《SN-T 1303-2003 蜂王浆中苯甲酸、山梨酸、对羟基苯甲酸酯类检验方法 液相色谱法.pdf.pdf》由会员分享，可在线阅读，更多相关《SN-T 1303-2003 蜂王浆中苯甲酸、山梨酸、对羟基苯甲酸酯类检验方法 液相色谱法.pdf.pdf（6页珍藏版）》请在三一文库上搜索。
1、S拍 中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 S N/ T 1 3 0 3 - 2 0 0 3 蜂王浆中苯甲酸、 山梨酸、 对轻基苯甲酸醋类检验方法 液相色谱法 M e t ho d f o r t he de t e r m i nat i o n of be nz oi c a c i d. s o r bi c ac i d a n d p - h y d r o x y b e n z o a t e s i n r o y a l j e l l y - L i q u i d c h r o m a t o g r a p h i c me t h o d 2 0 0 3 - 0 8
2、 - 1 8 发布 2 0 0 4 - 0 2 - 0 1实施 中华人民共和匡 国 家 质 量 监 督 检 验 检 疫 总 婿 S N/ T 1 3 0 3 -2 0 0 3 前言 本标准的附录A为资料性附录。 本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。 本标准起草单位: 中华人民共和国河南出人境检验检疫局。 本标准主要起草人: 刘亚风、 杨冀州、 刘朝晖、 梁炜、 袁萍。 本标准系首次发布的检验检疫行业标准。 S N/ T 1 3 0 3 -2 0 0 3 蜂王浆中苯 甲酸 、 山梨酸、 对轻基苯甲酸醋类检验方法 液相色谱法 范 围 本标准规定了蜂王浆中苯甲酸、 山梨酸、 对经基苯甲酸甲
3、酷、 对经基苯甲酸乙醋、 对经基苯甲酸丙 醋、 对经基苯甲酸丁醋检验的抽样和液相色谱测定方法。 本标准适用于蜂王浆中苯甲酸、 山梨酸、 对经基苯甲酸甲酷、 对经基苯甲酸乙醋、 对经基苯甲酸丙 酷 、 对轻基苯 甲酸丁酷的检验。 2 抽样与制样 2 . 1 检验批 以一报验批为一检验批， 每一检验批不多于 1 t . 同一检验批商品应具有相同的特征， 如包装、 标记、 产地、 规格、 等级等。 2 . 2 抽样数f 抽样数量见表1 . 表 1 一批 量 / 件一抽 样 量 / 件 1 - - 5 0 5 1 - 1 0 0 1 0 0 2 . 3 抽样方法 按 2 . 2 规定的抽样件数随机抽取
4、， 逐件开启， 从每件内抽取一罐( 袋) ， 每罐( 袋) 取约5 0 g ， 作为原始 样 品。 2 . 4制样方法 将所取样品充分混匀， 分为两等份， 加封后， 注明标记， 一份作为留样保存， 另一份作为试样供检验 用。在抽样和制样的操作过程中应防止样品受到污染和发生含量的变化。 2 . 5 试样保存 2 . 5 . 1 试样宜及时检验。 2 . 5 . 2 在不能及时检验的情况下， 应将试样于一1 8 以下冷冻保存。 3检验方法 3 . 1 方法原理 试样中的苯甲酸、 山梨酸、 对轻基苯甲酸甲酷、 对经基苯甲酸乙A lm 、 对经基苯甲酸丙醋、 对经基苯甲 酸丁醋用乙醇提取， 经过离心，
5、 取上层清液供液相色谱仪测定， 外标法定量。 3 . 2 试荆和材料 除另有规定外， 所用试剂均为分析纯， 水为去离子水。 3 . 2 . 1 无水乙醇: 优级纯。 S N/ T 1 3 0 3 - 2 0 0 3 3 . 2 . 2 乙醇; 9 5 %, 3 . 2 . 3 甲醉: H P L C纯或优级纯。 3 . 2 . 4 盐酸溶液: 0 . 0 3 mo l / L , 3 . 2 . 5 苯甲酸、 山梨酸、 对经基苯甲酸甲醋、 对经基苯甲酸乙醋、 对经基苯甲酸丙酷、 对经基苯甲酸丁醋 标准品: 9 9 . 0 %以上。 3 . 2 . 6 苯甲酸、 山梨酸、 对经基苯甲酸甲酷、 对
6、轻基苯甲酸乙酷、 对经基苯甲酸丙醋、 对经基苯甲酸丁醋 标准溶液: 每毫升含 1 0 0 0 p g 。准确称取适量的苯甲酸、 山梨酸、 对经基苯甲酸甲醋、 对经基苯甲酸乙 酷、 对经 基苯甲酸 丙醋、 对经基苯甲酸丁 醋标准品， 分别用无水乙醇( 3 . 2 . 1 ) 配成 1 0 0 0 p g / m L的标准 储备液。根据需要用无水乙醇稀释成适当浓度的混合标准工作溶液。 3 . 3 仪器和设备 3 . 3 . 1 液相色谱仪: 带可变波长紫外检测器或二极管阵列检测器。 3 . 3 . 2 超声波清洗器。 3 . 3 . 3 离心机。 3 . 4 分析步骤 3 . 4 . 1 提取 称
7、取试样约2 . 5 g ( 精确至 0 . 0 l g ) 于 5 0 mL烧杯中， 依次加人 2 m L水， 1 mL盐酸溶液( 3 . 2 . 4 ) , 混 匀， 再加人 2 0 mL乙醇( 3 . 2 . 2 ) ， 用超声波清洗器提取 1 0 mi n ， 取出， 用乙醇( 3 . 2 . 2 ) 定容于5 0 m L容量 瓶至刻度， 摇匀。取适量溶液置于 1 0 mL离心管中， 在离心机上以 3 0 0 0 r / mi n离心 1 0 mi n ， 取上层清 液用0 . 4 5 p m的滤膜过滤， 供液相色谱仪测定。如样液中被测物质含量过高， 可用乙醇稀释到适当的 浓度后进行测定
8、。 3 . 4 . 2 色谱条件 3 . 4 . 2 . 1 流动相: A: 4 0 %甲醇水溶液; B : 甲醇。 3 . 4 . 2 . 2 流动相梯度， 见表2 , 表 2 时 间 / m i n流 动 相A /(% )一 流 动 相B /( % ) 0 - -3 3 - 4 4 - 9 1 0 0 1 0 0 - 3 0 3 0 0 0 - 7 0 7 0 3 . 4 . 2 . 3 流速: 2 . 0 mL / mi n , 3 . 4 . 2 . 4 检测波长。 : 苯甲酸、 山梨酸: 2 3 0 n m; 对经基苯甲酸甲酷、 对经基苯甲酸乙醋、 对轻基苯甲酸丙 醋、 对经基苯甲酸
9、丁醋: 2 4 8 n m. 3 . 4 . 2 . 5 色谱柱: R a d i l p a k C 1 8柱， 1 0 0 mm X8 m m( i . d . ) 或相当者。 3 . 4 . 2 . 6 色谱柱温度: 室温 3 . 4 . 2 . 7 进样量: 2p 工 。 3 . 4 . 3 色谱测定 根据样液中苯甲酸、 山梨酸、 对经基苯甲酸甲醋、 对经基苯甲酸乙酷、 对经基苯甲酸丙醋、 对经基苯 甲酸丁酷含量的情况， 选定峰高相近的混合标准工作溶液， 混合标准工作溶液和样液中苯甲酸、 山梨酸、 对经基苯甲酸甲醋、 对经基苯甲酸乙醋、 对轻基苯甲酸丙醋、 对经基苯甲酸丁醋的响应值均应
10、在仪器测 定的线性范围内。对混合标准工作溶液和样液等体积参插进行测定。在 3 . 4 . 2 色谱条件下， 苯甲酸、 山 梨酸、 对轻基苯甲酸甲醋、 对经基苯甲酸乙醋、 对经基苯甲酸丙酷、 对经基苯甲酸丁酷的参考保留时间依 次为 1 . 9 7 m i n , 2 . 2 9 m i n , 4 . 8 7 m i n , 5 . 3 9 m in , 6 . 2 2 m in , 7 . 8 4 m i n , 标准品的色谱图参见附录A中的图A 1 , z S N / T 1 3 0 3 -2 0 0 3 3 . 4 . 4 空 白买验 除不称取试样外， 均按上述分析步骤同时完成空白实验。
11、3 . 4 . 5 结果计算 按式( ” 分别计算试样中苯甲酸、 山梨酸、 对经基苯甲酸甲醋、 对轻基苯甲酸乙醋、 对经基苯甲酸丙 酷、 对经基苯甲酸丁酷( X) 含量或采用色谱数据处理系统计算。计算结果需扣除空白值。 hxc , XV h. X m . . . . . . . . . . . . . . 。 。 ( 1 ) 式中 : X 试样中被测组分含量， 单位为毫克每千克( m g / k g ) ; h 样液中被测组分峰高， 单位为毫米( m m) ; c , 标准工作溶液中被测组分浓度， 单位为微克每毫升伽g / m L ) ; V 样液定容体积， 单位为毫升( mL ) ; 从标准
12、工作溶液中被测组分峰高， 单位为毫米( m m) ; m 所称样品的重量， 单位为克( 9 ) 。 4 测定低限回收率 4 . 1 测定低 限 本方法测定低限为: 苯甲酸、 山梨酸: 5 mg / k g ; 对9基苯甲酸甲酷、 对经基苯甲酸乙酷、 对轻基苯甲酸丙醋、 对经基苯甲 酸丁酷: 1 m g / k g , 4 . 2 回收率 回收率的试验数据见表3 , 表 3 添加浓度八mg / k g ) 回收率/(%) 苯 甲 酸 5 . ( ) 5 0 . 0 1 0 0. 0 9 0 . 0 9 7 . 6 9 9 . 2 山 梨 酸 5 . 0 5 0 . 0 1 0 0. 0 9 1
13、. 6 9 5 . 4 9 8 . 0 对经基苯甲酸甲醋 1 . 0 5 0 . 0 1 0 0 . 0 9 6 . 0 1 0 0 1 0 0 对羚基苯甲酸乙醋 L o 5 0 . 0 1 0 0 . 0 9 5 . 2 1 0 0 1 0 0 对经基苯甲酸丙醋 1 . 0 5 0 . 0 1 0 0 . 0 9 3 . 3 9 7. 2 1 0 0 对经基苯甲酸丁醋 1 . 0 5 0 . 0 1 0 0 . 0 9 2. 6 9 5. 2 9 9. 2 S N/ T 1 3 0 3 -2 0 0 3 附录A ( 资料性附录) 标 准 品 色 谱 图 0 . 0 1 . 0 2 . 0 3 . 0 4 . 0 5 . 0 6 . 0 7 . 0 8 . 0 9 . 0 ( mi n ) 1 苯甲酸; 2 山梨 酸 ; 3 对经基苯甲酸甲酷; 4 -对经基苯甲酸乙醋; 5 -对经基苯甲酸丙醋; 6 对经基苯甲酸丁酷。 图 A . 1 苯甲酸1 山梨酸、 对经基苯甲酸甲醋、 对经基苯甲酸乙醋、 对径基苯甲酸丙醋、 对经基苯甲酸丁醋标准品色谱图