《细菌的革兰染色法.ppt》由会员分享，可在线阅读，更多相关《细菌的革兰染色法.ppt（9页珍藏版）》请在三一文库上搜索。
1、实验二、细菌的革兰氏染色,一、实验目的 1. 掌握细菌革兰氏染色原理及方法、巩固油镜的使用； 2. 初步掌握无菌操作技术。,二、实验原理 革兰氏染色法（Gram, 丹麦，1884年） （1）是细菌学上最常用的鉴别染色法，染色后，可将细菌分为G+菌和G-菌。 （2）机理 主要因为两类细菌细胞壁结构和成分不同。 G+菌细胞壁：肽聚糖含量高（90）、交联程度高、肽聚糖层厚、脂类含量少用乙醇不易脱色； G-菌细胞壁：肽聚糖含量低（10）、交联程度低，肽聚糖层薄、外壁层脂类含量较高用乙醇易脱色。,三、实验材料 1.菌种 （1）枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis） （2）大肠杆菌（Esche
2、richia coli） 培养24h，用于革兰氏染色。 2.染色液和试剂 草酸铵结晶紫染液、卢革氏碘液、95%酒精、番红染液、生理盐水、乙醚-乙醇溶液、香柏油。 3.器材 废液缸、洗瓶、载玻片、接种环、酒精灯、擦镜纸、显微镜等。,四、实验方法 1.革兰氏染色 （1）步骤 取一干净载玻片在两端各加一滴生理盐水无菌操作取菌种涂于生理盐水中（成菌膜） 自然干燥火焰固定初染（结晶紫，1min） 水洗媒染（碘液，1min） 水洗脱色（乙醇，20-30s） 水洗复染（蕃红，2min） 水洗自然干燥观察。,革兰氏阴性杆菌,革兰氏阳性杆菌,（2）注意事项 选用对数期的细菌； 载玻片要洁净无油迹； 涂片时，滴生理盐水不要过多，挑菌量宜少，涂片要均匀，菌膜宜薄； 酒精脱色：是革兰氏染色成败的关键，要求脱至流出的乙醇不带颜色为止，立即水洗。,五、实验作业 1.分别绘出枯草杆菌和大肠杆菌的形态图，并注明两菌的革兰氏染色的结果。,