IL-1β对体外培养不同时期的小鼠早期胚胎发育的影响.pdf

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1、中国煤炭工业医学杂志2 0 0 6 年2 月第9 卷第2 期 1 8 7 基础论著 文奋编 号1 0 0 7 一 9 5 6 4 ( 2 0 0 6 ) 0 2 一0 1 8 7 一 0 3 I L 一 1 R 对体外培养不同时期的小鼠 早期胚胎发育的影响 4 6 7 0 0 0 河南省平顶山市第一人民医院妇产科丁月红 华北煤炭医学院袁丽杰 昆明医学院第二附属医院妇产科马兰苏莹杜玲周红林 关健词 I L一 1 (i , 0 - 胎. 体外培养 * 0率; 解化率; 小盆 摘要目 的研究白 细胞介素一 1 p ( J L一 1 闭对伟外培养不同时期的小舰早期胚胎发育的影响 方法收集J C R小鼠

2、2 一 细胞胚胎， 连续培养9 6 h , 观察I L- 1 日 对不同发育时期的早期胚胎的影响。 结果 在胚胎发育的4细施期, t3 细胞期加入I L -1 (i 可以捉高囊胚发 育率( P 0 . 0 5 ) ; 在胚胎发育的8细胞期加入I L -1 p ， 交胚发育率高于在胚胎发育的2细胞期, 4细胞期 时加入I L - 1 p O 胚发育率( P 0 . 0 5 ) .结论 在着床前不同发育阶段的胚胎， 对I L- 1 P 的蓄要是 不同的， 并随着胚胎的逐渐发育对比一 邓的需要有增加的趋势 E F F E C T O F I NT E R L E U K I N一1 pON E AR

3、 L Y MOU S E E MS R O I N V A R I OU S S T A G E S I N VI T RO Di n g Y u e h o n g, Y a a n L i j i e , Ma L a n , e t a l . De p a r tme n t o f G y n e c o l o g y a n d Ob s te t r i c s , T h e . Fir s t P e o p le Ho s p i t a l o f Pi n g d i n g s h a n , P i n g d i n g sh a n 4 6 7 0 0 0,

4、C h i n a K e y w o r d s I L 一1 (3 ; e m b r y o ; i n v i t r o; b l a s t o c y s t r a t e ; h a t c h e d b la s t o c y s t r a t e ; m o u s e A b s t r a c t O b j e c t i v e T o s t u d y t h e e f f e c t s o f I L一1 R o n t w o一c e l l m o u s e e mb r y o s c u l t u r e d i n v i t r o

5、 i n v a r i o u s s t a g e s Me th o d s Tw o 一c e l l e mb r y o s c o ll e c t e d f r o m I C R一t r ic e w e r e c u l t u r e d f o r 9 6 h o u r s , t h e n t h e e f f e c t s o f IL一1 p o n d e v e l o p m e n t o f e m b r y o s i n v a r i o u s s t a g e s w e r e o b s e r v e d . R e s

6、 u l t s Ad m i n i s t r a t i o n o f I L一l o in 4一c e l l a n d 8 一c e l l s t a g e s o f e mb r y o s i n c r e a s e d b l a s t o c y s t r a t e s ( P0 . 0 5 ) ; b l a s t o c y s t r a t e s o f I L 一 l o i n 8 一 c e l l s t a g e s e m b r y o s w e r e s i g n i f ic a n t l y ( P O . 0 5

7、 ) . C o n c l u s io n D e ma n d o f I L一l o in p r e i mp la n t a - t io n e mb r y o s in v a r io u s s t a g e s is d if f e r e n t . a n d t h e r e i s a n i n c r e a s in g t r e n d wit h t h e d e v e l o p me n t o f e mb r y o s . 中 图分奥号R 一 3 3 2文献标 识码A 目前， 由于各种各样的原因， 不孕症有逐年增加的趋势。 辅助

8、生育技术( 俗称试管婴儿) 是解决这一难题的重要手段之 一。但是目前试管婴儿技术成功牢较低， 在全世界范围仍仅 为2 5 纬. 3 4岁后成功率下降。如何提高成功率是各个辅助生 殖中心所要解决的问题。解决这一问题需涉及许多方面， 如 超排技术、 体外胚胎质量和胚胎移植技术的提高等等， 其中提 高体外胚胎质量是提高辅助生育技术的关键之一。目前在体 外培养大多数胚胎( 约7 5 ) 发育不能超越 2 -8个分裂球 期 1 0 ， 因 此大多 数辅助生殖中心是将此阶段的胚胎移植至子 宫内。近年来研究表明在囊胚期胚胎移植可增加种植率“ 7 尤其对以前反夏种植失败的妇女n . 3 。对于在囊胚期移植胚

9、胎， 有许多优点， 如能保持子宫内膜与胚胎发育之间在时间上 的一致性， 能在较长的培养期间选择更好的胚胎等D I 。如何 使 体 歼 培 养 的 胚 胎 更 多 的 从2 - 8 个 分 裂 球 期 发育 到 囊 胚 期， 关键是如何改变体外胚胎培养体系使体外环境更接近体内的 内环境。在化学成分明确的培养基中增加或去除某些成分， 有利于探讨胚胎的体外发育机制. 并有可能使胚胎体外发育 环境更接近体内悄况。其中在培养基中加人细胞因子是目前 的研究方向之一。本项 目拟研究白细胞介素 一l p对不同时 期小鼠早期胚胎体外发育的影响。 1 材料和方法 1 . 1 选取动物及饲养选取8 - 1 2周龄，

10、 体重为 2 5 -3 0 g的 雌性未交配的工 C R小鼠( 昆明医学院动物科提供) 。喂普通 小鼠饲料， 自由饮水、 摄食， 自然光照。 1 . 2 化学试剂和药品白细胞介素- 1 p ( IL - 1 困购自 美国 R邑D公司; 无菌磷酸盐缓冲液( P B S ) 由中科院医学生物所提 供; 孕马血清促性腺激素( P MS G) 购自天津华孚高新生物技 术公司; 绒毛膜促性腺激素( HC G) 购自丽珠集团; 牛血清白 蛋白( B S A ) , 矿物油、 配 M1 6液和 B M- HE P E S液的各试剂 均购自美国S i g ma 公司. 1 . 3 实验所用液体的配制 1 .

11、3 . 1 M1 6培养液及B M一HE P E S液的配制在电子夭平 秤上按 M1 6 培养液及 B M一H E P E S液中所含各组分称取各试 剂所需量， 依次加人 Min i 一Q纯水中溶解， 即得 M1 6 培养液及 B M - H E P E S 液。 溶解后用。 . 2 2 p .孔 径的 徽孔膜过滤 1 . 3 . 2 I L - 邓培养液的配制将I L - 邓加人M 1 6 培养液 中配成浓度为 0 . l n g / ml 的含 I L一l p的培养液. 1 . 4 各种皿的准备放人3 7 C1 5 %C O l 湿润培养箱平衡至 少 2 h 待用. 1 . 5胚胎的收集和

12、培养将每只雌鼠腹腔注射 P MS G l o l u， 造成超排卵刺激， 4 8 h后腹腔再注射 h C G 1 0 1 U. 促卵泡 成熟， 注射 h C G后， 按雌 : 雄鼠比例 1: 1合笼交配， 第二天 将雌雄鼠分笼， 发现阴拴者认为妊娠第一夭。在妊娠第二天 用颈椎脱臼法处死雌鼠。迅速将已处死的小鼠放在处理台 1 8 8 C h in e s e J o u r n a l o f C o a l I n d u s t r y M e d i c i n e F e b r u a r y 2 0 0 6 , V o l . 9 , N o . 2 上， 在无菌条件下剪开腹壁进人腹

13、腔， 取出双侧输卵管放人含 B M He p e s的皿中， 移人体视显微镜下， 将受精后达2细胞期 的鼠胚冲人含 M1 6 液的皿中， 用微量吸管收集发育正常的 2 细胞期胚胎， 放人含 M1 6液的皿中漂洗二遍后， 将每只小鼠 收集到的2细胞期胚胎按随机分组的原则分别放人 4 个培养 液滴中培养， 每个培养液滴中胚胎数 5 - 1 5个。实验共分四 组: 对照组为不加 I L一1 p的M1 6培养液滴， 三个实验组( 即 实验组1 、 实验组2 , 实验组3 ) 分别在胚胎发育到2细胞期, 4 细 胞期, 8 细胞期换成浓度为。 . 1 . g / m l 的I L一 1 0 培养液滴，

14、2 4 h 后换成不加I L - 1 臼 的M1 6 培 养液滴. 更换培养液时小心 胚胎的遗失。将培养皿放人3 7 0C 5 %C O ,湿润培养箱中连续 培养共 9 6 h , 观察胚胎生长情况， 分别统计四组鼠胚囊胚数和 孵出数。本实验采用微滴法培养。 1 . 统计学方法采用 S P S S 1 0 . 0统计学软件包， 对数据进 行X r 检验 2结 果 实验共收集2细胞期鼠胚4 4 0个， 胚胎发育情况见表1 , 表1 各组体内2细胞期胚胎体外发育情况 2细 胞期 胚 胎 数 ( 个 ) 培 养 7 2 h 培 养 9 6 h 组 别 作 孽 笋 黔 孵 出 胚数 ( 个 ) 孵 出

15、串 ( %) 1 8. 3 1 7. 8 2 1. 6 1 9 5 T a k a c s 等( s 7 用逆转录多聚酶链反应法( R T一P C R ) 测定 了鼠胚不同发育阶段 I L一1系统的表达， 2细胞中 I L一 1 p . R NA不表达， 而 4 细胞期、 8细胞期、 桑格胚及囊胚中都 有I L一1 p . RN A表达。而 Kr u e s s e l 等1- 1 也利用 R T一P C R 法研究发现I L- l p .R NA在胚胎的所有发育阶段都有表达. 这与前者的结果稍有不同， 可能与所用的方法灵敏度不同有 关。D e L o s S s n to s MJ等Cr 7

16、 在蛋白水平上测定胚胎 I L一1系 统表达的研究发现， 胚胎所有发育阶 段均有I L - l p 的 免疫染 色， 随着胚胎成熟I L- 1 系统的表达量有逐渐升高的趋势 。 从这 些研究报道推侧， 既然I L一 1 p m R N A在胚胎的发育阶段 有表达， 那么它对胚胎的发育可能起作用， 并随着胚胎的成熟 该作用更明 显。白细胞介素一 1 p ( I L 一 1 阳 对体外早期胚胎发 育的影响， 已有过一些报道， 如向人工授精后培养 8 -1 0 h牛 胚胎( 1细胞期胚胎) 中加人 I L- 1 p能增加囊胚发育率， 因 此， 认为胚胎以外来源的 工 L-1 月对胚胎发育起着调节作

17、用P I . 但也有学者研究 1 C R小鼠发现，IL一1 p 对体外鼠胚 2 细胞至囊胚的发育无影响s ; 还有研究表明 71 ， 在体外培养昆 明小鼠 桑甚胚胚胎时， 当r h l L一 1 p 的浓度为5 0 0 I U / m l 约 l 0 0 n g / m D 以 下时， 对胚胎发育无明显影响， 当r h I L 一 1 p 浓度 增大到1 O O O I U/ ml ( 约2 0 0 n g / ml ) 时， 胚胎发育率下降， 证明 其对胚胎发育有毒性作用。我们已做的研究结果表明， 在我 们 研 究 的 工 L 一 l p 浓 度 范 围 内 。 . l n g / m l

18、- 1 0 0 n g / m l ， 对: C R 小鼠体外2细胞胚胎培养时， 加人 工 L-1 日可增加囊胚发育 率, I L 一 1 p 浓度为0 . 1 n g / m l -l o n g / m l 是2 细胞鼠 胚体外培 养的 较适宜浓度( 结果待发表) .由此可见， 白 细胞介素一 1 p ( I L一1 困对体外早期胚胎发育的影响， 尚无一致结论， 以上不 同 结论是否因 体外培养的胚胎在不同发育阶段对儿一 l p 的 需要不同所致， 对此文献并无报道。基于以上观点， 我们设计 了本实验， 并结合我们已作过的研究， 选择了浓度为0 . 1 n g / t n l 的I L-1

19、 p 培养液.本实验结果表明 在胚胎发育的4细 胞期, 8 细胞期加人I L -1 月 可以提高囊胚发育率， 但不增加 孵出率; 在胚胎发育的8 细胞期加入I L 一1 p , 囊胚率高于在 胚胎发育的2细胞期, 4细胞期时加人 I L一l p囊胚发育率， 但孵出率也不增加.因为胚胎的孵出有利于胚胎的体内着 床， 但本研究各组的孵出率均未增加， 所以未能间接说明 I L 一1 p对鼠胚着床有利。因此本研究的结论是: 在着床前不同 发育阶段的胚胎， 对 I L- 1 臼的需要不同， 并随着胚胎的逐渐 发育对 I L-1 归的需要有增加的趋势。 总之，本实验通过研究细胞因子I L- I p 对小鼠

20、着床前 胚胎休外发育的影响， 以探讨小鼠早期胚胎发育机制和优化 鼠胚体外培养系统 并为进一步优化人类胚胎体外培养体系 提供理论和实验依据。但胚胎发育机制是复杂的. 不能单纯 用一种因子来解释. 它必然是许多相关因子协同作用的结果。 目 前研究发现除了工 L - 1 月 有可能促进胚胎生长外， 还有白 血 病抑制因子( L I F ) 、 表皮生长因子 E G F ) , 胰岛素样生长因子 ( I G F ) 等is - ; z j ， 但这些细胞因子之间相互调节的机制尚不清 楚。所以， 如何把 L I F和 I L- 1等细胞因子结合起来研究， 阐述它们的关系， 尚需进一步探讨。 4参 考 文

21、 献 3 D o k r a s A , S a r g e n t I L , B a r lo w D H . H u m a n 6 la s to c y s t g r a d - im g , a n i n d ic a t o n o f d e v e l o p m e n t p o t e n t ia l? F J l . H u m R , 36 . 7 45 . 8- 5 0 . 5 0 6 4 . 6 n“ x tp.R gfli ;三 个 实脸姐间两 两 相比.A P 0 . 0 5 , L L P 0 . 0 5 ) 。三个实验组间两两比较， 实验组 3 与

22、实验组 2 、 实验组 1 比较， 差异有统计学意义( P 0 . 0 5 ) . 2 ) 培养到9 6 h ， 对照组鼠胚孵出率为1 8 . 3 %， 三个实验组 孵出率分别为1 7 . 8 %, 2 1 . 6 %, 1 9 . 5 %， 各实验组与对照组比 较， 差异均无统计学意义 P 0 . 0 5 ) ; 各实验组间两两比较， 差异均无统计学意义 P 0 . 0 5 ) . 3讨 论 白细胞介素一I ( I n t e r l e u k in一1 . I L一1 ) 又称淋巴细胞激 活因子， 是一种主要由血液中的单核细胞和巨噬细胞以及其 他多种类型细胞合成和分泌的重要细胞因子和多肤

23、调节因 子， I L -1 系统由I L一 l a , I L 一1 p , I L一 1 受体拮抗剂( I L - l r a ) , I L一1 1 型受体( I L一1 R t 1 ) , I L一I I I型受体( I L一1 Rt I I ) 五种成分组成。工 L一1 具有广泛的生物学活性， 其功能已远 远超出了最初发现的免疫功能. 它不仅对多种免疫活性细胞 具有重要的调节作用， 而且参与造血、 神经内分泌及炎症反应 等多种生理、 病理过程。近几年的研究表明， I L一1在哺乳动 物的生殖过程中起着重要的作用， 它们可能参与性腺生理功 能的调节、 着床前胚胎的发育、 着床、 蜕膜化

24、胎盘形成) 、 分娩 等多个生殖环节。 中 国煤炭 工业医学 杂志 2 0 0 6 年 2 月 第 9 卷第 2 期 1 8 9 2 8 3 9 4 1 0 5 E l i 6 p ro d , 1 9 9 3 , 8 ;2 1 一 2 7 Me n e z o Y, H a z o u t A, D u m o n t M, e t a l . C o c u l t u r e o f e m b r y o s o n v e r o c e ll s a n d t r a n s f e r o f b la s t o c y s t s in h u m a n s J . H

25、u m R e p ro d , 1 9 9 2 , 7 : 1 0 1 一1 0 6 L i v e n n e s F , H a z o u t A, L e la id i e r C , e t a l. F o u r in d ic a t io n s f o r e mb r y o tr a n s f e r a t t h e b la s t o c y s t s ta g e J . H u m R e p r o d , 1 9 9 5 , 9 , 2 3 6 7一2 3 7 3 P lz c h o t M , H e y m a n n D, G o d a

26、 n d A , e t a l. E m b r o y s c o c u l tu r e t h e in t e r a c t io n e m b ry o 一 f e e d e r M / / A b u mm i e h A, B e r n a t E , e t a l. I x t h w o r ld c o n g r e s s o n i n v it r o f e r ti li s a t i o n a n d a s s is - re d r e p r o d u c t io n . Mo n d u z z i E d i to r e B

27、o lo g n a , 1 9 9 5 X一 4 4 T a k a c a P , K a u ma S . T h e e x p r e ss io n o f in t e r l e u k in 一l a a n d i n t e r le u k i n 一1 (7 r e c e p t o r ty p e f m R N A d u r in g p r e im p la n t a t io n mo u s e d e -1 - p u r e - 0 1 J R e p r o d I m m u n o l , 1 9 9 6 , 3 2 , 2 7 一 3

28、5 K r u s s c l J S , H u a n g HY, S im o n C . S in g le b l a s t o m e r e s w i th i n h u m a n p r e i m p la n t a t io n e mb r y o s e x p r e a s d if f e r e n t a m o u n t s o f me s s e n g e r r i b o n u c l e ic a ci d f o r p 一 -in a n d in t e r l e u k in 一 1 r e - c e p to r t

29、y p e l J . J C li n E n d o c r i n o Me ta, 1 9 9 8 , 8 3 t 9 5 3 D o L o s S e n t - KM七c a d e r A , F r a n c e s A, e l a l. R o le o f e n - d o me t r ia l f a c to r in re g u l a t i n g s e c r e t i o n o f c o m p o n e n t s o f t h e i m m u n o r e a c t iv c h u m a n e mb r y o n i

30、c in t e r l e u k in 一1 s y s t e m d u r i n ge m b r y o n ic d e v e lo p m e n t J . B i o l R e p r o d , 1 9 9 6 , 5 4 ( 2 ) 仁 1 2 r 7 5 6 3一5 7 4 R o b e r t s o n S A. L a v m n o s T C , S c a m a t k R F . I n v it r o m o d e ls o f t h e m e c e r n a l f e t a l in t e r f a c e M / /

31、W e g ma n n T G . T h e m o le c u - ta r a n d c e ll u l a r i m m u n o l o g y o f t h e m a t e r n a l 一 f e t a l in t e r f a c e N e w Y o r k : O x f o r d V n i v P r e a s , 1 9 9 0 ; 1 9 1 一 2 0 6 张炜， 周剑萍， 张俊慧， 等. L I F对体外培养小鼠孕早期胚胎发 育及IC A M一 I表达的影A J 上海医科大学学报 1 9 9 9 , 2 6 ( 4 ), 2 5

32、5 一 2 5 7 Ko r . a w a R , G la b o w s k i W , We n d s R L . E v a lu a t i , o f m o u s e p r e im p l a n t a t io n e m b r y o s c u lt u r e d i n m e d ia e n r ic h ed w it h in s a tin一lik e g r o w t h f a c t o r s 1 a n d 2 , e p id e r m a l g r o w t h f a c t o r a n d t u m o r n e

33、 c r o s i s fa c t o r a lp h a J . F o l ia H i sme h e m C y t o b i- o ( , 2 0 0 1 , 3 9 ( 3 ) : 2 4 5 一 2 5 1 K i m C H, C h . . H D , C h e o n Y P , c c a l . T h e e f f e c t o f e p i d e r m a l g ro wth f a c to r o n t h e p r e im p l a n t a t io n d e v e lo p m e n t , im p la n ts

34、- t io n a n d i t s r e c e p t o r e x p r e s s io n in m o u s e e mb r y o s J . J O b - s t e t G y n a c ca l R e s , 1 9 9 9 , 2 5 ( 2 ) ; 8 7 一 9 3 K o w a l ik A , L iu H C. H e Z Y, s t a l . E x p r e s s io n o f t h e i n s u l in 一 l ik e g r o w t h f a c t o r 一1 g e n e a n d i t ,

35、 r e c e p t o r i n ru c imp l a t a tio n m o u s 巴 e m b r y o v i a b il it y ? J I M o t H u m R e p ro d , 1 9 9 9 , 5 ( 9 ) : 8 6 1 一 a s s F 2 0 0 5 -0 9 -0 8 收稿2 0 0 5 - 1 1 -2 0 修 回 文章编 号1 0 0 7 一 9 5 6 4 ( 2 0 0 6 ) 0 2 一 0 1 8 9 一 0 1 大鼠自 体血栓脑动脉栓塞模型的制作及灌注取材 0 6 3 0 0 0 河北省唐山市， 华北煤炭医学院解剖教

36、研室田清友卢鹤翔件 王海学“ 关健 词自体血栓 ; 灌 注取 材赛 大友 中 图 分 类号R一 3 3 2文献标 识码A 制作模拟人类脑动脉栓塞动物模型， 对于研究人类脑动 脉栓塞的发病机制、 病理变化， 以及早期溶栓治疗的有效性和 可行性， 具有非常重要的作用。因此， 稳定而近似人类脑动脉 栓塞的动物模型的建立， 为这些研究提供了基础。现将我们 采用大鼠制作自体血栓脑动脉栓塞模型以及灌注取材的情况 报告如下。 1 资料与方法 1 . 1 实验动物Wi s t a r 大鼠， 雌雄不限， 体重 2 2 0 -2 9 0 g o 1 . 2 栓子制作取大鼠尾静脉血， 置人用凝血酶湿润的内径 为

37、0 . 7 5 . .塑料管内， 3 7 放置 1 0 min ， 吹人 2 .1 含3单位凝 血酶( 2 5万单位/ L ) 中 C , 3 7 放置 2 0 min ， 小心吸取栓子放 人 l o ml 生理盐水中洗涤 5 m i n ， 然后用 l r n 1 注射器套上塑料 管， 吸人5 .n 、 的栓子 将塑料管头剪成楔形备用 1 . 3 模型制作将大鼠用 1 0 %水合氧醛麻醉， 常规分离一 侧颈总动脉( C C A) , 颈内动脉( I CA ) 和颈外动脉( E C A ) , E C A 远端二处结扎，从其间剪断， 动脉夹暂时夹住 C C A, 提起 E C A 使其与I C

38、 A成一直线， 在 E C A结扎近端剪开小 口. 插人约 4 m 含栓子的细管， 缓慢推人栓子， 在退出细管的同时， 结扎 E CA松开动脉夹. 1 , 4 取材手术2 4 h 后麻醉大鼠， 打开腹腔剪开隔肌， 暴露心 脏 于左心室处插人用 1 0 0 m1 注射器连接的输液管， 在右心室 处剪开一切口， 迅速推人 5 0 .,1 生理盐水， 冲出血液， 然后推人 4 %多聚甲醛 P I S S 缓冲液5 0 r n 1 ,如果大鼠四肢抽搐痉挛， 则证 明灌注成功， 继续滴注缓冲液 2 0 m i n ,剪掉鼠头， 用止血钳沿 额中线左右分离颅骨， 子颅底剪掉视交叉， 取出大脑固定 2结 果

39、 2 . 1 形体观察大鼠清醒后， 栓塞对侧肢体无力， 行走时向 对侧旋转， 前肢下垂， 眼睛缩小 2 . 2 T T C染色取未 固定脑组织， 一2 0 放置 5 m i n , 以 2 m.为单位， 切成 7片， 进行染色， 正常脑组织染成红色 梗 死区呈白色， 表现出明显的缺血性梗死区。 3讨 论 实验过程中的桂子的吸人比较困难， 需要进行反复的练 习。但自体栓子的制备， 由于用生理盐水进行了洗涤 从而避 免了由于凝血酶的作用， 而造成的散在性栓塞的形成， 较之线 栓法更接近于人类脑动脉栓塞。为溶栓药物的选择和早期溶 栓效果的观察， 提供了良好的实验基础。灌注固定使大脑组 织形态结构完整， 有利于进行形态学研究。水合盆醛具有抗 惊厥和高热的作用 用其来进行麻醉， 可以避免大鼠术后不良 体征的出现。 4参 考 文 献 C i l 张新江， 常丽英， 张苏明， 等. 大鼠自 体血栓大脑中动脉闭塞模 型的改良 J 7 . 卒中与神经疾病, 2 0 0 3 , 1 0 0 ) . 1 3 2 0 0 5 - 1 1 -3 0 收稿2 0 0 5 - 1 2 -0 7 修 回 华北煤 炭医学 院基础 部形 态中心 唐 山市 眼科医 院