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1、I C S 6 5 . 1 5 0 B 5 1 DB1 3 河 北 省 地 方 标准 DB 1 3 / T 8 9 4 -2 0 0 7 中肋骨条藻人工培养技术规范 2 0 0 7 - 1 1 - 2 8发布 2 0 0 7 - 1 2 - 1 3实施 河 A L 省 质 E lp技 术 且 a督 F am i 发布 DB 1 3 / T 8 9 4 -2 0 0 7 . j J. . J . 月 g吕 本标准由河北省水产局提出。 本标准起草单位:沧州市水产技术推广站。 本标准主要起草人:李春岭、王振怀、高才全、杨树娥、孙玉华、李文敏、王淑芳、张金异。 D B1 3 / T 8 9 4 - 2
2、 0 0 7 中肋骨条藻人工培养技术规范 ， 范围 本标准规定了中肋骨条藻 ( S k e l e t o n e m a c o s t a t u m G r e v i l l e )的培养设施、培养液的制备、藻种、 培养等技术要求。 本标准适用于中肋骨条藻的人工培养。 2 规范性引用文件 下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有 的修改单 ( 不包括勘误的内容)或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方 研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日 期的引用文件，其最新版本适用于本标准。 G B 1 1 6 0 7 渔业水质
3、标准 G B / T 1 8 4 0 7 . 4 农产品安全质量 无公害水产品产地环境要求 N Y 5 0 5 1 无公害食品 淡水养殖用水水质 N Y 5 0 5 2 无公害食品 海水养殖用水水质 3 培养设施 3 . ， 选址 海水、 淡水水源方便，交通便利，电 力供应充足， 水质稳定， 符合G B /T 1 8 4 0 7 .4 的规定。 3 . 2 检测室 面积 1 5 m 2 - 2 0 耐，配备必要的水质分析仪器，生物检测仪器和必需药品。 3 . 3 保种间 面积 1 0 m 2 -2 0 m 2 ，配有冰箱、水温调节设施并具有配备光源的培养架。 3 . 4 清洗消毒间 面积1 0
4、 m 2 - 2 0 m 2 ， 室内 设有清洗水池、消毒池、加热设备等。 3 . 5 培养室 面积视生产规模而定， 东西走向， 便于采光，采用透光率8 0 % 左右的玻璃钢瓦覆顶， 侧窗的面积 占四周墙面积的5 0 %以上，房顶部设有白布调光，池水面上方 1 m处安装日光灯、碘钨灯等人工光 源。 3 . 5 . ， 培养容器 3 . 5 . 1 . ， 保种、扩种用容器 三角烧瓶 1 0 0 m l , 2 5 0 m l , 5 0 0 ml , 3 0 0 0 m l , 5 0 0 0 ml . 3 . 5 . 1 . 2 中继培养容器 玻璃细口瓶 1 0 0 0 0 m l 或2 0
5、 0 0 0 m l ，玻璃钢桶等。 3 . 5 . 1 . 3 扩大培养容器 水泥池:规格1 m ， 一1 0 m 3 0 3 . 5 . 2 培养池 规格1 m 3 -1 0 而 ， 混凝土建造， 池形长方形， 池深7 0 c m ，池底铺以白瓷砖或涂白色环保涂料， 池底有2 %-3 % 坡度向排水孔倾斜，排水孔直径以8 c m -1 0 c m为宜。 DB1 3 / T 8 9 4 - 2 0 0 7 3 . 6 进水管道 进水可用直径 1 2 c m -巧c m的P V C管，阀门采用P V C或尼龙阀门， 进水口用3 0 0目网布过滤，定 期清洗。 3 . 7 海水消毒池 一般用培养
6、池或高位水池代替。 3 . 8 其他设施 蓄水设施， 供水设施， 供气设施， 供热设施， 配电 设施参照D B 1 3 / T 5 1 9 -2 0 0 4中华绒鳌蟹天然海 水育苗技术规范。 4 培养液的制备 4 . 1 海水消毒 海水经沉淀及砂滤后流人培养池，向 水中加人含氯消毒剂， 有效氯含量达到2 5 m 留 L ， 存放6 h 7 h 后可用，使用前用N a 2 S 2 O 3 进行中和，经测定无余氯即可用于配制营养液和扩种时使用。 4 . 2 营养盐 按I m ， 消毒海水加N a N O 36 0 g , K H 2 P O 44 g , N a 2 S i O 34 .5 g ,
7、 F e C 6 H 5 O 7O .0 4 5 g , E D T A 5 g 营养盐，依 次加人，待一种溶解后再加人另外一种。 5 藻 种 5 . 1 藻种来源 采集天然藻种或购买藻种。 5 . 1 . ， 天然藻种 5 . 1 . 1 . 1 天然藻种分离 水样采集后，用水滴分离法分离， 得到初级分离藻种。 5 . 1 . 1 . 2 藻种预备培养 将分离的藻种，收集在装有培养液的器皿中预备培养。 5 . 1 . 1 . 3 藻种纯化培养 将预备培养的藻种再次进行分离得到更加纯化的藻液。 5 . 1 . 2 购买藻种 可直接用于扩大培养。 5 . 2 藻种的保藏 把中 肋骨条M -种放在
8、冰箱冷藏室 ( 3 c C - 5 9 C )中， 每天接受2 h -3 h 的弱光照 ( 5 0 0 1 x - - 1 0 0 0 I x ) . 1 5 h -3 0 h 更换一次培养液。 6 培 养 6 . 1 中继培养 6 . 1 . ， 培养容器 一般在室内用大的玻璃容器或塑料袋。根据需要可分为一级中继培养和二级中继培养。一级在 1 0L 的玻璃钢桶中，以封闭不通气培养为主，二级在0 . 5 m 3 1 . 0 m 3 的小型水泥池或塑料大袋中进行，以 开放式通气一次性培养为主。 6 . 1 . 2 培养方法 6 . 1 . 2 . 1 清洗消毒 所使用容器、工具要经过物理或化学方
9、法清洗消毒。 6 . 1 . 2 . 2接种 DB 1 3 / T 8 9 4 -2 0 0 7 6 . 1 . 2 . 2 . 1 藻种质量 镜检细胞颜色鲜艳，藻液呈黄褐色、生长旺盛，均匀悬浮于水中，无空细胞。 6 . 1 . 2 . 2 . 2 接种方法 8 : 0 0 -1 0 0 0 取上层藻种进行接种，接种后密度 1 万一3 万个细胞/ m l o 6 . 1 . 2 . 3 培养条件 光照3 0 0 0 1 x 6 0 0 0 1 x ， 水温2 0 9 0 , 2 5 c C ， 盐度2 5 3 0 , p H 7 . 0 -8 .5 0 6 . 1 . 2 . 4日常管理操作
10、6 . 1 . 2 . 4 . 1 充气 玻璃容器或塑料袋采用人工摇动或配备微型自动充气泵装置的容器的方法，摇动每天至少进行三 次，定时进行，每次0 . 5 m i n 左右;水泥池采用充气的方法。充气一般通人空气，充气时要对空气进行 过滤，微充气。 6 . 1 . 2 . 4 . 2 生产检查 每天做好生产纪录，观察水质变化，及时补充营养盐。 6 . 1 . 2 . 4 . 3 清除敌害生物 用3 0 0目筛绢过滤，连续过滤3 d , 1 次/ d a 6 . 2 生产性培养 6 . 2 . 1 培养容器 水泥池。 6 . 2 . 2 培养方法 见6 . 1 . 2 0 6 . 2 . 3 收获 经过3 h -5 h的连续充气培养，密度达到8 0 万一1 3 0万个细胞/ m l ，即可收获。