[商检标准]-SNT 1101-2002 进出口油籽及粮谷中黄曲霉毒素的检验方法.pdf

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1、SN 中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 S N / T 1 1 0 1 -2 0 0 2 进出口油籽及粮谷中 黄曲霉毒素的检验方法 De t e r mi n a t i o n o f a f l a t o x i n s i n o i l s e e d s a n d c e r e a l s f o r i mp o r t a n d e x p o r t 2 0 0 2 一 0 3 一 1 5发布 2 0 0 2 一 0 9 一 0 1实施 中华人民共和匡 国 家 质 量 监 督 检 验 检 疫 总 辰 S N/ T 1 1 0 1 -2 0 0 2 前言 本标准是根据

2、G B / T 1 . 1 -1 9 9 3 标准化工作导则 第1 单元: 标准的 起草与表述规则 第1 部分: 标准编写的基本规定 及S N/ T 0 0 0 1 -1 9 9 5 出口商品中农药、 兽药残留量及生物毒素检验方法标准编 写的 基本规定 的要求进行编写的。 其中 测定方法第一法: 荧光光度法， 采用了 美国 公职分析 化学家协会 公定分析方法 第 1 6 版中所载的黄曲霉毒素含量分析方法， 技术内容与原方法相同， 经验证后， 按规定 格式要求作了编辑性修改。 第二法: 薄层色谱法， 是参考国内外有关文献， 经研究、 改进和验证后制定的。 测定低限是根据国际上对油籽及粮谷中黄曲霉

3、毒素最高限量和测定方法的灵敏度而制定的. 本标准的附录A为提示的附录。 本标准由中华人民共和国国家认证认可监督管理委员会提出并归口。 本标准由中华人民共和国山东出人境检验检疫局负责起草。 本标准主要起草人: 第一法: 张艺兵、 张鹏、 赵卫东、 顾正志; 第二法: 张鹏、 赵卫东、 张艺兵、 李少容、 马洪雷。 本标准系首次发布的检验检疫行业标准。 中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 进出口油籽及粮谷中 黄曲霉毒素的检验方法 S N/ T 1 1 0 1 -2 0 0 2 De t er mi nat i o n of a f l at ox i ns i n oi l s e e ds a

4、 n d c e r e a l s f o r i mp o r t a n d e x p o r t 范 围 本标准规定了进出口油籽及粮谷中黄曲霉毒素检验的抽样、 制样和荧光光度法及薄层色谱法的测 定方法 。 本标准中荧光光度法适用于进出口花生仁、 花生果和玉米中黄曲霉毒素总量( B , 十B z +G, +G ) 的 检验; 薄层色谱法适用于进出口花生仁、 花生果和玉米中黄曲霉毒素 B B z , G ， 或 G : 的检验。 引用标准 下列标准所包含的条文， 通过在本标准中引用而构成为本标准的条文。本标准出版时， 所示版本均 为有效。所有标准都会被修订， 使用本标准的各方应探讨使用下

5、列标准最新版本的可能性。 S N / T 0 7 9 9 -1 9 9 9 进出口 粮油、 饲料检验 检验一般规则 S N/ T 0 8 0 0 . 1 -1 9 9 9 进出口粮油、 饲料检验抽样和制样方法 3 抽样和制样 抽样和制样按S N/ T 0 8 0 0 . 1 的规定进行。 第一法荧光光度法 测定方法 4 . 1 方法提要 试样中的黄曲霉毒素用甲醇一 水( 7 +3 ) 提取， 提取液经过滤、 稀释后， 用免疫亲和柱净化。以甲醇洗 脱， 加人澳溶液使成衍生化物， 以提高测定灵敏度。黄曲霉毒素总量( B , +B 2 +G, +G 2 ) 用荧光光度法 测定。 4 . 2 试剂和材

6、料 除另 有规定外， 所用试剂均为 分析纯， 水为重蒸馏水。 4 . 2 . 1 甲醇: 用全玻璃装置重蒸馏。 4 . 2 . 2 甲醇: 液相色谱纯。 4 . 2 . 3 徽化钠。 4 . 2 . 4 黄曲霉毒素免疫亲和柱: P柱或相当者。 4 . 2 . 5 澳溶液储备液: 称取适量的滨， 溶于水中， 配制成 0 . 0 1 %的储备液， 避光保存。 4 - 2 - 6 澳榕液: 0 . 0 2 g / L ， 取1 0 M I 澳溶液储备液 加人4 0 m L 水混匀， 供衍生用， 当日 制备。 中华人民共和国国家质f监督检验检疫总局2 0 0 2 - 0 3 - 1 5 批准2 0 0

7、 2 - 0 9 - 0 1实施 s N/ T 1 1 0 1 -2 0 0 2 4 . 2 . 7 1 La 4 . 2 . 8 硫酸溶液: 0 . 0 5 mo l / L， 取 2 . 8 mL浓硫酸( 9 5 %9 8 肠) ， 缓慢加人适量水中， 冷却后定容至 荧光光度计校准溶液: 称取3 . 4 0 g二水合硫酸奎宁 ( C z . H z , N z O z ) - H z S 0 4 2 H , 0 3 。 用 。0 5 m o l / L 的 稀硫酸稀释至1 0 0 m L ， 此溶液的荧光强度相当于2 0 n g / m L 浓度的黄曲霉毒素标准 溶液 的荧光强度。 4 .

8、 3 仪器和设备 4 . 3 . 1 荧光光度计. 4 . 3 . 2 高速均质器。 4 . 3 . 3 玻璃纤维滤纸。 4 . 3 - 4 空气压力泵。 4 . 3 . 5 玻璃试管: 1 2 X 7 5 mm， 无荧光特性。 4 . 4 测定步骤 4 . 4 . 1 提取 称取试样约 2 5 g ( 精确至 。 1g ) 于 2 5 0 mL具塞锥形瓶中， 加人5g 氯化钠及 1 2 5 mL甲醇( 4 . 2 . 1 ) 一 水( 7 +3 ) ， 以均质器高速搅拌提取 2 min 。过滤， 移取 1 5 . 0 ml滤液至 2 5 0 m L具塞锥形瓶中， 并加人 3 0 . 0 m

9、L 水稀释混匀。以 玻璃纤维滤纸过滤几次， 直至滤液澄清， 随即 进行免 疫亲和 柱净化操作。 4 . 4 . 2 免疫亲和柱净化 将免疫亲和柱连接于 2 0 M L玻璃针筒下。 准确移取1 5 . 0 m L( 相当于 I g 试样) 上述澄清滤液， 注人 玻璃针筒中， 将空气压力泵与针筒连接， 调节压力使溶液以约 6 mL / mi n流速全部过免疫亲和柱 ， 再使 2 m L -3 m L空气 通过柱体。 以2 X 1 0 m L水淋洗柱子， 弃去全部流出 液， 再使2 m L - - - 3 m L 空气通过柱 体。 准确加人 1 . 0 mL甲醇( 4 . 2 . 2 ) 进行洗脱，

10、 洗脱流速为 1 m L / mi n -2 mL / mi n 。 收集全部洗脱液于玻 璃试管中， 供检测用。 4 - 43 测定 4 . 4 . 3 . 1 荧光光度计的校准 在激发波长 3 6 0 n m， 发射波长4 5 0 nn 条件下， 以硫酸溶液( 4 . 2 . 7 ) 为空白， 调节荧光光度计的荧光 强度值读数为 0 . 0 ; 以校准溶液( 4 . 2 . 8 ) 调节荧光光度计的荧光强度值读数为 2 0 . 0 , 4 . 4 . 3 . 2 样液的测定 在上述洗脱液( 4 - 4 . 2 ) 中加人 1 . 0 m L澳溶液( 4 . 2 . 6 ) , 棍匀， 静置

11、1 mi n 。按 4 . 4 - 3 . 1 条件进行操 作， 测定其荧光强度值， 再从荧光强度值换算得黄曲霉毒素的浓度值。 4 . 4 - 4 空白试验 除不称取试样外， 均按上述测定步骤进行。 4 . 5 结果计算和表述 按式( 1 ) 计算试样中黄曲霉毒素的含量: c x VVm . . ， 二， ， . (1) 式中: X试样中总黄曲霉毒素含量， - g / g ; c 从荧光光度计上求得的 样液中黄曲 霉毒素的浓度， n g / m L ; V样液最终定容体积， m L; m 最终样液所代表的试样量, g . 注: 计算结果需扣除空白值. 测定低 限、 回收 率 测定低限 s N

12、/ T 1 1 0 1 -2 0 0 2 本方法的 测定低限为2 . 0 p g / k g , 5 . 2 回收率 花生仁、 花 生果和玉 米中黄曲霉毒素添加浓度及 其回收率实验数据如下。 5 . 2， 花生仁中的回收率 在2 . 0 p g / k g 时， Q 收率为8 7 . 5 Y o ; 在1 0 . 0 p g / k g 时， 回收率为9 2 . 0 %; 在2 0 . 0 p g / k g 时， 回收率为9 9 . 0 %. 5 . 2 . 2 花生果中的回 收 率 在2 . 0 p g / k g 时， 回 收率为8 5 . 0 %; 在1 0 . 0 p g / k g

13、 时， 回收率为9 0 . 0 写; 在 2 0 . 0 p g / k g时， 回收率为 9 6 . 0 %. 5 . 2 . 3 玉米中的回收率 在 2 . 0 p g / k g时， 回收率为 8 5 . o % ; 在 1 0 . 0 p g / k g 时， 回收率为9 2 . 5 %; 在 2 0 . 0 p g / k g 时， 回收率为 9 6 . 0 %. 第二法薄层色谱法 6 测定方法 61 方法提要 试样中的黄曲霉毒素 B B 2 , G ， 或G : 用甲醇一 水( 7 +3 ) 提取， 提取液经过滤、 稀释后， 用免疫亲和柱 净化。 以甲醇洗脱， 将洗脱液以氮气吹干，

14、 残渣以苯一 乙睛( 9 8 +2 ) 溶解并定容。 以薄层色谱法荧光扫描测 定各种黄曲霉毒素的含量， 外标法定量。 6 . 2 试剂和材料 除另有规定外， 所用试剂均为分析纯， 水为蒸馏水。 6 . 2 . 1 甲醉: 用全玻璃装置重蒸馏。 6 . 2 . 2 氯化钠。 6 . 2 . 3 苯一 乙精( 9 8 +2 ) : 取 2 m I乙睛用苯稀释至 1 0 0 mL . 6 . 2 - 4 丙酮一 三氯甲烷( 7 +3 ) : 取 3 0 mL三氯甲烷用丙酮稀释至 1 0 0 mL , 6 . 2 . 5 黄曲霉毒素免疫亲和柱: P柱或相当者。 6 . 2 . 6 黄曲霉毒素 B B

15、Z , G: 或Gz 标准品: 纯度均)9 9 %e 6 . 2 . 7 标准 储备液: 分别称取适量的黄曲霉毒素B B , G G ， 标准品， 以 苯一 乙 睛( 9 8 十2 ) 配制成浓度 为。 1 0 0 m g / m L的标准储备液。 6 . 2 . 8 混合标准工作液: 根据需要准确移取适量的黄曲霉毒素B B s , G , 或 G : 的标准储备液， 以苯一 乙 睛( 9 8- 2 ) 稀释成适当浓度的标准工作液。 6 . 3 仪器和设备 6 . I1 薄层色谱扫描仪配有荧光检测装置。 6 . 3 - 2 高速均质器。 6 . 3 - 3 微量注射器: 5 0 p L o 6

16、 . 3 - 4 玻璃展开缸: 2 0 X 1 0 c m, 6 . 4 测定步骤 6 . 4 . 1 提取按 4 . 4 . 1 操作。 6 . 4 . 2 免疫亲和柱净化按 4 . 4 . 2操作。 将洗脱液于5 5 0C-6 0 用氮气流吹干。 准确加人。 . 5 mL苯 3 S N/ T 1 1 0 1 -2 0 0 2 一 乙 肪( 9 8 +2 ) 以溶解残渣， 溶液供薄层色谱法测定。 6 . 4 . 3 测定 6 . 4 . 3 . 1 色谱条件 a ) 薄层色 谱板: 高效硅胶G 6 0 , 1 0 X 1 0 c m或2 0 X 1 0 c m; b ) 点样位置: 样点距薄

17、层板下沿 1 5 mm， 间距 1 0 mm; c ) 点 样量: 2 0 . 。 p L ; d ) 展开剂: 丙酮一 三抓甲烷( 7 十3 ) ; e ) 检测 条件: 荧光直线扫描， 激发波 长3 6 5 n m ， 发射波长4 4 0 n m , 6 . 4 - 3 . 2 点样与展开 根据样液中黄曲霉毒素B B 2 , G G : 的含量情况， 选定峰高相近的混合标准工作液， 混合标准工作 液和样液中黄曲霉毒素 B B AG G : 的响应值均应在仪器检测的线形范围内。对混合标准工作液和样 液按上述条件等体积参差点样。待样点溶剂挥发后， 将薄层板放人玻璃展开缸中， 用展开剂展开至薄层

18、 板上沿。取出， 使在空气中干燥。 6 . 4 - 3 . 3 色谱测定 在上述色谱条件( 6 . 4 . 3 . 1 ) 下， 对薄层色谱板进行扫描测定。黄曲霉毒素 B B z , G G : 的比移值分 别约为 。6 3 , 0 . 5 6 , 0 . 5 1 , 0 . 4 5 。标准品的薄层色谱荧光扫描图见附录A中图Al , 6 . 4 . 4 空白试验 除不称取试样外， 均按上述测定步骤进行。 6 . 5 结果计算和表述 用数据处理机或按式( 2 ) 计算试样中黄曲霉毒素( B B AG, 或G ) 的含量: X, h ,X cXV h, X m 。 。 . 。 。 . 。 . .

19、. . . . . 。 二(2) 式中: X , 试样中黄曲霉毒素( B , , B A G ， 或G z ) 含量， - g / g ; h , 样液中黄曲 霉毒素( B B G ， 或G 2 ) 的峰高, m m; h ,混合标准工作液中 黄曲 霉毒素( B B 2 , G ， 或G i ) 的峰高, m m ; 混合标准工作液中 黄曲 霉毒素( B B z , G ， 或G , ) 的 浓度， n g / m L ; V 样液最终定容体积， mL; 二最终样液所代表的试样量， g . 注: 计算结果需扣除空白值。 测定低 限、 回收率 7 . 1 测定低限 本 方 法 测 定 低限 :

20、黄 曲 霉 毒 素B ， 为1 . 0 Fa g / k g ; B : 为1 . 0 F a g / k g ; G ， 为1 . 0 p g / k g ; G : 为 1 . 0 F l g / k g , 7 . 2 回收率 花生仁、 花生果和玉米中黄曲霉毒素添加浓度及其回收率实验数据如下。 7 . 2 . 1 花生仁中的回收率 黄曲 霉毒素添加浓度/ ( p g / k g )回收率 B , 1 . 0 8 1 . 0 % B, 2 . 0 8 7 . 5 % B, s . o 9 0 . 0 % S N / T 1 1 0 1 -2 0 0 2 黄曲霉毒素 B Z B E B z

21、添加浓度/ ( K g / k g ) 11 0 回收率 8 0 . o y o 8 0 . O Y o 8 3 . 1 % 7 1 . 0 % 7 0 . 0 % 8 0 . O % GGG 8 0 . 0 % 8 0 . 0 % 7 5 . 0 % n六U00C户nno n乙卜匕1二n乙81止n乙只 GGG 7 . 2 . 2花生果中的回收率 黄曲霉毒素 B , B , B , 添加浓度/ ( p g / k g )回收率 7 8 . 5 % 8 3 . 0 % 8 0 . 1 % 1.02.08.0 1 .0 2 .0 8 .0 8 2 . 0 % 8 0 . 0 % 8 5 . 4 %

22、 ，确乙内 BBB 1 .0 2 .0 8 .0 7 0 . 0 % 6 6 . 5 % 7 3 . 0 % GGG Gz Gz Gz 7 - 2 . 3 玉米中的回收率 黄曲霉毒素 B, B , B, 1 . 0 2 .0 8 .0 6 7 . 5 % 7 2 . 2 % 7 3 . 3 % 添加浓度/ ( ! g / k g ) 1 . 0 2. 0 8. 0 回收率 7 7 . 5 0 0 7 9 . 0 0 o 7 9 . 7 % S N/ T 1 1 0 1 -2 0 0 2 黄曲霉毒素 B z B Bz 添加浓度/ ( f a g / k g ) ; 8 10 回收率 8 1 .

23、0 % 8 2 . 4 % 3 4 . 6 % ; : 8。0 7 3 . 50 0 7 4 . 0 % 7 7 . 1 % GGG 6 8 . 00 o 7 0 . 5 % 7 5 . 0 % nnn 11n乙no GGG s N / T 1 1 0 1 -2 0 0 2 附录A ( 提示的附录) 标准品色 谱图 注: 色谱峰号 1 , 2 , 3 , 4分别为黄曲每毒素G G B B , ， 比移值分别为 。 . 4 5 , 0 . 5 1 , 0 . 5 6 , 0 . 6 3 . 图A1 黄曲霉毒素B B , G G: 标准品的薄层色谱图 SN / T 1 1 0 1 -2 0 0 2

24、 F or e wo r d T h i s s t a n d a r d w a s d r a ft e d i n a c c o r d a n c e w i t h t h e r e q u i r e m e n t s o f G B / T 1 . 1 -1 9 9 3 “ D ir e c t iv e s f o r t h e w o r k o f s t a n d a r d i z a t io n -U n it 1 : D r a ft i n g a n d p r e s e n t a t io n o f s t a n d a r d s -P

25、 a rt 1 : G e n e r a l r u l e s f o r d r a ft i n g s t a n d a r d s “ a n d S N / T o o o 1 -1 9 9 5 “ G e n e r a l r u l e s f o r d r a ft i n g t h e s t a n d a r d me t h o d s f o r t h e d e t e r m i n a t io n o f p e s t i c i d e , v e t e r i n a ry d r u g r e s i d u e s a n d b

26、i o t o x i n s i n c o mm o d it ie s f o r e x p o rt “ . I n t h is s t a n d a r d , t h e t e s t i n g me t h o d f o r q u a n t it a t i v e d e t e r min a t i o n o f a f l a t o x i n in t h e A O A C O ff ic i a l Me t h o d 1 6 t h . E d . i s a d o p t e d a s t h e Me t h o d 1 ( F l

27、u o r o me t r ic me t h o d ) wh ic h i s t h u s t e c h n i c a l ly id e n t ic a l w it h t h a t o f t h e o r ig i n a l ; o n l y m i n o r e d it o r i a l m o d if i c a t i o n r e q u i r e d f o r t h e s t ip u l a t e d f o r - ma t w a s ma d e a ft e r g o i n g t h r o u g h v e r

28、if i c a t i o n . T h e Me t h o d 2 o f t h i s s t a n d a r d ( T h i n l a y e r c h r o - m a t o g r a p h ic m e t h o d ) w a s d r a ft e d b y r e f e r r i n g t o t h e r e l e v a n t d o m e s t i c a n d f o r e i g n li t e r a t u r e s t h r o u g h r e s e a r c h , mo d if ic a

29、t i o n a n d v e r i f i c a t i o n . T h e l i mit o f d e t e r mi n a t i o n i n t h i s s t a n d a r d is d e f i n e d o n t h e b a s i s o f t h e c u r r e n t i n t e r n a t i o n a l ma x i - mu m l i mit f or a f l a t o x i n s i n o i l s e e d s a n d c e r e a l s a n d t h e s e

30、 n s it iv i t y o f t h e me t h o d. Ann ex A of t hi s s t a ndar d i s an i n f or ma t i ve anne x. T h is s t a n d a r d wa s p r o p o s e d b y a n d i s u n d e r t h e c h a r g e o f t h e C e rt if i c a t i o n a n d A c c r e d it a t io n a d - min i s t r a t io n o f t h e P e o p

31、l e s R e p u b l ic o f C h i n a . T h is s t a n d a r d wa s d r a ft e d b y S h a n d o n g E n t ry- E x i t I n s p e c t i o n a n d Q u a r a n t i n e B u r e a u o f t h e P e o - p i e s R e p u b li c o f C h i n a . T h e ma i n d r a ft e r s o f t h i s s t a n d a r d a r e Z h a n

32、 g Y i b i n g , Z h a n g P e n g , Z h a o We id o n g a n d G u Z h e n g z h i f o r Me t h o d 1 ， a n d Z h a n g P a n g , Z h a o We i d o n g , Z h a n g Y i b i n g , L i S h a o g i a n a n d Me H o n g le i f o r Met hod 2. T h i s s t a n d a r d i s a p r o f e s s i o n a l s t a n d

33、a r d p r o mu lg a t e d f o r t h e f i r s t t i me . N o t e : T h is E n g li s h v e r s io n , a t r a n s la t i o n f r o m t h e C h in e s e t e x t , is s o l e ly f o r g u id a n c e P r o f e s s i o n a l S t a n d a r d o f t h e P e o p l e s R e p u b l i c o f C h i n a F o r E n

34、 t ry- E x i t I n s p e c t i o n a n d Q u a r a n t i n e De t e r mi n a t i o n o f a f l a t o x i n s i n o i l s e e d s a n d c e r e a l s f o r i mp o rt a n d e x p o rt SN/ T 1 1 0 1 -2 0 0 2 1 S c o p e T h i s s t a n d a r d s p e c if i e s t h e m e t h o d s o f s a m p l i n g ,

35、s a m p l e p r e p a r a t i o n a n d d e t e r m i n a t i o n o f a f l a t o x - i n s b y f lu o r o me t r y a n d t h in la y e r c h r o ma t o g r a p h y i n o i l s e e d s a n d c e r e a ls f o r i mp o rt a n d e x p o rt M e t h o d 1 o f t h i s s t a n d a r d i s a p p l ic a b le

36、 t o t h e d e t e r mi n a t io n o f t o t a l a f l a t o x i n s ( B , +B 2 +G , +G 2 ) i n p e a n u t , p e a n u t i n s h e l l a n d ma iz e f o r i mp o rt a n d e x p o rt , me t h o d 2 o f t h i s s t a n d a r d i s a p p l ic a b le t o t h e d e t e r mi n a t io n o f a f l a t o x

37、i n B 1 , B 2 , G 1 , o r G 2 c o n t e n t i n p e a n u t , p e a n u t i n s h e l l a n d ma i z e f o r i mp o rt a n d e x p o rt. 2 No r ma t iv e r e f e r e n c e T h e f o ll o w in g s t a n d a r d s c o n t a i n p r o v is io n s w h i叻, t h r o u g h r e f e r e n c e i n t h i s t e

38、x t , c o n s t it u t e p r o v i - s i o n s o f t h is s t a n d a r d. A t t h e t i me o f p u b l ic a t i o n , t h e e d i t i o n s i n d i c a t e d w e r e v a li d . A l l s t a n d a r d s a r e s u b j e c t t o r e v i s i o n , a n d p a rt i e s u s i n g t h is s t a n d a r d s h

39、a l l i n v e s t i g a t e t h e p o s s i b i lit y o f a p p ly i n g t he mos t r e cen t edi t i on s of t he s t anda r ds i n di ca t ed bel ow . S N / T 0 7 9 9 -1 9 9 9 I n s p e c t i o n o f c e r e a ls , o i ls a n d f e e d s t u f f s f o r i mp o rt a n d e x p o rt - Ge n e r a l r

40、u le s f or t h e in s p e c t i o n S N / T 0 8 0 0 . 1 -1 9 9 9 I n s p e c t i o n o f c e r e a l s , o i ls a n d f e e d s t u ff s f o r im p o rt a n d e x p o rt - M e t h o d s o f s a mp l i n g a n d p r e p a r a t i o n o f s a mp le s 3 S a mp l i n g a n d s a mp l e p r e p a r a t

41、i o n F o l lo w t h e i n s t r u c t io n s g i v e n in S N / T 0 8 0 0 . 1 . Me t h o d 1 : F l u o r o me t r i c me t h o d 4 Me t h o d o f d e t e r mi n a t i o n 4 . 1 P r i n c i p l e T h e a f l a t o x i n s i n t h e t e s t s a mp le a r e e xtr a c t e d wi t h me t h a n o l - wa t

42、 e r ( 7 + 3 ) . T h e e x t r a c t i s f i lt r a t e d , d i l u t e d wit h w a t e r , a n d a p p l i e d t o immu n o a f f in i t y c o l u mn f o r c le a n u p . A f l a t o x i n s a r e e l u t e d wit h me t h a n o l a n d t r e a t e d wit h b r o mi n e s o l u t i o n , r e s u lt i

43、n g i n t h e f o r ma t i o n o f d e r i v a t i v e s . T o t a l a f l a t o x - i n s a r e q u a n t i t a t e d b y f l u o r o me t r y . A p p r o v e d b y G e n e r a l A d mi n i s t r a t io n o f Qu a l it y I mp l e me n t e d f r o m 2 0 0 2 - 0 9 - 0 1 S u p e rvi s i o n， I n s p e

44、 c t i o n a n d Q u a r a n t i n e o f t h e P e o p le s R e p u b l i c o f C h i n a o n 2 0 0 2 一 0 一 1 SN/T 1 1 01 - 200 2 4. 2 R e a g e n t s a n d ma t e r i a l s U n l e s s o t h e r wis e s p e c i f i e d , a ll t h e r e a g e n t s u s e d s h o u l d b e a n a l y t i c a ll y p u

45、r e ; “ wa t e r “ i s d is t i ll e d 4 . 2 . 1 Me t h a n o l : R e d is t i l le d in a ll - g la s s d i s t i l l i n g s y s t e m. 4 . 2. 2 Me t h a n o l : L C g r a d e. 4. 2. 3 Sodi um chl or i de 4 . 2 . 4 A f l a t o x i n i mmu n o a f f i n it y c o l u mn : P o r e q u iv a l e n t .

46、4 . 2 . 5 B r o mi n e s t o c k s o l u t i o n : We i g h a n a d e q u a t e a mo u n t o f b r o min e , d i s s o lv e a n d d i l u t e in p r o p e r a mo u n t o f w a t e r t o p r e p a r e t h e s t o c k s o l u t i o n s o f 0 . 0 1 % i n c o n c e n t r a t i o n . K e e p a wa y f r o

47、 m li g h t . 4 . 2 . 6 B r o mi n e s o l u t i o n : 0 . 0 2 g / L . P r e p a r e f r e s h d a i l y b y mi x i n g 1 0 mL o f b r o min e s t o c k s o l u t io n wit h 4 0 mL o f wa t e r . U s e t h i s s o l u t ion f o r d e r i v a t i z a t i o n 4 . 2 . 7 S u lf u r i c a c i d s o l u t

48、 i o n : 0 . 0 5 mo l/ L , d i l u t e 2 . 8 mL o f c o n c e n t r a t e d s u lf u r i c a c i d ( 9 5 %一 9 8 %) t o 1 L Wi t h wa t e r . 4 . 2 . 8 F l u o r o me t e r c a l i b r a t i o n - s o l u t i o n : We i g h 3 . 4 0 g o f q u i n i n e s u lf a t e d i h y d r a t e L ( C 2 O H 2 4 N

49、2 0 2 ) “ H 2 S O 4 - 2 H 2 0 ) , d is s o l v e a n d d il u t e t o 1 0 0 mL w i t h 0 . 0 5 m o l/ L s u l f u r ic a c i d s o l u t i o n . T h e f l u o r e s - c e n c e i n t e n s it y o f t h is s o l u t io n is e q u i v a l e n t t o t h a t o f a f l a t o x i n s t a n d a r d s o l u t i o n o f 2 0 n g / mL in c on c e n t r a t ion . 4. 3 Ap p a r a t u s a n d e q u i p me n t 4. 3.1 F l uor ome t e r. 4 . 3 . 2 H i g h - s p e e d b le n