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1、乙型肝炎病毒外膜大蛋白与HBV国际检验医学杂志2011年7月第32卷第10期IntJLabMed,July2011,Vo1.32,No.10?论着?乙型肝炎病毒外膜大蛋白与HBVDNA,ALT的关系及其临床意义牛文强,陈杰(湖北省孝感市中心医院检验科432100)摘要:目的检测不同模式乙肝患者血清中乙肝病毒外膜大蛋白(HBV-LP),HBVDNA以及转氨酶情况,比较HBV-LP的检出与HBVDNA及转氨酶的关系.方法采用酶联免疫吸附法检测199例HBV患者血清HBV-LP,荧光定量PCR法检测患者HBVDNA,全自动生化分析仪检测转氨酶.结果相同乙肝模式患者血清HBV-LP与HBVDNA检出率
2、差异无统计学意义.HBeAg阳性患者血清中,HBV-LP与HBVDNA阳性率均明显高于HBeAg阴性患者(92.45与42.O4,P<0.05;90.57%与38.85,P<0.05).HBV-LP阳性患者的转氨酶水平明显高于HBVLP阴性患者.结论HBVLP与HBVDNA有较高的符合率,是反映乙肝患者体内病毒复制情况的可靠指标.而且,HBV-LP阳性患者转氨酶较阴性患者高,表明HBV-LP同时也反映了乙肝病情的活动情况.关键词:肝炎表面抗原,乙型;丙氨酸转氨酶;乙肝病毒DNADOI:10.3969/j.issn.16734130.2011.10.012文献标识码:A文章编号:16
3、734130(2011)10104502InvestigationoftheclinicalvalueofhepatitisBviruslargeenvelopeproteinanditsrelationshipwithHBVDNAandALTNWnqiang,ChenJie(DepartmentofClinicalLaboratory,PCentralHospitalofXiaogan,Hubei432100,China)Abstract:ObjectiveToexploretheclinicalsignificanceofhepatitisBviruslargeprotein(HBV-LP
4、)inthediagnosisofviralreplication.MethodsSerumsampleswerecollectedfrom199patientswithHBVinfection.HBVLPandHBVmarkerswereexaminedusingenzymelinkedimmunosorbentassay(ELISA).HBVDNAwasquantitativelydetectedbyrealtimepolymerasechainreaction.Theleve1ofalanineaminotransferase(ALT)wasobtainedbyanautomatedbi
5、ochemistryanalyzer.ResultsNosignificantdifferenceofdetectionrateswasfoundbetweenHBVDNAandHBVLPinpatientswiththesameHBVmarkers.ThepositiveratesofHBv_LPandHBVDNAinpatientswithHBeAgwerehigherthanthosewithoutHBeAg(92.45vs42.04,P<0.05;90.57-0538.85,P<O.05).TheaveragelevelofALTinHBVLPpositivepatient
6、swashigherthanthatofHBV-LPnegativeones.ConclusionTherecouldbeaperfectcorrelationbetweenthepositiverateofHBVLPandHBVDNA,andHBVLPcouldbeareliableserologica1markerthatcanreflectthereplicationofHBVaswellasliverfunction.Keywords:hepatitisBsurfaceantigens;alanineaminotransferase;hepatitisBvirusDNA乙型肝炎病毒(H
7、BV)感染是1个严重的公共卫生问题,目前临床上主要以肝功能的改善,HBeAg血清转换和HBVDNA阴转作为乙型肝炎(下称乙肝)患者病毒复制与抗病毒疗效的监测指标,但尚有一定的局限性.有研究发现抗病毒治疗时,如果HBVDNA的拷贝数与HBeAg水平同时下降或阴转,则疗效和预后较好;如果只有HBVDNA下降,HBeAg水平不变或下降不明显,则停药后病毒反弹的可能性大_2.因此,对HBeAg阴性慢性乙肝患者缺乏准确反映体内病毒复制与抗病毒疗效的血清学指标.近几年,HBV外膜大蛋白(HBv_LP)作为1种新的,可靠的定量血清免疫学指标,越来越受到重视_3.作者使用HBV-LP酶免定量试剂盒研究HBeA
8、g大蛋白检测用于临床的意义,针对构象型前s区的高亲和力,高特异性的单抗来检测HBVLP,现报道如下5.1资料与方法1.1一般资料HBV感染者血清标本均来自2008年11月至2009年3月本院门诊及住院患者,共199例,其中男103例,女96例;年龄1581岁,平均48.2岁,均符合HBV感染的临床诊断标准.所有标本均于一2O保存以备用.1.2方法HBVDNA在GeneAmp5700SequenceDetector仪上进行定量测定,其水平小于1.010.copy/mL判为阴性,反之为阳性.HBV外膜大蛋白采用酶联免疫吸附法(ELISA)测定,操作严格按试剂说明书进行,临界值为平均阴性对照值乘以2
9、.1,样本A值大于或等于临界值为阳性,反之为阴性.转氨酶试剂由四川迈克生物有限公司提供,试用速率法在日立7060全自动生化分析仪测定,严格按试剂说明书进行,其结果大于40U/L为增高.1.3统计学处理应用统计学软件SPSS11.5对检测数据进行统计学处理,计数资料进行Y.检验,计量资料进行t检验,以P<O.05为差异有统计学意义.2结果2.1不同乙肝两对半模式患者血清HBv_LP和HBVDNA检出情况比较,见表1.相同乙肝两对半模式组中,HBV-LP的阳性率与HBVDNA的阳性率经.)f.验证,差异无统计学意义(P>O.05);不同的乙肝两对半模式组中,HBeAg大蛋白的阳性率经过
10、Y.验证,组间差异有统计学意义(P<O.05).2.2HBeAg阳性和阴性组中HBVLP和HBVDNA的检出情况比较,在HBeAg阳性组中HBeAg大蛋白的阳性率明显高于HBeAg阴性组,经过验证两者差异有统计学意义(P<0.05),见表2.2.3HBV-LP与丙氨酸转氨酶检测结果显示,HBVLP阳性患者115例,转氨酶水平为(1325.63士697.73)U/L,明显高于84例HBV-LP阴性患者的(645.69287.48)U/L,经t检验,差异有统计学意义(P<O.O5).国际检验医学杂志2011年7月第32卷第lO期IntJLabMed,July2011,Vo1.32
11、,No.10表1不同乙肝两对半模式患者血清HBV-LP和HBVDNA检测比较表2HBeAg阳性,阴性组中HBV-LP和HBVDNA的检测情况3讨论ELISA法一直是临床上用于HBV感染的血清检测手段,传统认为乙肝两对半中HBeAg阳性表明HBV复制活跃,传染性较强.研究显示,在53例HBeAg阳性患者中,HBVLP阳性率(92.45)与HBVDNA的阳性率(90.57)一致,经过Y.验证,差异有统计学意义.结果表明,HBV-LP与HBVDNA的检出具有良好的一致性,能够准确地反映出乙肝患者体内病毒的复制情况.过去临床上认为,乙肝患者出现HBeAg阴转是HBV复制转弱,传染性降低和预后良好的象征
12、.但研究显示,在156例HBeAg阴性患者中,HBVDNA与HBVLP的阳性率分别为39.1O和42.31,可能是免疫清除不全或是HBV基因前C区变异所致8.转氨酶是判断肝内炎性反应活动度的可靠指标,临床上通常将血清转氨酶水平变化作为乙肝患者病情转归的1个重要指标.研究显示,HBVLP阳性患者的转氨酶水平明显高于阴性患者(P<0.05),说明HBVLP阳性患者较阴性患者肝组织损伤严重,这与HBVLP阳性代表存在HBV复制相符合,表明HBVLP可用于观察临床疗效和估计预后.目前,HBVDNA的检测是HBV复制最直接的指标,但此方法对实验室条件要求严格,不易推广,特别是广大基层医疗卫生单位还
13、难以开展.乙肝两对半的血清免疫学标志物可反映乙肝患者的病情和传染性,现已作为常规检查项目开展.不过,由于其方法灵敏度,特异性的限制以及HBV为逃避宿主的免疫反应常发生变异,导致检测结果失真.而使用酶联免疫定量法检测HBV-LP与HBVDNA有良好一致性,是反映HBV复制活跃的可靠指标,可以作为HBV感染,复制和乙肝患者诊断,治疗和预后的重要标志物,具有较高的临床应用价值.参考文献1梁晓峰,陈园生,王晓军,等.中国3岁以上人群乙型肝炎血清流行病学研究EJ.中华流行病学杂志,2005,26(3):655658.23孙颖,辛绍杰,雷厉,等.乙肝病毒外膜大蛋白检测对于判定HBVDNA复制的意义EJ.世
14、界华人消化杂志,2006,14(3):354357.3LambertC,MannS.AssessmentofdeterminantsaffectingthedualtopologyofhepadnavirallargeenvelopeproteinsJ.GeneralVirology,2004,85(4):12211225.E4彭建明,李金明.病毒样颗粒在免疫测定中的应用研究进展J.中华检验医学杂志,2005,11(2):214-216.5赵蕊,李鲁平.乙肝病毒外膜大蛋白的临床检测及其意义J.中国热带医学,2008,10(2):18511852.6王晓东,李秀全,李风焕,等.慢性乙肝血清标志物
15、与HBVDNA水平的关系J.国际检验医学杂志,2006,27(4):10701072.7谢志贤,谭爱国,董莹.血清中乙型肝炎5项标志表现模式与乙型肝炎病毒DNA含量的关系J.中华医院感染学杂志,2002,12(2):81-83.8HamasakiK,NakataK,NagayamaY,eta1.ChangesintheprevalenceofHBeAgnegativemutanthepatitisBvirusduringthecourseofchronichepatitisBJ.Hepatoogy,1994,20(4):814.9赵辉,李凤英.HBV血清标志物与前s1抗原,HBVDNA的相关性
16、研究CJ.国际检验医学杂志,2007,28(2):1129113o.(收稿日期:20110212)(上接第1044页)AutoantibodiesinSLEbutnotinsclerodermareactwithproteinstrippednucleosomesJ.JAutoimmun,2004,22(4):325334.Il1王梅芳.抗dsDNA抗体在系统性红斑狼疮中的临床意义J.中国卫生检验杂志,2010,20(3):606607.12吕世静,刘若英,蒋黎华,等.临床免疫学检验M.北京:中国医药科技出版社,2004:240241.13金卫东,贾敬年,俞晓洁,等.系统性红斑狼疮疾病活动性的血清学指标的评价J.中国实验诊断学,2007,1l(9):11561159.(收稿日期:2011-0405)