DNA疫苗的分子佐剂研究进展及其在鱼用疫苗中应用.pdf

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1、免 疫 学 杂 志 第22卷第3 期2 仪 巧年6 月I M M U N O LOG I C A-L J O U R 外 A LV o l . 2 2N o .3J u n eZ ( X 沁5 7 3 。 文章编号 1 ( 拟弘 8 8 6 1 ( 2 (X 巧 ) 0 3 ( 5 ) 一 (X)73一 以 D N A疫苗的分子佐剂研究进展及其在鱼用疫苗中应用 郑风荣 ， 刘洪 展2 ， 孙修勤“(l. 国 家 海 洋 局第 一 海洋 研究 所 生态 室 ， 山东青岛2 6 6 061 ; 2 . 山 东 大学 威 海分校海洋学院 植物学教研究， 山东威海2 642 09) 摘 要 D N A

2、 疫苗是一种能诱生机体产生免疫应答的新型疫苗， 近年来成为一种新的研究热点， 但存在免疫效果低的 缺点， 为优化D N A 疫苗的免疫效果， 人们开始研究一类新型的D N A 疫苗分子佐剂。 本文简述了当前DNA 疫苗中 几种常用的 分子佐剂如细胞因 子、 C 沁 O D N 及其在鱼用疫苗中的应用。 【 关键 词D N A 疫苗; 分子佐剂; 细 胞因 子; C p G- O DN 中图分类号 邢92; 59 文献标识码 A a d V 8 ll C e sin adju v a n t for D N Avac c i n e s a n d itsa P P I i c a t 1 on

3、 infi shv a c c i nes z H E N GFe n g 一 ro n g ， LI UH o n g 一 z h a n ， S U NX iu 一 q in( Fi rs t 加t i t u teofocea l汉 )g m l 柳，S ta t e o c e a n icA dmin is t ra t 勿 n Q i 刀 g dao 2 6 6 0 6 1 ， Chi na) D N Av a c c i nei s a ne wk i n d ofv a c c i n e whi c h c ani n duc e o r g a I1 1 sm t o 脚d

4、uc e i nun u n e re s 卯n s e a ndbec ome s a n ew re s e 毗h hots pot . Toi m p rove i mmunee 价c t ofD N Av a c c i ne， re s e 叽; beg a l l C y t o ki n tos t u d y a new geneti c adju v ant fo r D N Av ac c i n e . 肠s P a per 。 z e s s e v e 司 邵 n e ti C a dj u v antS fo r D N Av ac c i nei n c ornm

5、on u se(and C p C-O D N ) an d their 娜l ic ati o n in fi s h v a c c ine s . Key w o n 如 D 队 v a c c i ne s ; 诀n e t i c adju v ant ; C yt o ki ne; C p ( 弘 O D N D N A 疫苗自1 9 90年发现以来， 因 其具有良 好的 安全性及可诱导广泛的体液免疫和细胞免疫， 已逐 步显示出巨大的潜力， 越来越受到人们的关注， 成为 继减毒疫苗、 灭活疫苗、 亚单位疫苗和重组多肤疫苗 之后的新一代疫苗。然而， 国内 外研究表明， D N A 疫

6、 苗也存在着明显的不足， 即现有各种核酸疫苗诱导 的免疫应答效应往往比常规疫苗接种引起的免疫反 应 弱， 需采取 措施强化免 疫应答 二 ， 这就给D N A 疫 苗的研究提出了新的挑战， 因 此， 新型疫苗佐剂已成 为当今倍受关注的研究热点。 作为D N A 疫苗的分子佐剂主要是指将某些分 子的基因， 与D N A 疫苗所编码的抗原基因共同应用 于机体后， 这些分子基因的表达产物( 与抗原融合或 非融合两种形式) ， 可通过募集和活化淋巴细胞， 促 进疫苗编码抗原的 摄取、 加工和提呈， 刺激协同刺激 分子表达和细胞因子分泌等作用， 调节疫苗编码抗 原所诱导的免疫应答的强弱和方向， 提高疫苗

7、的效 力。目 前， 应用于核酸疫苗的分子佐剂主要有细胞 收稿日 期 2 ( X 5 一 1 0 一 抖; 修回日 期 2 以 巧 一 1 2 一 2 3 【 基金项目 J 国家“ 8 63” 资助项目 ( 2 朋 3 A A 6 2 2 03 0) 【 作者简介 郑风荣( 1 97 5 一 ) ， 女， 山东 德州市 人， 博士， 主要从事分子 病 毒与免疫学方面的研究。( rre l ) 1 3 1 5 印 3 5 1 5 6 ; ( E 一 mai l ) I vdi a 7 粼 刃1 63 . c om * 通讯作者 因子、 C p G 一 o D N 和c 3 d 。 1 细胞因子 细

8、胞因子是体内免疫细胞或非免疫细胞产生的 一组具有广泛生物学活性的异质性肤类调节因子， 在体内能激活和调节免疫活性细胞， 对免疫应答的 产生和调节具有重要作用。近年来人们发现多种细 胞因子( 如C 初 一 C S F 、 I F N 一 丫 、 I L 一 2 、 I L 一 4 和I L 一 1 2 ) 具免 疫 佐剂作用， 可不同程度的增强 D N A疫苗的免疫效 果， 并可引导机体免疫朝有利的方向转化， 有重要的 理论和 实用价 值国。 1 . 1 白 细胞介素2(IL 2 ) I L 一 2 最重要的 作用是 诱 导T 淋巴细胞增殖， 增强细胞间的接触和诱导细 胞 分泌细胞因子， 可诱导

9、T细胞和N K细胞产生I FN- 7 ， 当以D NA 表达质粒形式与抗原在抗原递呈部 位 共同接种后， I L Z 可有效增强针对抗原的B细胞 及 T 细 胞 应 答川 。 Bu等 侧 将IL 一 2 质粒与I El so质粒 共 同免疫C3H/H e J 鼠， 提高了伪狂犬病病毒IE1 80D NA 疫苗的 免 疫原 性和 保护 力。 冯 新 港等5j 将I L 一 2 基 因 与日 本血吸虫Sj FAB PcD N A 疫 苗共同 免 疫小鼠 ， 结 果表明 基因佐剂Pc D 一 I L 一 2 具有协同Pc D 一 Sj FAB Pc增 强免疫鼠细胞免疫应答的作用， 并可刺激I LZ

10、、 I FN- Y 等细 胞因 子的 产生， 而 特异的1 舀抗体 的 产生 则 不 依赖该基因佐剂的作用。 5 7 4免 疫 学 杂 志第 2 2 卷 1 . 2 白细胞介素1 2(IL 1 2)I L 一 12又称细胞毒性 T 细胞( C TL) 成熟因子和自 然杀伤细胞( N K ) 刺激因 子， 与I L Z 有较强协同作用， 起内源性佐剂的作用。 IL 一 12已成功的用于肿瘤的免疫治疗， 可有效的对抗 实 体肿瘤困。 zhu 等构建了分别表达I L- 12两个亚 基p 3 5 和娜 的 质 粒p c D N A 3 . 1 玛 5 和Pc D N A 3 . 1 1科 0 ， 发现

11、可显著增强日 本血吸虫磷酸丙糖异构酶 D N A 疫苗诱导的 抗血吸 虫感染的 保护性免疫力川。 1 . 3 干扰素 Y(肠 N Y)I FN一 y 能增强细胞毒性T 淋巴细胞( C 孔) 和N K 细胞杀伤靶细胞的能力， 诱导 细胞表达IL 一 2 受体， 从而促进T 细胞增殖， 进一步增 强 细胞免疫应答3。 Gu。 等s发现I FN一 下 基因 佐剂 能增强刚地弓形体棒状蛋白1 ( R O PI) D NA 疫苗的细 胞免疫应答， 如增强脾 T淋巴细胞、 N K细胞活性和 血 清中I FN一 Y 、 I L Z 、 N O 的 活 性， 但 对1 娇抗体水平没 有影响。 1 . 4 白

12、细胞介素4 ( IL. 引凡 m等叫 在研究H c v 核心抗原D N A 疫苗时发现， I L 4 质粒也能如I L Z 和 G M 一 C S F 一样使血清阳 性转化率明显增高， 但对C TL 活 性 却 呈抑制 作用。 Song 同 样发现I L 一 4 与c E A 表 达质粒共免疫可诱导高水平的T ll 2 型免疫反应， 但 抑制C TL活性， 因而不能产生抗瘤效应 。 。 1 . 5 粒细胞一 巨噬细胞集落刺激因子( C M. C SF) G M 一 C S F 能诱导分化、 增殖和活化多种免疫活性细 胞， 诱导体液和细胞免疫， 是另一种新型的免疫佐 剂， 在免疫应答反应中， G

13、 M 一 C S F 主要通过调节抗原 递呈细胞的数量和功能来增强免疫应答强度， 促进 IL 一 2 分泌及C D4 T 细胞增生， 从而使抗体及 C D S + T 细 胞 增 加。 Se de sah 等的 研究表明， 疟疾巧 CS P D N A 疫苗和G M 一 C S F 质粒联合免疫， 结果表明C M 一 C SF质 粒可使抗体水平、 I FN一 y 分泌水平及 C TL 活性增 高 川 。 GM一 c s F 质粒在D N A 疫苗免疫前3 d 注射能 诱导T ll 2 型占 主导地位的应答， 而在D N A疫苗免疫 后3 d 注射， 则主 要增强Thl 型应答 2 ) 。 Z

14、C PG O D N 传统佐剂绝大多数以诱导体液免疫为主， 体液 免疫在抗细胞外病原体或可溶性毒素导致的 感染中 提供保护作用。但对于肿瘤和细胞内感染， 细胞免 疫可提供重要保护作用。C p G 一 O D N因能诱导强烈 的Thl 型免疫应答， 增加细胞毒 T 淋巴细胞( C 几) 的活性， 故成为Thl 佐剂的研究热点之一。 C l G 城 D N是一种强有力的D N A疫苗佐剂。 D a v i s 等 用C p G 一 o D N 做H B vD N A 疫苗的 佐剂， 可明 显 增加大猩猩的血清转化以及抗体滴度， 这是C p G - O D N 首次在猿上的报道， 该实验直接促成了C

15、 p G 在 人 体内 的 研究 ” 。 Te w 卿等 4 将C p G 一 o D N 与 含有 利什曼原虫( his ll ll犯 Ili a ) 可溶性蛋白S A的核酸疫苗 联合免疫 B al b/ C小鼠， 可显著提高保护率， 并诱导 Thl 型细胞免疫因子I FN一 了 、 I L 一 12以及 l gGZ 。 的产 生， 从而增强了Thl 型免疫反应。 3 细 胞因 子及C PG. O D N 在鱼 类核酸 疫苗中 的应用及展望 近年来， 水产养殖业逐步向集约化、 产业化发 展， 大规模高密度养殖和水环境的污染致使水产养 殖病害日 趋严重， 特别是病毒性传染病造成的损失 非常惊人

16、， 经济损失严重， 已成为21世纪水产养殖 业发展的重要制约因素。 作为化学药品和抗生素的 替代品基因工程疫苗是治疗病毒病的最好选 择。 但由于鱼类免疫系统与其他脊椎动物免 疫系统 差异， 对鱼类免疫系统的研究相对来说比较薄弱， 特 别在我国对鱼类免疫学的研究比 较晚， 世界水产界 核酸疫苗的研究也处于起始阶段。目前， 国外关于 鱼类 D NA 疫苗的研究主要集中在 IHN E 、 I PNV 、 E v A 、 E v E x 、 跟v 、 文哈病毒以及蛙鱼疮痴飒等 5 。 鱼类中常用的细胞因子有 I L 一 2 、 I Llb、 I L 一 4 、 I L - 5 、 I L 一 6 、

17、I L 1 2 、 C M 一 C S r 和I N F 一 了 等。 这些细胞因子一 方面调节机体的特异性免疫反应， 另一方面增强机 体的 非特异性细胞免疫。 有研究表明， I L 一 1 、 I L 一 2 、 IL- 4 、 I L 6 对鱼的IHNV 病毒多肤和D NA 疫苗有免疫促 进作用， 发现I L Z 能强烈增加疫苗的免疫保护效应。 D av i S 等 19 97年研究表明 G M 一 C S F基因与 hcZ 基因 共同注射人鱼体内， 则促进转染肌肉 纤维的消 失( T 细胞毒细胞的间接的方法) ， 但不诱导抗体反 应的 产生 6 1 。 K a n e llo S 等的

18、研究表明， 鼠GM一 c s F 基 因与抗原编码基因共同注射人金鱼体内， 可调节细 胞免 疫反应t 7 。 研究表明鼠G M 一 cs F 基因 在鼠中的 的佐剂作用是因为细胞因子本身的作用， 而不是 G M 一 c sF质粒中的c p Gmoti fs的作用。GM一 c sF在金 鱼体中促进转染肌肉 纤维的消失的现象表明鼠C M - C S F 增加细胞免疫的机制或许与在鼠中增加C D S + T 细胞的机制相似， 但鼠G M 一 C S F 基因增加金鱼的免 疫功能的机制还需要进一步的研究， 因为C DS十 T细 胞在哺乳动物病毒感染过程中有重要作用， 这个发 现或 许对 鱼的 免疫 功

19、 能的 研 究有重 要的作 用 ” 。 含未甲 级化的C p cmoti fs寡聚 脱氧核 昔 酸具有 免疫刺激活性， 是高等脊椎动物的有效的免疫佐剂， 但在鱼类中的研究则很少有报道。J I )rg e n s en等报 道， 利用质粒脱氧核糖核酸和人工合成的、 含 有未甲 基 化C p G 的 寡聚 脱 氧核昔 酸( c p G 一 O D N ) ， 体 外刺激 大西洋鲤鱼48 h 后， 在细胞培养上清液中可检测到 第 3 期郑风荣， 等 . D N A 疫苗的分子佐剂研究进展以及在鱼用疫苗中 应用 5 7 5 很强的抗病毒活性， 并认为是 工 型和n型I FN 的混 合物; C p G

20、一 O D N 还能促使以巨嗜细胞为主的勃附细 胞数量的激增， 但使非勃附细胞数量增加的作用微 弱 8 二 。 用c p G 一 o DN 与 虹蹲巨噬细胞作用s h 后， N o rthe m杂交显示IL 一 1 日 的表达量增加， 而经氯哇处 理的 细胞再与C p G 作用， 则发现其表达受抑制， 远 远低于未经处理时的水平。因为氯喳是一种包内酸 化的 特异性抑制剂， 所以， C p G 一 O D N 是经内 吞 作用进 人细胞， 经一系列的信号传导， 从而激活免疫细胞的 功能的 9 。 但o ulno un a 等 却报道， 刺激鳃鱼高纯 度 非特异性细胞毒细胞( no ns pe c

21、i fic细胞毒素的单元， N C C ， 与高等动物中N K 细胞作用类似) ， 可产生两种 含很强细胞杀伤活力GC 的序列: 5 找 刀 U C T T 户 3 和5 - 从G C T T 户 3 为 。 M e n g 等研究了几种c p G 基序对体 外培养草鱼巨 噬细胞的活化作用， 表明c p G 基序能 增 强 杀 菌 活 力， 并 呈 剂 量 依 赖 效 应 训。 目 前C p G 基 元对鱼类的作用机制还不清楚， 但通过提高质粒中 C p G S 数 量并降低C p G 一 N的 数量， 有可能在减少脱 氧核糖核酸疫苗用量的同时获得同等免疫效果。 不同类型的免疫反应对某一特定疾

22、病的发生发 展可产生不同的甚至相反的作用。因此佐剂对D N A 疫苗诱导的免疫应答就显得非常重要。佐剂种类、 剂量大小、 加人方式和加人与否， 无疑成为影响鱼类 核酸疫苗免疫效果的重要因素， 应针对不同疫苗选 择相应的佐剂， 使免疫效果得到最佳发挥， 作者在研 制的牙虾淋巴囊肿病毒的核酸疫苗生产应用中， 使 用了 几种C 沁o D N ， 以期 为水产养殖业病毒性疾病 开发新型治疗佐剂。 参考文献 1 2 仁 5 Ferna ndezA I o nso M，R 以 Z h aA ，C on J-M .D N Av acci n a t i on 场i lnmersio n a ll d l 山

23、 阳 段 ，und to加utvi rall l a e morrh吧c se p t i - c a enua v iru s J . v a c c i ne， 2 (刃 1 ，1 9( 2 3 / 24) : 3 067 - 3075. P al l ，ndiraU ， K a n l a l 卜 AT， F e n g C G ， e t 以. C oe x l ” s s i onof i nt erle uki， 1 2c 俪ns场 ase lf- 印 l i c i n gv e c t ori nc re as e s th e p n 或 ectivec e l lu l a

24、ri on 拐 p II Seof】 ) N 八 朋 d 峋c o 】刃 c l e ri uln 场 访 s B c Gv ac c i ne s a g 田 nstM y c o b a c tenum n ll犯 。 ul os i s J . I nfec t L l u l l l川， 2 刃 2 ， 7 0( 4 ) : 1 9 4 9 一1 9 5 6 . 邢同京， 章廉. Th 类细胞极化群体的基础与临 床 M . 北京: 军事医学科学出版社， 2 00 2 : 1 1 一 12. B u J ， 5 用 g y ， 肠n p ato G ， eta l . C * de l

25、ive 巧ofI L Z orli - po som e s au gme ntthe re s po n s e s of而c e t o a DNAv ac c i nefo r 详 e u do r a b ie s vi ru s l E 1 8 o J . C o 呷 I n u ll u ll oM ic ro 扬 oll n - fect 肠5 ， 2 (X)3 ， 2 6( 3 ) : 1 75一 1 8 7 . 冯新港， 余新炳， 吴忠道， 等. 以pe D 一 I L Z 为基因 佐剂 的 含日 本血吸虫Sj FAB Pc基因真核表达重组质粒裸 D N A 免疫小鼠的研究

26、J 中国人兽共患病杂志， 2 印1 ， 1 7( 6 ) : 7 一1 0 . 仁 6 N i s hi ta 垃M A ， S a ka i T ， I s hi i K ， 。 t a l . AC o nv e ni e n t C a n c e r v ac c i ne th e ra 盯初 t hi n : 卿 tran s fe r o f i n t e rl e u k i nl Ze x p 】 5 - s i o n Pl asmi d u s i n g 罗 n e 即nt e c ll ll o o gy afte r p ri rni雌 wi t h ir - r

27、a di at e dC arcin o rna C e ll S J .C a n c e rGen e The r ， 2 (X)2 ， 9 ( 2 ) : 1 5 6 一1 6 3 . 7 z h u y ， s i J ， H am D A ， e t 以 The nrot e c t iv e i nun画ty四- d u c e di ni nfec te dC 5 7 B IJ 6而c e ofaD N Av ac c i n ee nc o di ng Sc hi s to so maj a p ni c umC hi ne se st rain t ri o s e 一 户o

28、 s p h ate i some rase 仁 J . 阮 u th e as t A s i anJ TropM e d 乃 1 l i c H e al th ， 2 (X)2 ， 3 3( 2 ) : 2 07一 2 1 3 . 8 Guo H ， C h e n G ， LuF ， e t 成 . I mmu ni tyinduc e dbyD N A v a c c i n e ofPl as 而de n c oding t h e rhOI 力 )p o t e i nl gene c o m - hi ne d wi ththe g e l1 e tica dj uvant o

29、fPc I FN一 g aj l刀 刀 a a g 乏 Ii n st To xo - Pl asma即 ndii i n而 c e J . C hi nM e dJ ( E ngl) ， 2 田 1 ， 1 1 4( 3 ) : 3 1 7 一 3 20. 9 儿 mJJ ， S I Inbi ri KA， S i n 卫 ， et 耐 . C yt o ki nemol e c ul ara dj u - v a n t s m odul ate i mmunere s Pon s e s i I1 d u c e db yD N Av ac c i ne c o n s n 1 Jc t

30、s for” 1 、 一 l an d s l V J . J ln t e l企 11卫 C yt oki n e R es ， 1 创 为， 1 9( 1 ) : 7 7 一 84. 1 0 50 飞K ， C hang Y ， 1 11 111 ， 11 O m l” e GJ. R e gulat io n of不 h e l险 I versus T-hel per . 2ac ti vi tya n d e nhanc e mentoft uInori Inmu - ni t y 场 c o lnbi n e dD N A 一 ha s e dv ac c in at i o na

31、ndno n v i ral c yt o - h ne罗 n e 恤sfer f J 口 . 诀n e Th er ， 2 0 以 ) ， 7 ( 6 ) : 4 8 1 - 4 9 2. 1 1 Se de gah M ， W e i s s W ， S ac c i J B Jr ， et以. 1 o n ro v i n g nrote c - t i v e i nu-namtyi n duc e d 场 D N A 一 b as e di mmu n i z ati o n : Pn而 n g wi thanti ge n an d ( ; M 一 C SF-e nc诫ngp l

32、asnu d D N A and haosti ng wi t h anti 罗 n- e x p l s s in g re c O n lb in ant l洲 以 、 iru s J . J b llll ll l- nol ， 2 以 刃， 1 64 ( 1 1 ) : 5 9()5 一 5 9 1 2 . 1 2 K 日 s a k a l犯K ， 兀 n KQ， Kato h H ， et以 . Th e t i 而 嗯。 f G M - C S Fe x p l s s i o n Pl asnu d a 山 1 1 i ni s trati o ni nflu e n c e

33、s th e Thl 门 ，1 己 re 铆n s e i n duce d 场a n H W一 1 一 孵c ifi cD N Av ac c i n e J . J I mm unol ， 2 I X)， 1 64 ( 6 ) : 31 02一 31 1 1 . 13 D av is H L ， 狮aIto 1 ， Wee ratnaRR， et以 . C 沁 D N A over - c ome s h 卿re s 即 ns iv e n e s s t ohePat i t i sBv ac c i ne i no ran即 - tans J 丁V ac c i n e ， 2 (X

34、刃 ， 1 8 ( 1 8 ) : 1 9 20一 1 9 24. 1 4 T e w a ly p ， Pa n dy a J ， M e h taJ ， 。 t 以 . v ac c in at i o n 杭th玫 is h - InaIU a SO l llh e an ti ge nan dilnlnunosti n li 习 at ory oligo d e O x ynu- c l eoti desi n d uce ss 伴c ifi ci mmumty a ll d四t e c t i o n哪i ns t 玩i s ll l l l a l l l a do no v o

35、i nfec t i o n J . FEM S i n l n l l u l o l M e d M i - c robi o l ， 2 1 碎 ， 4 2( 2 ) : 241 一 248 . 1 5 儿 mC H ， J o h n so nM C ， D re nnanJD，。 t al . D N Av ac c ine s e n c 诫n g v iral脚c O 11、 t e i n s i n d uc e n o n s l洲 王c ifi c immurutyand Mx p rote in s y nt h e s is i n fi sh J . J v i r

36、o l ， 2 (众 ) ， 科 ( 1 5 ) : 7以8一7054 . 1 6 D av i 。 H L ， M ill an C L ， W at 知 nsS C .I mmune一 m e di at e d de - s truc ti onoftran sfec t e d m u s c l e 五 1 1 ” 苍 afte r d i rect g e n e ll飞 幻 司 毛 r wi t h an t i罗 n- ex nres s i 嗯p lasmi d D N A仁 J . Ge n e The r ， 1 期， 4( 3 ) : 1 8 1 一1 8 8 . (

37、下转第 79页) 一一J 气j4 rLLesesL 第 3 期章卓 . I R A K 家族中TI R 信号通路的关键因子5 7 9 物靶点 的手段 ， 开发出新的抗炎药物， 将为感染控制提供新 参考文献 1 rl l lO mas JA， Alle n JL， 确n M ， et 以. I n lp 一 a i r e d 。 yt o 拓 nes i g - 11 习 ing in 而ce l ac 拓 ng th e ILl rece Pt or- iat ed ki nase J . J l mi l ll ll l ol ， 1 塑 刃 ， 1 6 3 ( 2 ) : 97 8 一

38、9 84. 2 UX ， Q i n J . M 仪 11 il a t io n ofTo ll 一 Interle 南n- I R e C ePtorM e - di at edsi g ll a l ing J. J M ofM ed， 2 005 ， 83(4) : 25 8 一 266 . 3 Rosati O ， 呱ch ael M U . 1 d e n 1 ifi c ati onan d c h a m c te ri zationof m urin e l 凡 区 ， 2 J . B i oc ll e n 1 B io p ll y s Res C o mmun， 2 朋

39、 2 ， 1 3 ( 2 9 7 ) : 5 2 一 5 8 . 4 M a tt llew PH ， L Ik e A ， N ei nJ O . 叨 1eM urine 1 Ia k2 E l1 C od es F our 从 te ma 一 ti v elv SPlic edl so 五 n 刀 5 ， T w o ofW l l i chAre l n ll i - bitory J. J Bi olC he m ， 2 (X 抖 ， 27 9(26) : 276 卯一 277 0 8 . 仁 5 H u ang Y ， UT ， S a n e 氏， et 以. I r a k l

40、se rves asa novelre gu - l ator es se nt ialfo r li po 砰 刃 y sacc ll面de-in d u 峨 edi nted e 一 山n- 10 罗 nee x l re ss ion J . J B io C ll e ll l ， 2 仪 又 ， 刀 9( 妇) : 5 1 的 7 - 5 17 03 . 6 凡 shi二M ， N 苗 t o s . Ti s s ue-s pe C ili c ll 讯 N Ae x l 比 s s i on四- fi l e s ofll t u ll 田 l toll一 li k e re c

41、 ePtors and rela t e d 罗 ne s J . B io l P l lanl l B ull， 2 (X)5 ， 2 8 ( 5 ) : 8 8 6 一 8 92. 7 场ker MV， G aj arM M ， N airsK. M olec L Il arstIuc 俪 ofThe l1 R-as soci a t e dki nase-4d e a t 11 don l a 1 nanditS i m p 1 1 c ati on for rn 卫 5 1即 al i 飞 J ，Jl ll u n 山 1 0 1，2 田 5 ， 1 7 5 ( 7 ) : 41 7

42、 5一41 7 9 . 【 sy 田 11 a m o toM ， 尸r a k e d a K ， Akio5 . ” Rd O 11卫 lin- co ntalni ng a d a p t O rsdefinethe spec 币 ci tyofT I 丑si gna一 li ng【 J. M olh- 皿u lo 1 ， 2 (X)4 ， 40 ( 12) : 861 一 8 68. 【 9 H t la n g YS， hLW. Novelrol e and r e 孚 司 ati onof theint erl eu - 峪 间 rece p t o r as soci a te

43、d kl nase ( I B A K ) 1 由 正 卜Protei ns J . C el l M oll nununol ， 2 (X)5 ， 2( 1 ) : 3 6 一 3 9 . 仁 1 0 Bol GF， 加 m l la llll N ， B ri seliu s 而heF . C ell u lall 斑 吐 i c k i飞of th e几1 班一 as sociated ki nase-1re quiresi I 1 Ia c tki naseac ti - vi ty J . B i oc he mB io Phys Res C ommun， 2 朋 5 ， 3 3 2

44、( 1 ) : 27 9一2 8 7. 1 1 q n 卫 ， J i缨 2 ， Q ianY ， et 以 . I R A K 4 裕 nase ac tiv ity is re - d ll lld a ll l for interle than- 1 ( I LI)re c e p t o 卜 as sociat ed 场 nase Ph o s p h o 叮 l ati o n and I L lre 卿ns ive n e s s J . J B i oC I记 功 ， 2 以 又， 2 7 9 ( 2 5 ): 2 6 7 48一 2 6 7 5 3 . 1 2 S tr e l

45、 o wA ， K o l l ewe L ， Wesc h eH . C l l a r a c t eriZatio nofPell i no 2 ， a subs ll a t e ofl l 认K l an d 1 R A K4 J. 几BSI 无 t t e rs ， 2 (X) 3 ， 5 4 7( 1 / 3 ) : 1 5 7 一1 6 1 . 【 13 M edve de v AE， TholnasK ， A w O m o y i A ， et以 . cutti ng找 Ig e 二 ex 衅s s i on OfI Llre c e p tor-as sociatedki

46、 nase- 4( I R A K 喇 4 ) p ro te i nswi t h lllu ta t i o nside n t 饭 ed ina Patie niwi th溉urre nt b a c l e ri al i l 此c t i o n s al te rsn O n 刀 all R A K . 4i nie r a c ti on 衍th c o n l - 印 n e ntsofthe I L l re c e Pt o r c o n l p lex J . J l llu ll u n ol ， 2 田 5 ， 1 74( 1 1 ) : 6 5 8 7 一 6 5

47、 9 1 . 1 4 J e n se nLE， W ll it e he ad ASI R A K l b ，anove l alte 耐 iv e snlic evan ant of interle ukin 一 1二 c ePtor-as soci a ted 拓 nase ( I R I、 K ) ， medi ates interle u k in- 1 si g l1 al i ngand 肠 p ro l l用 g e d 引 目 五 li ty J . J B io l C he m ， 2 0 0 1 ， 2 7 6 ( 3 1 ) : 290 3 7 一 2 9 州. 1

48、5 、 ra l l娜sawa K 厂 1 魂 O K ， H a y a k 洲 a M ， et以 . A novels nli ce v 面ant of mousei l lt e r l e t l ki n-1 一 Iece P to 卜 as 眠iat ed ki nase 一 1 ( m A K ， 1 ) ac ti vate s nucle arfactor-k a p p a B( NF-k a p l坦 B) and c -J t ll l 阵t e n l u nal ld nase( J N K ) J .JB ioc he m，2 印 3 ， 3 7 0 ( 1 ) : 1 5 9 一 1 肠. 【 16 lK 0 b a y as h i K ， H e n l a ll IezLD， GalanJE， et以 . n 认k 户 Mis a 11e g a t lv e re 孚 il a lo r oftoll一 li ke ， ce p to r si g 司 ing J . C ell， 2 (X 犯， 1 1 0 ( 2 ) : 1 9 1 一 2 0 2 . 1 7 wie tek C ， 0 N e i ll以。 I R A K . 4 : Anew dlug t 山 书 e t