《传染性法氏囊病病毒 VP243CHIL2融合基因DNA疫苗免疫原性研究.pdf》由会员分享，可在线阅读，更多相关《传染性法氏囊病病毒 VP243CHIL2融合基因DNA疫苗免疫原性研究.pdf（7页珍藏版）》请在三一文库上搜索。
1、传染性法氏囊病病毒! “ # $ % 3 , 7 + 1 ? ( / ? 4 ( 5 * + ( 3 5 ( 3 2 + 4 ? (，A B C D） 多聚蛋白 （D ; “E#） 基因和鸡白细胞介素“ （ 3 , 7 + 1 ? (/ ? 4 ( 5 * + ( 3 5 ( 3， A B C） 是目前危害世界养禽业的三大主要传染病之 一， 该病的病原传染性法氏囊病病毒 （+ - 3 , 7 + 1 ? (/ ? 4 I ( 5 * + ( 3 5 ( 3 2 + 4 ? (，A B C D） 主要侵害雏鸡的中枢免疫 器官法氏囊， 造成免疫抑制和其它疫苗的免疫失败。 A B C D为双股双节段
2、= K L病毒， 其基因组由L、B两 个节段组成， 其中L节段包括两个部分重叠的开放 阅读框架 （9 = W !、 9 = W “） 。9 = W “编码与病毒致病 性有关的D ; O蛋白 # ； 9 = W !编码多聚蛋白 （D ; “ E #） ， 经加工剪切成#个成熟的蛋白D ; “、D ; E和 D ; # E 。D ; “是病毒的主要宿主保护性抗原 O、 N， D ; #是群特异性抗原 R ， D ; E是病毒的蛋白酶 。 B节段编码D ; !蛋白，D ; !具有= K L依赖的= K L 聚合酶活性 N、 。 白细胞介素“（+ - 7 3 4 * 3 ? G + -“，A H I
3、“）是P F !型 细胞免疫应答的重要细胞因子， 具有显著的免疫增 强及抗病毒作用， 已被广泛应用于C K L疫苗的免 疫试验中。研究发现A H I “能通过不同作用环节调 节和增强C K L疫苗的免疫效果， 发挥其佐剂效应。 本研究小组在前期工作中已证实了A B C D多聚蛋白 （D ; “ E #）C K L疫苗能提供一定的保护力， 同时研 究还证实联合鸡白细胞介素“（ ? 3公司； 重组质粒; $ 7 N 3 1 = 2 5 %柱购自 + = G 2 Q 1 0 Q K = G= R 1 L = 6 / K G 3 G Q ; 4 3 2 6 K S; $ 7 N 3 1 = 2 5 %
4、过柱纯化后溶于无菌与等量病毒悬液 = /“于“ 8孔板中混和， 置: = 97 ? 6 #培养箱中中和) A， 弃去已长满单层细胞的“ 8孔板中的营养液， 将病毒与血清 中和溶液# / “接种于单层细胞上， 每个中和溶液接种8孔， 并设最低稀释度的纯血清和) / /5 6 * , 7 /的病毒作对照， 置 : = 97 ?6 #培养箱中吸附) A。在吸附后的细胞单层上加 维持液 （) 孔） ， 置: = 97 ? 6 #培养箱中继续培养， 每 天观察#次， 至“ 8 A， 记录细胞病变情况。按B C C D E F G C $ H A法 计算出每个血清样品的中和保护价 （ M G Q C #
5、B C 4 U Q ; H U ; K $C $ V W % C D ; M C 4 U ; K $1 $ D $ 1 $ U S 1 4 % ; D 4 S 6 * E - Z C H K $ U Q K ；! Y S 6 * E - M C 4 U C D ; U A“ # $B* % $ ; 2 ( # . / *! “ # $ %8 = 2 : ; 7/ 0 % 8 C C 2 = 6 A ! 病毒中和试验 / 0 %疫苗各试验组免疫后的中和抗体动态变 化规律见图,所示。各试验组的血清中和抗体效价 均随时间的推移而稳定上升， 并在加强免疫后) H 5 8 9 2 F 8 2 ; =8
6、= 2 : ; 7/ 0 % 8 C C 2 = 6 A “ # $ %疫苗各试验组诱导的外周血 ? , 1 ? ; - ? A B C B D D E9B F G - D H F I ? - D B ; J ? A I ; D K ? L - D K L ? 表%不同“ # $疫苗免疫后对强毒株 L D KD J - D I ? H I ; M ? ; G G = K ? ? L - D K L ? L D J E ; J J ? ? K I! “ #M A H H ; K ? ; G G = K ; N ? E H ; H O ? K L H A B B ? K = B ? K I L I
7、 A ; K( ) * + , P D = - L ) ; H O ? K L Q C = L A B ? L ; D K L H D ? L # 8$ D ( ( = L A( RS - B ? ? K( R ! ? A E1 D I ? H I ; M ? A I ; D - ) . / . 5 / D K L H D ? L：8 TK D B ? L ; D K；$ TG ; B E H ? B B E ? - B ? I ; D K ; KA J ? UJ D B B ; H B ? L； D K ; K$ I D $ H B ? L； T L ? M ? ?K ? H D L ; L
8、 A K EA I D - F ; K A B B J D B B ; H B ? L 2( 20 A B = ? L L D UA M ? A $ H O ? K L 2 # M ? A A A G L I D I A B C D E FU ? ; A G L 2“A”; K E ; H A I ? L M A B = ?K D I L ; ? K I J D GK D G A B H D K I D B （!“ 8 2 8 ,） 2“C”; K E ; H A I ? L M A B = ? L ; ? K I J D GK D G A B H D K I D B （! 8 2 8 ,）
9、2 讨论 传染性法氏囊病病毒主要侵害雏鸡的中枢免疫 器官法氏囊， 导致以免疫抑制为主的淋巴细胞衰 竭综合症， 造成对多种病原的易感性增加以及其他 疫苗的免疫失败。传统. ( !人工免疫主要是使用 弱毒苗和灭活苗， 但. ( ! 0变异株和超强毒株的出 现给该病的防治带来了困难， 免疫失败时有发生。 随着对. ( ! 0分子生物学研究的不断深入， 利用各 种不同表达系统构建的. ( ! 0多聚蛋白! “ #疫苗 的免疫原性仍不够理想， 因此如何增强疫苗的免疫 效果， 开发实用有效的疫苗就成为防制疫病的关键。 在前期工作中利用. ( ! 0! “ #疫苗对鸡群进 行免疫， 通过不同免疫途径的比较试
10、验发现以肌肉 和皮内联合注射免疫产生的中和抗体和保护率最 高， 免疫效果最佳。同时还进行了不同免疫剂量的 比较试验， 结果表明 （, 8 V , ;） ： - A .V- A “ A K ,/ B GW，/ B ? C UXH，Y Q ? C UH N，0 O ? F K 4 C 7 ? C E 0 P 0 C O 2 T O 7 0 B P ) P Q C 2 U 0 C B E B O J2 T# $ %R ? E E B C 0 ? U ? B C I O B C T 0 E O B 2 Q I Q 1 I ? F S B I 0 ? I 0R B 1 Q I J E 2 ) S 0 F
11、 B R 0 1 JZ B O 7 （!） ： 8 ; V ! A A K .3 2 2 OYG，Y Q Q 1 C 0%Y M，Y 2 0 D P ? C%GN，0 O ? F K W 0 I E Q 02 T R 0 1 JR B 1 Q F 0 C O ? C SP 2 I ? B E B C T 0 E O B 2 Q I Q 1 I ? F S B I 0 ? I 0R B 1 Q I T 1 2 PE F 2 C 0 S E # $ %：* + , B I C 2 O O 7 0 I 2 F 0 S 0 O 0 1 P B C ? C O 2 T O 7 0 R 0 1 JR B
12、1 Q F 0 C O V , ! 8 K # J B C U G，G ? E D Z 2 2 S#G K % C O B U 0 C B E ? C S B P P Q C 2 U 0 C B E ; 8，- ,：8 A V ; ! K “/ 0 ? F$， 2 I O ?3#，Y Q 0 O GK W 2 F 0 2 T 5 0 1 ) “ ,? C S/ J I ) “ ; , B C O 7 0 8 . V ; ; , K = 0 1 C ? C S 0 _%，W B I E 2，M ? 1 O B C 0 _ 5，0 O ? F K 4 9： 8 8 ? = = O 9 6 8 J
13、I O ? ; 6 8 I殷震， 刘景华6动物病毒学 N6第I版Q北京： 科学出版社， 8 9 9 ; 6 8 J李建荣，周继勇6传染性法氏囊病病毒变异株弱毒的免疫原性 研究 56中国预防兽医学报，I J ? 8 6 8 =于涟， 李建荣， 黄耀伟， 等6传染性法氏囊病病毒D P A疫苗的 免疫原性研究 56中国农业科学，I 8 J = : 6 8 O李英华，朱威，胡福良6蜂胶的生物学活性及其在医学上的应 用前景 56蜜蜂杂志，I 8 I 6 8 ;B # 5T，U ( , $ FV W，B # , $ FXV，% , - 6 Y - , ) 1 # .D P A% $ = 6 ! “ # $ “ % ? : * 5 - + “A % , # * 9 % 3 0， “ % 1 % 8 : O 9 ; 8 : 9 =；C D J & % .：0 : . % & # = $ :Q# 7 :Q- J=8 I期 万旺军等： 传染性法氏囊病病毒7 Y I=J 2 E 0 R B 2 I融合基因D P A疫苗免疫原性研究