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1、实验四 球菌,引起人类化脓性感染的主要细菌，又称化脓性球菌 常见有： 葡萄球菌属 链球菌属 肠球菌属 奈瑟菌属,菌种,葡萄球菌属：金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球 菌（白色葡萄球菌）、腐生葡萄球菌（柠檬色葡萄球菌） 链球菌属：甲型溶血型链球菌、乙型溶血性链球菌、肺炎链球菌 奈瑟氏菌属：微黄奈瑟氏菌,葡萄球菌属,菌种： 金黄色葡萄球菌 表皮葡萄球菌 腐生葡萄球菌,实验目的,掌握葡萄球菌属的分离培养方法与鉴定方法 掌握葡萄球菌属的菌落特点 菌体形态及染色性,细菌菌落形态及色素的观察 做GS染色，镜下形态的观察 生化反应： 1.触酶试验 2.血浆凝固酶试验,实验内容,葡萄球菌镜下形态的观察,革兰阳性,无芽
2、胞无鞭毛,葡萄堆状排列,生化反应,触酶试验： 原理：某些细菌能产生过氧化氢酶，将对细菌有害的H2O2 分解成H2O、O2 方法：在洁净载玻片上，滴加3% H2O2溶液12d,用接种环 挑取普通琼脂上的菌落，观察结果。 结果：产生大量气泡者（+），不产生气泡者（） 鉴别：葡萄球菌（+）、链球菌（）,血浆凝固酶试验： 原理：金黄色葡萄球菌能产生血浆凝固酶，可使血浆中可溶性的纤维蛋白原变为不溶性的纤维蛋白，结合型血浆凝固酶附着于细菌表面，在玻片上形成凝块；游离型的血浆凝固酶则可使试管中的血浆发生凝固。 方法（玻片法）： 对照区 试验区,生理盐水 血浆 细菌 细菌,结果：出现凝集现象者为阳性。,链球菌
3、属,菌种： 甲型溶血型链球菌 乙型溶血型链球菌 肺炎链球菌,实验目的,掌握链球菌属的分离培养与鉴定方法 掌握链球菌的菌落特点、菌体形态及染色性,实验内容,细菌菌落形态及溶血的观察 做GS染色，镜下形态的观察,细菌菌落形态及溶血的观察 1.灰白色、圆形凸起、表面光滑、边缘整齐的针 尖样大小菌落，菌落周围出现不同的溶血 2.根据血平板上的溶血情况分：,甲型():草绿色溶血环,丙型():无溶血环,乙型():透明溶血环,细菌镜下形态观察,革兰阳性球菌、圆形或卵圆形、成双或呈链状排列,肺炎链球菌成双排列，细菌形似矛头，周围有空晕，此为荚膜。,奈瑟氏菌属,菌种：微黄奈瑟菌（代替脑膜炎奈瑟菌） 实验目的：掌
4、握脑膜炎奈瑟菌的形态和培养特性。 实验内容：1.培养特性和菌落观察：营养要求高，接种血平 板或巧克力平板，置35 ，5%CO2条件下， 孵育1824h观察结果，可见圆形突起、光滑湿 润、无色透明、边缘整齐、似露滴状 ，直径 为23mm。 2. GS染色，形态观察： G-双球菌、肾形、成双排列、凹面相对。 3.生化反应： 氧化酶试验。 4.淋病奈瑟菌示教片。,氧化酶试验: 原理：某些细菌具有氧化酶，能将盐酸二甲基对苯二胺 或（盐酸四甲基对苯二胺）氧化成紫红色（蓝色）的醌类化合物。 方法：用滤纸条蘸取被检菌落少许，用滴管吸取氧化酶试 剂，滴加于滤纸条菌落上，观察颜色变化。 结果：阳性者立刻出现红色(蓝色)，继而逐渐加深，阴性不变色。 脑膜炎奈瑟菌（+）,淋病奈瑟菌示教,革兰染色阴性、肾形双球菌，无芽胞无鞭毛。,总结,球菌的鉴定程序,