《[农业标准]-NYT552-2002 流行性淋巴管炎诊断技术.pdf》由会员分享，可在线阅读，更多相关《[农业标准]-NYT552-2002 流行性淋巴管炎诊断技术.pdf（6页珍藏版）》请在三一文库上搜索。
1、I C S 1 1 . 2 2 0 B4 1 1 / 中 华 人 民 共 和 国 农 业 行 业 标 准 N Y / T 5 5 2 -2 0 0 2 流行性淋巴管炎诊断技术 D i a g n o s t i c t e c h n i q u e s f o r e p i z o o t i c l y mp h a n g i t i s 2 0 0 2 一 0 8 一 2 7发布2 0 0 2 一 1 2 一 0 1实施 中 华 人 民 共 和 国 农 业 部发 布 N Y / 1 5 5 2 -2 0 0 2 前言 马流行性淋巴管炎( e p i z o o t i c l y m
2、 p h a n g i t i s ， 简称 E l ) 是由伪皮疽组织胞浆菌( H i s t o p l a s m a f a r c i m l n o s u m) 引起马属动物( 偶尔也感染骆驼) ， 以形成淋巴管和淋巴结周围炎、 肿胀、 化脓、 溃疡和肉 芽肿结节为特征的慢性传染病， 被世界动物卫生组织 Wo r l d O r g a n i z a t i o n f o r A n i m a l H e a l t h ( 英) , O f - f i r e I n t e r n a t i o n a l d e s E p i z o o t i e s ( 法
3、) , O I E 列为B 类疾病， 我国农业部列为二类动物疫病。 本标准与农业部 1 9 7 9 年颁布的 流行性淋巴管炎变态反应技术操作试行规程 比较， 有较多的补 充， 保留了原有的流行性淋巴管炎变态反应试验， 增加了流行性淋巴管炎的临床检查、 脓汁显微镜检查 和鉴别诊断， 应用本标准规定的三种诊断方法， 可以早期准备诊断本病， 对预防和控制流行性淋巴管炎 的发生和流行， 将起到重要的作用。本标准所规定的技术与O I E推荐技术 一致。 本标准的附录A为资料性附录。 本标准由农业部畜牧兽医局提出。 本标准由全国动物检疫标准化技术委员会归口。 本标准起草单位: 中国人民解放军军需大学。 本
4、标准起草人: 李佑民、 宣华。 N Y/ T 5 5 2 -2 0 0 2 流行性淋巴管炎诊断技术 1 范围 本标准规定了流行性淋巴管炎的临床检查、 脓汁显微镜检查及变态反应试验技术要求。 本标准适用于口岸、 产地、 集散地及饲养单位( 或个人) 的马( 骡) 的流行性淋巴管炎的诊断和检疫。 2 临床检查 2 . 1 检查前准备 术者及助手均穿全套工作服， 术者戴医用胶皮手套。 配制消毒药液( 0 - 1 %新洁尔灭或3 %来苏儿) 。 由助手保定被检马( 骡) 。 2 . 2 临床检查方法 先视诊被检动物体表有无结节、 脓肿及溃疡， 而后触摸颈部及胸部两侧， 了解结节及脓肿的分布、 大 小、
5、 性质以及浅表淋巴管肿胀情况。最后检查可视粘膜。 2 . 3 病变特征 流行性淋巴管炎的特征性症状是在皮肤、 皮下组织及勃膜上发生结节、 脓肿和溃疡。皮下淋巴管发 炎肿大， 并有串珠状结节。非重症病马( 骡) ， 其体温、 食欲及精神无明显变化。 2 . 3 . 1 皮肤病变 最常发生于四肢、 头部， 颈部及胸侧的皮肤及皮下组织。 初期结节小而扁平呈丘疹状， 以后逐渐增至 蚕豆大乃至鸡蛋大。 初期硬固无痛， 以后化脓形成脓肿， 中心变软有波动， 局部被毛脱落， 最后破溃， 流出 黄色或黄绿色猫稠的脓汁， 疡底形成平的溃疡， 以后肉芽组织赘生， 形成蘑菇状溃疡( 溃疡面高于周围的 皮肤) 。溃疡
6、不易愈合， 并向周围扩散， 或几个溃疡融合一起， 形成一个大溃疡面。 2 . 3 . 2 贴膜病变 全身性感染病例， 可在鼻腔、 口 唇、 眼结膜及阴道猫膜等处发生结节。结节的特征是扁平， 呈不整圆 形， 高出粘膜表面， 大小不等， 呈黄白色， 表面光滑干燥， 边缘整齐， 周围无红晕。结节化脓破溃后形成溃 疡。病变发生于鼻腔时， 则流出少量钻脓性弃液。 2 . 3 . 3 淋巴管炎病变 受侵害的淋巴管变粗变硬， 如索状( 索肿) ， 并沿肿胀的淋巴管形成数个结节， 呈串珠状排列( 申珠状 结节) ， 最终破溃形成蘑菇状溃疡。 局部淋巴结肿大化脓。 2 . 4 判定 具有2 . 3 . 1 ,
7、2 . 3 . 2 和2 . 3 . 3 任何一项病变者， 均应怀疑为流行性淋巴管炎病马( 骡) ， 并做脓汁显微 镜检查或变态反应试验。 3 脓汁显微镜检查 3 . 1 材料准备 3 . 1 门器材 普通光学显微镜， 载玻片， 盖玻片， 灭菌 2 m L -5 m L注射器带 1 6 号针头， 灭菌小试管， 灭菌棉拭 子， 灭菌移液管， 1 0 %氢氧化钠溶液或生理盐水。 N v/ T 5 5 2 -2 0 0 2 3 门. 2 采样 用注射器无菌采取脓肿内的脓汁， 或用棉拭子采取溃疡面 L的脓汁及脓痴， 放人小试管， 立即送实 验室检查， 或放 4 冰箱保存待检。 3 . 2 操作方法 3
8、 . 2 - ， 压滴标本制备 用移液管吸取 1 0 %氢氧化钠液或生理盐水， 滴一小滴( 约0 . 0 2 5 m l - ) 于载玻片中央、 而后用钩菌环 取少量脓汁放于液滴内混匀， 加上盖玻片， 即成压滴标本。棉拭子采取的脓汁及脓痴可直接涂于载玻片 上。再加 1 0 0 o 氢氧化钠液一小滴， 等脓痴变透明后， 加上盖玻片 3 . 2 . 2 显微镜检查 将压滴标本放于载物台上， 把显微镜的集光器下调， 使进人物镜的光线弱一些。 先以高倍镜头( 扩大 4 0 。 倍一5 0 0 倍) 检查， 后用油浸镜头检查。 脓汁中流行性淋巴管炎囊球菌的典型形态为椭圆形( 象西瓜 子) 或圆形， 具有
9、双层菌膜， 一端或两端尖锐， 大小为3 p m - - 4 p mX 2 p m-3 p m， 内部为均质半透明状 态， 内含2 -4 个折光性强的小颗粒， 呈现回旋运动。菌体多单个存在， 也有 2 -3 个菌相连者， 常常可在 脓细胞内看到十几个菌体成堆存在。 13 判定 3 . 3 . 1 全面检查 2 个压滴标本， 任何一个标本发现典型的流行性淋巴管炎囊球菌， 则判为流行性淋巴 管炎脓汁检查阳性。 13 . 2 二个压滴标本均未发现流行性淋巴管炎囊球菌， 应再采样检查一次， 如仍未发现囊球菌， 则判为 流行性淋巴管炎脓汁检查阴性。 4 变态反应试验 4 门材料准备 4 . 1 . 1 器
10、材: 灭菌1 m L注射器及针头， 游标卡尺， 剪毛剪, 7 5 %酒精棉球或 。 . 1 %新洁尔灭棉球。 4 . 1 . 2 变态反应原。 4 . 2 操作方法 4 . 2 . 1 剪毛 在被检马、 骡左侧或右侧颈部中三分之一的中央部健康皮肤处剪毛， 面积5 c m X 5 c m。被毛尽量 剪短。 4 . 2 . 2 测f皮肤皱栩厚度 在使用囊球菌素时， 须在注射前将剪毛部位的皮肤用手指捏起， 以游标卡尺测量皮肤皱摺的生理厚 度( 以m m表示) ， 并记人登记表。登记表样式见附录A( 资料性附录) 。 4 . 2 . 3 消毒及注射 用7 5 %酒精棉球或。 . 1 %新洁尔灭棉球消毒
11、剪毛部位后， 使用灭菌注射器皮内注射囊球菌素或浓 缩囊球菌素， 成年马( 骡 0 . 3 m L ， 两岁以内马( 骡) 0 . 2 m L 。 注射后3 天内， 避免重度使役， 防止磨擦注射 部位。 4 . 2 . 4 检查 在注射后第2 4 h , 4 8 h , 7 2 h 各检查一次。 注射囊球菌素者， 用游标尺测量注射部位皮肤的皱褶厚度 ( 以m m表示) 。注射浓缩囊球菌素者， 用游标卡尺测量注射部位皮肤肿胀的面积( 以c m X c m) 表示， 并 将结果记人登记表。 4 . 3 判定 以第2 4 h , 4 8 h 和7 2 h 三次检查中的 最强反应为准。 皮肤增厚度为最强
12、反应的皮肤皱褶厚度减去 皮肤皱褶生理厚度所得的差。 肿胀面积指注射部位发生的界限明显的疼痛性弥漫性肿胀范围， 其判定标 准见表 1 。 N Y / T 5 5 2 -2 0 0 2 判定 阴性 疑似 阳性 表 1 变态反应判定标准表 轰 球 菌 素 皮 肤 皱 褶 增 加 厚 度 / m m 浓缩囊球菌素肿胀面积/ c m 3 . 0以下 3 . 1 - 5 . 0 5 . 1以 卜 4 . 0以下 4 . 1 - 8 . 0 8 . 1以 卜 注 1 : 疑似反应马( 骡) . 间隔一周在对侧颈部再注射一次， 操作方法同4 . 2 。 两次疑似反应判流行性淋巴管炎变态 反应阳性. 注 2 :
13、 注射囊球菌索或浓缩囊球菌素后 2 4 h -4 8 h ， 小部分马( 骡) 出现轻度体温升高， 绝大多数于第 7 2 h 恢复 正常。 注3 : 流行性琳巴管炎治愈马( 骡) ， 不宜做变态反应试验。 5 鉴别诊断 5 ， 1 岛疽 皮肤鼻疽的结节、 溃疡和淋巴管索肿等症状易与流行性淋巴管炎相混淆。但皮肤的溃疡底凹陷， 湿 润而呈猪油样。溃疡边缘呈撕裂或火山口 状， 没有明显的愈合倾向。脓汁内含有革兰氏阴性、 着色不均 匀的鼻疽假单胞菌。应用鼻疽菌素点眼呈阳性反应。 5 . 2 资疡性淋巴管炎 病变主要发生于后肢下部， 溃疡不呈蘑菇状， 容易愈合， 附近的淋巴结几乎不受侵害， 病程呈良 性
14、经 过， 脓汁内 含有革兰氏阳 性小杆菌( 假结核棒状杆菌) 。 将病料制成( 1 ， 5 ) -( 1 e 1 0 ) 的悬液， 腹腔注射 1 m L 于雄性豚鼠， 引起类似鼻疽的典型皋丸炎， 各实质脏器产生干酷性坏死结节。 6 综合判定 6 . 1 具有2 . 3 . 1 , 2 . 3 . 2 , 2 . 3 . 3 任何一项病变， 同时脓汁显微镜检查呈阳性者， 判为流行性淋巴管炎病 马( 骡) 。 6 . 2 具有2 . 3 . 1 , 2 . 3 . 2 , 2 . 3 . 3 任何一项病变， 同时变态反应试验呈阳性者. 判为流行性淋巴管炎病马 ( 骡) 。 6 . 3 无可疑症状， 但变态反应试验阳性者， 判为流行性淋巴管炎变态反应阳性马( 骡) 。 N Y / T 5 5 2 -2 0 0 2 附录A ( 资料性附录) 流行性淋巴管炎变态反应试验登记表 畜主( 单位或个人) : 变态反应原名称: 生产厂家及批号: 试验 日期: 操作者 : 马骡编号临床检查结果脓汁镜检结果 变态反应试验 终判 注射前皮厚2 4 h4 8 h7 2 h判定 注 注射浓缩囊球菌芬( 时不需填写注射前皮厚。 1 2 0