SPF级与普通级新西兰兔血液学参数的比较.pdf

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1、2 0 0 8 年 4 月 第 1 8 卷第4 期 中国比较医学杂志 C HI N E S E J O U R N A L O F C O MP A R A T I V E ME D I C I N E A p r i l V o l . i f 2 以招 No. 4 踢 5E S 邵 性 气 .- . . S P F 级与普通级新西兰兔血液学参数的比较 李增强， 孙淑华， 孟金萍， 王艳蓉， 杨旭， 张棍， 刘云波 ( 中国医学科学院 北京协和医学院 医学实验动物研究所， 北京1 0 0 0 2 1 ) 摘要】 目的对普通级新西兰兔进行剖宫产， 获得 S P F 兔， 比较 S P F 兔和

2、普通级兔血液学参数。方法采 取剖宫产手术培育成无菌兔， 接种正常寄生菌使之S P F 化。耳缘静脉采血， 自 动生化分析仪测定 S P F 兔、 普通级兔 血液学参数。结果经检测 S P F 兔符合国家 S P F 兔标准; S P F 兔和普通级新西兰兔白细胞数、 血红蛋白、 红细胞容 积、 中性粒细胞百分比、 嗜酸性粒细胞百分比、 嗜碱性粒细胞百分比、 中性粒细胞数、 单核细胞数、 嗜酸性粒细胞数、 嗜碱性粒细胞数、 总蛋白、 球蛋白、 白蛋白/ 球蛋白、 谷酞转肤酶、 葡萄搪、 钙、 高密度脂蛋白胆固醇等参数差异极显 著( P 0 . 0 5 ) .结论不同等级微生物环境对新西兰兔血液学

3、指标有显著影响。 【 关键词】 S P F 兔; 血常规; 血生化 中圈分类号I R - 3 3 文献标识码I A 文章编号1 1 6 7 1 - 7 8 5 6 ( 2 0 0 8 ) 0 4 - 0 0 5 1 - 0 5 C o m p a r i s o n o f H e m a t o l o g i c a l P a r a me t e r s i n S P F a n d C o n v e n t i o n a l Ne w Z e a l a n d Ra b b i t s L I Z e n g - g i a n g , S U N S h u - h u a

4、 , M E N G J i n - p i n g , W A N G Y a n - r u n g , Y A N G X u , Z H A N G K u n , L I U Y u n - 场 ( I n s t i t u t e o f L a b o r a t o ry A n i m a l S c i e n c e , C h i n e s e A c a d e m y o f P e k i n g U n i o n M e d i c a l C o ll e g e , B e ij i n g 1 0 0 0 2 1 ， Me d i c a l S c

5、 i e n c e B lo o d r o u t i n e e x a m i n a t i o n ; B l o o d b i o c h e m ic a l p a r a m e t e r s 甚金项目】 北京市教委无菌兔技术的应用与推广( D W S 2 0 0 7 2 3 ) , 【 作者简介 李增强( 1 9 8 2 一) ， 男， 硕士研究生， 研究方向: 环境因子生物学效应。 【 通讯 作者 刘云波， 研究员。 E - m a i l : l i u - y u o b o . 2 6 3 . n e t , 万方数据 中国比较医学杂志2 0 0 8 年4 月

6、第1 8 卷第4 期C h i n J C o m p M e d , A p ri l 2 0 0 8 , V o l . 1 8 . N o . 4 1 9 世纪末期开始， 无菌动物和 S P F动物的研究 逐步兴起， 相继培育出了各种无菌实验动物， 1 9 5 9 年， W o s t m a n n 和 P l e a s a n t 。 首先报道经剖宫产手术， 人 工哺 乳培 育 无 菌 兔获 得了 成功 “ , R e d d y 和C o a t e s 等进一步对无菌兔的哺育和营养吸收进行了研 究 2 -3 1 o 8 0 年代， 我国也成功培育了无菌兔， 为我国 S P F

7、兔的发展和应用奠定了基础4 1 ， 涂新明等 5 1 在 我国首次建成了S P F 级种兔。 但是， 目前国内还没有对 S P F兔的生物学特性 进行系统的观察比较， S P F兔也没有作为实验动物 模型在科学研究中进行规模化的应用。本实验对 S P F 兔模型的培育进行了规范化研究， 并对 S P F 兔 的血液学参数进行了测定， 为 S P F 兔的使用和推广 提供参考。 1 材料和方法 库尔特有限公司生产， 公司原配试剂; 日立7 0 2 0 全 自 动生化仪， 日 本日立公司生产， 北京中生生物技术 有限公司试剂。 使用前按照仪器使用规程进行自检， 仪器各项 参数正常后方可进行测定，

8、而且质控标准品数值在 正常范围内， 测定的数值才能有效。红细胞计数、 白 细胞计数、 平均血小板体积、 血小板计数、 红细胞容 积等参数测定采用阻抗法; 平均红细胞容积、 平均红 细胞血红蛋白浓度、 平均红细胞血红蛋白测定采用 计算法; 乳酸脱氢酶、 天冬氨酸转氨酶、 碱性磷酸酶、 肌酸磷酸激酶、 丙氨酸转氨酶测定采用连续监测法; 低密度脂蛋白胆固醇、 高密度脂蛋白胆固醇测定采 用清除法。 1 . 5 统计学方法 所有数据用 S P S S I L 0软件进行 : 检验与秩和 检验， 比较两组新西兰兔血液学参数的差异。 1 . 1 新西兰兔 普通级新西兰兔 1 0只， 雌雄各半， 购自北京百

9、尔康纳特实验兔繁育生物技术开发有限公司， 体重 1 . 9 0 t 1 . 1 k g 。合格证号: S C X K ( 京) 2 0 0 5 - 0 0 1 1 0 S P F 级新西兰兔 1 0只， 雌雄各半， 体重 1 . 8 7 士 1 . 4 k g ， 通过剖宫产手术获得。普通级临产新西兰 孕兔 C 0 2 气体麻醉， 然后进行剖宫产手术， 逐层开 腹， 暴露子宫， 用止血钳夹住子宫颈， 从远离子宫端 侧剪断输卵管和子宫颈， 将子宫传入无菌隔离器内， 然后挤出胎仔， 并轻轻按摩仔兔至自主呼吸， 2 . 4 h 后开始人工哺乳.， 喂养至3 0 d 离乳。离乳的无菌 兔分别口服接种乳

10、酸杆菌、 双歧杆菌、 肠球菌和肠杆 菌使无菌兔S P F 化， 继续饲养至4 月龄。 1 . 2 S P F兔微生物检测 将4 月龄S P F 兔的新鲜粪便送到中国疾病预防 控制中心传染病控制所微生物室， 比对 G B 1 4 9 2 2 . 2 - 2 0 0 1 和G B 1 4 9 2 2 . 1 - 2 0 0 1 中S P F 兔的微生物质量标 准， 检测 S P F 兔携带微生物和寄生虫状况。 1 . 3 样品采集 空腹耳缘静脉采血0 . 5 m L , E D T A抗凝( 每个 1 . 5 t n L 的E p p e n d o r f 管中 加人1 5 %的E D T A

11、二钾盐水 溶液1 0 y L ， 在烤箱中不超过5 6 9 0 烘干后使用) ， 立 即测定血常规参数值; 同时每只家兔耳缘静脉采血 7 m L ， 静置0 . 5 h ， 然后3 0 0 0 r / m i n 离心5 m i n ， 取血 清， 测定血常规。 1 . 4 仪器及测定方法 全自动血球计数仪， A C T . 5 d i ff型， 美国贝克曼 2 结果 2 . 1 S P F兔微生物检测结果 检测结果如表 1 所示， 4月龄的 S P F 级新西兰 兔微生物质量 控制符 合 G B 1 4 9 2 2 . 2 - 2 0 0 1和 G B 1 4 9 2 2 . 1 - 2 0

12、 0 1 中S P F 兔的质量要求。 裹 1 微生物检测结果 T a b . 1 T h e re s u l t s o f m i c r o b i o l o g i c a l d e t e c t io n 徽生物种类S P F 级兔普通级兔 M i c r o o r g a n i s m S P F C o n v e n t i o n a l 兔沙门菌 S a l mon e l l a 叩 p -一 石青样毛醉菌 T r ic h o p h y to n m e n t a g r o p h y t a一+ 石膏样小抱子菌M ic r o s p o r u m

13、 g y p s e a n一+ 羊毛状小抱子菌M ic ro s p o r a m . “ 帅一+ 多杀巴斯德杆菌P a s t e u r e l l a m a l to c i d a一+ 支气管鲍特杆菌B o r d e te l l a b r o n c h is e p t ie a一+ 泰泽病原体T y z z e r s 价 ， 切 皿a m一+ 嗜肺巴斯德杆菌P a s t e u r e l t a p n e a m o t r o p ic a一+ 肺炎克雷伯杆菌K k b s i e ll a p 月 启 脚几 闭 姆一+ 金黄色葡萄球菌 . S t a p h

14、 y l o c o e e a a .一+ 肺炎链球菌S t n rp ta c o a c u s p 洲睡一+ 乙型溶血性链球菌户 h e m o l y t i o t r r p -一+ 绿脓杆菌 P s e u d o m o n a s a e r u g in m .一+ 兔出血症病毒R a b b it h e m o r r h a g ic d i s e a s e v i r u s- 轮状病毒 R o ta v i m s一+ 仙台 病 毒S e n d a i v ir u s一 + 体外寄生曳 E c to p a r e s i t e s 兔脑原虫 E n

15、c e p h a l it a z o o n c u n i c d 一+ 弓形虫 T o x o p l a s m a g o n d i i- 爱美尔球虫 E i m a r ia a p p .一+ 膜 壳 绦 虫H y m e n o lep is s p p ._ 止 一 注: “ 一 ” 代表阴性; “ +” 代表阳性。 N o te : “ 一 ” .n e g a t i v e ; “ + “ m e a n s p o s i t i v e . 万方数据 中国比 较医 学杂志2 0 0 8 年4 月 第IT .? 卷第4 期 C h i n C o m p M e

16、d , A p r i l 2 0 0 8 , V o l - 1 8 . N o . 4 2 . 2 血常规测定结果 血常规检测结果如表2和表3 所示， S P F兔在 白细胞数、 血红蛋白、 红细胞容积、 中性粒细胞百分 比、 嗜酸性粒细胞百分比、 嗜碱性粒细胞百分比、 中 性粒细胞数、 单核细胞数、 嗜酸性粒细胞数、 嗜碱性 粒细胞数等 1 0 项指标差异极显著( P 0 . 0 5 ) 。其中， S P F 兔的白细胞数、 嗜酸性粒细 胞百分比、 单核细胞数、 嗜酸性粒细胞数、 嗜碱性粒 细胞数、 血小板数低于普通级新西兰兔， S P F 兔血红 蛋白、 红细胞容积、 中性粒细胞百分比

17、、 嗜碱性粒细 胞百分比、 中性粒细胞数、 淋巴细胞百分比高于普通 级新西兰兔。 2 . 3 血生化测定结果 血生化检测结果如表4所示， 与普通级新西兰 兔相比， S P F 兔在总蛋白、 球蛋白、 A / G 、 谷酞转肤酶、 葡萄糖、 C a 、 高密度脂蛋白胆固醇等7 项指标差异极 显著( P 0 . 0 5 ) 。其中， S P F 级新西兰兔总蛋白、 球 蛋白、 谷酞转肤酶低于普通级兔， S P F 兔的白蛋白/ 球蛋白、 葡萄糖、 C a 、 肌醉、 高密度脂蛋白胆固醇高于 普通级兔。 衰2 S P F 级和普通级新西兰兔血液学常规数值比较 T 日 b。 2 n o f b l o

18、 o d p a r a m e t e r s b e t w e e n S P F a n d c o n v e n t i o n a l r a b b i t s 项 目 T e s t T h e c o m p a r i s o 单位 P v a l u e 白细胞数W B C 红细胞数 R B C 血红蛋白 H G B 红细胞容积 H C T 平均红细胞体积 M C V 平均血红蛋白含量 M C H C 平均血红蛋白浓度 M C H 红细胞体积分布宽度 R D W 血小板数 P L T 平均血小板体积 M P V S P F 级免 S P F P值 005哪0030011

19、17167307053049752 0.。0.0.氏0.0.0.0.0.0. 1 0 1 2 / L g / L UL II . 滩 g / L % 1 0 / L f l , 普通级兔 C o n v e n t i o n a l 7. 7 1 t 2 . 2 4 5 . 9 6.t0 . 3 7 1 3 1 . 3 0:k 6 . 3 3 0 . 3 7 t 0 . 0 1 6 6 2 . 印 t 3 . 4 4 2 2 . 1 0 t 0 . 8 2 3 5 3 . 犯 t 7 . 7 1 1 1 . 4 1 t 0 . 刃 1 3 1 . 0 0 6. 4 3 t 0 . 4 1 5

20、 . 0 5 t 1 . 3 4 6 . 2 3 * 0 . 3 3 1 4 0 . 7 0士5 . 6 4 0 . 4 0 t 0 . 0 1 7 6 4 . 印 t 1 . 7 1 2 2 . 5 7 t 0 . 6 3 3 5 0 . 3 0 t 5 . 7 6 1 2 . 2 3 t : 0 . 8 4 7 9 . 0 0 “ 6 . 3 3 t 0 . 卯 检验方法 T e s t 爬 山o d t 检验 t 检验 检验 t 检验 t 检验 t 检验 t 检验 检脸 秩和检验 t 检验 注: 表示使用秩和检验时， 给出总秩和。 N o t e . * m e a n s s u m

21、o f ran k s w a s s h o w n w h e n r a n k s u m t e s t w a s n w r d 裹3 S P F 级和普通级新西兰兔白细胞分类的比较 T a b . 3 T h e c o m p a r i s o n o f l e u k o c y t e p a r a m e t e r s b e t w e e n S P F a n d c o n v e n t i o n a l r a b b i t 项目 r e s t 单位 un i t 普通级兔 Co n v e n t i o n a l 010264001晰联脚

22、003溯001 中性粒细胞百分比 N E 淋巴细胞百分比 L Y 单核细胞百分比M O 啥酸性粒细胞百分比 E O 嘴碱性粒细胞百分比 B A 中性粒细胞数 N E # 淋巴细胞数 L Y # 单核细胞数 M O # 嗜酸性粒细胞数 E O # 嗜碱性粒细胞数 B A # 肠 % % % % ! 护/ L 1 护/ L 1 护/ L 1 护/ L 1 护/ L 5 7 . 0 0 S P F 级兔 S P F 1 1 4 . 0 0 检验方法 T e s t m e t h 记 秩和检验 尸值 P v a l u e 0. 0 0 1 5 7 . 叩 t 1 0 . 仍的 . 1 2 t 7

23、. 2 8 3. 1 6 t 0 . 7 52 . 7 8 t 0 . 7 2 t 检验 t 检验 1 3 3 . 0 0 3 8 . 0 0 1 . 3 6 t 0 . 2 9 印 . 5 0 4 . 3 7 t 1 . 0 3 0. 2 4 t 0. 0 6 8 0 . 9 6 t 0 . 3 0 1 1 0 . 5 0 3 . 4 8 t 0 . 9 5 0 . 1 4 t 0 : 0 5 履 1 3 5 . 0 0 1 4 7 . 5 0 “ 3 6 . 0 0 6 2 . 5 0 秩和检验 检验 秩和检脸 t 检验 检验 秩和检验 秩和检验 注: ， 表示使用秩和检验时， 给出总秩和

24、。 N o t e : * - s s u m o f r a n k s w a s s h o w n w h e n ran k s u m t e s t w a s i v -d . 万方数据 中国比 较医学杂志2 0 0 8 年4 月第i s 卷第4 期 C h i n J C o m p M e d , A p r i l 2 0 0 8 , V o l . I S . N o . 4 裹4 S P F 级和普通级新西兰兔血生化的比较 T a b . 4 T h e c o m p a r i s o n o f b l o o d b i o c h e m i c a l p

25、 a r a m e t e r s b e t w e e n S P F a n d c o n v e n t i o n a l r a b b i t if 目 T e s t S P F 级兔 S P F 检验方法 T e s t me t h o d P值 P v a l u e 期771161345叨叨场O7loo7ooll76028l27oo21960S4545oo36504so拐 总蛋白 T P 白蛋白 A L B 丙氮酸转氨酶 A L T 天冬氮酸转氨酶 A S T 球蛋白 G L O 白蛋白 / 球蛋白 A / G 总胆红素 T B I L 单位 U n i t g /

26、 L g / L I U/ L 普通级兔 C o n v e n t i o n a l 6 7 . 7 814 . 2 4 4 1 . 6 01 1 . 9 3 5 7 . 7 9: t 4 . 3 5 4 1 . 2 7* 2 . 卯 检验 检验 碱性磷酸酶 A L P 谷酞转肤酶 G G T u m o l / L I U/ L I U/ L mmn l / L mmo l / L u m o U L 拜 m o l/ L mm- I / L mmn l / L mmo l/L mm o l / L mmo l / L mmn l / L 1 2 3 . 5 0 9 2 . 5 0 2

27、6 . 1 8 t 3 . 1 0 1 . 6 1 :t 0 . 1 8 8 9 . 0 0 2 5 6 . 0 0士6 5 . 6 5 8. 2 0 1 3 . 5 8 8 6 . 5 0 1 1 7 . 5 0 “ 秩和检验 秩和检验 1 6 . 5 2: 0 . 1 6 2. 5 3 1 0 . 3 5 检验 检验 1 2 1 . 0 0 2 1 1 . 加 1 2 9 . 5 1 4. 4 01 1 . 7 1 有萄糖 G L U 尿素氮 B U N 肌酥 C R E A 尿酸 U A 钙 C a 碑 P 总胆固醇 C H O 甘油三酪 T G 高密度脂蛋白 胆固醉H D I L C

28、低密度脂蛋白胆固醇L D L C 磷酸肌酸激酶C K 乳酸脱氢酶 L D H ， 表示使用秩和检验时， 给出总秩和。 6 . 的 土1 . 7 1 7. 4 5 1 1 . 5 9 9 . 5 2 1 1 . 4 8 6. 3 8 1 1 . 8 2 1 似 . 1 0 1 1 9 . 1 61 1 7. 8 01 7 . 8 9 1 2 5 . 0 0 8 5 . 0 0 3. 1 3士0. 1 9 2 . 4 3 1 0 . 3 5 3 . 4 9 1 0 . 2 6 2. 印 1 0. 1 8 1 3 0 . 5 0 9 7 . 0 0 6 5 . 5 0 N/ L I U/ L 9 9

29、 . 0 0 “ 9 5 . 0 0 “ 9 4 . 0 0 1 4 4 . 5 0 “ 1 1 1 . 印 . 1 1 5 . 0 0 1 1 6 . 0 0 “ 秩和检验 t 检验 t 检验 : 检验 t 检验 检验 秩和检脸 检验 t 检验 秩和检验 秩和检脸 秩和检验 秩和检验 秩和检验 秩和检验 注 : No t e;* m . . . 4 s u m o f n- k 4 w a s s h o w n w h e n m ak s u m t e s t w a s u s e d . 3 讨论 3 . 1 S P F级和普通级新西兰兔血常规差异分析 S P F 兔在无菌隔离器中

30、生长， 温度、 湿度恒定， 呼吸的是经过过滤得无菌空气， 饲料和水也经过了 高压灭菌， 除了接种的4 种菌以外， 接触不到其他微 生物， 免疫系统没有经受其他微生物的侵袭， 免疫系 统很不完善， 防御功能比较低下， 而白细胞是机体防 御系统的一个重要组成部分， 所以S P F 兔血常规中 白细胞数比较低; 白细胞是一个庞大的血细胞家族， 包括淋巴细胞、 嗜碱性粒细胞、 中性粒细胞、 单核细 胞和嗜酸性细胞， 其中嗜酸性粒细胞具有趋化性， 能 吞噬搞原体复合物， 减轻其对机体的损害， 并能对抗 组织胺等致炎因子的作用; 嗜碱性粒细胞中有嗜碱 性颗粒， 内含组织胺、 肝素与 5 - 经色胺等生物活

31、性 物质， 在抗原一 抗体反应时释放出来; 单核细胞是血 液中最大的血细胞， 目前认为它是巨噬细胞的前身， 具有明显的变形运动， 能吞噬、 清除受伤、 衰老的细 胞及其碎片， 单核细胞还参与免疫反应， 诱导淋巴细 胞的特异性免性反应. ， 而 S P F兔生活在限菌的隔离 环境中， 接触到的微生物种类很少， 所以在白细胞分 类比较中， S P F 兔单核细胞数、 嗜酸性粒细胞数、 嗜 碱性粒细胞数均低于普通级新西兰兔。S P F 兔的血 小板数低于普通级兔， 血红蛋白、 红细胞容积高于普 通级兔， 与国内外 S P F动物和无菌动物的相关报道 基本一致 7 1 ， 其机制尚 不十分清楚， 考虑

32、与宿主特殊 的微生物寄生状况以及S P F 动物所处的屏障环境与 外界存在压差有关。另外， 经过统计分析， 无论是普 通级， 还是S P F 级新西兰兔， 雌雄两组动物的血常规 差异均不显著， 说明性别对新西兰兔的血常规没有 显著的影响。 3 . 2 S P F级和普通级新西兰兔血生化差异分析 本研究结果表明， S P F 级新西兰兔和普通级新 西兰兔总蛋白、 球蛋白、 A I G 、 谷酞转肤酶、 葡萄糖、 C a 、 高密度脂蛋白胆固醇、 肌醉等8 项参数均有差 异。血清球蛋白是一种免疫蛋白， 机体受到抗原刺 激后由肝脏和浆细胞合成， 它能与外来的特异性抗 原起免疫反应而保护机体， S P

33、 F 兔由于接触微生物 种类较少， 所以其产生的抗体种类也比较少， 所以 S P F 兔的球蛋白和总蛋白要比普通级兔低; 谷氨酞 万方数据 中国比 较医学杂志2 0 0 8 年4 月第1 8 卷第4 期 C h i n J C o m p M e d , A p r i l 2 0 0 8 , V o l . 1 8 . N o . 4 转肤酶分布全身， 血清谷氨酞转肤酶主要来自肝脏， 而肝脏是一个重要的免疫器官， 文献报道 S P F动物 的肝脏脏器系数较小a ， 故S P F 动物谷氨酞转肤酶 较低可能与其肝脏较小有关; 文献报道， 无菌小鼠接 种正常寄生菌后， 脂肪、 糖类等营养物质的代

34、谢水平 都发生了显著变化， 分子水平上利用基因芯片技术 发现小肠脂肪代谢相关基因转录水平改变， 接种菌 株不同导致基因表达发生的变化也不同， 结果显示 共生细菌调节多个涉及重要功能的小肠功能基因的 表达9 ) , S P F 兔的寄生菌种类和数量与普通级兔相 比发生改变， 导致营养物质代谢改变， 所以S P F 兔的 高密度脂蛋白胆固醇和葡萄糖水平较高可能与其营 养物质代谢改变有关; 肌配是反映肾小球功能的一 个参数， S P F 兔的肌醉和血钙水平较高， 可能和 S P F 动物的微生物寄生状况以及高压灭菌的饲料和饮水 有关。在比较雌雄两种新西兰兔的血生化差异时， 发现普通级和S P F 级

35、新西兰兔的雌雄间都不存在显 著差异， 表明性别对新西兰兔的血生化也不存在显 著影响。 实验动物血液学参数是生物医学研究的重要基 础参数， 实验证明， 微生物环境因素对实验动物血液 学参数的影响十分显著， 血液学参数是机体各组织、 器官功能和状态的反映， 说明寄生微生物对宿主的 生理、 代谢及机体防御等方面都有显著影响。S P F 动物生活在限菌的屏障环境中， 寄生微生物的种类 和数量与普通动物相比有很大变化， S P F动物逐渐 适应， 其生理生化各方面都有改变， 产生了很多独特 的特征， 这些特征决定了S P F动物有很多普通动物 不可替代的应用。随着我国实验动物学的发展， 实 验动物质量标

36、准与国际接轨势在必行， 目前我国在 医学研究中仍普遍使用的清洁级动物和普通级动物 必然要被国际通用的 S P F动物所取代， 而 S P F动物 的大规模使用， 其基础是本土化 S P F动物的基础生 物学数据测定， 这是一项非常迫切的工作， 本研究正 是针对这一趋势， 对 S P F级和普通级新西兰兔血液 学参数进行测定， 为 S P F 兔在我国医学科研中的广 泛应用提供重要的基础数据， 两组数据的比较也便 于医学科技工作者在实验动物模型的选择过程中参 阅、 参考。 .考文献: I 宫川澄. 无菌动物 M l . 东京: 医齿药出版株式会社. 1 9 7 3 : 1 1 4 一1 1 6.

37、 2 R e d d y B S ,. P l e a s a n t s J R , Z i m m e r m a n D R , e t a l . I ro n a n d c o p p e r u t i l i za t io n i n r a b b i t s a s a ff e c t e d b y d i e t a n d g e r m f r e e s t a t u s J l . J N u t r i t i o n , 1 9 6 5 , 8 7 ( 2 ) : 1 8 9 一1 9 6 . 3 C o a t e s M E , O D o n o

38、 g h u e P N . M i l k a l l e r g y i n in f a n t g e r m - f r e e r a b b its J . N a t u re, 1 9 6 7 , 2 1 3 ( 5 0 7 3 ) : 3 0 7 一 3 0 8 . ( 4) 薛家宾， 徐为中， 诸玉梅， 等. 实验兔生物净化初报 J l . 上 海实验动物科学， 2 0 0 3 , 2 3 : 1 7 4 一 1 7 5 5l 涂新明， 寿克让. S P F 及清洁级种兔的培育【 J l . 中国实验动 物学杂志， 2 0 0 1 ， 4 : 2 2 8 一 2 3 1

39、. 6 张业彬， 徐杏珍. 任文广， 等. 用 1 %苯扎澳铰溶液作为剖腹 产手术隔离器渡槽液进行无菌剖腹小鼠的实验 J . 中国实 验动物学杂志， 1 9 9 8 , 8 : 7 0 一 7 2 . 【 7 l T r 6 v n i ce k J , M a n d e l L , T re b ic h a v s k y I , e t a l . I m m u n o l o g i c a l s t a t e o f a d u l t g e r m f r e e m in i a t u r e M i n n e s o t a p i g s . F o l i a

40、 M ic ro b i o l . 1 9 8 9 , 3 4 ( 2 ) : 1 5 7 一1 6 4 . 8 l 衰进， 顾为望， 张弃宁， 等. S P F 级和普通级新西兰兔主要脏 器系数的比 较 J l中国比较医学杂志， 2 0 0 6 , 1 2 : 7 4 9 - 7 5 1 . ， B a c k h e d F , D in g H , W a n g T , e t a l . T h e g u t m ic ro b io ta .a n e n v i r o n m e n t a l f a c t o r t h a t r e g u la t e s f a t s to r a g e j . P ro c e e d i n g s o f t h e N a t i o n a l A c a d e m y o f S c i e n c e s o f t h e U n i t e d S t a t e s o f A m e r i c a . 2 0 0 4 ， 1 0 1 ( 4 4 ) : 1 5 7 1 8 一1 5 7 2 3 . 修回日期) 2 0 0 8 -01 - 1 0 万方数据