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1、BMAL1 protein expression exhibited a rhythm of ap- proximately 24 hours in normal myocardium，but its expressioninhypertrophicmyocardialosesthis rhythm. Conclusion These data suggest that clock gene may play a role in the development of hypertro- phy. Abnormal expression of clock protein may cause th
2、e heart unable to adapt to the ever-changing environ- ment. Key words： hypertrophic myocardium；clock gene； BMAL1 PB-19 对大鼠缺血再灌注心律失常的保护作用 赵 祯， 安 平， 王玉勤， 薛一雪 （中国医科大学神经生物学教研室， 辽宁 沈阳 110001） 中国图书分类号： R-332； R 322. 11； R 541. 705. 3； R 542. 2 文献标识码： A 文章编号： 1001 -1978 （2005） 07 -0815 -03 摘要： 目的 观察 PB-19
3、对离体大鼠心室肌细胞的动作电位 （AP） 的影响， 研究 PB-19 对大鼠冠状动脉缺血再灌注损伤 的作用。方法 制备大鼠离体心肌模型， 记录并观察 PB-19 对离体大鼠正常心肌动作电位的影响； 制备在体大鼠心肌缺 血及再灌注模型， 观察 PB-19 对大鼠缺血性心律失常的保护 作用。结果 PB-19 明显延长离体大鼠心室肌细胞复极 50%及 90%时的动作电位时程 （APD50、 APD90， P 0. 01） ； 大 鼠冠脉结扎前后分别给予 PB-19 均缩短 VTD （室速持续时 间， P 0. 05） ， 降低室速 （VT） 、 室颤 （VF） 发生率和死亡率 （P 0. 01） ，
4、 并呈剂量依赖性。结论 PB-19 未对 Vmax产生 影响， 但延长了 APD。PB-19 降低了大鼠冠状动脉结扎诱发 的室性心律失常和死亡率。这种作用可能与 PB-19 延长动 作电位时程有关。 关键词： PB-19； 动作电位； 心肌缺血再灌性心律失常 室性心律失常是心肌梗死的主要死亡原因之 一， 及早预防和治疗室性心律失常具有重要的临床 意义。PB-19 1- （2-氨基-4-甲基磺胺苯氧基） -2- （3， 4-二甲氧苯基） -N-甲基 丙胺盐酸由故宫制药厂提 供， 是一种以抗心律失常药物为开发目的新合成的 药物。为了弄清其作用及作用机制， 本研究观察了 PB-19 对离体大鼠心室肌
5、细胞的动作电位的影响， 观察了 PB-19 对大鼠冠状动脉缺血再灌注所致的室 收稿日期： 2004 -12 -23， 修回日期： 2005 -02 -17 基金项目： 国家自然科学基金资助项目 （No 30400145） ， 辽宁省自然 科学基金资助项目 （No 20022061） ， 辽宁省自然科学基金 资助项目 （No 20022067） ， 沈阳市自然科学基金资助项目 （No 041129） 作者简介： 赵 祯 （1969 - ） ， 女， 博士， 讲师； 薛一雪 （1963 - ） ， 女， 教授， 博士生导师； 研究方向： 血脑 屏障的药物研究， Tel： 024-23256666-
6、5506， E-mail： ryuunka mail. sy. ln. cn 性心律失常的作用。 1 材料和方法 1. 1 离体大鼠心室肌细胞的动作电位的测定 SD 大鼠 （中国医科大学实验动物部提供） 20 只， 体重 200 250 g， 断头取心脏， 分离右心室游离壁备用。 将右心室肌固定于恒温循环水浴槽内的硅胶片上， 用 37、 经 95% O2+5%CO2混合气体饱和的正常 台氏液 1灌注， 保持温度在 （37 0. 5） ， pH 保持 在 7. 4， 灌注速度为 3 4 mlmin -1。正常台氏液 灌流 60min 后分成两组： PB-1 组， 给予 PB-19 （3 10 -
7、7 molL -1） ； PB-2 组， 给予 PB-19 （1 10-6 mol L -1） 。以微操纵器推进玻璃微电极插入心肌细 胞， 将给药前后心肌细胞动作电位信号经微电极放 大器放大后分别显示于 DSS6521 示波器和输入计 算机， 采用动作电位自动分析软件进行处理。 1. 2 PB-19 对大鼠冠状动脉结扎诱发的心律失常 的保护作用 取 SD大鼠 50 只， 体重 200 400 g。 实验前 12 h 禁食， 腹腔注射戊巴比妥钠 60 mg kg -1麻醉， 分离股静脉， 保持血管通畅以备给药。气 管插管接人工呼吸机， 动脉插管监测动脉血压， 同时 记录导心电图。于胸骨左侧剪断第
8、 4、 5 肋骨， 打 开胸腔即刻开始人工通气， 维持 Pco2、 Po2、 pH 在正 常范围， 切开心包膜轻压胸壁挤出心脏， 放置 6/0 号 丝线包绕左冠状动脉， 然后将心脏送回胸腔， 动物稳 定 15 min 后， 于左心房下约1 2 mm 冠状动脉处放 置一塑料软管， 然后连同塑料软管一起用备用丝线 结扎冠脉， 各动物均于结扎即刻或数分钟之内出现 ST 段抬高及动脉血压下降 20% 30%， 视为结扎手 术成功； 5 min 后剪开结扎丝线， 取出软管， 使血管 再灌注， 观察10 min， 可见各动物血压恢复至缺血前 水平， 视为再灌注成功。 将大鼠随机分为 5 组， 每组 10
9、只。对照组注射 生理盐水； 两组于冠脉结扎前分别给予PB-19 0. 1 518中国药理学通报 Chinese Pharmacological Bulletin 2005 Jul； 21 （7） ： 815 7 Tab 1 Effects of PB-19 on action potential of ventricular muscle in rat （-x s， n =10( ） GroupRPVmax（V/ s）APA/ mVAPD50/ msAPD90/ ms Control-82.9 4.0240.0 40.0102. 9 7. 1 128. 1 34. 6 155. 8 25. 8
10、 PB-1-82.9 4.0240.8 39.0104. 8 10. 4156. 8 31. 7*188. 5 35. 7* Control-84.6 5.2241.7 20.1107. 1 5. 2106. 8 29. 2136. 9 36. 1 PB-2-85.0 5.1242.5 21.2109. 0 7. 2163. 9 38. 3*211. 5 53. 2* *P 0. 01 vs cotrol； RP： Resting potential；V max： maxinal velocity mgkg -1 （前给药组 1）和1. 0 mgkg -1 （前给药组 2） ； 两组于冠脉结扎
11、后 3 min （即再灌注前 2 min） 分 别给予 PB-19 0. 1 mgkg -1 （后给药组1） 和1. 0 mg kg -1 （后给药组 2） 。 1. 3 心律失常的定义 按照 Lambeth Convention 等 方法 2， 12， 异位活动可分为单次室性早搏、 室速 （4 次或以上连续室性早搏） 及室颤。血压可作为判定 心律失常种类的参考指标， 尤其是对于区分多型性 的室速和室颤更有意义。当室速发生时通常伴有动 脉血压的波动， 而室颤发生时， 血压会迅速下降到 0 并且不出现波动。对于大鼠来说， 室颤可以持续存 在， 也可以自发地回复为正常窦性节律。 1. 4 统计分析
12、 实验结果以-x s 表示， SPSS 软件 分析。 2 结果 2. 1 PB-19 对离体大鼠心室肌细胞的动作电位 （AP） 的影响 如 Tab 1 所示， 与对照组相比， 3 10 -7 molL -1 PB-19， 对 RP、 APA 和 Vmax无明显影 响， 但延长了 APD50和 APD90（两组均为 P 0. 01） 。 较高浓度的 1 10 -6 molL -1 PB-19， 对 RP、APA 和 Vmax无明显影响， 延长了 APD50和 APD90（两组均 为 P 0. 01） 。 2. 2 PB-19 对大鼠缺血再灌注性心律失常的保护 作用 见 Tab 2。与对照组相比，
13、 PB-19 冠状动脉结 扎前给药 0. 1 mgkg -1， 缩短 VTD（P 0. 05） ， 降 低了 VT、 VF 发生率和死亡率 （3 组间比较均为 P 0. 01） ； PB-19 冠状动脉结扎前给药 1. 0 mgkg -1， Tab 2 Effects of PB-19 on VTD、 VT、 VF and mortality of ischemia and reperfusion rats （-x s， n =10） Group VTD / s VT rate / % VF rate / % Death rate / % Control141.2 25.6 1009080 p
14、re-PB-160.8 8.8*50*10*10* pre-PB-220.6 7.2*50*10*10* post-PB-151.7 9.0*8010*10* post-PB-221.2 8.9*60*10*10* *P 0. 05，* P 0. 01 vs control 缩短 VTD， 降低了 VT、 VF 发生率和死亡率 （4 组间 比较均为 P 0. 01） ； PB-19 冠状动脉结扎后给药 0. 1 mgkg -1， 缩短 VTD （P 0. 05） ， 降低了 VF 发 生率和死亡率 （两组间比较均为 P 0. 01） ； PB-19 冠状动脉结扎后给药 1. 0 mgkg -1
15、， 缩短 VTD， 降 低了 VT、 VF 发生率和死亡率 （4 组间比较均为 P 0. 01） 。本实验中所见的 VF 均为再灌注后出现的， 而在缺血 5 min 内的缺血期未见室颤。 3 讨论 心肌缺血及再灌注过程中出现的严重的室性心 律失常是冠心病猝死的重要原因， 及早预防和治疗 心律失常具有重要的临床意义。目前的抗心律失常 药分为 4 类， 即第 1 类的钠离子通道阻断剂，第 2 类的肾上腺素 受体阻断剂，第 3 类的钾离子通道 阻断剂和第 4 类的钙离子通道阻断剂。由于在长期 临床实践中观察到的钠离子通道阻断剂和钾离子通 道阻断剂具有明显的副作用，因此这两类药物的应 用受到了很大的限
16、制 3。 PB-19 是以新的抗心律失常药物为目的而开发 的药物。本研究在离体实验中， 观察了 PB-19 对大 鼠心室肌细胞动作电位的影响。结果发现， 与对照 组相比， PB-19 对大鼠心室肌细胞的静息电位、 动作 电位幅度及 Vmax没有明显的改变， 但是延长了 APD50、 APD90， 并且呈剂量依赖关系。说明 PB-19 能 延长动作电位的时程， 这符合第类抗心律失常药 的特性 4。这一点， 与 E-4031，sematilide，MS-551 和 KCB-328 等类抗心律失常药相似， 这些药物在 不同种属的动物实验中， 均显示出了延长 APD50、 APD90的性质 8。而在这
17、些药物中， 它们延长 APD 的原因是由于阻滞了不同类型的钾离子通道 5 7。 为了验证 PB-19 在在体情况下的作用， 本研究 制作了大鼠冠状动脉结扎及再灌注模型 9， 研究了 PB-19 对缺血再灌注所致的心律失常的作用。结果 发现， 与对照组相比， 结扎前后给予不同浓度的 PB- 19 均缩短了大鼠心肌室性心动过速的持续时间 （VTD） ， 大鼠 VT 发生率、 VF 发生率以及大鼠死亡 率， 这种降低呈现出了剂量依赖关系。这一结果说 618中国药理学通报 Chinese Pharmacological Bulletin 2005 Jul； 21 （7） 明 PB-19 对缺血再灌注性
18、心律失常具有保护作用。 E-4031，sematilide，MS-551 和 KCB-328 均对缺血再 灌注性心律失常具有保护作用 5 8。PB-19 显示出 了与 E-4031，sematilide，MS-551 和 KCB-328 等抗 心律失常药物相似的作用。由于胺碘酮、 阿魏酸 钠 10， 11， E-4031，sematilide，MS-551 和 KCB-328 等 抗心律失常药物的抗心律失常作用是由于这些药物 均为钾离子通道阻滞剂， 延长了 APD， 我们推测， PB-19 对大鼠缺血再灌注性心律失常的保护作用的 重要原因之一是有效的延长了 APD。PB-19 有可能 是一种新
19、的三类抗心律失常药物。 综上所述， PB-19 在离体实验中， 延长了大鼠心 肌细胞动作电位持续时间； 在体实验中， 对大鼠缺血 性再灌注性心律失常具有保护作用。有关 PB-19 的 作用和作用机制还有待于进一步研究。 参考文献： 1 Ferrier GR，Guyette CM. Ventricular tachycardia in an isolated guinea pig ventricular free wall model of ischemia and reperfusion J . Cardiovasc Pharmacol， 1991， 17 （2） ： 228. 2 Walke
20、r MJA，Curtis MJ，Hearse DJ et al. The lambeth conven- tions： Guidelines for the study of arrhythmias in ischemia，infarc- tion and reperfusion J . Cardiovasc Res， 1998， 22： 447 -55. 3 Sanguinetti MC，Jurkiewicz NK. Two components of cardiac de- layed rectifier K + current：differential sensitivity to bl
21、ock by class antiarrhythmic agents J . J Gen Physiol， 1990， 96： 195 -215. 4 林志彬， 金有豫. 医用药理学基础 M ，北京： 人民卫生出版 社， 第 5 版， 2002： 207. 5 Cheng JH，Kamiya K，Kodama I et al. Differential effects of MS- 551 and E-4031 on action potentials and the delayed rectifier K + current in rabbit ventricular myocytes J
22、. Cardiovasc Res， 1996， 31： 963 -74. 6 Hashimoto K， Haruno A，Matsuzaki T et al. Effects of a new class antiarrhythmic drug （E-4031）on canine ventricular arrhythmia models J . Asia Pac J Pharmacol， 1991， 6： 127 -37. 7 Hashimoto K，Haruno A，Hirasawa A et al. Effects of the new class antiarrhythmic drug
23、 MS-551 and d-sotalol on canine coro- nary ligation-reperfusion ventricular arrhythmias J . Jpn J Phar- macol， 1995， 68： 1 -9. 8 Lee YJ，Lee K，Shin HS et al. Frequency-dependent effects of KCB-328， a novel class antiarrhythmic agent in isolated guinea pig ventricular muscle J . FASEB J， 1996， 10： A32
24、. 9 孙 蓉， 李云霞， 段长农 et al. 参葛胶囊对缺血及再灌性心律 失常大鼠的影响 J . 中国新医药， 2003， 2 （8） ： 13 -4. 10朱俏萍， 郭凌燕， 徐 华 et al. 胺碘酮对急性心肌梗死伴室性 心律失常患者自主神经的影响 J . 心脏杂志， 2002，14 （6） ： 479 -81. 11李 屏， 曾秋棠， 邱红梅 et al. 阿魏酸钠抗实验性心律失常的 机制. 中国药理学通报， 2002， 18 （3） ： 323 -5. 12刘红亮， 戴体俊， 王 钧， 曾因明. 异丙酚、 利多卡因预处理对 在体大鼠心肌再灌注心律失常的影响 J . 中国药理学通报
25、， 2000， 16 （1） ： 29 -31. Effects of PB-19 on ischemia-reperfusion arrhythmia in rats ZHAO Zhen，AN Ping，WANG Yu-qin， XUE Yi-xue （Dept of Neurobiology，China Medical University，Shenyang 110001， China） Abstract： Aim To investigate the effects of PB-19 on action potential（AP）of ventricular cells in vitro
26、 and ischemia and reperfusion induced arrhythmias in vivo in rats. Methods We established the model of isola- ted rat right ventricular wall and perfused the models with normal Tyrodes solution and PB-19. Microelec- trode was inserted into the cells to record the AP. We ligated the left anterior des
27、cending coronary artery of rats to study the effects of PB-19 on ischemia and reperfusion induced arrhythmias. 50 rats were divided into 5 groups randomly and were given iv. injection with normal saline and PB-19 of different concentra- tions respectively. We recorded ECG of the rats. Results In vit
28、ro models，the APD50、 APD90of PB- 19 group were significantly longer than that of control group respectively（P 0. 01） . The VTD， VT rate， VF rate and mortality of PB-19 groups were significant- ly lower than that of control group respectively . Con- clusion PB-19 has protective effect on ischemia and reperfusion induced arrhythmias of rats. Key words： PB-19； action potential （ AP） ； ischemia and reperfusion；arrhythmias 718中国药理学通报 Chinese Pharmacological Bulletin 2005 Jul； 21 （7）