生化实验基本操作.ppt

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1、生化实验基本操作技术,生物化学与分子生物学实验教学中心,生物化学与分子生物学实验教学中心,基本操作技术内容,生物化学与分子生物学实验教学中心,常用玻璃器皿的洗涤方法,使用过的玻璃器皿洗涤(常规洗涤方法) 倒掉内容物自来水冲洗温肥皂水冲洗自来水冲洗蒸馏水冲洗三次 新购置的玻璃器皿洗涤 2%盐酸浸泡数小时自来水冲洗常规洗涤 血清堵塞刻度吸管洗涤 7.5mol/L尿素清洗常规洗涤 油污烧杯试管洗涤 去油脂常规洗涤 (去油脂方法:将量器倒放于具有强吸水力的几层厚纸上,置100烤箱中烘烤半小时,使油脂溶化由厚纸吸收,再置碱性溶液中煮沸趁热洗刷,即可除去油脂)。,生物化学与分子生物学实验教学中心,污染玻璃

2、器皿洗涤 浸泡在杀菌剂(5%煤酚皂液)中过液常规洗涤 染料污染玻璃器皿洗涤 清水清洗3%盐酸乙醇溶液清洗常规洗涤 微量元素测定用玻璃器皿洗涤 单独清洗稀盐酸浸泡去离子水冲洗常规洗涤 量器类玻璃器皿洗涤 立即清洗晾干铬酸洗液浸泡46h自来水冲洗蒸馏水冲洗 比色杯洗涤 自来水冲洗蒸馏水冲洗 (洗不净可用3.5mol/L HNO3溶液或(0.30.6)mol/L HCl冲洗,禁用毛刷或强氧化剂或超声波洗涤) 干燥自然干燥、烘烤干燥 量器自然凉干,容器烘干备用。,常用玻璃器皿的洗涤方法,生物化学与分子生物学实验教学中心,洗涤、干燥原则与判断方法,玻璃器皿洗涤原则: 对不同玻璃器皿,采用不同的洗涤方法。

3、根据器皿污染源的不同选择合适的洗涤液。 玻璃器皿干燥原则: 量器自然凉干,容器烘干备用。 器皿清洁的判断方法: 洗涤后倒置容器,其内壁无挂珠;干燥后器壁内外干净、无污物痕迹。,生物化学与分子生物学实验教学中心,溶液的混匀技术,甩动混匀适用于试管内液量不多的溶液混匀。 弹打混匀适用于锥形离心管、小试管和小塑料离心管等内容物的混匀。 旋转混匀适用于未盛满溶液的锥形瓶、试管和小口容器等内容物的混匀。 倒转混匀适用于具塞容器,如容量瓶、具塞量筒和具塞离心管等内容物的混匀。 玻棒搅拌混匀适用于烧杯内容物的混匀。 吸管混匀适用于样品不同浓度等级稀释的混匀。 旋涡振荡器混匀适用于锥形离心管、小试管和小塑料离

4、心管等内容物混匀。 电磁搅拌混匀适用于酸碱自动滴定、pH梯度滴定等。,生物化学与分子生物学实验教学中心,刻度吸管的使用,选管(大小合适)总容量等于或稍大于取液量 执管(左球右管) 取液(一下一上) 插入液面下0.5cm,吸至最高刻度上方12cm 调准刻度(三点一线) 溶液弯月面、视线和刻度线在同一水平上 放液(贴壁放液) 需要吹的则吹出,如要求不吹的则让吸量管尖端停靠内壁约15s,同时转动吸管,重复一次。 放置(放回吸管架) 禁止平放在实验台面上! 洗涤(操作结束后),吸量管操作执管姿势,放液示意图,生物化学与分子生物学实验教学中心,可调式微量加样器的使用,选择(大小合适) 设置量程(动作轻缓

5、) 先确定调节轮的方向,再调至大于或小于所需值一格,最后调回所需值。 装吸嘴(套牢,避免间隙) 取液(按至第一停点,缓慢吸液) 放液(贴壁放液)先按至第一停点,再按至第二停点。 卸吸嘴(废物缸) 将数轮调回最大值 放置(放在固定支架上,严禁平放或倒置),生物化学与分子生物学实验教学中心,图A:把按钮压至第一停点, 图B:垂直握持加样器,使吸头浸入液面下3-5毫米处,然后缓慢 平稳地松开按钮,吸入液体。 图C:将吸头口贴到容器内壁底部并保持倾斜,平稳地把按钮压到 第一停点 。 图D:压住按钮,同时提起加样器,使吸头贴容器壁擦过。 图E:松开按钮,按吸头弹射器除去吸头。,南方医科大学 生物化学与分子生物学实验教学中心,Thank You !,

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