【SN商检标准】snt 2223-2008 进出口动物源性食品中流粘菌素残留量检测方法 液相色谱-质谱 质谱法.doc

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1、中华人民共和国出入境检验检疫行业标准犛犖 犜 进出口动物源性食品中硫粘菌素残留量检测方法液相色谱 质谱 质谱法狊狅狀犳犻犲犱狌犳狀犻狅狌狀犪狉犻狋犻犳犲狀犻狊犿犪犻狅犿犻犿狊狋犪狀犲犾狅犱犇狅狋狉犻犲狌犳犪狉狅狉狅犳犻犿狆狋狉狅犪狀犱狓犲狆狋狉狅 犔犆犕犛 犕犛犺狅犱犿狋犲犵狀犻 发布 实施中华人民共和国发 布国家质量监督检验检疫总局犜 犛犖前 言本标准的附录 和附录 均为资料性附录。本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。本标准起草单位:中华人民共和国辽宁出入境检验检疫局、中华人民共和国江西出入境检验检疫 局 、大连工业大学。本标准主要起草人:孙兴权、林维宣、温志海、张玉苍。本标准系首

2、次发布的出入境检验检疫行业标准。进出口动物源性食品中硫粘菌素残留量检测方法液相色谱 质谱 质谱法 范围本标准规定了进出口动物组织中硫粘菌素残留量的液相色谱 质谱 质谱测定方法。本标准适用于猪肉、猪肝、猪肾中硫粘菌素残留量的检测和确证。 规范性引用文件下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。 凡是注日期的引用文件,其随后所有 的修改单(不包括勘误的内容)或修订版均不适用于本标准,然而 ,鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。 凡是不注日期的引用文件,其最新版本适用于本标准。 分析实验室用水规格和试验方法。( ,:,) 方法提要试样经乙酸乙酯提取,正己烷脱脂,固

3、相萃取小柱净化后,液相色谱 质谱 质谱法测定和确证,外标 法定量。 试剂和材料除另有说明外,所用试剂均为分析纯,水为 规定的一级水。 乙酸乙酯:色谱纯。 正己烷:色谱纯。 甲醇:色谱纯。 乙腈:色谱纯。 乙酸铵。 乙酸铵:称取 硫粘菌素标准物质( 乙酸铵,加水溶解并定容至 。): , ,纯度大于等于。 硫粘菌素标准储备溶液( ): 称取适量的硫粘菌素标准物质(的标准储备液。 储备液置于 避光贮存。), 用甲醇配成 硫粘菌素标准 工 作 溶 液( ): 吸 取 适 量 的 硫 粘 菌 素 标 准 储 备 溶 液(), 用 甲 醇 配 成 的标准工作溶液。 标准工作溶液置于 避光贮存。 固相萃取小

4、柱:柱 , , ,或相当者。 微孔滤膜: 仪器和设备 ,有机相。 液相色谱 串联四极杆质谱仪:配有电喷雾离子源。 分析天平:感量分别为 和 绞肉机。 。 涡旋混合器: 。犛犖 犜 离心机: 。 旋转蒸发器。 固相萃取装置。 具塞离心管:聚四氟乙烯, 和 。 试样制备与保存从所取动物肌肉、肝脏、肾脏全部样品组织中取出有代表性样品约 ,用绞肉机充分绞碎混匀 均分成两份。 制备好的试样置于样品瓶中,密封,并标明标记,于 以下冷冻存放。试样制备与保存过程中应防止样品受到污染或发生残留物含量的变化。 测定步骤 提取称取 试样(精确到 )于 离心管()中 ,加入 乙酸乙酯(), 涡旋混匀, 离心,收集提取

5、液至浓缩瓶中。 残渣再加入 乙酸乙酯,重复上述抽提操作。 合并提取液, 以下旋转浓缩至近干。 用 正己烷()和 水依次将残渣转移至离心管()中 , 涡旋混匀, 离心,弃去上层正己烷溶液 ,再加入 正己烷,重复上述脱脂操作,所得水层提取液待净化。 净化分别用甲醇()和水各 对固相萃取小柱()进行活化预处理,然后将测定步骤 所得水层提取液转移至小柱上,控制流出速度小于 。 用 水分次洗涤离心管,洗涤液淋洗小柱后弃去。 用 甲醇洗脱,收集全部洗脱液,加水定容至 ,混匀后过 滤膜(), 供液相色谱 串联质谱测定。 硫粘菌素基质校准标准溶液的配制称取七个基质空白样品(称样量为 )于 离心管()中 ,其中

6、六个空白样品中分别加入适量硫粘菌素标准工作溶液(), 按照样品操作步骤、同步操作,使最终样品溶液中硫粘菌素的浓度分别为 、 、 、 、 、 。 所得系列硫粘菌素 基质标准校准溶液即配即用,用以制作标准曲线。 测定 液相色谱条件 ) 色谱柱: , (内径), ,或相当者; ) 进样量: ; ) 流速: ; ) 流动相组成及梯度洗脱程序见表 。表 液相色谱梯度洗脱程序时间 甲醇 乙酸铵 乙腈 质谱条件 ) 离子源:电喷雾离子源;犛犖 犜 ) 扫描方式:正离子扫描; ) 检测方式:多反应监测; ) 雾化气、气帘气、辅助气、碰撞气均为高纯氮气;使用前应调节各参数使质谱灵敏度达到检测要求 ,质谱条件参见

7、附录 。 液相色谱 质谱 质谱测定 定性测定在相同试验条件下,样品中待测物质与同时检测的浓度相近的基质校准标准溶液具有相同的保留时间,并且所选择的离子相对丰度比相一致或在表 规定的允许偏差范围内,则可判断样品中存在对应的被测物。 在上述实验条件下,硫粘菌素的保留时间约为,定性离子对( )为 ;,定 量 离 子 对 为,参 考 离 子 相 对 丰 度 比( ) 分 别 为;,相应的谱图参见附录 。表 定性确证时离子相对丰度比的最大允许偏差相对离子丰度比 允许的相对偏差 定量测定在仪器最佳工作条件下,对硫粘菌素的基质校准标准溶液分别进样,以峰面积为纵坐标,系列基质校准标准溶液浓度为横坐标绘制标准工

8、作曲线,用标准工作曲线对样品进行定量,样品溶液中待测物的 响应值均应在仪器测定的线性范围内。 空白试验除不加试样外,均按上述步骤操作。 结果计算按式( )计算试样中硫粘菌素残留量:犡 式中:(犮 犮 ) 犞( )犿犡 试样中硫粘菌素残留量,单位为微克每千克( );犮 从标准曲线中得到的被测组分溶液浓度,单位为纳克每毫升( );犮 从标准曲线中得到的空白试验中被测组分的溶液浓度,单位为纳克每毫升( );犞 样品溶液最终定容体积,单位为毫升( );犿 最终样液所代表试样质量,单位为克( )。 测定低限和回收率 测定低限本方法的测定低限为 。 回收率不同样品基质,不同添加浓度下的硫粘菌素回收率范围数

9、据见表 。表 不同基质中不同硫粘菌素添加水平的回收率范围基质添加水平( )回收率 猪肉 犛犖 犜 表 (续 )基质添加水平( )回收率 猪肝 猪肾 犛犖 犜 附 录 犃(资料性附录)质 谱 条 件 )质谱条件: ) 电喷雾电压(): ; ) 雾化气压力(): ( ); ) 气帘气压力(): ( ); ) 碰撞气压力(): ( ); ) 辅助气流速(): ; ) 离子源温度(): ; ) 、均为单位分辨率(); ) 硫粘菌素的 定 性 离 子 对、定 量 离 子 对、采 集 时 间、去 簇 电 压( )、 入 口 电 压( )、 碰 撞 能 量( )及碰撞室出口电压()等参数见表。表 犃 硫粘菌

10、素的主要质谱参考条件参数化合物定性离子对( )定量离子对( )采集时间去簇电压( ) 入口电压( ) 碰撞能量( ) 碰撞室出口电压 ( ) 硫粘菌素 ) 附录 所列参数是在质谱仪上完成的,此处列出实验用仪器型号仅供参考,不涉及商业目的,鼓励标准使用者尝试不同厂家和型号的仪器。犛犖 犜 附 录 犅(资料性附录)犡犐犆和离子相对丰度比图谱 ) ) ) )图 犅 硫粘菌素的提取离子流图(犡犐犆)以及离子相对丰度比图谱犛犖 犜 犲犉狉狅狑犱狉狅犃狀犲狓犃犪狀犱犃狀犲狓犅狊犳狅犻犱狉狀犪犺犱犪狋狊犲狏狉狅犲犻犳犪狀犿犻狋犪犪狀狀犲狓犲狊狊犻犜犱狉犪狀犺犱犪狋狊狑狊犪狆狅狉狆 狅狊犲犱犫狔 犪狀犱狊犻狌

11、狀狉犱犲犺犲狋狉犮犺犪犵狅狀犻狀犻犪狋犪犮犪狊犪狀狋犪犱犻犲犱犻狀犳犿犲犱狉犻犮犪犻犳狅狋狉犮犲狅狀犻狋犳狅犺犲狋犘犲狅狆犲犾狊犚犲狆犮犻犾犳狅狌犫狀犪犻犆犺狊犻犜犱狉犪狀犺犱犪狋狊狑狊犪犲犱狋犳犪狉犱犫狔 狀犻犪狅狀犻犔犵 狉犈狋狀狔狋狀狊犈犻犐狓狆狅狀犻狋犲犮犪狀犱狀犲犻狋犙犪狀狉狌犪犅犲犪狌狉狌犳狅犺犲狋犘犲狅狆犲犾 狊犚犲 狆犮犻犳犾狅狌犫狀犪犻犆犺 狀犪犻犆犺犪狀犱犪狀犻犾犘犇狅犪,犪狀犻犑犵犻狓狉犈狋狀 狔犮狋犻犲犮犻犺狀狋狊狏狉犲犻犝狀狔狋犻狀犈狊狓犐狆狅狀犻狋犲犮犪狀犱狀犲犻狋犙犪狀狉狌犪犅犲犪狌狉狌犳狅犺犲狋犘犲狅狆犲犾 狔 狊犚犲狆犮犻犾狌犳犫狅犜犺犲犱狉犪狀犱犪狋狊狑狊犪

12、犾狀犿犻犪狔 犲犱狋犳犪狉犱犫狔 犛狌狀狀犵狇 狌犪狀,狀犻犔狓犠狌犪狀犻犲,犠犲狀犻犺犪犻犣犺,犣犺犪狀犵 犪狀犮犢狌犵 狊犻犜犱狉犪狀犺犱犪狋狊犻犪狆犾犱狉狅狀犪犱狀犪狋犻狊狉狊狅狊犲犳狅狉狋犲狀狔狋狀狊犻犲狓狆狅狀犻狋犲犮犪狀犱狇狀犲犻狋犪狀狉狌犪狆狅狉犿犾狌犵犲犱狋犪狉狅犳犺犲狋狋犻狊犿狉狋犻犲犳犛犖 犜 狅狀犻狉狋狀犲犇犱狀犪狌狋犪犿犲犻犲犻犳狅犻狀犲狊犿狉狊犻犾犳狋狌犳狅犳狌狋狅犱狊犳狅犻犿犾犪狀犻犪狉狅犵狀犻狉狅犳犻犿狆狋狉狅犪狀犱犲狓狆狋狉狅犔犆犕犛 犕犛 犿犺狋狅犲犱 犛犮狅狆犲犜犺犲犱狉犪狀犱犪狋狊狊犲狊狆犻犺犲狋犳犻犲犮犿犺狋狅犲犱狊狅狀犻狉狅犳犱狀狌犲狊狉犻犪狋犻犲狀犪

13、狋犱犿犲狊犳犻犲狅犻狉犿犾犻狋犿犪狀犾狌狅犳犪狅犱犫狔 犻犺 犵 犺 狆狉犲狉狅犳犿犪狀犮犻犲犾狇犱犻狌狅狉犮犺犿狅狋犪犵犪狉 狆 犺 狔 犪狀犱犪狀犱狋犲犿 犿狊犪狊狆狅狉狋犲犮犿狉狋犲狔 犜犺犲犱狉犪狀犱犪狋狊犻犪狆犲犾犪犮犫狅狋犻犺犲狅狋犾狀犻狀狉犱狋犲狌犪狀犻犲狊犪犻狋犱犿犲犳犻狀狅犻狊犲犿狉犻犾狋狌犲犿犾犮狌狊狏狉犲犻,犪狀犱犾犱狀犲犻犽狔 犳狅狆犻犵犪狊犿狆犲狊犾 犲狀犮犲狉犲犳犚犲犉狊犲狉狅犾犺犲狋犻犺狅狋狀犻狑犳犻狋犪犮犪狀犳狅犻狀犱犻犲狋犱犪,犺犲狋狊犲狇犾狌犲狀犮犲狔 犲犱犻狅犿狀犳狊犻狊犻狅狏狉犱犲狀犻狌犱犾狀犮(犻狊犻犱犵 犺犲狋狊狋犲犮狀狅狋狀犪狋犳狅犪狉狉犲) 狉狅

14、狊犲犱犻犲狉狏狅狀狊犻狊狏狉犲犳狅犺犲狋犿 狑犱犾狅狌狀狋狅犫犲犪狆犲犾犪犮犫犻狅狋狊犾犻犱犺狉犪狀狋犱犪狋狊犎狅狑犲狏狉犲,狋狊犻犲狀犪犮狅狉狌狋犺犲狊狅犲狋狀犻犪狊犾狏狉犲犳狅犺犲狊犲狋犱狅犮狌犿狊狋犲狀犵 犲犱狉狅犳犺狋狅狊犲犺犪狏犲犮犺犪犲犲狉犱犪狀犪犵犲狉犿狋狀犲狀犻犱犮狉犮狅犪犉狉狅犲狊犾犺犲狋犻犺狋狅狋狌狅犳狑狀犻狋犪狀犪犮犻犳狀狅犱犻犲狋犱犪犵 狅狋狊犻犱狉犪狀犱犺犪狋狊狅狋犮犺狉犲犪犲狊狉狑狉犺犲狋犺犲狅狋狌狋犲狊狋狉,狊犪犻犾犺狏狉犲狋犲狅狀狊犻狊狑犱犾狅狌犫犲犪狆犲犾犪犫犮狅狋犻狊犻犱狉犪狀犺犾犱犪狋狊犌犅 犜 犛狅狀犻狋犪犮狆犻犳犪狀犱犻犲犮狋犲狊狋 犿犺狋狅犲犱狉狅犳

15、 狑狉犲狋犪狌狊犲犱狀犻犾犪狀犪狔犾犪犮犪犫犻犾狋(犌犅 犜 ,犛犐犗:,犕犗犇) 犻狀犮犻狉犘狆犲犾狀犱犪犻狌犲犻犜犿狊犲狊狉犾犻犲犱狋狌犮犪狉狅犲狉狋狓犳犿犺犲狋犪狊犿狆犲犾犺狋狑犻犺狋犲狔犾犲狋犪狋犮犲犪犃狀犱犺犲狋狋犮犪狊狉犲犻狋犲狓犱狋狋犪犳犱犲犺狋狑犻狀 犺犲狓犪狀犲犪狀犱犲犪狀犲犱犾犮狌狆犺狋狑犻犺狔狅狉犱犮犻狆犾犻犺犻犾 狆 狅犮犻狆犪狀犮犲犾犫犪犻犺(犎犔犅)犱犻犾狊狅狆狅犲犺犪狀犻狋犮犪狌狉犾犲犮狋狓狅犿狀狊犲 狇犾狌狋犲狀狔犾犾狀犪犻犉狔 犺犲狋犾犪狀犪狔犲狋狊犻犲狉犱狋犲狀犪狋犱犿犲犻犫狔 犻犺 犵 犺 狆狉狅犳犿狉犲犻犪狀犮犲犾狇犱犻狌狅狉犮犺犿狅狋犪犵犪狉 狆 犺

16、狔 犪狀犱犪狀犱狋犲犿犿狊犪狊狆狅狉狋犲犮犿狉狋犲狔 ,狀犻狌狊犵 犾犱狉犪狀犱狀犪狋狉狊犲狋狓犿犺狋狅犲犱 犚犪犲犵狊狋犲狀犪狊狀犱犾犪犻狉犿犲狋犪狊犲狊犾犝狀狉犺犲狊犲狋狅狑犻狊犲狆犱犻犳犻犾,犺犲狋犾犪犲犪狉犵狋犲狀狊犻犾狀犪犪狔犮犻狋狊犵犪犱犲狉犪狀犱“狑狉犲狋犪”狊狕犲犱犻狅狀犻犱犲狑狉犲狋犪 犺狋犈狔犲犾犱狋犪狋犮犲犪: 犎犘犔犆犵犪犱犲狉 狀 犎犲狓犪狀犲: 犎犘犔犆犵犪犱犲狉 犕犾犺犪狀狋狅犲: 犎犘犔犆犵犪犱犲狉犛犖 犜 犾犻狉狋犻犃狅狋狀犮犲: 犎犘犔犆犵犪犱犲狉 犃犿犿狌犻狅狀犿犲狋犪狋犮犲犪(犖犎 犃犮 ) 犖犎 犃犮 : 犠犻犲犵 犺 犵 犖犎 犃犮犪狀犱狏犲犾犱犲狊

17、狅狀犻 犿犔 狑狉犲狋犪 狀犪犻犻犜犿犾狌(犆 犎 犖犗 犛 ): 犆犃犛犖狅:,狆狋犻狉狌狔 狅狀犻狅犽犛狋犮狋狀狌犪犻犾犳狅狊狅犻犿犾狋狌 狏犲犾狊狋狊狅犻犱犺狋狑犻犿犾犺犪狀狋狅狅狋犲犱犾犮犲狅狌犳狋犾狊犪犫犻犫犻犲犱犾狉狅狋狊犻犪狋狏犪 犻狀犻狉犳犲狉狆犲狉: 犿 犵 犿犔 犠犻犲 狆犲狉犪犪狅狀犻狅犽狋犮狋狊狌狅犾狀犻狊狅犮狊犺狑犻狋犪犺狉犮狅狀狋犮犲狀犵狀犺犻犪狋犪狉犮犲犿狅狋狌狀犳狅犺犲狋犱狉犪狀犾犱犪狋犲狊狋犪狉犮狌犪犵狉狅狀狋犪犻狉犱犲犪狏犻狅犵犻犾 犵狋犺 犿 犵 犿犔 狅狀犜犻犺犲狋狌犾狊狅狔 ,犪狀犱 狀犠犻犽狉狅犵狅狀犻狀狋犪犻狌犳犻狅犾犿狊狅犾狋狌: 犵 犿犔狀犻犪

18、狋犪犆狉犲犿狅狋狌狀狅犪犻狀犻犳犻狅犽狀狋犮犿狋狊犪犻犾狌狋犳犻狌犾狅犿狊狅犾狋狌狑狊犪犲犱狋狌犾犻犱犺狋狑犻 犿犾犺狀犪狋狅犲狅狋狀犻 犪狀犱犻犽 犳狅狀犪犻犻犿犾狋狌狀犻狑犽狉狅 犵 犿犔 狅犜狀犻犺犲狋犱狌犾犮犲狅狊狅狌犳狋犾狊犪犫犻犫犻犲犾犱狉狅狋狊犻犪狋狏犪 犻狀犻狉犳犲狉犵 狅狀犻狋狌犾狊狅犮犺狑犻犺狅狀犻狋犪狉犮狅狀狋犮犲狊狀犻犵狉狅狀狋犪犻狉犱犲犪狏犻狅犵犻犾 犵狋犺 犎犔犅犛犘犈狌犾犮犿狅狀: 犿犵 , 犿犔狉狅犲狇狋犲狀犾狏犪犻狌 犾犿犻犉: 犿 ,犗狉 犵犮犻狆 狊犲犺犪 犃 狆 狌狊狋犪狉犪犪狀犱犲狇犻狌 狆 犿狋犲狀 犻犔 狇犱犻狌狅狉犮犺犿狅狋犪犵犪狉狆 犺狔 狅狊

19、狉犺狋犲犮狑犻犾犲狆犪狉狔狅狀犻狋犪狕犻狅犿狀犻狊犪狊狆狅狉狋犿犲犮狉狋犲狔 犪狀犮犲犾犅犪狋狑犻狏犻犺狅狊犲狋犻狊犲狀狊狔 犱狊犺犾狅狌犫犲 犿 犵 狉狅 犵 犕狋犲犪狓狉犕犲犻 犲狋狓犞狉狅狓狉犿犲犻 狌犳犻狉犆狋犲狀犵 犲 :狉 狀犿犻 狉犪犚狋狅狔 狏犮犪狌犿 犲狏犪狆狉狅狋犪狉狅 犃 狆 狌狊狋犪犱狉犻狉犪狅犳犾狊狅狆狅狀犻狊犲犺犪狋犮犪狉犲狋狓 狌犳犻狉犆狋犲狀犵 犲狌狋犫犲犺狋狑犻犪犮狆 : 犿犔犪狀犱 犿犔 犲狉犘狆狅狀犻狋犪狀狉犱犪犪狉狅狋狊犵犲犳狅狋狊犲狋犪狊犿狆犲犾犜犽犲犪犪犲狉犲狉狌狋犪犿犾犮狌狊狌狆狏犲犻狋犪狋犲狊犲狀狉狏狉犲犻,犪狀犾犱犱狀犲犻犽狆狅狀犻狋狉狅狑犺狅

20、狊犲 狑犻犲狔 犪狀犱犵狅狉狌狀犱狋狀犻犪犲狀狉犱犲犾犫犵狋犺狊犻犪犫狅狋狌犽 犵 狅狉犳犿犺犲狋狑犲犾犺狅犇犲 狆狋狉犪犪狀犱犽犲犲狆 犺犲狋狆犻犿狉犪狆犲狉狔 犪狊犿狆犲犾狊狌犮犺狊犪狆犲犱狉犪犪狊犿狆犲犾狅狋狀犻犛犖 犜 狋狑狅犪狊犿狆犲狊犾狋犫狋狅犲狇犾犾狌犪 犻犿 狆狋犪狀狋狉狅狉犳狅犺犲狋狀犻狋犲犮狋犱犲狔 犲狉狅犳犫犲犾狊犲犪犪狀犱犾犪犫犲犾 犵 犾狀犪犪狔犲狋狅狋狀犻犱犪犻狏狅,犺犲狋狀犲犱狉狅狋狊犺犲狋犿狀犻 犻狉犳犲狉犵狆狅狀犻狋狌犾犪狀犱犾狅犽犲犲狆 狅狊狀犻狋狋犻犪狉犮狅狀狋犺犮犲狀狋狅狋狌狑犲犱犻狉狏犪犵狉狅狋犪狉犲狋犐狊犻狀犻犱狉狌犵 犺犲狋狀狑犲犻犾犺狅狉狅狋狊犵

21、狆 狅犱犻狉犲 狅犲狉犮犲狉犘犱狌 狅狀犻狋犮犪狉犈狋狓犠犻犲犵 犺 犵 犳狅犺犲狋狋犲狊狋犪狊犿狆犲犾(犲狋犪狉犮狌狅犪狋 犵 )狅狋狀犻犪犿狌犳犔犻狉狋犮犲狀犵 犲狌狋犫犲犃犱犿犔犺狋犲狔犾犮犲犪 狀犿犻狉狅犳犲狋狅犪狋狀狋犻犺犲狋狌犫狋犲犪狀犱犺狅犿狅犵狕犲犻犲狉狀狅犳狀犿犻狋犪狉 狀犿犻狌犳犻狉犆狋犲狀犵 犲犺犲狋犲狉狌狋狓犿犻狋犪狉狀犿犻,犪狀犱犺犲狋狊狌狆犪狋犪狀犾狋狀犪狉犲狔狉犲狑狊犪狊犻犱狆犮犲犪犱狅狋狀犾犻犲犪犾狉狅犳犪狋狅狉犫狋狅狔 犲狏犪狆狅狀犻狋犪狉狅犚犲狆狋犲犪犺犲狋犮犪狉犲狋狓狀犻狋犵狆 狅狉犮犲犱狉狌犺狋狑犻 犿犔犺狋犲狔犲狋犾犪狋犮犲犪狀犱犮狅犿狀犲犱犻犫狅犺犲

22、狀狋犻犲犱狋犮犪狋狌狉犲犾狋狓狊狅犜犺犲狀犲犱狉狌犮犲犱狆犲狉狊狌狊犲狉犲狏犪狆犲狋犪狅狉狅狀犻犺犲狋狋狌狅狋犾狊狅犾狉狀狔 狉犱 狔 狀狊犲狊狀犻犪 狑狉犲狋犪犺狋犫犪狅犾犫狑 犃犱 犿犔狀 犺犲狓犪狀犲犪狀犱 犿犔狑狉犲狋犪狅狏狋犱犲犾狌狊犲犻狊狅狊犲犻狉犱犪狀犲犱犳犺犪狀狊犲狋狉狋犿狅狋狀犻犪犿狌犳犔犻狉狋犮犲狀犵 犲狌狋犫犲狊犲狇犾狌犲狀犮犲狔 犲狀犱犾犅犺犲狋狓犿犻犲狉狌狋狉狅犳狀犿犻狌狀狉犱犲狉 狀犿犻狌犳犻,狉狋犮犲狀犵 犲狉狅犳狀犿犻狌狀狉犱犲狉 狀犿犻,犪狀犱狉犪犮狊犺犻犲狋犱狊狌狆狋犪狀狋狀犪狉犲犪犾 狔狉犲犃犱 犿犔狀 犺犲狓犪狀犲狅狋犲狉狆狋狀犲犪犻犺犲狋狋犪犳犱犲犵狆

23、 狅狉犮犲犱狉狌 犲犪狀犾犆狌狆狉犲犳犪狀狊犺犜狉犲狋犾犪狀犪狔狅狀犻犲狋狀狋犻狌犾狊狅狑狉犪犲狋犾犪狔狅狉狋犲狀犻犺犲狋犎犔犅犛犘犈狌犾犮狅犿狀犮犺狑犻犺狊犺犪犫犲狀狆狅狊犲狉犮犲狊犱犺狋狑犻 犿犔狅犾狑犿犾犺犪狀犾狋狅犲犱狅犳犫狔 犿犔 狑狉犲狋犪狊犲狇犾狌犲狀犮犲狔 ,犪狀犱狀犿犻犽犪犵 犺犲狅狋犾狑犳犲狋犪狉狅犾犫犲狑 犿犔 狀犿犻狀犻犺犲狋犾狅狉犮狅狋狀狀狊犲犻犚犺犲狋犛犘犈狌犾犮犿狅狀犺狋狑犻 犿犔 狑狉犲狋犪,犺犲狋狀犱狉犪犮狊犻犺犱犲狋犲狋狌犪犾犲犾狋犮犲犺犲狋犾犲犱狋狌犪犾犆犾狌狅犲犾狊狅狅狀犻犲狉狋犲狌狋犾犳犺犲犪狋犲狌犾犮犿狅狀犺狋狑犻 犿犔 犿犾犺犪狀狋狅犲犪狀犱犪犱犼

24、狋狌狊犲犺狋犲狋犪狋狌犾狏犲狅犿犲狅狋 犿犔犺狋狑犻狑狉犲狋犪狋狓犕狉狅犻狉狅犲狌犺狀狋犻狋犺犲狋犾狋狌犪狀犱犾狊犻狅犳犵 犺 犿犾犿犻犳犲狋狊犪狉犻犲犪犱狉狋犾犜犺犲犻犳狔 狉狅犳犔犆犕犛 犕犛狅狀犻狉狋犲狀犪狋犱犿犲犻 犲狉犘狆狅狀犻狋犪犲犱狋狉犳犪狅犪狉狀犫狅犪犻狀犻犱犻狉犫狀犪犿犜犱犪狋犾狊狌犪犾犮狊狅狔 狓犻狉犕狋犪犠犻犲犵 犺狊犲狏犲狀狀犲犵狏犲犻狋犪狓犻狉犿犪狋狊犪犿狆犲狊犾狑犺狅狊犲 狑犻犲犵狋犺狊犻犵 犲狊狉狆犾狏犲犻狋狔 狅狋狀犻 犿狌犳犔犻狉狋犮犲狀犵 犲狌狋犫犲,犪狀犱狊狆犽犲犻狀犻犪狋犪狉犮犲犿狅狋狌狀犪犻犳犻狅犿犾狋狀狌犻狑犽狉狅犵狅狀犻狅狋狀狓狋犻狌犻犾狊狅犳狅犺

25、犲狋犿犜犺犲狀狆狅狊狉犮犲狊犺犲狊犲狋犪狊犿狆犲狊犾狀犻犱犮狉犵 狅狋犺犲狋犾犪狀犪狔犮犻犲狋狊狆狊 犪狀犱狊犪犺犲狋狆狅狉犮犲犱狉狌犿狅狀犻犲犱犲狀狊犪犫狅狏犲狅狋狆犲狉狆犲狉犪犺犲狋犪狀犱狋狊狅狀狊犱犻狉犪狋狌犾狊狅犮犺狑犻狅狀犻犺狋犪狉犮狅犲狋狀犮狉犲狀犪 狀 犵 犿犔 , 狀 犵 犿犔 , 狀犵 犿犔 , 狀犵 犿犔 ,狀犵 犿犔 ,狀犵 犿犔犲狊狉犪犱狉犪狀犱犪狋狊狏狉犮狌犲犪狀犱犱狊犺犾狅狌犫犲狌狊犲犱狉犲狋犳犪狆犾狏犲犻狋狔 犜犲犱犺狋犲犪狉犫狀犻狅犪犻狀狊犻犱犫犻狉犪狀犜犿犱犪狋犾狋犾狌狊犪犮狌犾狊狅狆犲狉狆犲犱狉犪犻犿犾狋犲狔 狔 狓犻狉犲犕狉狋犪犿犪犱犲狀犻狉狅犳狀犻犪狅狋

26、犫犵 狅狀犻狉狋犇犲狀犪狋犿犲犻 犎犘犔犆狅狆狀犻狋犪狉犲犵狅狀狊犻狋犮狅犻狀犱犪 ) 狌犆犾犿狅狀: 犣犗犚犅犃犡犻犾犈犮狆犲犡犇犆犅 , 犿犿 犿犿(犻 犱 ), 犿 ,狉狅犺犲狋犲狇狋犲狀犾狏犪犻狌;犫 ) 狀犐 犼狅狀犻狋犲犮狌犾狏犿狅犲: 犔 ;犮 ) 狅犾犉狑犲狋犪狉 : 犿犔 狀犿犻;犛犖 犜 犱 ) 犲犾犕犻狅犫狆 狊犲犺犪犵狋犲狀犻犪犱狉狊犲犲犾犪犫狋犲犾犜犪犫 犲犾犕犻狅犫狆 狊犲犺犪犵狋犲狀犻狀犪犱犪犻狉犳狅犻犿犾狋狌犻犜犿犲 狀犿犻犾犕狀犪犺狅狋犲 犃犿犿狌犻狅犿狀犲狋犪狋犲犮犪 犲犾犻狉狋犻犃狅狋狀犲犮 犕狊犪狊狆犾犪犮狉犪狋狅狀犻狇狋犻狊犻狌犪 ) 犛犮犲狅狉狌:

27、犈犐犛;犫 )狋犻狉犪犾犘狅狔 : 狆狏犲犻狋犻狅狊;犮 ) 犕狅犱犲:犻狋犿犾狌狆狅狀犻犲犾狋狀犮犪犲犻狉狉狅狋犿犻狅狀犵 ;犱 ) 犌狊犪、犌狊犪犪狀犱狀犻犪狋犆狉狌犵狊犪狅狉犲狉狋犪犻狀犵 犲狀 犃犱 犼狋狌狊犺犲狋狆犪狉犪狊犿狉犲犳狋狊犲狅狋犻狋犪狊狔狋犻狏犻犺犲狋犻狊犲狀狊狔 狀犲犱犳狅犿狊犪狊狆狅狉狋犲犮犿狉狋犲狔 犲狉狅犳犫犲狌狊犲犱犪狀犱犺犲狋犾狉犺犲狋狅犻犪狋犱犲狆犪狉犪狊犿狉犲狋犲狊犲犲犪狀狀犲狓犃 犔犆犕犛 犕犛狅狀犻狉狋犲狀犪狋犱犿犲犻 狅狉狀犻犿犻狋犆犪狅犳狀犳狅犔犆犕犛 犕犛犝狀狉犱犲犺犲狋犪狊犿犲犔犆犕犛 犕犛狅狀狊犻狋犮狅犻狀犱,犺犲狋犱狉犪狀犱犪狋狊狀犻狑犽狉

28、狅犵狅狀狊犻狋狌犾犪狀犱狊狅犺犲狋狋犲狊狋犪狊犿狆狅狀狊犻犲犾狋狌犾狊狅犲狉犪狀犻犼犲犱狋犳狅狀犻犐犺犲犻狋犿狋犲狀狋犲狉狏犪狀犲犻犱狋犺犪犲狋犪犫狅狌犾狊狀犱犻犪狀犮犲狉狅狋犳犪犺狉犲狋狆狊狉狅狉犲犮狌狉犪狀犱犺犲狋狆狅狉犱狋狌犮狅狀犻狆狊狉犻犳狅犪犺犲狋狋犲狊狋犪狊犿狆狅狀犻犲狋犾狌犾狊狅犿犮犺狋犪狋犺犪狋犳狅犺犲狋犱狉犪狀犱犪狋狊狀犻狑犽狉狅犵狅狀犻狋狌犾犲狊犱狅狋犮犺狑犪狉犻犫犺犻狊犺犪犾犪犮犫 狔 狓犻狀狉犿犻狋犺狋犪狑犻狆狅狉狆狉犲狀犪狉犵 犲犲狊狉狆犾狏犲犻狋狔 (狊犲犲犾犪犫狋), 犺犲狋犲狊狉犮狉狅狆狀狅犻狀犱犵 犾犪狀犪狔犲狋犿狋狌狊犫犲狆犲狊犲狀狉犲犱狋狀犻犺犲狋狋犲狊狋

29、犪狊犿狆犲狊犾犃狋犺犲狋狅狋狀狊犻犲狊狋狋犮狅犻狀犱狅犿狀犲犻犱狅狋狀犪犫狅狏犲,犺狅犲狋狀犻狋犲犻狀狋犿犲狉狋犲犳狅狀犪犻狋狊犿犾犻狌犪犫狅狋狌 狀犿犻; 犺犲狋狆狊狉狅狉犮犲狌狉犪狀犱犺犲狋狆狅狉犱狋狌犮狅狀犻狆狊狉犻犪(犿 狕 ) 狉狅犳狅狀犻狋犪犮犲犻狉犪狇犳犻犾狌犪 , ,狏犪狀犲犱犻狋犪犺犪犫犲狅狋狌狀犾犻犱犪狀犮犲狉狋犪狉()犳狅犺犲狋犿犲狉犪犪犫狅狋狌 , 犪狀犱犲狊狉狆犾狏犲犻狋犲犮狏犲犻犜犺狋狅犪狊犲犾犲狉犵犪狉 犾狆犾犪犮犻犺狔 狅狉狀狅犻犳狀犿犻狋犪狑狊犪狆犲犱狋犲狊犲狀狉狀犻犃狀犲狓犅犪狀犱犲狊狉狆犾狏犲犻狋狔 ,犺犲狋狆狊狉狅狉犮犲狌狅狉狀犻狆狊狉犻犪(犿 狕 )狉狅犳狅狀犻狇狊狋犪犻狋犻狋狌狔 犲犾犜犪犫 犕狌犻犪狓犿狅犾狅犲狏狀犻狑犲犻犾犪狋犫狋犪犱犳犻狅犪犲犫犾狏狌狅狀犱犪狀犻犮犲狉狋犲狅犪狉狀犻狉犾犿犻狋狑犪犮犻狅犳狀犺狏犲犻狋犪

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