和2型) 所致疾病：菌痢 典型 急性 非典型 中毒性 慢性 携带者 免疫性：不牢固,33,三、生物学特性 1、形态结构 G-短小杆菌，无荚无H有菌毛 2、Ag: O(型与群特异性抗原)、 K(表面抗原) 3、变异性: SR 、耐药性； 4、培养特性: 低求一般条件； 液体培基: 均匀混浊; SS琼脂等: 低凸齐无色半透易变型 生化：葡+乳-动-，KIA底A无气斜K，MIU-+/-， IMVCUSLOA-/+ + - - - - - - - 5. 抵抗力: 低，敏酸,34

20、,四、 M检验,（一） 标本采送 原则: 发病早期（服药前）,采脓血粘液便,粪尿要分开, 及时送与检,存于30的甘油缓冲盐水中（保存液） （二）检验程序 （三）标本直接检查 显微镜检查、抗原检测、核酸检测 （四）分离培养与鉴定 增菌液:GN; 分离培养：SS、MAC、EMB、XLD,35,鉴定 初步鉴定：形态结构菌落生化 最终鉴定：全面生化、血清分型 鉴别试验： 志/大志：动力-L-糖+黏多糖+醋酸盐+C+ 志/沙动力、硫化氢：-/+，血清凝集 志/类志邻单胞动力氧化酶：-/+ 血清学鉴定：志A-D多价，A1、2，B16、C16、宋； 毒力试验：豚鼠眼结膜试验+,36,第五节 耶尔森氏菌属 一

21、、分类 11种 鼠疫耶尔森氏菌 小肠结肠炎耶尔森氏菌 假结核耶尔森氏菌 二、鼠疫耶尔森氏菌,37,卡法之战,于是，在一个月黑风高之夜，他们弄来几具死于的尸体，穿上鞑靼士兵服装，抛进城内。,1364年，鞑靼人远征，围攻卡法城。卡法城军民奋力抗击，酣战数日未分胜负。,鞑靼士兵大部分是患过鼠疫的幸存者，深知鼠疫的厉害，面对苦攻不下的卡法城，决定把大自然赐予他们的鼠疫“慷慨”地转让给卡法城。,38,几天后，卡法城军民相继发病：高热，有的人腹股沟或腋窝肿胀隆起如鸡蛋，触之剧痛，溃破流脓；有的剧咳，胸肋疼痛，大咯血痰。多数病人3-5d死亡，卡法城尸陈遍地，不攻自破。,Swollen lymph gland

22、s termed “buboes“ caused by plague bacteria (bubonic plague),卡法之战,39,鼠疫耶尔森菌（鼠疫杆菌）引起的自然疫源性的烈性传染病，传染性强，病死率高，呈世界性分布，对人类危害极大，主要通过带菌鼠蚤叮咬而感染。,什么是鼠疫？,40, 520565年（5060年），死亡5千1万/天，总死亡1亿。 1346 1665年（300年），欧洲死2500万（1/4欧洲人口），意、英死半数人口。 18941930年（40年左右），全球流行，死亡上千万人。,鼠疫黑死病,尸横遍野的欧洲 画家笔下的欧洲鼠疫,41,一、生物学特性,两端钝圆的粗短杆菌。革兰

23、阴性，菌体两端染色较深。有荚膜。 形态变异： 陈旧培养物、3NaCL 多形性(衰颓型),“菌影”,1. 形态 染色,42,一、生物学特性,2.培养特性, 在普通培养基上生长, 最适生长温度为2830,43,菌落形态 在血平板上，28培养48小时后，长成不透明的，中央隆起，不溶血，边缘呈花边样菌落。,一、生物学特性,44,在液体培养基中 24小时孵育逐渐形成絮状沉淀 48小时在液表面形成薄菌膜，从菌膜向管底生长出垂状菌丝，呈钟乳石状。,一、生物学特性,45,一、生物学特性,3、生化反应,不活跃；葡、甘+，乳、多数糖- ；KIA：K/A，MIU- 半固体：表面菌膜，线周围纵树根状发育；,4、抗原构

24、造,复杂，18种； FI-Ag V/W-Ag T-Ag,荚膜或包膜抗原，蛋白质多糖复合物；抗原性强，特异性高；常作为诊断抗原. 表面抗原，蛋白质和脂蛋白；抗吞噬与毒力相关 蛋白质抗原即外毒素；对鼠类剧毒（鼠毒素）,46,5.抵抗力,对紫外线、高温、干燥及一般消毒剂均敏感。,较弱, 阳光直射45小时被杀死 5515分钟被杀死 5石炭酸、5来苏尔、0.1升汞、 510氯胺杀死,在阴湿处、低温及有机物内生存时间较长,在痰液中可存活36d 在冬季的尸体内可存活数周至数月 在蚤类和土壤中能存活半年以上,一、生物学特性,47,二、致病性与免疫性,鼠疫是自然疫源性传染病，一般先有鼠类的发病和流行，当大批病鼠

25、死后，失去宿主的鼠蚤转向人群，可引起人间鼠疫。,致病物质 侵袭力：FI-Ag V/W-Ag 毒 素：鼠毒素（T-Ag） 内毒素,48,人间鼠疫主要由蚤类为传播媒介，即主要传播方式为“鼠蚤人”。,二、致病性与免疫性,49,1.所致疾病,（1）腺鼠疫 鼠疫杆菌通过鼠蚤叮咬侵入人体皮肤后，若病变仅限于淋巴结，则称为“腺鼠疫”，为临床上最常见的形式。,二、致病性与免疫性,50,二、致病性与免疫性,（2）败血性鼠疫 继发于腺鼠疫之后，这时机体抵抗力极度损害，细菌侵入血流，发生败血症，病死率极高。,（3）肺鼠疫或继发性鼠疫 由吸入空气中鼠疫杆菌直接引起，传染性极强，在寒冷季节里很容易造成扩大流行，此型病症

26、最危险。继发性肺鼠疫由腺鼠疫或败血症鼠疫患者体内细菌侵入自身肺内引起的并发性肺炎，由病人呼吸散播，病死率极高。,51,3.免疫性, 人类对鼠疫杆菌没有天然免疫力 预防接种只能产生短时期（612个月）的免疫力 自然感染可获持久免疫力，再次感染罕见。 主要针对FI-Ag 、 V/W-Ag 的抗体。,二、致病性与免疫性,52, 必须穿全套防护服； 无菌采集容器上注明地点、编号、时间（几点钟）、采集人姓名； 程序为先动后静、先中心后边缘； 标本不得用化学消毒剂处理； 个人卫生处理并接受医学观察。 标本：血液、痰、淋巴结穿刺液；尸体标本、鼠标本,三、微生物学检验,采集标本时的注意事项,1、标本采集 实验

27、前的准备 工作人员应接受必要的免疫接种和检测 收集从事工作人员的本底血清,甲类 传染病！,BSL-2 BSL-3,53,三、微生物学检验,（2）分离培养 （3） 初步鉴定：菌落特征、菌体形态、肉汤中生长特征、KIA（K/A，H2S-)、MIU (- - -)； 最后鉴定：生化反应、鼠疫杆菌噬菌体裂解试验（阳性者可作为确诊依据）、动物接种、免疫学方法。 基因诊断：DNA探针PCR,2、检验程序 P205,（1）显微镜检查 直接涂片染色镜检 （G、美兰） 免疫荧光抗体试验： 快速诊断,54, 所有的残留材料都应该采取高压灭菌销毁，实验室用于处理材料的凳子和设备也必须进行消毒处理。 实验室彻底消毒，

28、紫外灯照射实验室半小时。,三、微生物学检验,实验结束,鼠疫杆菌菌株的管理 我国法定管理的一类传染病微生物种 地县级以下专业机构不能保存，应全数送交省专业机构。 省专业机构保存需经国务院卫生行政部门批准。,55,小肠结肠炎耶尔森菌,一、临床意义 致病因素：侵袭性与（肠）毒素、与人组织共同抗原 所致疾病：人兽共患，污染食物和水源经消化道传播或接触动物感染；致小肠、结肠炎，菌血症。 二、生物学特性 1、G-球杆菌无芽荚，35无动力，2225 有动力。 2、依OAg分50多个血清型，O9、8、5、3致病。 3、440 长，普平长，MAC、NyE：乳糖不发酵无色半透明扁平较小菌落。 4、生化反应不稳定，

29、葡蔗+乳鼠-S-U-O+VP+（ 2225 ）/- （3537 ）。,56,三、微生物学检验,（一）标本采集 （二）检验程序 （三）标本直接检查 （四）冷增菌 （五）分离培养与鉴定 选择性培养基：MAC、CIN（粉红色菌落） 初步鉴定：嗜冷性，TSIA：A/A，KIA：K/A-， 葡蔗+乳鼠蜜-I-/+S-U-O+PAD-， 动力、VP、ONPG + 2225 /- 3537 全面鉴定：生化+血清分型,57,第6节 枸橼酸杆菌属,1、枸橼酸杆菌属 主要种：弗劳地、异型、无丙二酸 2、条件致病：腹泻和肠外感染 3、G-杆菌，周H无芽荚 4、低求，普平长，血平灰白不溶血，肠道选择性培养基乳糖发酵浑

30、浊菌落 5、鉴定：符合肠科菌，KIA：A（/K）A+，I+/-VP-C+S+U+L-O+/-A+，动力+,58,第七节 克雷伯菌属 分类： 肺炎克雷伯菌：肺炎、臭鼻、鼻硬结亚种； 产酸（催娩）克雷伯菌 解鸟氨酸、植生、土生克雷伯菌（已归劳特菌属） 诊断依据：肺炎克雷伯菌 形态结构：G-杆，无H芽厚荚膜 菌落特点: 乳糖发酵型，大、凸、粘 生化反应：葡+动-I-C+VP+O-U+丙+DNA- 动物试验：小白鼠接种病变染色镜检(荚膜) 荚膜种胀试验（血清学）+,59,第八节 肠杆菌、泛菌、哈夫尼亚菌属 第九节 沙雷氏菌属 主要菌属 主要代表菌种 鉴定特征 肠杆菌属 产气/阴沟/日勾维 周H乳F菌落

31、IMVCULOA-+- 泛菌属 成团、弥散泛菌 周H乳d LOA- （生化不规则） 哈夫尼亚菌属 蜂房哈夫尼亚菌 乳蔗蜜棉侧山卫肌DNA脂酶- 沙雷氏菌属 粘质/液化/气味/深红 周H乳F菌落DNA酯酶ONPG明LO+ 粘质沙雷氏菌 最小的细菌,常用于检查滤菌器的除菌效果。,60,第十节 变形杆菌属、普罗威登斯菌属、摩根菌属 共性：符合肠科菌定科依据；乳-苯+ ； 变形杆菌属 普罗威登斯菌属 摩根菌属 致病性 尿路、伤口感染 （医院感染主要病原菌） 食物中毒、肠炎 泌尿系统结石 腹泻 鉴定特征 乳-苯+I-/+U+S+明+ 乳-C+U-I+动+V-O- I+V-C-U+S-L+动+ O+,61

32、,变形杆菌属 培养: 液 培: 混浊+菌膜 ； SS 琼 脂: 似沙门菌属(乳糖非发酵型菌落) 普(血)平: 迁徙状生长现象 0.1石炭酸、0.4硼酸、 6琼脂平板HO变异 2. 生化: 尿 24h + ； 乳-苯+I-/+S+明+KIA：KA+ 3. 抗原: O 、H、K; 外斐氏反应 4. 鉴定依据: 尿+(24h) 、 迁徙状生长现象 对食物中毒加做：食物细菌计数 菌株同一性试验 动物试验（小鼠、豚鼠；竖毛寒颤腹泻） 特异性抗体测定（以分离菌制备Ag测血清Ab）,62,葡 乳 动 I M V C U S L O A 枸橼酸杆菌属 +/+ +/- + +/- + - + -/+ + - +

33、/- + 克雷伯菌属 + + - - - + + +/- - + - - 肠杆菌属 +/+ + + - - + + +/- -/+ + + - 泛菌属 +/+ +/- + - ? ? ? ? ? - - - 哈夫尼亚菌属 + - + - ? ? ? ? ? + + - 沙雷氏菌属 + +/- + - - + + + - + + - 变形杆菌属 + - + +/- - -/+ V + + ? -/+ ? 普罗威登斯菌属 +/+ - + + ? - + - - ? - ? 摩根菌属 + - + + ? - - + - + + ?,63,思考题C8 P101：1、2、3、4 1简述志贺菌的快速诊断方

34、法。 2叙述肥达试验的原理及分析结果时应注意的问题。 3疑菌痢患者应采集什么标本？采集送检过程需注意什么？,64,病例分析 36岁男性农民。持续发热已10天，伴有全身不适和食欲减退，明显乏力及轻度腹泻，于7月25日来院急诊。体格检查：体温40，神志恍惚，表情淡漠，听力减退，有时胡言乱语。巩膜黄染，肝脾均肿大，质软。皮肤有出血点。肾叩诊无疼痛。血白细胞数3.6109/L，中性粒细胞0.62。尿蛋白少许。WT：TO1：160，H1：320，PA1：80，PB1：40。HBsAg（）；抗-HBc（），抗HAV-IgM（+）。医生怀疑伤寒。取粪便标本送检做细菌分离培养。试述检验程序，并列出伤寒沙门氏菌

35、的鉴定依据。,65,40岁男性农民。近两天来畏寒，不发热，腹泻，大便每天58次，伴轻度里急后重。粪便常规：黄稀带有黏液，每高倍视野脓细胞+红细胞+。半年前有发热腹痛腹泻及脓血便史，经口服呋喃唑酮5天，症状控制而停止治疗。自此每当饮食不当时即有轻泻，可自限。问：诊断为何种疾病？如何进行细菌学检验？（标本采集、检验程序与方法）,66,22岁女学生。近两天来出现小便次数增多伴有尿急尿痛和下腹稍有胀痛。自觉轻度发热。体格检查：体温38心肺部无异常，血压110/70mmHg。血常规：白细胞11109/L，中性粒细胞0.77。尿沉渣镜检：有大量白细胞、少量红细胞及较多G-杆菌。尿培养：大肠埃希菌+，菌落计

36、数105CFU/ml。药敏试验：庆大霉素R，氟哌酸S。 A.根据临床和实验室检查，诊断为何种疾病？ B.除肠外感染外，请比较引起胃肠炎的各种大肠埃希菌。 C.卫生细菌学检查有哪些指标？各有何意义？,67,常用指示剂浓度及其应用范围 指示剂名称 色调变化 PH感应范围 常用浓度% 0.1克指示剂应加 酸 碱 N/20氢氧化钠量（ML） 麝香草酚蓝（酸性）（T.B） 红 黄 1.22.8 0.04 4.3 溴酚蓝（B.P.B） 黄 蓝 3.04.6 0.04 3.0 甲基红（M.R） 红 黄 4.46.0 0.02 7.4 溴甲酚紫（B.C.P） 黄 紫 5.26.8 0.04 3.7 溴麝香草酚蓝（B.T.B） 黄 蓝 6.07.6 0.04 3.2 酚红（P.R） 黄 红 6.88.4 0.02 5.7 甲酚红（C.R） 黄 红 7.28.8 0.02 5.3 麝香草酚（碱性）（T.B） 黄 蓝 8.09.6 0.04 4.3,