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1、!基金项目“临沂市科技局资助项目# $ % % 2增 生 组 及 对 照 组 分 别 为 和% 2两 两 比 较 均 有 显 著 差 异# ?期8 期 患 者, - . /0 1.阳 性 表 达 率明 显 高 于A期8 B期 患 者2外 周 血, - . /0 1.阳 性 表 达 与 淋 巴 结 转 移 密 切 相 关+结 论外 周 血, - . /0 1.表 达 可 作 为 乳 腺 癌 转 移 的 一 个 辅 助 监 测 指 标+ !关键词“ 乳腺癌5循环肿瘤细胞5微转移5癌胚抗原5逆转录聚合酶链反应 !中图分类号“ 0 3 C 3 : D!文献标识码“ .!文章编号“ ) % % $ $
2、4 4 E # $ % % 4 * $ 4 % % ) 3 % C - F G H I J J K L MN M OP Q K M K P N Q J K R M K S K P N M P IL S P N H P K M L I /T H U L M K PN M V K R I M/0 1.K MG I H K G W I H N Q T Q L L OP I Q Q J L S 7 N V K I M V JXK V WT H I N J V P N M P I H G N V K I M V J Y Z 2 Z_ a b c d e 2 fghi d : # Y d j I V W
3、L O J “7 I H K G W I H N Q T Q L L OJ N /G Q I JXI H IP L Q Q I P V I OS H L / :.M OM LW I N Q V W Uw L Q x M V I I H JXN JG L J K V K w I : x V$L SV W I9 %# *G N V K I M V JXK V WT H I N J V W U G I H G Q N J K N# *XI H IG L J K V K w I :6 W I H IXI H IJ K R M K S K P N M VO K S S I H I M P I JN /L
4、 M RV W H I IR H L x G J : 6 W IG L J K V K w IH N V I K M P H I N J I J OXK V WV W IG N V W L Q L R K P N QJ V N R K M RN M OQ U /G WM L O I/I V N J V N J K J 2T x VV W I H IXI H IM LJ K R M K S K P N M VH I Q N V K L M J T I V XI I MV W IH N V IN M OV W I/N Q K R M N M V I F V I M V L S P I Q Q O
5、K S S I H I M V K N V K L M :! , L M P Q x J K L M “6 W II F G H I J J K L ML S , - ./0 1.K M G I H K G W I H N Q T Q L L OP I Q Q JP L H H I Q N V I JXK V WV W IG N V W L Q L R K P N Q J V N R K M RN M OQ U /G WM L O I/I V N J V N J K JL S T H I N J V P N M P I H 2N M OK V P N MT IL S G L V I M V K
6、 N Q x J IV L/L M K V L HV W I/K P H L /I V N J V N J I JL S V x /L H : | ! “ # $ % t T H I N J VP N M P I H 5P K H P x Q N V K M R V x /L HP I Q Q J 5/K P H L /I V N J V N J K J 5P N H P K M L I /T H U L M K PN M V K R I M 5H I w I H J I V H N M J P H K G V K L MG L Q U /I H N J IP W N K MH I N P V
7、 K L M 研究表明2乳腺癌为全身系统疾病2早期可发生 隐匿性转移+如果能在亚临床阶段检测到微小转移 灶2则对疾病的分期8治疗8预后有重要意义+ $ % % C年 ) )月 ?酶.逆转录酶A B C 7 D 2 5 %E F 公司= ) G HI 2 J E 2 K G B! # # #7 L M F 5 M公司= )0 - #型酶标检测 仪7美国康能公司= ) ! N扩增仪7美国D O公 司= ) P3 % $; N ! 0 8低温高速离心机7 P9 1 I; P9公 司=等( 0 “ ! “ ! 引物设计与合成套式N 1A D ; N; O I引物 设计参考有关文献( 0 “ ! “ 外
8、周血N HI提取三组均抽取新鲜枸橼酸 钾抗凝血*%6 7乳腺癌组0 ,例行根治术患者术后Q !R 内再次抽抗凝血*%6 = (采用红细胞裂解法分离单个 核细胞)单个核细胞总N HI的提取按1 2 3 4 5 6试剂盒 一步法)用紫外分光光度计检测其I! , # S I! - #值在 0 “ - +! “ #即可(TQ # U贮存( 0 “ ! “ O I$ G HI合成 取0V 6细胞总N HI)用引 物D !进行逆转录(反应体系中还有A B C反转录 酶. 0 # WN 1A D ; N X Y Z Z E 2 . 6 ! 等(扩增程序为 N法(取; O I%N HI逆转录反应产物!V 6
9、行外套D ; N (引物为D 0和D ! )反应条件为 *U变性 *%3 M /冰浴冷却)加入1 ?酶 *U变性0%3 M . , !U 退火0%3 M . Q !U延伸0%3 M)循环 *次/ Q !U延伸0 # %3 M (取外套D ; N反应产物!V 6行内套D ; N )引物为 D !和D )反应条件为 *U变性*%3 M /冰浴冷却) 加 入1 ?酶 *U变性0%3 M . , !U退火0%3 M. Q !U延 伸0%3 M )循环 *次/ Q !U延伸0 #%3 M (每份样本均进 行D ; N扩增内参照8 ID G P(扩增引物为和N )反 应条件为 *U变性*%3 M /冰浴冷
10、却)加入1 ?酶 * U变性0%3 M . , !U退火0%3 M . Q !U延伸0%3 M)循环 *次/ Q !U延伸0 #%3 M ( 0 “ ! “ , 电泳分析 N 1A D ; N扩增产物均由溴乙锭 染色) 0 “ * _琼脂糖凝胶电泳)紫外透射仪观察扩增 带( 0 “ 统计学处理采用L IL , “ # O I%N HI表达三组外套D ; N扩 增产物经0 “ * _琼脂糖凝胶电泳均未发现特异性条 带(内套D ; N产物显示乳腺癌组! 0例出现约0 !X b 的特异性扩增条带)且位置与预期结果一致(乳腺癌 组.增生组.对照组外周血; O I %N HI阳性表达率 分别为 O I%
11、N HI阳性检出率 与病理类型.分化程度.肿瘤部位.大小等无显著性 关系)但与肿瘤分期.淋巴结转移明显相关)见表0 / 0 ,例行根治术患者手术前后; O I %N HI阳性率分 别为 O I%N HI阴性者术后转为阳性( 表f乳腺癌组外周血; O I%N HI表达与临床 病理特征的关系 病理特征 g ; O I%N HI g_ 1 H分期 h期ij期 ! ! - “ 0 k期il期! #0 ! , # “ # m 分化程度 低 中 高 0 N检测肿瘤细胞的基本原理是通过 血液.骨髓.淋巴结或其他成分中扩增出肿瘤细胞 s标志性t靶N HI来证实肿瘤细胞的存在(乳腺癌为 上皮来源性肿瘤)具有上皮
12、来源性的细胞生物学特 征(; O I %N HI属于上皮组织特异性标志基因)高 -0 山东医药! # # ,年第 ? ; 8 7 9 9 7A!; 7 B C 8 EF G H 8 ; 7 E 9 7 , 9 ; 8, F I 7 B&; 7 E 7 E ; E J9 F L; ; , ,= ,+ O PK 7 = ; , E - Q . CQ R 7 : F B !+ S S 1 ! 1 T * 0 + 3 J 1 P 5 U 1 T S C - + .%,V W!$ M 7 7 B C# B = , = 9 7 BE = M , = G = 9 7 , 9 ;F G 9 = 8 9 ? B
13、 7 = , M9 7 , 9 ; 8 9 ; B B E= ,L= :H 8 ; 7 E 9 7 , 9 ; 8 - Q . CY F : F D ?Q$ Z K 6; I !+ S S 1 ! 1 T 0 + 3 J 1 * U 1 5 + C 0收稿日期J + S S 5 U S 5 U + + 3 护理园地 强化# Y治疗室的消毒与管理体会 张华清1!马素贞+!王丽萍+ 0 1山东省医学影像研究所!山东济南+ * S S + 1 4 +山东省立医院3 + S S +年1月+ S S 年1月!我们共为5 S S例患者行强化 # Y检查! 无1例出现交叉感染!且# Y图像清晰“数据精确)现
14、 将强化# Y治疗室的消毒与管理体会报告如下) 室内通风与空气消毒J定时开窗通风换气0切勿对流3 !每 次 S&= ,左右4每晚紫外线照射1: 4每日用福尔马林1 S&B 2 & 及高锰酸钾熏蒸! 封闭O 5: ) 物体表面消毒J保持室内各种设施清洁“整齐!桌面“凳 子“门把手“水龙头和各种医疗器械!用含有效氯+S S S&M 2 的消毒剂0或S C + _ P O a消毒液3喷洒或擦拭! O次2 I 4听诊器“ 血压计“止血带等用后以S C + _过氧乙酸擦拭4体温计用后以 含有效氯+S S S&M 2 的消毒剂浸泡&= , !酒精擦拭“清水冲 洗干净后晾干备用) 严格执行无菌技术操作“合理
15、安排检查J建立静脉通道行 碘试验时!应认真检查碘试验液的有效期及有无破裂“变质“ 沉淀4无菌物品由专人管理!按规定存放!做到定位置“定数 量)将口服阴性造影剂准备行消化道检查的患者安排在距治 疗室较近的观察室!便于观察病情变化和指导检查4尽量减少 患者走动!减少空气污染4待检患者穿一次性隔离衣“戴鞋套! 呼吸道症状严重者戴口罩) 一次性用品管理J b定期到医院医疗设备科领取一次性 医疗用品!单独存放!专人管理!建立登记帐册4库房内保持干 燥“洁净“通风良好“温度适宜4对有包装破损“霉变“消毒日期 不清晰的产品应请示上级部门后统一销毁)c注射器“输液 器“针头等用后放入S C + _ P O a消毒液浸泡!专人专车清点后 送供应室销毁处理!由指定部门回收) T1 山东医药+ S S 5年第O 5卷第+ 5期