HIV实验室生物安全防护.ppt

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1、1,HIV实验室生物安全防护,2,学会安全操作的基本原理和技术 在日常工作和紧急情况时,都能得到同事的信任 让彼此的信任和尊重成为生物安全实验室的核心价值理念,3,良好的生物安全行为是实验室人员的责任和义务,4,保护自己和同事、环境的安全是一线实验人员不可推卸的责任，世界卫生组织一直强调个人责任对于实验室生物安全的重要性，只有每个相关人员都受过良好培训、遵守实验室安全操作规范、并且以自己和同事安全、社区安全和环境安全为己任，安全健康的实验室环境才会有最基本的保障。 个人责任也包括当所要开展的工作涉及新的规程或新的病原体时 ，应预先做风险评估，评估这些活动的危险性。,5,一、个人防护 二、生物安

2、全实验室规范操作 三、HIV实验室的十条安全操作和防护措施 四、实验室安全事故处理 五、病原微生物实验室生物安全管理条例 六、职业暴露的评估及预防用药 七、我国艾滋病实验室网络职业暴露危险度分析,6,个休防护装备的必要性： 感染性材料或其它有害因子在实验室操作时难免发生沾染或溢洒，发生身体暴露 任何物理防护设备的保护功能都有一定限度，都不是绝对的。譬如标准的二级生物安全柜也可能有少量气溶胶粒子扩散到室内，所以在围场操作时还要进行个体防护。 实验室生物安全防护是一项受制于多环节多因素的系统工程，在长期运转中难免有意外发生，此时个体防护就是保障安全的关键。,一、个人防护,7,各级生物安全实验室的个

3、体防护要求,BSL-1：工作服、手套，工作服不穿离实验区，出实验室前洗手。 BSL-2：背开式防护服、手套、帽子、口罩、必要时面部保护装置 BSL-3：两层防护服、两层手套、帽子、专业防护口罩、必要时防护镜和呼吸保护装置。可再次使用的工作服要先去除污染再清洗。 BSL-4：进入BSL-4实验室时要更换全套服装，工作后脱下所有防护服，出口淋浴后离开。 不同类型的BSL-4实验室中，个体防护装备有所不同： 在生物安全柜型BSL-4 实验室，个体防护装备同BSL3，在防护服型实验室中，使用正压防护服。混合型实验室同时使用三级生物安全柜和正压一体式防护服。,8,眼睛防护装备 安全眼镜和护目镜 在所有可

4、能发生眼睛损伤（生物、物理和化学因素）的生物安全实验室中工作时，必须采取眼睛防护措施。此要求不仅适用于在实验室中长时间工作的人员，也适用于进入实验室进行仪器设备维修保养的工作人员。所有的眼睛防护装备技术质量要求应该符合有关质量标准的规定。,9,眼睛防护装备 安全眼镜和护目镜 当在进行有可能发生化学和生物污染物质溅出的实验时，必须佩戴护目镜。护目镜应戴在常规视力矫正眼镜或隐形眼镜的外面来对飞溅和撞击提供保护。当进行更为危险的操作时，如进行有潜在爆炸的反应和使用或混合强腐蚀性和强酸溶液时，必须佩戴面罩或同时佩戴面罩和护目镜或安全眼镜。,10,眼睛防护装备 安全眼镜和护目镜 配戴隐形眼镜的人员在生物

5、安全实验室中工作时要使用护目镜。原因如下： 如果腐蚀性液体溅至眼睛，本能反射会使眼睑夹紧关闭而使取出隐形眼镜更为困难。 实验室中某些水汽能透过隐形眼镜，而引起对眼睛的广泛的刺激（这种情况下要使用特殊的护目镜加以保护）。 镜片能阻碍眼泪洗去刺激物。,11,眼睛防护装备 安全眼镜和护目镜 安全眼镜能够保护工作人员避免受到大部分实验室操作所带来的损害，但是对某些特殊的操作如腐蚀性液体喷溅出或细小颗粒飞溅出时，佩戴安全眼镜显然是不够安全的。又如在用铬酸类溶液洗涤玻璃器皿，或使用玻璃器皿进行极具爆破或破损危害（例如在压力或温度突然增加或降低的情况下）的实验室操作时。在这些情况下，有必要保护整个面部和喉部

6、，应该配戴面罩。 安全眼镜、护目镜或面罩使用后未经去除污染，不得带离实验区。,12,眼睛防护装备 洗眼装置 BSL-2和BSL-3实验室应配备紧急洗眼装置或淋浴设施。洗眼装置应安装在室内明显和易取的地方，并保持洗眼管道的通畅，便于工作人员紧急时使用。工作人员应掌握其操作方法。如果发生感染性物质或腐蚀性物质溅至工作人员眼睛时，工作人员应该（或在同事的帮助下）使用就近的洗眼装置用大量清水冲洗眼睛表面至少15-30分钟。 注意：速度是决定性的。,13,淋浴和应急消毒喷淋装置 BSL-2实验室在必要时应设应急喷淋装置；BSL-3实验室应在清洁区设淋浴装置，必要时在半污染区设应急消毒喷淋装置。这些装置应

7、保持管道的通畅。必须告知工作人员应急消毒喷淋装置的摆放位置并培训其操作方法。在使用中可用大量冷水淋洗污染的部位，至少需20分钟。如果为化学品溅出污染，需用大量急水冲洗。,14,头面部防护装备 口罩 外科口罩可以保护部分面部免受生物危害物质如血液、体液、分泌液以及排泄物等喷溅物的污染。 外科口罩单独使用不能为工作人员提供呼吸保护。,15,防护面罩 由防碎塑料制成，保护工作人员免受脸部碰撞或切割伤、血液、体液、分泌液、排泄物或其它感染性物质或化学物质的飞溅或滴液接触至脸部，或污染眼睛、鼻子以及口。,16,防护帽 由无纺布制成的一次性简易防护帽可以保护工作人员避免化学和生物危害物质飞溅至头部（头发）

8、所造成的污染。,17,手部防护装备 手套的选择 根据不同用途选择合适的手套。生物安全实验室最常用的是乳胶手套，对乳胶手套过敏者可使用聚氯乙烯和聚腈类手套。橡胶或塑料手套不能接触高温物体。使用耐热材料（皮制品）制成的手套可供接触高温物体时使用。 处理极冷物体如液氮或干冰时要用特殊的绝缘耐冷手套。 在进行尸体解剖等可能接触利器时，应戴不锈钢网手套以防切割损伤，但不能防止针刺损伤。,18,手部防护装备 手套的检查 在使用手套前应该检查手套是否褪色、穿孔或有裂缝。 手套的使用 一般情况下，佩戴一副手套即可，操作高致病性或潜在高致病性病原微生物时应戴两副手套。在操作过程中，外层手套被污染时应立即用消毒剂

9、喷洒手套，脱下后丢在生物安全柜内的高压袋中，并立即戴上新手套继续实验。手套戴好后应覆盖实验服袖口。,19,手部防护装备 避免手套的“触摸污染” 戴手套的手避免触摸鼻子、面部和避免触摸或调整其它个体防护装备以及触摸不必要的物体一表面（如灯开关、门把手等；） 戴手套过程的注意要点 在实验室中要一直保持戴手套状态；选择正确类型和尺寸的手套；手套戴好后要覆盖实验服袖口；戴手套的手要远离面部。,20,手部防护装备 脱手套过程的注意要点 脱手套时注意不要污染手部。 手套脱下后内面向外。 脱第二只手套时，手指插入第二只手套腕部内面，使手套脱下后内面向外，扔进高压袋中。,21,身体防护装备 实验服 隔离衣 正

10、压防护服 围裙 套袖,22,足部防护装备 鞋 鞋套,23,用过的个人防护用品的处理 凡在生物安全实验室使用过的个人防护装备均应视为被污染过。一次性用品可高压灭菌后作为医疗废物统一处理。 可重复使用的防护服帽子等高压灭菌后再洗涤处理，重复使用。 其它根据物品性质选择物理或化学方法处理。,24,二、生物安全实验室规范操作,25,在实验室工作需穿实验服、戴合适的手套,26,避免皮肤裸露-手套拉到袖口以盖住腕部 用创可贴包住小伤口,27,使用 机械 移液 装置,生物安全1级（BSL-1）,避免产生溅出气溶胶,28,减少气溶胶,禁止: 吹出移液器中最后一滴液体 吹打混匀,29,生物安全1级（BSL-1）

11、,防护设备,个人保护装置 面罩 眼罩,30,洗 手,生物安全1级（BSL-1）,处理感染性物质以及动物，离开实验室前洗手,31,生物安全2级（BSL-2）,特殊的规程,防范针头和利器的伤害； 使用利器收集器； 不要打碎注射器、弯曲注射针头、用后装上 针头套、重复使用针管或针头。,32,生物安全2级（BSL-2）,特殊的规程,防范针头和利器的伤害； 不要把针头或利器放在垃圾袋中；,33,生物安全2级（BSL-2）,特殊的规程,防范针头和利器的伤害； 不要用手直接接触破碎的玻璃器皿；,34,生物安全2级（BSL-2）,特殊的规程,防范针头和利器的伤害； 使用塑料器皿,35,生物性废弃物,处置方法,

12、防刺穿、防泄漏、密封的容器 避免装载过满 处置正确,36,生物性废弃物,处置方法, 不要把实验废物放到办公区的废物内 把利器放入专用容器内； 废弃物离开实验室前 要对其外表进行消毒； 做上标记； 贴封条，并保持到高 压灭菌结束； 安全的运送到高压灭 菌处。,37,生物性废弃物,消毒的目的,通过去除或减少生物有害因子，来保证转送的物件或材料的安全性。,化学法高效的消毒剂，足够的作用时间； 物理法干烤、压力蒸汽； 焚烧； 其它方法，如破碎+化学 ；,消毒的方法,38,常用的去除污染程序 洗手 既保护操作者，又防止危险物通过污染手而带出实验室。 戴手套不能代替洗手。手套可能会有不易觉察的破损，脱手套

13、时也可能污染到手。 从实验室出来时，要在出口处摘下手套并洗手。,39,固体废弃物 BSL-2及以上的实验室产生的不回收的固体废弃物（放射性除外）要先高压灭菌后再焚烧处理，BSL-1实验室的废弃物可直接送出焚烧。,40,液体废弃物 收集后用高压灭菌或化学法去污染后再排放。,41,移液器TIP 有的TIP比较锋利，在BSL-2及以上的实验室中，应采取一定措施防止刺破高压袋，危及后续的实验室废弃物处理人员，如放到一个塑料或金属的有盖的盒子里。,42,利器 利器包括注射器、解剖刀等。实验室要将利器的使用量降到最低。 使用后的利器要放到专用的可防刺破的利器盒里，注射器不要重新盖帽，不要折断、剪断，完整的

14、注射器放到利器盒中，不要拆下针头。 利器盒不要装满，装到3/4满时，扣上盖子，先高压后焚烧。 利器盒任何情况下都不要扔到普通垃圾里。 绝不能用硬纸盒代替专用的利器盒。,43,设备的去除污染 当BSL2及以上的设备需拿出实验室维护或报废时，要先去除污染，根据仪器设备的特性选择表面消毒、高压或薰蒸的方法。,44,房间去除污染 当实验室发生大范围污染或更换操作的微生物种类时，或要暂时关闭时，要去除污染，可采用甲醛薰蒸或其它权威部门推荐的方法。,45,三、HIV实验室的十条安全操作和防护措施,（一）HIV实验室安全感的认识 1. 实验室安全专家针对设备和实验室进行安全性评估，并提出改进意见。 2. 检

15、查安全标准操作规程（S-SOP），这些规程应适用于现有的条件，并与其它的规则和操作过程相一致。实验室管理人员应保证工作人员和参观人员理解这些安全要求。 3. 不管是否有意外发生和新的危险出现，均要定期对安全标准操作规程及实施情况进行检查。,46,（二）尽量减少利器的使用 利器包括注射器、针头、刀片、玻璃器皿、载玻片等，它们在接触传染性材料后非常危险，应用时需特别小心。如果有可能最好不要在HIV实验室使用这些利器或使用替代品，如塑料移液管。,47,（三）严格而又不断更新的培训 所有工作人员都必须经过培训（包括上岗培训和复训），并要接受实验室管理人员的监督，实验室的上级专家要对工作安全及整洁安全的

16、工作环境负责，所有工作人员均有责任保证自己和他人的工作安全。,48,（四）高标准的个人保健 1、高标准的个人保健对于减少感染的危险性很重要。皮肤受损、患病都会增加感染的危险性。 2、很小的伤口和擦伤都应以防水的敷料覆盖。 3、患有急性疾病和严重慢性疾病的工作人员不应进入P3实验室。 4、在进入HIV检测实验室时，要穿侧面和背面能系紧的隔离衣，戴一次性手套，如接触物传染性危险大，可戴两付手套以增加保护。 5、进实验室前要摘除首饰，修剪长的、带刺的手指甲，以免刺破手套。,49,6、在脱去隔离衣、离开实验室前必须洗手。 7、在实验室工作的人员应尽量避免用可能已受到污染的手套触摸面部。 8、在有危险化

17、学品溅出或爆炸可能时，应配戴安全眼镜和面罩，例如把样品管移出液氮时。 9、严禁在HIV和相关实验室用嘴吸取液体。严禁在实验室内吃、喝、吸烟。 10、HIV检测实验室工作人员应享有职业安全保险。 11、HIV检测实验室工作人员一旦因工作中意外事故可能造成感染时，国家将按HIV职业暴露安全药品储备库和储备点的实施方案（2001年5月）的有关规定为其提供免费抗病毒药物治疗。,50,（五）清楚在实验室区域的人员 1、实验室主任和设备管理者应了解所有人员。在安排新工作人员的实验室区域时，要根据其工作的种类和所涉及的生物试剂，对实验室环境做安全检查。 2、严格执行实验室工作人员年度采血检测HIV抗体和备案

18、制度。 3、所有工作人员应佩戴一目了然的标志。包括照片、姓名和在岗有效期。 4、来访的客人应分发身份标牌，对于陪同人员和进出的清洁工也应和正常的工作人员一样佩戴醒目的标志。,51,1、实验室和动物室应与公共建筑分开。 2、实验室和动物室应一直上锁。 3、进入实验室和动物室应持钥匙卡或类似装置。 4、所有进入实验室的人员（包括来访者、维护工人、修理工和其它只进入一次或偶尔进入的人员）都应作记录，可以持钥匙卡或在记录本上签名。,（六）监控存放生物试剂和有毒物区域,52,5、只有要求工人工作时才能允许其在实验室内，他们在需要和要求的地点和时间内进行。同时，工作人员工作时要限制学生、来访者、清洁工、维

19、护人员及修理工入内。 6、冷藏柜、冰箱、培养箱和存放生物试剂、化学危险品、放射性物质的容器置于工作人员视线之外的地点时应上锁。 7、应设有专门储存阳性血的低温冰柜，并应上锁。,53,1、所有带入实验室的包裹都应通过检查（眼看/X线照射）。 2、装有样品、细菌或病毒株及有毒物的包裹应在安全柜或其他适当的消毒装置内打开。,（七）了解带入实验室的物品,54,感染性样品的处理 接收者: （1）所有带入实验室的包裹都应通过检查（眼 看和/或X线照射），泄漏的包裹必须立即 报告有关领导和专家。 （2）尽管感染性材料应该有合适的包装并有醒 目的标记，但实际工作中仍然有可能收到 没有合适包装和标记的材料。应按

20、潜在感 染性材料处理。 （3）感染性包裹应该送到合适的实验室，在实 验室的污染区或操作台内打开， 不能在收 发地点、运输途中、仓库和办公室等地点 打开。,55,（4） 包裹必须在下列情况下才能打开： a) 在处理感染源方面受过训练的工作人员， b) 具有处理感染源设备的实验室， c) 穿戴保护衣的工作人员， d) 在用后可消毒的容器中。 （5） 包有样品、细菌或病毒株及有毒物的包裹 应在安全柜或其他适当的消毒装置内打开。,感染性样品的处理,56,1、在将HIV相关样品或物品转移到其他实验室时应单独打包装，并在适当的地方按地方或国际通用规则作标识。 2、转移这些生物活性材料时要携带通行证。 3、

21、护送者应了解接受者，并努力保证这些材料被转入安全装置，得到安全的处理。 4、污染材料或可能造成污染的材料在被带出实验室前应进行消毒。,（八）将物品带出实验室时要保证安全,57,发放者: （1）在转移一些生物活化学材料时要携带通行证。 （2）所有的感染性材料必须清楚地标记为感染性的。 （3）生物材料/有毒物在转到其他实验室时应打包 装，并在适当的地方按地方或国际通用规则作 标识。 （4）感染性材料必须放在密闭的管子中，后者放 在生物危险罐中，罐里含有足够的吸收材 料，以防泄露。,感染性样品的处理,58,（5）每一包装的体积不得超过50ml。 （6）所有发放的第二类病原微生物必须有记录。 （7）准

22、备应急包：吸附材料，消毒液，手套等 （8）污染材料或可能造成污染的材料在被带出实 验室前应进行消毒。,感染性样品的处理,59,运输者: （1）护送者应了解接受者，并努力保证这些 材料被转入安全装置，得到安全的处理。 （2）不宜手提装有微生物材料和有毒物的装置。如果普通的携带者手提这些生物材 料或危险物应该有一些适用的防护方法。 （应急包）,感染性样品的处理,60,1、在处理紧急事件计划中要包括设备管理员、实验室主任、调查员、实验室工作人员、设备安全员和设备安全官员。 2、要依据实验室应用的生物材料种类通知警察、消防员和其他紧急事件处理者，以帮助他们制定紧急事件发生时的处理方案。 3、计划中要有

23、在紧急事件发生时通知实验室主任、实验室工作人员、安全官员的条款，以便他们在生物安全发生问题时做出处理。,（九）建立应付突发事件的措施,61,4、实验室紧急处理计划要广泛灵活。在制定计划时还要考虑到包括炸弹威胁、严重天气情况（飓风、洪水）、地震、停电及自然（或非自然）灾害因素。 5、实验室主任和设备安全员要按照HIV职业暴露安全药品储备和储备点的实施方案规定记录处理和按期报告突发事件以及所发生的意外职业暴露。,62,消毒不能代替灭菌或整个清洁活动,消毒通常被用作表面清洁或作为使用前做的安全工作。主要采用的消毒方法如下: 1、化学消毒 2、熏蒸消毒 3、高压蒸汽消毒（高压消毒）,（十）掌握有效的消

24、毒方法,63,不同温度对HIV活性降低 10倍所需的时间,64,65,工作人员发生意外事故时，如针刺损伤、感染性标本溅及体表或口鼻眼内，或污染实验台面等均视为安全事故，应立即进行紧急处理。 （一）紧急处理：根据事故情况采用相应的处理方法 1、小型事故：任何一种小的损伤，包括皮肤的破损或刺伤等都可能与传染性物质接触，必须用肥皂和水冲洗，如果可能尽量挤出损伤处的血液，使用70%乙醇或其他皮肤消毒剂，立即进行医疗处理；,四、实验室安全事故处理,66,2、皮肤污染：皮肤污染部位用水和肥皂冲洗，并用适当的消毒剂浸泡，例如，70%乙醇或皮肤消毒剂（外科用药）. 3、针刺和切割伤：怀疑皮肤有损伤或针刺时，建

25、议尽可能挤压伤口，然后用大量的水冲洗. 4、眼睛溅入液体：眼睛溅入液体，立即用水冲洗。必须迅速。避免揉擦眼睛。连续冲洗至少十分钟.,67,（1）尽快脱掉隔离衣以防止感染物触及皮肤并防止进一步扩散。脱掉防护手套。洗手并更换隔离衣及手套. （2）将已污染的隔离衣及手套放入高压灭菌器. （3）清理发生污染的地方及放置隔离衣的地方. （4）如果个人衣物被污染，应立即将污染处浸入消毒剂. （5）应立即寻求帮助，抛弃已污染的衣物并更换干净的衣物或一次性衣物。,5、衣物污染:,68,6、重大事故：指的是严重损伤或暴露。皮肤受损处理同上。实验室重大损失及泼溅，应按下述第7项立即行动起来，主管领导和专家到场并提

26、供指导。所有事故和意外必须记录在事故登记簿和意外事故/危险登记簿上，这些记录本必须由单位保存备案。,69,7、涉及污染物的重大损伤及泼溅 当感染性培养物泼溅出来后，气溶胶会造成最大危害；发生泼溅事故后应立即采取措施保护易污染物质；如果怀疑有严重事故，应按较严重情况处理并采取以下措施： （1）污染处疏散人员，但要防止污染扩散； （2）控制污染-锁门并防止进一步进入； （3）通知实验室主管领导、安全负责人，以便查清情况，确定消毒的程序； （4）如果认为合适，可进行生物安全柜和/或实验室的熏蒸消毒； （5）消毒：发生溢出后应离开房间约30分钟。,70,1、向主管领导及有关专家报告 （1）重大事故在紧

27、急处理的同时要立即向主管领导和有关专家报告，主管领导和专家要立即到现场对处理方法具体指导，并立即向地区性抗HIV安全药品储备库报告，力争在暴露后最短时间内（24小时以内）开始预防性治疗，并同时抽血检测抗HIV，该血清留样备用。暴露一年内要定期检测HIV抗体（6周、12周、6个月、12个月）,安全事故的报告和检测,71,（2）小型事故可在紧急处理后立即将事故情况和处理方法一并报告主管领导和专家，以及时发现处理中的疏漏之处，使处理尽量完善妥当。不一定进行预防性治疗，但要定期检测HIV抗体，检测时间同前。,72,2、向卫生部性病艾滋病预防控制中心报告 每年6 、12月底，各省级HIV检测中心将本省各

28、HIV检测实验室人员和临床医护人员安全事故及处理情况分两次汇总，填写“HIV检测实验室人员及临床医护卫生保卫人员职业暴露事故登记表”。报告项目包括：事故发生的时间、地点（单位）、暴露方式、处理方法（使用药物者应注明治疗方案；首次用药时间暴露后几小时或几天；药物毒副作用监测情况）、定期检测结果、填表单位、填表人、填表日期、审核人 .,73,五、病原微生物实验室生物安全管理条例,实验室或者实验室的设立单位应当每年定期对工作人员进行培训，保证其掌握实验室技术规范、操作规程、生物安全防护知识和实际操作技能，并进行考核。工作人员经考核合格的，方可上岗。 从事高致病性病原微生物相关实验活动的实验室，应当每

29、半年将培训、考核其工作人员的情况和实验室运行情况向省、自治区、直辖市人民政府卫生主管部门或者兽医主管部门报告。,第三十四条规定：,74,病原微生物实验室生物安全管理条例第三十五条规定： 从事高致病性病原微生物相关实验活动的实验室，还应当对实验室工作人员进行健康监测，每年组织对其进行体检，并建立健康档案；必要时，应当对实验室工作人员进行预防接种。,在实验室生物安全的三要素中人又是最宝贵的要素，必须保证操作者的身体健康和生命安全，同时也要防止因操作的意外感染而导致的传染病传播。因此，必须对病原微生物实验室相关人员进行健康监测。,75,病原微生物实验室生物安全管理条例,病原微生物分类 1.第一类病原微生物，是指能够引起人类或者动物非常严重疾病的微生物，以及我国尚未发现或者已经宣布消灭的微生物。 2.第二类病原微生物，是指能够引起人类或者动物严重疾病，比较容易直接或者间接在人与人、动物与人、动物与动物间传播的微生物。 3.第三类病原微生物，是指能够引起人类或者动物疾病，但一般情况下对人、动物或者环境不构成严重危害，传播风险有限，实验室感染后很少引起严重疾病，并且具备有效治疗和预防措施的微生物。 4.第四类病原微生物，是指在通常情况下不会引起人类或者动物疾病的微生物。 第一类、第二类病原微生物统称为高致病性病原微生物。 (HIV第二类病原微生物),76,谢谢！,