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1、,毛细管电泳质谱联用技术 在现代中药中的应用,主要内容,毛细管电泳分离分析原理,CE-MS技术的分类,CE-MS应用进展,总结和展望,5,2,3,4,前言,1,1.前言：,中药组成十分复杂，有效成分不明确、含量低、药理作用复杂难监测等原因，发展高效、高灵敏、高通量的分析鉴定手段具有重大意义。毛细管电泳逐渐进入了中药分析的领域，为中药分析开辟了一个新的天地，中药的有效成分中如生物碱、多糖等在非水毛细管电泳中已得到了良好的分离分析。,电泳迁移,电渗迁移,分离原理,2.毛细管电泳分离分析原理,分离 原理,3. CE-MS的分类,按接口技术 类型不同,按毛细管电泳 类型不同,在线,离线,非水毛细管电泳
2、(NACE),毛细管等电聚焦（CIEF-MS）,CGE-MS法（凝胶毛细管电泳）,其他,电喷雾电离技术 电感耦合等离子体（CE-ICP-MS）技术 飞行时间质谱( TOFMS ) 三重四极杆质谱( TQ-MS ) 离子阱质谱( IT-MS ),3. CE-MS的分类,按接口技术类型不同,在线技术,离线技术,3.1在线技术：,CE-MS在线结合的仪器主要包括三个部分:即CE系统，CE-MS接口和MS检测器。 目前，成功地应用于CE-MS接口中的离子化技术有连续流-快原子轰击（CF-FAB）、离子喷雾（IS）、电喷雾（ESI）、大气压化学电离、基质辅助激光解吸离子化和等离子体解吸离子化技术等。其中
3、电喷雾电离是最常用、最成熟的技术。,3.1.1电喷雾电离技术,3.1.1电喷雾电离技术,优点,灵敏度高,ESIMS分析在中草药定量分析上具可行性和优越性，且定性简单快速。,可测定 生物大分子,CEESIMS在二维分离技术上有很大的优越性。,可用于 结构鉴定,3.1.1电喷雾电离技术,电喷雾接口可分为无鞘流式电喷雾接口和鞘液体接口。,稳定性差,Description of the contents,毛细管柱使用寿命短,3.1.1电喷雾电离技术,无鞘流电喷雾接口的缺点有：,3.1.1电喷雾电离技术,3.1.1.2鞘液体接口： 金属接口（喷雾杆）具有三层套管结构：内层中插入普通毛细管, 与最初设计不
4、同的是中间层采用了液体鞘流技术, 鞘液体从中间层流出, 与毛细管中流出的液体混合, 解决了毛细管末端电接触的问题, 同时可以控制鞘液体流速以增大进入ESI的液体量，补给足够的液体基质, 形成稳定的电喷雾。,3.1在线技术小结：,优点： CE-MS 在线联用具有样品损失少、自动化程度高、分析速度快等优点,其应用要比离线联用广泛 缺点： a.限制离子源的使用，仅电喷雾等几种方法可选 b.常不允许CE采用其最佳缓冲条件，限制其优势的发挥 c.CE出峰很快，欲进行二级质谱研究，时间常不够，限 制结构测定能力发挥,此外 CE-MS 在线联用需要设计合适的接口,能够将已分离的样品全部转移到质谱仪中,同时实
5、现样品快速高效的离子化。因此, CE-MS在线联用接口技术是研究的重点。,3.2离线技术,优点： a.操作方便，特别是允许CE按所需要优化其分离条件 b.对离子化方法没有限制 缺点： 关键是对已分离样品的有效收集,并不涉及真正意义上的联用接口技术,3. CE-MS的分类,非水毛细管电泳(NACE),毛细管等电聚焦（CIEF-MS）,CGE-MS法（凝胶毛细管电泳）,其他方法,按毛细管电泳类型不同,3.1非水毛细管电泳(NACE),释义： 非水毛细管电泳(nonaqueous capillary electrophoresis，NACE)法是CE的一个分支，它没有严格的定义，主要是指以有机溶剂完
6、全替代水作电解液的溶剂这种情况。目前，NACE应用的研究热点集中在有机溶剂、电解质、检测器的选择以及方法的优化等方面。,分析不易溶于水、易溶于有机溶剂的物质,在水中难以 进行反应的研究,分离在水溶剂CE中淌度十分相似的物质,Vision 01,Vision 03,Vision 02,Vision 03,适用 范围,3.1非水毛细管电泳(NACE),分离效率高，分析时间短,3.1非水毛细管电泳(NACE),检测手段多,降低峰宽并改善拖尾,提高被分析物的回收率,由于以有机溶剂完全替代水作电解液，所以有一定局限性。,优点,不足,3.2毛细管等电聚焦(CIEF-MS),是新近出现的技术，技术尚不成熟，
7、未得到广泛应用,优点,不足,给复杂生物大分子混合物的分离和结构阐述提供了一种强有力的工具,3.3 凝胶毛细管电泳（CGE-MS）,分离和鉴定生物样品中的低聚核苷酸以及生物碱、黄酮及其苷、香豆素类、有机酸类、氨基酸类、核酸类、多肽类及蛋白质类等化合物。,特点,适用,特别适用于缓冲液和相对高浓度的液体的分析，使其不会流出CE柱。,3.4 其他方法,毛细管区带电泳(CZE)、胶束电动毛细管色谱(MEKC)，也适用于生物碱、黄酮及其苷、香豆素类、有机酸类、氨基酸类、核酸类、多肽类及蛋白质类等化合物的分离。,4.CE -MS 应用进展,Text in here,Text in here,Text in
8、here,1,2,3,生物大分子及相关物质分析,天然产物中活性和毒性成分分析,食品药品分析及其他领域的应用,4.1生物大分子及相关物质分析,例：促红细胞生长素(EPO),4.2天然产物中活性和毒性成分分析,4.2.1 CE-MS用于中药化学成分的研究,例1：陈军辉等，高效毛细管电泳电喷 雾飞行时间质谱联用分析黄连中的生物碱 化学学报 Vol. 65, 2007 2743-2749,4.2.2 中草药中毒性成分的分析,例：马兜铃酸,4.2.2 中草药中毒性成分的分析,5.总结和展望,CE/MS的应用报道虽然很多,但作为常规方法尚存在以下缺点: 浓度灵敏度低,不如LC-MS； 毛细管壁涂层材料或者
9、MEKC中的表面活性剂等会降低被分析物的离子化效率甚至严重污染MS离子源； 不是所有的CE分离模式都可方便地用于与MS相联用； MS对CE分离缓冲液的限制较多。,展 望,与提取富集技术联用,提高选择性和灵敏度,发展毛细管涂层材料,研制新型的高效CE-MS接口,Add Title,与高分辨MS等新型质谱仪联用,应用研究领域的进一步拓展,小组成员,S0920436 郭雨姗 S0920438王淑蕾 S0920441 熊焰(PPT) S0920442刘玲玲 S0920443 骆杨丽 S0920446唐开亮 S0920447 孙建博 S0920452何 艳 S0920453 翦雨青 S0920455唐本钦,,Thank You!,