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1、第四次实验 动物实验的基本操作训练,Basic Operation in Animal Experiment,教师：金寰、田虹,实验目的,1.学习捉拿家兔的正确方法和固定。 2.掌握常用手术器械的正确使用方法。 3.学习动物实验的基本操作技术，包括麻醉、切口与止血、气管插管术、神经分离术、颈动脉插管术、输尿管插管术、膀胱插管术。,健康家兔,雌雄不拘,体重2.02.5Kg,实验对象,实验内容,1.家兔的捉拿、麻醉与固定 2.颈总动脉、神经分离术 3.气管插管 4.动脉插管 5.膀胱插管 6.输尿管插管,1.器材： 兔手术台、哺乳类手术器械一套、三通、动脉夹、动脉插管、气管插管、输尿管插管、膀胱插
2、管、纱布、棉线、注射器、绑腿带、污物杯。 2.药品： 25%氨基甲酸乙酯溶液(乌拉坦),实验器材和药品,实验方法,一、家兔的捉拿与称重,图1 正确捉拿家兔,右手抓住家兔颈背部皮肤，轻轻将家兔提起，迅速以左手托住其臀部，使家兔体重主要落左掌心上，以免损伤动物颈部。,注意点： 家兔一般不咬人，但脚爪锐利，在挣扎易抓伤捕捉者，所以捕捉时要特别注意其四肢。,1.家兔的捉拿,图2 错误捉拿法,可损伤两肾 可造成皮下出血 可损伤两耳,将家兔放在婴儿秤上，待家兔安静的时候观察体重并记录。,2.家兔的称重,注意点： (1)调零 (2)切勿使劲按压称面,二、家兔的麻醉,1. 药品:25%氨基甲酸乙酯(又名:乌拉
3、坦) 2. 参考剂量:1gkg ，相当于4mlkg 3. 给药途径:耳缘静脉,4.家兔耳缘静脉注射方法,(1)助手按下图的方式将家兔固定,图4 家兔耳缘静脉麻醉前固定,助手的一侧上肢弯曲与同侧的躯干夹住家兔的后半部位，同时该侧的手托住家兔的腹部，另一只向上抓住家兔的颈背部。,(2)注射方法(视频),图5 家兔耳缘静脉注射方法,静脉穿刺意外(视频),(3)耳缘静脉注射要点： 充分暴露耳背外缘耳缘静脉。 左食指、中指轻夹耳根部使静脉充盈。 注射点的选择。 从远心端以30角度进针刺入静脉后顺血管平行方向深入1cm。 左手拇指、食指在刺入部位将针头与兔耳固定。 注意注入速度和密切观察家兔的反应。 注射
4、完后注意止血。,(4)麻醉效果,动物呼吸平稳深慢 角膜反射迟钝或消失 肢体肌肉松弛 皮肤夹捏反射消失,(5) 麻醉意外 麻醉过量 实验动物会出现两种情况，一是呼吸、心搏骤停或间断等情况：二是动物全身皮肤色表紫，呼吸运动浅而慢。要密切观察动物生命体征的变化，做好实施各项抢救工作的准备。 麻醉过浅 动物可能出现挣扎、尖叫等表现，需要及时地追加麻醉药物，但一次追加不宜超过总量13，并密切观察动物是否已达到麻醉的基本状态。,1.仰卧固定,图6 家兔仰卧固定法,头部用一根粗棉线拉住兔的两只门齿后栓在兔板的铁柱或固定于钩上。两前肢平直放在胸腰部两侧,用粗棉绳的一端缚扎腕关节以上部位,缚绳从背后左右交叉穿过
5、,压在对侧前肢的前臂上,再紧扎于兔板两侧的木钩上,两后肢左右分开, 缚绳扎踝关节以上部位,另一端分别固定于兔板后两侧的木钩上,三、固定方法,(1)活结的打法； (2)颈部必须放正拉直，且不要超过铁杆； (3)缚绳要紧扎于兔板两侧的木钩上，防止家 兔挣扎时挣脱缚绳； (4)拉出舌头，以免阻塞呼吸道。,2.注意事项,四、止血 1.压迫止血法 用温热盐水纱布或棉球压迫止血。 2.钳夹止血法 对准出血点迅速、准确钳夹，一般细小血管用此法。 3.结扎止血法 较大的血管出血，用血管钳夹住出血点，结扎止血。,五、颈部手术,1.气管插管术(视频),(2)气管插管术操作要点： 颈部正中切开皮肤，钝性分离暴露气管
6、、穿线备用。 于气管中段第三或第四软骨环上向头端作一纵向倒“T”形切口。 将气管导管由切口向胸部方向插入气管腔内。 在气管软骨环之间进行结扎，并将棉线固定于插管分叉处。,(3)注意事项 颈部皮肤切口，皮下组织和颈前肌肉群的分离均在一定要沿正中线进行。 分离肌肉时，要顺着肌肉的走向钝性分离，而且动作须轻柔，止血钳插入不宜过深，以防损伤深层的食管和血管。 插管之前先用蘸有生理盐水的棉球，挤尽水分后进行清理气管内的血液和分泌物，以保证气道通畅。 插管时动作轻柔，若见插管内有血，应取出插管擦净血液，再进行插管。,2.颈部神经分离术(视频),(2)神经分离术操作要点： 暴露神经的手法。 仔细辨认神经，用
7、玻璃分针轻轻分离神经。 分离神经的先后顺序。,3.颈总动脉插管术(视频),(1)颈总动脉插管术操作要点： 于气管一侧小心分离颈总动脉约3cm穿两线备用。 远心端结扎、近心端用动脉夹夹紧。 用眼科剪与血管呈45的角度从远心端开始在向心一侧剪开管壁的1/3。 插管前导管和压力换能器的肝素化。 插管后结扎固定。,(2)注意事项 分离动脉时不要损伤动脉的小分支，以免造成出血。 颈总动脉剪口不宜过大或过小，过大易于使颈总动脉插断，过小导管不易插入。 动脉导管的插入端要光滑，不能过尖，以防刺破动脉壁，引起大出血。 未扎紧动脉插管前不要松动动脉夹。,六、腹部手术,1.膀胱插管术(视频),(1)膀胱插管操作要
8、点： 在耻骨联合上方备皮，做一35cm的切口，沿腹白线打开腹腔，暴露膀胱，将膀胱向下方翻开，可见白色输尿管。 结扎尿道口。 膀胱底部剪一小口，插入导管，与切口处的膀胱壁结扎固定。,(2)注意事项 因腹壁与腹腔内脏紧贴，作腹壁切口时一定提起腹壁，以免伤及腹腔内脏。 动作轻柔，以免引起损伤性尿闭。 注意膀胱插管不要插入过深。,2.输尿管插管术(视频),(1)输尿管插管操作要点： 在耻骨联合上方备皮，做一35cm的切口，沿腹白线打开腹腔，暴露膀胱，将膀胱向下方翻开，可见白色输尿管。 游离输尿管，下方穿2根线，在入膀胱处用一细线结扎输尿管，另一细线打松结备用。 待输尿管充盈后，在结扎处前方的管壁上剪一
9、楔形小口（小于管径1/2），从此孔向肾脏方向插管，固定。,(2)输尿管插管应注意： 因腹壁与腹腔内脏紧贴，作腹壁切口时一定提起腹壁，以免伤及腹腔内脏。 分离输尿管时，注意分清输精管，输精管为围绕输尿管横向走行的白色管，与膀胱无联系。 分离输尿管时不要伤及周围血管，以防出血模糊手术野。分离应尽量干净，以便剪口和插管时看得清楚。 插管时不要插入肌层与粘膜之间，插入方向应与输尿管方向一致，勿使输尿管扭结。 输尿管插管易引起输尿管出血，血凝块阻塞导管，可用肝素生理盐水冲洗，保持输尿管通畅。,Copyright 2008 wust,1.请不要向水槽内倾倒固体垃圾（如兔毛、血凝块、纸巾、棉线及棉球等）； 2.请勿使用外带U盘等拷贝设备及擅改电脑设置(如桌面主题等); 3.请勿进行与实验无关的活动。,友情提示：,谢谢合作！,下 次 实 验,家兔呼吸运动的调节及胸内负压的测定,地点：第二实验室,