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1、中国猪传染病概况,仇华吉 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所,提纲,世界范围内主要猪传染病 中国养猪业规模 中国的主要猪传染病 中国目前猪传染病状况 中国猪传染病疫苗 中国兽医研发机构 中国生物制品企业 中国猪传染病控制目标 猪传染病的未来研究方向,世界范围内的主要猪传染病,CSF：已经在北美、大部分欧洲国家、澳大利亚、日本被消灭，主要在亚洲和中南美洲流行 AD：已经在北美、欧洲、澳大利亚、日本被消灭 FMD：已经在大部分发达国家被消灭和控制 PRRS：世界范围内流行，在某些地区已经根除 ASF：北美、欧洲部分地区、中国无此病，在非洲、部分欧洲国家流行,中国的养猪业,中国猪肉产量世界排名第一，20
2、13年生猪出栏量71,557万头，猪肉产量5493万吨，约占世界的48%。 品种 6个主要外来品种（杜洛克猪、长白猪、大白/大约克夏猪、汉普夏猪、皮特兰猪、巴克夏猪） 80余个地方品种（宁乡、 太湖、金华、内江、陆川、荣昌、八眉、民猪、巴马香猪、文昌猪、淮猪、成华猪、海南猪、滇南小耳猪） 数十个培育品种（苏太猪、湖北白猪、湘白猪、北京黑猪、松辽黑猪、上海白猪、哈尔滨白猪、沂蒙黑猪、三江白猪、新淮猪、） 养殖 大型、中等和小型猪场或庭院养殖，机械化或人工操作,中国年出栏猪数(1976-2013),中国的猪生产力,PSY (每头母猪每年提供的断奶仔猪数(weaned piglets per sow
3、 per year) 中国 (69628/5068=14), vs 美国 (22), 丹麦 (30), 荷兰 (32) 决定因素：窝仔数、胎数、母猪泌乳、种猪更新、繁殖障碍 制约因素：疾病(死亡率25%?)、品种、配种、饲料与饲喂方式、管理 ,中国猪传染病-病毒病,猪瘟（CSF） 猪繁殖与呼吸综合征（PRRS）：经典+变异 口蹄疫（FMD）：O、A、Asia 1 伪狂犬病（AD）：经典+变异 猪流行性腹泻（PED） 猪传染性胃肠炎（TGE） 猪圆环病毒2型相关疾病（PCVAD） 日本脑炎（JE） 猪细小病毒感染（PPV） 猪流感（SI） 等等,PRRS,1996,HP-PRRS,2006,PE
4、D,2010,AD variant,2011,1958,CSF/AD,1925?,PCV2,2000,PED,1978/1973?,FMD,1956,TGE,病毒性疾病-CSF,地方流行性或散发 病毒基因型：主要是 2.1, 2.2, 2.3, 1.1 疫苗：C株（猪瘟兔化弱毒疫苗） 控制：强制接种、检测+淘汰 研究团队：哈兽研、军事兽医所、中监所、上海师大、兰兽研、西北农大、武大、上兽研等,病毒性疾病-PRRS,1995年出现的北美洲型PRRSV（经典株） 2006年出现的高致病性PRRSV（变异株） 流行性或地方流行性，很少有PRRSV阴性猪场 疫苗：变异和经典株活疫苗、灭活疫苗（？） 控
5、制：强制接种(HP-PRRS)/自主免疫，免疫不宜过度过滥！ 研究团队：哈兽研、华中农大、上兽研、中国农大、兽医诊断中心、南京农大、浙大、西北农大、特产所，等等,病毒性疾病-AD,长期处于有效控制之下 但在2011年以来，出现了新的ADV“变异株”，目前使用的Bartha-K61 疫苗不能提供完全保护 疫苗：大部分都是Bartha-K61，还有其他基因缺失株 疫苗接种：自主接种 研究团队：华中农大、哈兽研、四川农大、武汉病毒所、上兽研等,病毒性疾病-PED,1978年代首次在中国出现 2010年12月在中国大流行（2013年5月起在美国大面积爆发，传播途径：运猪车） 有时跟TGEV或 PRoV
6、或细菌混合感染 多种来源不同的疫苗，效果不确实 研究团队：哈兽研、华中农大、东北农大、上兽研、江苏牧医所、中国农大、兰兽研、华南农大等等,病毒性疾病-FMD,血清型：在猪群中有O、A、亚洲1型，以O型为主(Cathay、缅甸98、泛亚等3个谱系) 控制：强制接种和扑杀政策，疫情上报？ 疫苗：包含分离自不同地区(包括东南亚)的不同毒株的各种疫苗，疫苗的覆盖度、有效抗原含量、内毒素 研究团队：兰兽研、哈兽研、华中农大、军事兽医所、云南畜牧兽医科学院、新疆畜牧科学院等,病毒性疾病-PCVAD,无所不在、混合感染 基因型：PCV2b、2a、2d、2e 疫苗：基于全病毒的灭活疫苗，或者基于重组Cap蛋白
7、的亚单位疫苗 研究团队：哈兽研、南京农大、浙江农大、中国农大、北京牧医所、河南牧医所、江苏牧医所，还有很多,病毒性疾病-ASF,急性、发热性、出血性、致死性传染病，症状和病变类似猪瘟 只感染家猪、野猪 经软蜱传播 撒哈拉沙漠以南非洲国家、意大利撒丁岛流行，目前在俄罗斯、立陶宛、波兰部分东欧国家爆发 尚无可用的疫苗 严防死守，防止传入！,猪传染病-细菌性疾病,猪传染性胸膜肺炎(Actinobacillus pleuropneumoniae, App) 副猪嗜血杆菌病 (Haemophilus parasuis, Hps) 猪喘气病/地方流行性肺炎(Mycoplasma hyopneumoniae
8、, Mhp) 猪肺疫(Pasteurella multocida, Pm) 猪链球菌病(Streptococcus suis, Ss) 猪大肠杆菌病(Escherichia coli) 猪丹毒(Erysipelothrix rhusiopathiae) 猪增生性肠病/回肠炎(Lawsonia intracellularis) 等等 存在的主要问题： 主要疫病防控不力，引起继发性细菌感染 治疗不当，致使病菌扩散 滥用抗生素，造成耐药菌株增加,猪传染病-寄生虫病,猪囊虫病(Swine cysticercosis) 猪旋毛虫病(Swine trichinellosis) 猪疥螨病 (Swine sa
9、rcoptidosis) 猪蛔虫病 (Swine ascariosis) 猪弓形体病 (Swine toxoplasmosis) 等等,目前国内猪传染病状况,首要传染病：PRRS、CSF、FMD、AD CSF和PRRS持续存在 AD和猪丹毒重新抬头 FMD散发或地方流行性 腹泻病常发（病毒或细菌性，PED为主） PCV2、Hps、Mhp、App普遍存在 混合感染（多种病毒和细菌） 继发感染,国内的兽医研发中心,国家级兽医研究所（哈兽研、兰兽研、上兽研、吉林特产所、兰州牧药所、北京畜牧兽医所、军事兽医所等） 大学的兽医学院（华中农大、中国农大、南京农大、华南农大、四川农大、扬大、浙大、河南农大等
10、） 省市级兽医研究所（河南、江苏、广东、山东、北京、天津、湖北等牧医所） 生物制品公司的研发中心（哈兽研维科、兽用生物制品工程中心、大北农、中牧、普莱科、瑞普、华威特、硕腾、勃林格殷格翰、默沙东、梅里亚、诗华、诺华等） 其他,国内动物生物制品厂,本土生物制品企业数量不断增长，28(2000)、47(2003)、68(2010)、78(2012)、99(2013)，能满足全世界3倍需要，产能利用率仅为25-27%左右 加上许多跨国企业来华设厂（梅里亚、硕腾、勃林格、海博莱、诗华、默沙东、礼来等等）,7,7,1,8,4,2,10,9,3,3,7,4,2,2,6,1,1,2,1,2,1,2,2,1,
11、5,全国生物制品厂分布图,2,2,动物疫苗市场规模：100亿元 猪用疫苗销售额：35亿左右,1,South China Sea Islands,正在应用的疫苗,CSF：C株（超过36个疫苗厂生产） PRRS: CH-1a, CH-1R, R98, IngelvacPRRS (MLV), RespPRRS MLV, PrimePac MLV, HuN4F112, TJM-F92, JXA1-R，超过21个厂生产 AD：Bartha-K61, Bucharest, BUK, SA215, Begonia(783), HB-98 PCV2：LG, SH, ZJ/C, WH, Circovac (梅里
12、亚), Suvaxyn (富道/硕腾), Circumvent (英特威), CircoFLEX (勃林格殷格翰) PED+TGE：二联苗 (哈兽研转让厂家) Mhp：灭活疫苗 (硕腾、梅里亚、海博莱、富道、普泰克等) Hpp：灭活疫苗 (海博莱、勃林格殷格翰、科前等),正在研发的疫苗,联合疫苗 TGE+PED+PRoV, CSF+PRRS, AD+PRRS, PCV2+PPV, 标记疫苗 嵌合载体猪瘟疫苗（哈兽研） 变异株伪狂犬病及其载体疫苗（哈兽研等） 猪繁殖与呼吸综合征基因缺失疫苗（中博/上兽研/中农等） 口蹄疫病毒样颗粒疫苗（兰兽研/哈兽研） PCV2亚单位疫苗/病毒样颗粒疫苗（很多单
13、位） 细菌菌影疫苗（ghost vaccine）（哈兽研等）,嵌合载体猪瘟疫苗评价,1. 免疫效力试验,猪体上的免疫攻毒试验结果显示： rAdV-SFV-E2和C株免疫效力相当，所有猪只存活并无发热症状。 pSFV1CS-E2和rAdV-E2免疫组，所有猪只存活，但部分猪只有发热表现。 所有对照猪只均死亡。 rAdV-SFV-E2免疫组所有猪各组织脏器无病变，各组织脏器中也没有检测到猪瘟病毒的存在， 也没有发现猪瘟病理变化。所有对照猪剖检后出现典型的猪瘟病变。,图1.抗体检测,表1.攻毒后临床症状统计,图2.免疫攻毒后的剖检变化,图3.组织免疫荧光检测,图4.病理组织学检测,2. 突破猪瘟母源
14、抗体能力试验,表1. 试验设计,图1. 抗体检测,表2. 临床反应统计,表3. 病毒血症,结论：嵌合载体猪瘟疫苗rAdV-SFV-E2免疫不受猪瘟母源抗体干扰。,3. 嵌合载体疫苗与伪狂犬病疫苗同时免疫试验,结论：rAdV-SFV-E2与伪狂犬病疫苗同时免疫互互不干扰。,表1. 试验设计,图1. 针对PRV抗体,图2. 针对CSFV抗体,表2. 临床反应统计,4. 嵌合载体疫苗与蓝耳病疫苗同时免疫,结论：rAdV-SFV-E2与蓝耳病疫苗 同时免疫互互不干扰。,表1. 试验设计,表2. CSFV攻毒后的临床症状统计,表3. PRRSV攻毒后的临床症状统计,图1. 针对CSFV抗体,图2. 针对
15、PRRSV抗体,5. 一次免疫提供的免疫保护,结论：rAdV-SFV-E2 一次免疫也能提供完全保护。,表1. 试验设计,图1. 针对CSFV抗体检测,表2. 攻毒后的临床症状统计,表3. 攻毒后的病毒血症检测,6. rAdV-SFV-E2最早产生保护时间,结论：rAdV-SFV-E2 一次免疫最早3周能够提供完全保护。,表1. 试验设计,图1. 针对CSFV抗体检测,表2. 攻毒后的临床症状统计,表3. 攻毒后的病毒血症检测,7. 低剂量对猪只提供的免疫保护,结论：rAdV-SFV-E2 以2.5106 TCID50能够提供完全保护。,图1. 针对CSFV抗体检测,表1. 攻毒后的临床症状统
16、计,表2. 攻毒后的病毒血症检测,8. rAdV-SFV-E2不同免疫途径效果评价,图1 猪瘟特异性抗体检测,表1 中和抗体检测,表2 攻毒后临床症状统计,图3 淋巴细胞培养上清中IFN-的含量,图2 淋巴细胞增殖,结论：rAdV-SFV-E2 以皮下接种效果最佳,嵌合载体疫苗可以诱导消除性免疫和完全保护，免疫效果接近于C株 嵌合载体疫苗对猪只、家兔、小鼠安全 嵌合载体疫苗以较低的免疫剂量或一次免疫可以诱导完全保护 嵌合载体疫苗一次免疫后3周可以诱导完全保护 嵌合载体疫苗的效力不受猪瘟母源抗体干扰 嵌合载体疫苗不影响伪狂犬病疫苗和蓝耳病疫苗免疫效力 嵌合载体疫苗不产生干扰性抗载体免疫 嵌合载体
17、疫苗的体外培养不受BVDV抗体影响,(Sun Y, et al. Vaccine 2011; 2013).,嵌合载体疫苗的系统评价,gE和gI双基因缺失病毒rPRVTJ-delgE的构建,MluI,gB抗体,图1 缺失病毒构建模式图,图2 缺失病毒的测序鉴定,图3 缺失病毒的IFA鉴定,gE抗体,PRV阴性血清,PRVTJ,rPRVTJ-delgE,mock,图4 缺失病毒的一步生长曲线,伪狂犬病变异株基因缺失疫苗的构建和评价,gE和gI双基因缺失病毒rPRVTJ-delgE的免疫效力评价,表1 试验设计,表2 临床症状统计,图1 gB抗体检测,图2 gE抗体检测,表3 中和抗体,(Wang
18、CH et al., Vaccine, 2014),国家猪病控制目标 (2012-2020),需要优先控制的疾病：FMD、CSF、HP-PRRS、PRRS、AD 做到免疫无疫的疾病：FMD（A型） 种猪需要净化的疾病：AD、CSF、HP-PRRS、PRRS 需要在部分区域净化的疾病：CSF 达到有效控制的疾病：FMD（O型）、HP-PRRS,国内猪病控制的挑战,养猪场的多样化：不同规模不同水平的猪场并存，包括大量家庭猪场 交叉感染：病毒和/或细菌病共同感染 滥用抗生素：耐药性细菌、免疫抑制 多种疫苗泛滥：疫苗选择？疫苗株之间的重组？ 疫苗质量堪忧：疫苗效价和效力参次不齐 过度免疫接种：免疫压力
19、、免疫干扰、免疫耐受 不合理的动物移运：病原谱的交换和汇集 病死猪的非法交易：疾病的广泛传播 喜食新鲜猪肉的消费习惯：潜在的疫病传染源,猪病防控需要多方共同努力,政府：加强市场准入、动物调运、疫苗质量监管，加快防疫急需的疫苗的审批进度 养猪业者：疫病防控要抓大放小，抓住主要矛盾，执行良好的养殖规范GBP（good breeding practices），正确选择和使用猪种、饲料、疫苗、药物，采取严格的生物安全措施 生物制品厂：生产和销售质量合格的、价格合理的生物制品 科研人员：及时开发安全、有效、有针对性的疫苗/药物/诊断方法，积极参与动物防疫技术普及,猪传染病的研究方向,流行病学：持续监测病
20、毒变异、新发疾病，更新疫苗株 病毒学：致病性、传播机制，病毒-宿主相互作用、受体、毒力相关基因的鉴定 免疫学：感染和免疫保护标志物、病毒拮抗剂的鉴定，天然免疫分子和信号通路激活机制 诊断方法：国产化的、快速的、现场的、高通量的诊断试剂盒 疫苗开发：安全环保（比如基于乳酸杆菌）的疫苗、多价、多联疫苗 、复制缺陷型的标记疫苗 药物开发：广谱、高效、低残，中草药、天然药物等 猪的育种：转基因抗病猪的品种/品系培育,结语,中国养猪业长期饱受各种猪传染病之苦 中国的动物疫苗厂家和猪用疫苗（可能还包括研发机构）跟中国的猪传染病一样，有点多，有点滥 在中国有效控制猪传染病，是一个具有挑战性的长期任务 中国兽医研究人员要与有关各方共同努力,建议的疫苗免疫程序,仔猪 母猪 猪瘟、蓝耳、口蹄疫：跟胎免疫，间隔1周；乙脑，每年3-4月1次 伪狂犬病：1年23次；细小病毒：后备母猪配种前1次 公猪 猪瘟、伪狂犬病、口蹄疫：1年23次 蓝耳病：后备期间免疫活疫苗1次，以后灭活疫苗每年2次,伪狂犬病,0 14 30 40 50 60 70 80,猪瘟疫苗+口蹄疫疫苗,蓝耳病疫苗+圆环病毒疫苗,猪瘟疫苗,伪狂犬病疫苗+口蹄疫疫苗,猪圆环病毒疫苗+喘气病疫苗,