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1、实验六 沙门氏菌检验（二）,一、实验器材（每组的量，由班长分发）,赖氨酸脱羧酶培养基试管： 5支/组 对照培养基试管（不加赖氨酸）：1支/组 尿素琼脂培养基斜面：3支/组 蛋白胨水培养基试管：6支/组 余下的作为空白 实验前准备：（尿素）琼脂培养基融化后冷至50 55 ，加入经过滤除菌的尿素溶液（10ml尿素溶液/100ml培养基），分装于灭菌试管内（约34ml/管），放成斜面。,二、实验步骤,首先标记挑取的可疑菌落产H2S是“ ”还是 “ ” 1.赖氨酸脱羧酶试验 挑取可疑菌落，接种赖氨酸脱羧酶培养基试管（包括对照培养基），每人接种一支， 36 1 ，培养18h24h 2.尿素酶试验 挑取可
2、疑菌落，接种三支尿素琼脂斜面，36 1 ，培养24h 3.吲哚试验 挑取可疑菌落，蛋白胨水试管每人接种一支，36 1 ，培养1d2d,三、实验结果,1.赖氨酸脱羧酶试验 赖氨酸脱羧酶阳性者由于产碱，培养基应呈紫色； 阴性者因葡萄糖产酸，培养基变为黄色。 对照管应为黄色 2.尿素酶试验 尿素酶阳性者由于产碱，培养基变为红色。 3.吲哚试验（蛋白胨水试管） 加入数滴乙醚，摇动，静置；沿管壁徐徐加入欧-波试剂 （吲哚试剂）数滴，在乙醚和培养物之间产生红色环状物 为阳性反应。,反应序号A2： 补做甘露醇和山梨醇试验，按下表判定结果：,反应序号Bl： 补做ONPG。若ONPG（），为大肠埃希氏菌，若ON
3、PG（），为沙门氏菌。同时，沙门氏菌应为赖氨酸（），但甲型副伤寒沙门氏菌为赖氨酸（）。,7,赖氨酸脱羧酶试验 从左往右依次为 对照、阳性（紫）、阴性（黄）,沙门氏菌常用生化试验,三糖铁 TSI,沙门氏菌常用生化试验,Urease Test 尿素酶试验：,urea尿素,ammonia氨,Indol test 吲哚试验 tryptophan色氨酸indole吲哚玫瑰吲哚 Kovacs reagent吲哚试剂 （对二甲基氨基苯甲醛）,- +,E.coli,蛋白胨水试管,中华人民共和国国家标准 食品卫生微生物学检验沙门氏菌检验GB 4789.4-2003,TSI（排除A/A H2S结果 ），靛基质，尿素，KCN，赖氨酸,H2S 靛 尿KCN 赖（或一项不符）,沙门氏菌血清学试验,H2S 靛 尿 KCN 赖,H2S 靛 尿 KCN 赖/,非如左述的各种反应结果,沙门氏菌血清学试验,沙门氏菌,非沙门氏菌,