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1、吉林医学2006年1月第27卷第1期 C57 小鼠淋巴细胞瘤电转染 M2.延边大学医院呼吸科, 吉林延吉 133000;3.中国医学科学院肿瘤研究所免疫室,北京100021) *摘要+目的:制备高表达,-./01的/27小鼠3淋巴瘤细胞系。 方法:将小鼠,-./01真核表达质粒用电穿孔方法导入 /27小鼠3淋巴瘤细胞中, 倍比稀释法制备单个细胞克隆, 经43.5/4、 骨髓干细胞增殖实验和集落形成实验筛选相对高表达 ,-./01的4-6.,-克隆。 结果:获得了高表达,-./01的4-6细胞系4-6.,-,其出瘤时间延长。 结论:/27小鼠4-6. ,-克隆细胞出瘤时间延长,肿瘤细胞免疫原性增
2、强。 *关键词+淋巴瘤;电转染;基因;抑制;肿瘤;质粒;小鼠 )*+*,-./ 01 2-,3+1*-*4 M8o5ogy3 ?in13C2nHi *IIJJJ3 +,in2;.78192:4;1n4 oin13C2nHi *IIJJJ 3+,in2KI78192:4;1n4 o1: LnB4i4u41 oin1 Mi1n1 ?21;y3N1iHing *JJJ.*3 +,in2O ?+2-,.2:?A*.26B* 37 89:; /27 8=D; EF8;. M*2/04 3 E9B8=I J9B HA9CBK;DH;I =CH7 /27 8=D; 3 EF8 D;EE DE7C; J9B
3、B;E;DH;I LF 43.5/4N ;C=H7A D;EE D7E7CF K7A 89H=7C 9BB9F 9KH;A BDA;=C LF ,.O1P 9CI DE7C=C LF D7GLE=C I=EGH=7C. )*+C:2+ 6 ,-./01 D;EE E=C;9; 4-6.,- J9B B;E;DH;I J 9CI HG87A 7A=C9E =88GC=HF =B BHA;CH,待温度降至! 左右,取一份琼脂液至%/份骨髓细胞培养液中,混匀,立即加至 4.孔板中,/;K2LMN%,K2LMNC)和(#B,DEFGB0(K2LMN%/)细胞孔中也 有少量增殖现象。 干细胞集落实验中O
4、在所检测的四种细胞中, 正常(*B细胞和(*B,DEFGB0细胞培养上清不能刺激干细 胞形成集落,而克隆_VEE=V=W =5 =NNVd=V# Md K2WN EM33a MJ=MMNMd W aMENMM 2KN=M H*,?:I a=2K# 3VMa DWM aDME=X=E Vd 3WJ ,3Va=J V=K2WN =22K=Z; )NWE GV33 BEVd :E= b:B,%CC0;C/:0 T4U c=aaV *O dNWJMN BO eVKaMN e,M V3; ?Wf=M,XVE=3=VMd DN=2=J WX ?FaMa L FGB hVEE=V=Wi; Z *W3 *Md
5、,4/0;J G:,kVJ ie,$KNMN i; *W3MEK3VN aNVMJ=Ma XWN =2# DNWh=J EWf=M NVaJMM MlDNMaa=W = WN2V3 Vd 2V3=JV =aaKMaZ; HMM $5MN,4/.;%R%S:%/; T.U萨姆布鲁克,;I;弗里奇,$;曼尼阿帝斯;分子克隆实验指 南$;第4版;北京:科学出版社,%CC-:4%; T北京:高等教 育出版社,%CC0:%4%; T-U QK QOea=M5 *ON=aa $9OM V3;HMMNV=W WX F? XNW2 2WKaM aD3MM EM33 EK3KNMa = NMaDWaM W H*
6、,?:IP=22KWD5MWD=E Vd XKE=WV3 VV3a=aZ; 822KW3WJ,%CC&;Wh=NV33 MJ=MMNMd W aMENMM JNVK3WEM12VENWD5VJM, EW3W,a=2K3V=J XVEWN MaVL3=a5 V=K2WN =22K= Vd M# 3=2=VM DNM,Ml=a=J K2WNa = aJMM=E 2=EMZ; ?VEMN 82# 2KW3 822KW5MN,%CC;.A:A4; 收稿日期:!“#$“%$&编校:郑英善 李瑞永C57小鼠淋巴细胞瘤电转染GM-CSF基因研究 “# “$ %$ “$ 本刊启事: 为适应我国信息化建设需要,扩大作者学术交流渠道,本刊已加入中国学术期刊(光盘版)、 “中国期刊网“、“万方数据!数字化期刊群“和“中文生物医学期刊文献数据库“#$%#“等。 作者著作权使用 费与本刊稿酬一次性给付。 如作者不同意 将文章编入该数据库,请在来稿时声明,本刊将做适当处理。 &!