药物的杂质检查 PPT课件.ppt

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1、第三章 药物的杂质检查,基本要求,第二节 杂质的检查方法,第三节 一般杂质的检查方法,返回主目录,第一节 概述,练习与思考,第四节 特殊杂质的检查与鉴定方法,基本要求,一、掌握一般杂质检查的原理、方法和计算。 二、熟悉特殊杂质检查的方法和原理。 三、了解热分析在药物分析中的应用。,返 回,一、药物的纯度要求 1药物纯度的概念：药物的纯度是指药物的纯净程度。 2. 药物纯度的要求是不断提高： 例如：度冷丁1948年收入BP，1970年经GC分离鉴定出两种 无效异构体（）和（），有时高达20%30%。 再如：ASA中除了SA外，还存在乙酰水酸酐、乙酰水杨酰水 杨酸等SA的衍生物，具有致敏作用。,第

2、一节 概述,杂质（impurities）是指： 1. 有毒副作用的物质：砷盐、重金属 2. 本身无毒副作用，但影响药物的稳定性和疗效的物质：水分 3. 本身无毒副作用，也不影响药物的稳定性和疗效，但影响药物的科学管理的物质，如一般杂质检查中的氯化物，少量的氯离子为什么还要进行检查呢？,二、药物中杂质的来源,1. 生产过程中引入,（1）原料、反应中间体及副产物,（2）试剂、溶剂、催化剂类,（3）生产中所用金属器皿、装置以及其他不耐酸、碱的金属工具所带来的杂质,如阿司匹林以苯酚为原料生产，产品中可能存在苯酚、水杨酸、醋酸苯酯、水杨酸苯酯、乙酰水杨酸苯酯等杂质。 制备工艺：,制剂过程中可能产生新物质

3、,如： 制备过程中加热灭菌 盐酸普鲁卡因注射剂 进一步脱羧转化 对氨基苯甲酸 苯胺 引起毒性反应,杂质的来源,2. 贮藏过程中产生,水解、氧化、分解、异构化、晶形转变、聚合、潮解和发霉等 如麻醉乙醚、利血平,易发生水解反应的结构：,酯、内酯、酰胺、卤代烃、苷类等,易发生氧化反应的结构：,醚、醛、酚羟基、巯基、亚硝基、双键等,问题1：在药物生产过程中引入杂质的途径为 A. 原料不纯或部分未反应完全的原料造成 B. 合成过程中产生的中间体或副产物分离不净造成 C. 需加入的各种试剂产生吸附，共沉淀生成混晶等造成 D. 所用金属器皿及装置等引入杂质 E. 由于操作不妥，日光曝晒而使产品发生分解引入的

4、杂质,例2、药物及其制剂的成分中不属于杂 质范畴的是 A、药物中的残留溶剂 B、药物中的多晶型 C、药物合成中的副产物 D、阿司匹林中的游离水杨酸 E、维生素AD胶丸中的植物油,三、杂质的分类,1.药物中的杂质按来源分为,1). 一般杂质：如氯化物、硫酸盐、铁盐、重金属、砷盐、酸、碱、水分、易炭化物、炽灼残渣等。一般杂质其检查方法收载在中国药典的附录中。,2). 特殊杂质：指某一个或某一类药物的生产或贮藏过程中引入的杂质，如阿司匹林中的游离水杨酸、异烟肼中的游离肼、甾体激素中的其他甾体。特殊杂质检查方法收载在中国药典正文各药品的质量标准中。,2. 按化学类别和特性分类,3. 按毒性分类,无机杂

5、质、有机杂质、有机挥发性杂质,信号杂质、毒性杂质,问题：中国药典（2010年版）中规定的一般杂质检查中不包括的项目是 A. 硫酸盐检查 B. 氯化物检查 C. 溶出度检查 D. 重金属检查 E. 砷盐检查,四、药物的纯度与化学试剂的纯度,药物的纯度考虑杂质的生理作用，药品只有两个等级：合格或不合格。 化学试剂有很多等级，如基准试剂、优级纯（GR）、分析纯（AR）、化学纯（CP）、色谱纯、光谱纯。,第三章,例如：硫酸钡（BaSO4） 试剂规格 对可溶性钡盐不做检查. 检查：氯化物、铁、灼烧失重等 药用规格 如存在可溶性钡盐则导致 医疗事故. 检查：酸溶性钡盐、重金属、砷盐等,化学试剂不能代替药品

6、使用,例. 临床所用药物的纯度与化学品及试剂纯度的主要区别是 A. 所含杂质的生理效应不同 B. 所含有效成分的量不同 C. 所含杂质的绝对量不同 D. 化学性质及化学反应速度不同 E. 所含有效成分的生理效应不同,四、杂质限量,指药物中允许杂质存在的最大量，通常用百分之几或百万分之几（ppm）来表示,杂质量 杂质限量 杂质量,药品合格,药品不合格,1. 对照法 限量检查法 （Limit Test） 特点：不需知道杂质的准确含量,供试品,对照品,杂质最大 允许量,2. 灵敏度法,系指在供试品溶液中加入试剂，在一定反应条件下，不得有正反应出现。 特点：不需对照品,3. 比较法,测定特定待检杂质的

7、参数与规定的限量比较，不得更大，如测定吸收度、pH值等。 特点：不需对照品,杂质限量的计算,对乙酰胺基酚中氯化物的检查：取 本品2.0g，加水100ml，加热溶解后，冷 却，滤过，取滤液25ml，依法检查，与 标准氯化钠溶液5.0ml（每1ml相当于10 ug的Cl）制成的对照液比较，浊度不得 更大。问氯化物限量为多少？,问题：检查某药物中的砷盐，取标准砷溶液2ml（每1ml相当于1g的As）制备标准砷斑，砷盐限量为0.0001，应取供试品的量为 A. 0.20g B. 2.0g C0.020g D. 1.0g E. 0.10g,已知：c1 g/ml1106 g/ml V2ml L0.0001

8、%,问题：检查维生素C中的重金属时，若取样量为1.0g，要求含重金属不得过百万分之十，问应吸取标准铅溶液（每1ml0.01mg的Pb）多少ml？ A. 0.2ml B. 0.4ml C2ml D. 1ml E. 20ml,98：87、药物纯度合格是指 A、含量符合药典的规定 B、符合分析纯的规定 C、绝对不存在杂质 D、对病人无害 E、不超过该药物杂质限量 的规定,例1、药物中含有超过限量的杂质， 就可能使 A、理化常数超过规定范围 B、外观发生变化 C、含量偏低或活性降低 D、毒副作用增加 E、鉴别反应不明显,例2、称取柠檬酸钠2.0g，加水溶解，加稀 醋酸10mI与水适当使成25ml，依规

9、 定方法检查重金属，与1.0ml标准铅 溶液（10g/ml）用同法制成的对照 液比较，不得更深。重金属限量应为 A、2ppm B、4ppm C、5ppm D、百万分之三 E、百万分之十,一、杂质的研究规范,（一）有机杂质在质量标准中的项目名称 1.以杂质的名称作为项目名称,中国药典（2010）收载硝苯地平有关物质中杂质、杂质,2.以某类杂质的总称作为项目名称 杂质结构不明确，如硝酸毛果芸香碱中的 “其他生物碱” 3.以检测方法作为项目名称 杂质结构未知，也没有具体类别；如杂质吸光度 溶液透光率,(二）杂质检查项目的确定 由质量研究和稳定性研究中检出的，并在批量生产中出现的杂质和降解产物。 根据

10、其起始原料、生产工艺及稳定性情况确定。,（三）杂质限度的确定,（二）、化学性质的差异,（一）、物理性质的差异,（三）、光学性质的差异,（四）、色谱性质的差异,臭味及挥发性差异 颜色差异 溶解行为差异 旋光性质的差异 对光吸收性质的差异 吸附或分配性质的差异,一 物 理 性 质 差 异,2. 杂质无挥发性 利用药物在室温或加热挥发后,遗留残渣于一定温度加热至恒重,其重量不得超过规定. 例：乙醇中不挥发物的检查.,(一) 嗅味及挥发性差异,1. 杂质有特殊气味： 例：乙醇中的杂醇油（异臭）,一 物 理 性 质 差 异,药物自身无色 生产中引入有色的有关物质或分解产物.,例：磺胺嘧啶原料药颜色检查

11、取本品2.0g,加氢氧化钠试液10ml溶解后，加水至25ml，溶液应澄清无色；如显色，与黄色3号标准比色夜比较，不得更深。 磺胺苯环上胺基被氧化生成有色偶氮苯化合物.,(二) 颜色差异,一 物 理 性 质 差 异,根据药物与杂质溶解度的差异 例：葡萄糖中糊精的检查,(三) 溶解行为的差异,一 物 理 性 质 差 异,1. 药物有旋光度而杂质没有 例:黄体酮在乙醇中+186 +198 ,(四) 旋光性质的差异,2. 杂质有旋光度而药物没有 例:硫酸阿托品中莨菪碱的检查,供试品水溶液50mg/mL不得过-0.4 ,一 物 理 性 质 差 异,1 酸碱性的差异 例：苯巴比妥中苯基丙二酰脲检查,甲基橙

12、不得显红色,2 氧化还原性的差异 例：氯化物中碘化物检查 供试品与含亚硝酸钠的淀粉指示剂不得显蓝。 Cl的氧化电位高(1.35)不能被氧化为Cl2. I-的氧化电位低(0.53)能被氧化为I2,二 化 学 性 质 差 异,3 杂质与一定试剂反应产生沉淀 间苯二酚中邻苯二酚检查,4 杂质与一定试剂反应产生颜色 Aspirin中游离水杨酸的测定,5 杂质与一定试剂反应产生气体 盐酸乙基吗啡中胺盐检查.,二 化 学 性 质 差 异,检查原理,Aspirin中游离水杨酸的测定,水杨酸鉴别反应,色谱法 (一) 薄层色谱法(TLC) (二) 高效液相色谱法(HPLC) (三)气相色谱法(GC),三 色 谱

13、 行 为 差 异,根据药物与杂质对吸附剂的吸附或对展开剂的解析能力不同 (Rf 值的差异), 加以分离和检查.,(一) 薄层色谱法 (TLC),三 色 谱 行 为 差 异,本法灵敏、简便、快速； 不需特殊的设备、费用低； 分离和鉴定同步进行.,1. TLC法特点,三 色 谱 行 为 差 异,1) 杂质对照品法,适用于杂质已知并有杂质对照品的情况. 方法 根据杂质限量, 取供试品溶液和一定浓度的杂质对照品溶液,分别点于同一薄层板上展开,定位后进行检查.,三 色 谱 行 为 差 异,2. TLC法应用,判断：供试品中所含杂质斑点不得超过相应的杂质对照斑点 优点：同一物质，同一Rf值比较，准确度高、

14、直观性强； 缺点：需要杂质对照品。,适用于杂质的结构不能确定或无杂质对照品的情况.,2) 供试品溶液自身稀释对照法,三 色 谱 行 为 差 异,2. TLC法应用,例：氢化可的松中“其他甾体” 检查 供试液:3mg/ml 对照液:60g/ml(供试液稀释50倍) 判断:供试液的杂质斑点数3个, 且供试液的杂质斑点颜色对照液主斑点颜色. 仅限于杂质斑点颜色与主成分斑点颜色相同或相近,优点：以供试品的稀溶液作为对照液， 不需要杂质对照品，简单、价 廉，还可配成几种限量的对照 溶液 缺点：不同物质，不同Rf值的比较， 准确度差、直观性差,三 色 谱 行 为 差 异,样（1) 5mg/ml,对(3)

15、5mg/ml,样（2) 0.2mg/ml,马来酸麦角新碱中 有关物质的检查 判断：）主斑点颜色与位置 应与）主斑点颜色与位置一致， 所显杂质斑点颜色不得深于） 中对应的杂质斑点，并不得有） 以外的杂质斑点； ）除主斑点外，不得显 任何杂质斑点。,三 色 谱 行 为 差 异,中国药典规定 正文各品种项下的HPLC条件,不得任意改变 固定相种类、 流动相组分、检测器类型,可适当改变 色谱柱内径、长度、 固定相牌号、载体粒度、流动相流速 和比例、柱温、进样量、灵敏度,、系统适用性试验 ChP 每次检测前，应对仪器进 适用性试验，应达到规定要求 理论板数（n） 分离度（R） 重复性（RSD） 拖尾因子

16、（T）,（一）理论板数（n） 如测得n低于规定，应改变柱长 或载体性能、重填色谱柱等以求达到,（二）分离度（R） 除另有规定外，R1.5,（三）重复性（RSD） 15 峰面积 33校正因子,（四）拖尾因子（T） 除另有规定外，T应0.95 1.05,1. 内标法加校正因子测定供试品中某个杂质的含量,准确测定杂质含量,方法,内标+杂质对照品溶液，进样，测定，计算校正因子,内标物+ 杂质对照品 校正因子,内标物+样品 杂质含量,供试品+内标供试品溶液，进样，测定杂质和内标峰面积或峰高，计算杂质量,2. 外标法测定供试品中某个杂质的量,供试品供试品溶液,杂质对照品对照品溶液进样，测定，计算杂质的含量

17、,缺点：不易准确控制进样量，宜用定量环进样,3.加校正因子的主成分自身对照法,方法,将校正因子载入药品质量标准,分别进样，测定供试品溶液中各杂质峰面积及其总和，分别乘以相应的校正因子后与对照溶液主成分峰面积比较，计算供试品中杂质的量。,例：检查红霉素中红霉素B、C组分及有关物质。,判断： 红霉素B峰（0.7）和红霉素C（1.0）峰校正后的峰面积均不得大于对照液主峰面积（5.0%） 红霉素稀醇醚校正后的峰面积不得大于对照溶液主峰面积的3/5 (3.0%) 其他单个杂质峰面积的和不得大于对照溶液主峰面积（5.0%）,4. 不加校正因子的主成分自身对照法,杂质峰面积与主成分峰面积相差悬殊时应用。,方

18、法,分别进样，测定供试品溶液中各杂质峰面积，与对照溶液主成分峰面积比较，计算供试品中杂质的量。,优点：不需杂质对照品，可同时控制各个杂质及其总量限度 缺点：检测波长处，各杂质和药物的吸收强度可能有差异，准确度差,例：氧氟沙星中有关物质的检查,判断： 供试品溶液的色谱图中如有杂质峰，单个杂质峰面积不得大于对照溶液主峰面积（0.2%） 各杂质峰面积的和不得大于对照溶液主峰面积的2.5倍。,5. 峰面积归一化法,取一定量供试品溶液进样，测定各杂质及药物的峰面积，计算各杂质峰面积及其总和占总峰面积的百分率，不能超过限量。注意溶剂峰不应计算在总峰面积内。,例如：利巴韦林中有关杂质的检查： 对照品液(5g

19、/ml)进样10l,调灵敏度，使主峰达满量程的20%25% 样品液(0.4mg/ml)进样10l, 杂质Ai(Ai+A主） 的1.0%,优点：不需杂质对照品，简便易行。,缺点：检测波长处，各杂质和药物的吸收强度可能有差异，控制杂质峰面积百分率不一定就是杂质限量，准确度差，适用于粗略测量供试品中杂质的含量。,(三) 气相色谱法(GC),用于药物中挥发性杂质的检查, 如药物中残留溶剂、农药残留量等.,三 色 谱 行 为 差 异,(四) 毛细管电泳法(HPCE),用于酶类药物中酶类杂质的检查，方法与HPLC相同。,(一) 紫外分光光度法 (二)可见分光光度法 （三）红外光谱法 （四）荧光分析法,四

20、光 谱 行 为 差 异,光谱法,（一）紫外分光光度法 利用药物和待检杂质对光选择吸收性质的差异进行,例: 肾上腺素中肾上腺酮的检查,四 光 谱 行 为 差 异,例: 肾上腺素中肾上腺酮的检查,规定：A310nm0.05,方 法,限量计算,杂质限量 % =,例: 肾上腺素中肾上腺酮的检查,肾上腺酮的,C(g/100mL)=A/E1%1cm,（三）红外分光光度法,主要用于药物中无效或低效晶型的检查。某些多晶型药物由于其晶型结构不同，一些化学键的键长、键角等发生不同程度的变化，从而导致红外吸收光谱中某些特征峰的频率、峰形和强度出现显著差异。利用这些差异，可以检查药物中低效（或无效）晶型杂质，结果可靠

21、，方法简便。,（四）荧光分析法,五 热分析法 热分析法是在程序控制温度下， 精确记录待测物质理化性质与温度的 关系，研究其受热过程所发生的晶型 转变、熔融、升华、吸附等物理变化 和脱水、热分解、氧化还原等化学变,化，对物质进行物理常数（如熔点和 沸点）的确定、鉴别和纯度检查的方法。,亦可用于药物的稳定性研究及制剂辅料的优选,1. 热重法（TGA）,热重法是在程序控制温度下，测量物质质量与温度关系的一种技术。,记录质量变化对温度的关系曲线即热重曲线。热重曲线的纵坐标为质量(m)，横坐标为温度(T)或时间(t)。,m,本法适用于药物结晶水的测定和贵重药物或在空气中极易氧化药物的干燥失重分析。,特点

22、：准确测量物质的质量变化及变化速度、样品用量少、速度快,2. 差热分析法（DTA）,差热分析法是在程序控制温度下，测量待测物质和参比物之间的温度差（T）与温度(或时间)之间的关系的一种技术。,差热分析曲线记录的纵坐标为样品与参比物的温度差(T)，T与热容量差(CRCs)成正比，横坐标为温度。,T,差热分析曲线,本法可鉴别药物或其多晶形，可检查药物的纯度,3. 差示扫描量热法（DSC）,差示扫描量热法是在程序控制温度下，测量输给待测物质和参比物的能量差与温度(或时间)关系的一种技术。,本法可鉴别药物或其多晶形、纯度检查以及熔点和水分等的测定。,例15 A. HPLC B. TGA C. TLC

23、D. DSC E. DTA 1. 差示热分析法 2. 薄层色谱法 3. 热重分析法 4. 高效液相色谱法 5. 差示扫描量热法,E,C,B,A,D,第三节 一般杂质检查,一、一般杂质检查规则,药品检验操作标准规定： 1. 遵循平行操作原则,（1）仪器的配对性 如纳氏比色管应配对，刻度线高低相差不超过2mm，砷盐检查时导气管长度及孔的大小要一致 （2）对照品与供试品的同步操作,2. 正确的取样及供试品的称量范围 1g不超过2%，1g不超过1%,3. 正确的比色、比浊方法,4. 检查结果不符合规定或在限度边缘时应对供试管和对照管各复查二份,二、氯化物检查法,（一）原理 对照法,样品管,对照管,1.

24、0mL,用水稀释至50mL,6.0mL,0.60g,0.010%,(浓度：10gCl/ml),（二）检查方法 药典附录,除另有规定外，取各药品项下规定量的供试品,葡萄糖中氯化物检查,在暗处放置5min (避免AgCl分解),同置黑色背景上，从比色管上方向下观察，比较即得,（三）测定条件,1. 标准NaCl溶液 10gCl/ml，50ml溶液中含5080g的Cl所显浑浊梯度明显，相当于标准NaCl溶液58ml。,2. 反应需在硝酸酸性条件下进行，且以50ml供试溶液中含稀硝酸10ml为宜。,（1）加速AgCl浑浊的形成；,（2）产生较好的乳浊；,（3）避免弱酸银盐如碳酸银、磷酸银以及氧化银沉淀的

25、形成。,（4）,3. 试剂：硝酸银,5. 避光、暗处放置5分钟后比浊，因氯化银见光易分解。,4. 供试液和对照液稀释后，再加硝酸银溶液，使生成白色浑浊而不是白色沉淀,7. 比浊方法：同置于黑色背景上，自上向下观察。,6.温度的影响：3040产生浊度最大，且恒定，但作为限度检查，可在室温进行。,8. 平行操作原则 9. 最适检出浓度： 0.050.08mg/50ml,（四）干扰及排除,1. 若供试品有色，需经处理后方可检查。,（1）内消色法：倍量法，如枸橼酸铁铵中氯化物的检查。,（2）外消色法：如高锰酸钾中氯化物的检查，可先加乙醇适量，使其还原褪色后再依法检查。,a.内消色法 如枸橼酸铁铵中氯化

26、物的检查.,2. 当有其它干扰物质存在时，必需在检查前除去 （1）碘化物中氯化物的检查 （2）溴化物中氯化物的检查 （3）碘中氯化物的检查,a.碘化物中氯化物的检查,b.碘中氯化物的检查,反应原理: 根据氨中溶解度不同 AgCl(溶解)AgBr(微溶)AgI(不溶),Cl的氧化电位高(1.35)不能被氧化为Cl2 Br-的氧化电位低(1.08),c. 溴化物中氯化物的检查,3. 不溶于水的有机药物,（1）加水振摇，过滤，取滤液进行检查。,（2）加热，放冷，过滤，取滤液进行检查。,（3）溶于有机溶剂如稀乙醇、丙酮，可加稀乙醇或丙酮溶解后进行检查。,4. 有机药物中有机氯杂质的检查，具体情况，具体

27、分析。,问题：药物中氯化物杂质检查，是使该杂质在酸性溶液中与硝酸银作用生成氯化物浑浊，所用的稀酸是 A. 硫酸 B. 硝酸 C. 盐酸 D. 醋酸 E. 磷酸,例1. 中国药典 （2000年版） 规定，检查氯化物杂质时，一般取用标准氯化钠溶液（10gCl/ml）58ml的原因是 A. 使检查反应完全 B. 药物中含氯化物的量均在此范围 C. 加速反应 D. 所产生的浊度梯度明显 E. 避免干扰,例2. 采用硝酸银试液检查氯化物时，加入硝酸使溶液酸化的目的是 A加速生成氯化银浑浊反应 B消除某些弱酸盐的干扰 C消除碳酸盐干扰 D消除磷酸盐干扰 E避免氧化银沉淀生成,例3. 当采用比浊法检查氯化物

28、杂质时，若药物本身有颜色而干扰检查的话，应该选用的处理方法为 A内消色法 B外消色法 C比色法 D差示比浊法 E差示可见分光法,例4. 若要进行高锰酸钾中氯化物的检查，最佳方法是 A. 加入一定量氯仿提取后测定 B. 氧瓶燃烧 C. 倍量法 D. 加入一定量乙醇 E. 以上都不对,例5. 下列哪些条件为药物中氯化物检查的必要条件 A. 所用比色管需配套 B. 稀硝酸酸性下(10ml/50ml) C. 避光放置5分钟 D. 用硝酸银标准溶液做对照 E. 在白色背景下观察,三、硫酸盐检查法,（一）原理 对照法,（二）测定条件,1. 标准K2SO4溶液0.1mg/ml，50ml溶液中含0.10.5m

29、g的所显浑浊梯度明显，相当于标准K2SO4溶液15ml。,2. 反应需在盐酸酸性条件下进行，(盐酸作用？）且以50ml供试溶液中含稀盐酸2ml为宜。,3. 试剂：氯化钡,5. 比浊方法：同置于黑色背景上，自上向下观察。,4. 供试液和对照液稀释后，再加氯化钡溶液，使生成白色浑浊而不是白色沉淀,若供试品有色，也可用内消色法即倍量法处理。,（三）干扰及排除,6.最适检测浓度： 0.10.5mgSO4-2 /50ML,例：药物中硫酸盐检查时，所用的标准对照液是 A. 标准氯化钡 B. 标准醋酸铅溶液 C. 标准硝酸银溶液 D. 标准硫酸钾溶液 E. 以上都不对,四、铁盐检查法,1. 原理 对照法,（

30、一）硫氰酸盐法 ChP（2005）、USP（31）,2 . 检查方法 药典附录 除另有规定外，取各药品项下规定量的供试品：,（一）硫氰酸盐法,3ml,HNO3,3. 测定条件,（1）用FeNH4(SO4)212H2O（硫酸铁铵）配制标准铁贮备液（加入硫酸防止Fe3+的水解），标准铁溶液临用前稀释而成，标准铁溶液10g Fe3+/ml，50ml溶液中含1050g的Fe3+显色梯度明显，一般取标准铁溶液1.05.0ml。,（2）反应需在盐酸酸性条件下进行，且以50ml供试溶液中含稀盐酸4ml为宜。,（3）试剂：硫氰酸铵。加过量硫氰酸铵，使反应向正反应方向进行,（4）检查Fe2+和Fe3+,（5）铁

31、盐检查时，加氧化剂氧化Fe2+为Fe3+。加过硫酸铵可氧化Fe2+为Fe3+，同时可防止光线使硫氰酸铁还原或分解褪色。 加硝酸后加热也可氧化Fe2+为Fe3+,（6）比色方法：同置于白色背景上，自上向下观察。,4. 干扰及排除,（1）为了提高灵敏度或供试管与对照管色调不一致时，可用正丁醇提取后，分取正丁醇层比色。 ？,（2）具环状结构的有机药物，需经700800炽灼破坏处理后再依法检查。,（3）干扰离子的影响,（二）巯基醋酸法 BP（2011） 对照法,本法灵敏度较高，但试剂较贵,例1. 中国药典（2010年版）规定铁盐的检查方法为 A. 硫氰酸盐法 B. 巯基醋酸法 C. 普鲁士蓝法 D 邻

32、二氮菲法 E. 水杨酸显色法,例2. 中国药典（2010年版）规定，硫氰酸铵法检查铁盐时，加入过硫酸铵的目的是 A. 使药物中铁盐都转变为Fe3+ B. 防止光线使硫氰酸铁还原或分解褪色 C. 使产生的红色产物颜色更深 D防止干扰 E便于观察、比较,例3. 某药物（黄色）欲进行铁盐检查，应采用下面哪种方法 A. 倍量法 B. 微孔滤膜过滤法 C. 调色法 D. 600700炽灼残渣后测定 E. 以上都不对,例4. 中国药典收载的铁盐检查，主要是检查 A. Fe B. Fe2+ C. Fe3+ D. Fe2+和Fe3+ E. 以上都不对,五、重金属检查法 以铅为代表,中国药典（2010年版）共收

33、载三法。,重金属是指在实验条件下能与硫代乙酰胺或硫化钠作用呈色的金属. 如：Ag、Pb、Hg、Cu、Cd、Bi、Sb、Sn、As、Ni、Co、Zn等. 重金属存在影响药物的稳定性及安全性. 铅易在体内积蓄中毒,以Pb为代表.,（一）第一法 硫代乙酰胺法,1. 原理 对照法,适用于溶于水、稀酸和乙醇的药物。,操作方法,甲管,乙管,丙管,判断： 1. 当丙管甲管，乙管甲管 2. 当丙管甲管，按第二法重新检查,2. 测定条件,（1）用硝酸铅配制标准铅贮备液（加硝酸防止Pb2+水解），标准铅溶液临用前稀释而成，标准硝酸铅溶液10g Pb2+/ml，适宜比色范围为27ml溶液中含1020g的Pb2+。,

34、（2）本法用2ml pH3.5的醋酸盐缓冲液控制溶液pH值为33.5。,（3）显色剂：从ChP（1990）开始改用硫代乙酰胺做显色剂,（1）供试品如有色，需经处理后方可检查。,A. 外消色法：在对照管中加稀焦糖溶液或其他无干扰的有色溶液。,B. 内消色法,3. 干扰及排除,（2）若供试品中有微量Fe3+存在，会氧化硫化氢生成单质硫，干扰比色，加入抗坏血酸或盐酸羟胺（0.51.0g）还原Fe3+为Fe2+，可消除干扰,（3）若供试品为铁盐，Fe3+在盐酸中生成HFeCl ，用乙醚提取除去，剩余微量铁在氨碱性溶液中，加KCN掩蔽，然后用第三法检查,（4）若药物本身能生成不溶性硫化物时，可加入掩蔽剂

35、消除干扰。如ZnSO4中重金属的检查，要在碱性下加KCN掩蔽Zn2+后，依第三法检查,（二）第二法 炽灼残渣法,适用于含芳环、杂环以及不溶于水、稀酸、乙醇及碱的有机药物。,500600炽灼后的残渣，经处理后，依一法检查。,1. 原理 对照法,2. 操作方法,含钠及氟的有机药物应用铂坩埚、石英坩埚或硬质玻璃蒸发皿（因可腐蚀瓷坩埚，带入大量重金属）,（三）第三法 硫化钠法,适用于溶于碱而不溶于稀酸或在稀酸中生成沉淀的药物。如磺胺类、巴比妥类。,1. 原理 对照法,2. 测定条件,（1）NaOH碱性条件下,（2）显色剂：硫化钠,硫代乙酰胺,0.010.02mg Pb2+ /27ml,33.5,NaO

36、H,硫化钠,可溶于水, 稀酸和乙 醇的药物,不溶于水, 稀酸和乙 醇的药物,溶于碱 的药物,例1.重金属检查中，加入硫代乙酰胺时溶液控制最佳的pH值是 A. 1.5 B. 3.5 C7.5 D. 9.5 E. 11.5,例2. 中国药典(2010年版)重金属检查法中，所使用的显色剂是 A. 硫化氢试液 B. 硫代乙酰胺试液 C. 硫化钠试液 D. 氰化钾试液 E. 硫氰酸铵试液,例3. 葡萄糖中进行重金属检查时，适宜的条件是 A. 用硫代乙酰胺为标准对照液 B. 用10ml稀硝酸/50ml酸化 C. 在pH3.5醋酸盐缓冲溶液中 D. 用硫化钠为试液 E. 结果需在黑色背景下观察,例4. 现有

37、一药物为苯巴比妥，欲进行重金属检查，应采用中国药典上收载的重金属检查的哪种方法 A. 一法 B. 二法 C. 三法 D. 四法 E. 以上都不对,六、砷盐检查法,（一）古蔡法 ChP（2010）、BP（2011）,遇HgBr2试纸生成黄色棕色的砷斑，与2ml标准砷溶液在相同条件下生成的砷斑比较,1. 原理 对照法,2. 操作方法,（1）标准砷斑用2ml 标准砷溶液制备,（2）供试品需经有机破坏，则标准砷溶液应平行操作,古蔡法,3. 测定条件,（1）标准砷溶液临用新配，1gAs/ml。,（2）酸为反应物，酸量应足够，所以加浓盐酸5ml。,（3）酸性氯化亚锡及碘化钾的作用是：,A. 还原As5+为

38、As3+，加快反应速度；,B. 碘化钾被氧化生成的I2又可被氯化亚锡还原为I-，I-与反应中生成的Zn2+能形成稳定的配位离子，有利于生成砷化氢的反应不断进行；,C. 氯化亚锡与锌作用，在锌表面形成锌锡齐，使氢气均匀而连续地发生；,D. 可抑制微量Sb的干扰，在实验条件下，100 gSb存在不干扰。,（4）醋酸铅棉花的作用是消除锌粒及供试品中少量硫化物的干扰，醋酸铅棉花60mg装管高度6080mm。,（5）锌粒应无砷,（6）砷斑不稳定，应立即观察,4. 干扰及排除,（1）供试品若为硫化物、亚硫酸盐、硫代硫酸盐时，加HNO3，使氧化成硫酸盐，以除去干扰，如硫代硫酸钠中砷盐的检查。,（2）供试品若

39、为铁盐，需先加酸性氯化亚锡试液，将Fe3+还原为Fe2+。如枸橼酸铁铵中砷盐的检查。,（3）具环状结构的有机药物，要先行有机破坏后再进行检查。 常用的有机破坏方法：,（4）本法适用于不含Sb或含Sb量小于100g的供试品。,碱破坏法：a 加入氢氧化钙 500-600 C灼烧 例：酚磺 b 加入无水碳酸钠碱融 例：苯甲酸钠 酸破坏法：加稀硫酸与溴化钾 例：葡萄糖中砷盐检查,（二）白田道夫法 原理：氯化亚锡在HCl中能将砷盐还原成棕褐色的胶态砷，与一定量标准砷溶液，同法处理后比较颜色。 含Sb药物中砷盐的检查 如葡萄糖酸锑钠,优点：不受锑干扰 缺点：灵敏度低,（三）Ag-DDC法 检查、含量测定

40、ChP(2010)、USP（34）,对照法,砷化氢与Ag-DDC溶液作用，还原 AgDDC为红色胶态银，直接比色或于510nm波长处测定吸收度，进行比较。,用有机碱吸收反应产生的HDDC有利于反应的进行。USP（34）用吡啶，ChP（2010）用三乙胺。,本法适用于含Sb量小于500g的供试品。,Sb100ug,Sb500ug,Sb 500ug,Zn、HCl KI、SnCl2 HgBr2,Zn、HCl KI、SnCl2 Ag-DDC,SnCl2 HCl,黄棕色 砷斑,红色 胶态银,棕褐色 胶态砷,(四)奇列氏法（次磷酸法）BP,2. 特点,不受S2-,SO32-,Sb干扰,灵敏度较古蔡氏法低,

41、例1. 在药物的杂质检查中，其限量一般不超过百万分之十的是 A. 氯化物 B. 硫酸盐 C. 醋酸盐 D. 砷盐 E. 淀粉,例2.在用古蔡法检查砷盐时，导气管中塞入醋酸铅棉花的目的是 A. 除去I2 B. 除去AsH3 C. 除去H2S D. 除去HBr E. 除去SbH3,例3.铁盐检查法时，要求酸性条件的原因是 A. 防止Fe3+水解 B.防止Fe2+还原 C. 使生成颜色稳定 D. 提高反应灵敏度 E. 防止Fe3+与Cl-形成配位化合物,例4. 古蔡氏法中，SnC12的作用有 A. 使As5+As3+ B. 除去H2S C. 除去I2 D. 组成锌锡齐 E. 除去其它杂质,例5. A

42、gDDC法检查砷盐的原理为：砷化氢与AgDDC吡啶作用，生成的物质是 A. 砷斑 B. 锑斑 C. 胶态砷 D. 三氧化二砷 E. 胶态银,例6.中国药典（2010年版）收载的古蔡法检查砷盐的基本原理是 A. 与锌、酸作用生成H2S气体 B. 与锌、酸作用生成AsH3气体 C. 产生的气体遇氯化汞试纸产生砷斑 D. 比较供试品砷斑与标准品砷斑的面积大小 E. 比较供试品砷斑与标准品砷斑的颜色强度,适用于 A. 古蔡氏（Gutzeit）法 B. 二乙基二硫代氨基甲酸银法 C. A和B均可 D. A和B均不可 1.在连接砷化氢发生瓶的导管中装入醋酸铅棉花 2.使用的标准砷溶液为2m1 3.测定结果

43、要与标准砷斑相比较 4.要测定吸收度 5.要用酸碱滴定法,C,C,A,B,D,例7.用古蔡氏法检查下列药物中的砷盐时，排除干扰的方法： A. 先用硝酸或溴水氧化 B. 先加酸性氯化亚锑还原 C. 改用白田道夫法 D. 先加氰化钾掩蔽 E. 先加草酸生成沉淀 1. 硫化物 2. 亚硫酸盐 3. 硫代硫酸盐 4. 高铁盐 5. 锑盐,A,A,A,B,C,例8. AgDDC法检查砷盐时，所产生的红色溶液为 A. HDDC吡啶溶液 B. Ag吡啶溶液 C. Ag的胶态溶液 D. Ag(DDC)溶液 E. AsAg3溶液,例8. ChP（2010）检查葡萄糖酸锑钠中的砷盐时，应选用 A. 古蔡氏法 B.

44、 白田道夫法 C. 碘量法 D. AgDDC法 E. 契列法,例9. 葡萄糖中砷盐的检查，需要的试剂应有 APb2+标准液 BSnCl2试液 CKI试液 DZn E醋酸铅棉花,例10. Ag-DDC法检查砷盐时，加入碘化钾和酸性氯化亚锡的作用为 A将As5+还原为As3+ B有利于AsH3生成反应 C抑制SbH3的生成 D形成Zn-Sn齐以均匀而连续地发生氢气 E催化加速生成AsH3,例11. 古蔡氏法检砷，药典规定制备标准砷斑时，应取标准砷溶液 A. 1ml B. 5ml C. 2ml D. 依限量大小决定 E. 以上都不对,例12. 古蔡氏法检查所用的溶液是 A. 强碱性溶液 B. 强酸性

45、溶液 C. 含稀盐酸10ml/50ml溶液 D. 含稀硝酸10ml/50ml溶液 E. 含强氧化剂(硝酸或过硫酸铵)溶液,A. 硝酸银试液 B. 氯化钡试液 C. 硫代乙酰胺试液 D. 硫化钠试液 E. 硫氰酸盐试液 1药物中铁盐检查 2磺胺嘧啶中重金属检查 3药物中硫酸盐检查 4葡萄糖中重金属检查 5药物中氯化物检查,E,A,C,B,D,可用于检查的杂质为 A. 氯化物 B. 砷盐 C. 铁盐 D. 硫酸盐 E. 重金属 1在酸性溶液中与氯化钡生成浑浊液的方法 2在酸性溶液中与硫氰酸盐生成红色的方法 3在实验条件下与硫代乙酰胺形成均匀混悬溶液的方法 4Ag-DDC法 5古蔡法,D,C,E,B

46、,B,杂质检查中所用的酸是 A. 稀硝酸 B. 稀盐酸 C. 硝酸 D. 盐酸 E. 醋酸盐缓冲液 1. 氯化物检查法 2. 硫酸盐检查法 3. 铁盐检查法 4. 重金属检查法 5. 砷盐检查法,A,B,B,E,D,七、干燥失重测定法,干燥失重是指药物在规定条件下经干燥后所减失的重量，主要是水分，也包括其它挥发性物质。测定方法：,（一）常压恒温干燥法,适用于受热较稳定的药物。干燥温度一般为105。,干燥失重：第二次及以后各次称重均应在规定条件下继续干燥1h后进行。,炽灼残渣：第二次及以后各次称重均应在规定条件下继续炽灼.5h后进行。,（二）干燥剂干燥法,适用于受热易分解或挥发的供试品。,干燥剂

47、：硅胶、浓硫酸、P2O5 。,（三）减压干燥法,适用于熔点低，受热不稳定或水分难赶除的药物。,除另有规定外，压力应在2.67kPa（20mmHg）以下。,真空烘箱(带真空泵、干燥瓶）,例1 A干燥失重测定法 B炽灼残渣检查 C两者皆是 D两者皆不是 1. 有机物杂质检测法 2. 不溶物的测定法 3. 杂质检查法 4. 有机药物中不挥发无机物的检测法 5. 药物中挥发性物质的检测法,D,D,C,B,A,例2. 干燥失重测定的方法有 A炽灼（500600）法 B常压恒温干澡法 C减压干燥法 D干燥剂干燥法 E减压干燥剂干燥法,例3. 干燥失重测定中应注意哪几个方面 A. 供试品平铺在称量瓶中的厚度

48、一般不超过5mm B. 干燥温度一般为105 C. 可用干燥剂干燥 D. 主要指水分和挥发性物质 E. 测定时间不超过3小时,药物中的水分包括结晶水和吸附水。 中国、美国和英国药典收载了费休氏法和甲苯法。 费休氏法（卡尔费休法）（karl fischer）:可以测定结晶水、吸附水和游离水。 原理：I2+SO2+H2O2HI+SO3,八 水 分 测 定 法,根据消耗碘的量来测定水分的含量。 是对于测定水分最为专一，也是最为准确的化学方法,C5H5NSO3+CH3OH C5H5N(H)SO4.CH3 硫酸吡啶 甲醇 甲基硫酸吡啶 生成硫酸吡啶不稳定，能与水发生反应，消耗一部分水而干扰测定，为了使它稳定，我们可加无水甲醇。,费休法的滴定总反应式可写为： （ I2+SO2+3C5H5N+CH3OH ）+H2O