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1、 1 9 0 C h in e s e J o u r n a l o f C o a l I n d u s t r y Me d ic i n e F e b r u a r y 2 0 0 6 , V o l . 9 , N o . , 文章 幼号1 0 0 7 一 ， 5 6 4 ( 2 0 0 6 1 0 2 一 0 1 9 0 一 0 2 制作大鼠急性心肌梗死模型的实验分析 0 6 3 0 0 0 河北省唐山市， 河北医科大学附属唐山市工人医院心内一科 许丹张春来李霞纪征刘长青卢峰姜玉风姜玉如尚小明 关健词心肌 梗死 ; 疾病 模型 ; 大 鼠 中图分 类号R - 3 3 2文 献
2、标 识码A 心肌梗死动物模型的开发与应用， 是研究人类心肌梗死 病理、 诊断乃至于治疗的基础， 对于研究人类心肌梗死具有重 要的应用价值， 为完成干细胞移植对急性心肌梗死后细胞因 子影响的课厉, 我们运用结扎左冠状动脉前降支的方法建立 了大鼠急性心肌梗死模型。本文就实验中遇到的问题和解决 的方法进行总结报告如下. 1 材料与方法 1 . 1 动物选择清洁级S p r a g u e Da wle y ( S D) 大鼠2 0 0只( 雌 雄不限) ， 体重1 5 0 -2 0 0 g ， 用前喂养 1周. 1 . 2 器械设备小动物呼吸机( 上海奥尔科特生物科技有限 公司提供) 、 无损伤缝合
3、针、 眼科剪、 眼科镊、 文氏钳, 6一。缝 合线等手术器械。 1 . 3 模型制作方法 1 . 3 . 1 术前麻醉选用 1 0周龄 S D大鼠， 体重 1 5 0 - 2 0 0 g ( 由华北煤炭医学院实验动物中心提供) 。用 1 0 %水合抓醛 3 5 . g / k g 腹腔注射使大鼠麻醉。参照 0li y e t t “1 方法并加以 改进结扎冠状动脉( 冠脉) 前降支制备心肌梗死大鼠模型 1 . 3 . 2 气管插管参照王响英等 z 1 的方法将大鼠的舌头拉 出尽量上提看到气道的开合后进管， 连接呼吸机见大鼠胸廓 随呼吸机频率起伏后证明插管成功， 设定呼吸参数， 吸呼比为 1 .
4、 5: 1 ， 人工呼吸的频率6 0次/ min , 潮气量 1 -5 m l 八O O g 1 . 3 . 3 开胸干胸骨左侧做与胸骨平行的纵形切口， 各层肌 肉分层打开， 若看到肋间肌， 钝性分开左缘3 -4肋间肌， 尽量 撑开， 暴据心脏， 撕开心包膜。用左手示指、 拇指固定大鼠胸 骨， 中指抵住胸廓右侧左推 挤破心包， 迅速弹出心脏. 1 . 3 . 4 结扎在左心耳与肺动脉圆椎之间找到左冠状动脉， 在动脉起始点下方2 - - 3 m m处， 用6一 。号丝线结扎左冠状动 脉前降支， 结扎深度 0 . 3 - 0 . 5 mm, 结扎进针不可太深， 否则 容易大出血， 打结时尽量保持水
5、平拉紧线， 忌高高提起， 这样 极容易将结扎部位心肌拉断， 线脱出.注意选择的结扎部位 是看不见前降支的， 应以左冠状静脉主干为标志结扎， 后将心 脏送回胸腔. 逐层关闭胸腔， 此步骤一定要迅速， 最好 3 0 、内 完成.术中经肉眼观察 梗死区呈苍白色; 手术前后均记录体 表心电图， 以n 导联S T段弓背向上抬高为结扎成功的标志。 肌肉各层缝合， 缝皮， 撤呼吸机. 1 . 3 . 5 术中术后注意事项手术过程中 密切观察， 出现呼 吸或心脏暂停， 及时抢救， 可适当增加呼吸频率、 进行心脏按 摩等， 很多时候能及时抢救过来。术后对术中失血较多的在 晨起清醒后用灌胃针灌注少量牛奶， 以利大
6、鼠恢复。此外术 后单笼饲养也很重要， 因为术后大鼠容易躁动. 较大空间会增 加死亡率如果和正常的大鼠放在一起会被欺负。术后用青 霉素4 0万 U腹腔注射， 连用 3 d 预防感染。 2 实验结果 实验过程中大鼠死亡例数、 死亡原因及预防措施分析见 表 1 表1 实验中大眼死亡原因及预防措施分析 表现例数 原因措施 精 神姜靡 、 休 毛无 光 、 不进 食 心包积脓 、 切 口 感染 血 胸心 脏 破 裂 呼吸停 止 麻醉 剂过量 月 市 脏破裂 , f : 室 颇 动 挤 压心脏 时器械 损伤肺 结 扎部位偏 高 、 缺氧 抽位样 呼吸 、 发 d 呼吸困难 、 发继 喉 头水肿 气 胸肺
7、不张 3讨 论 1 ) 实验初期问题很多， 最重要的是呼吸对于初学制作 模型者小动物呼吸机属于必备。原因是开胸后， 造成气胸， 大 鼠死亡率高。我们按照张润峰等D;的方法颈部气管切开插 管， 自觉呼吸道难以管理， 术后大鼠状态不佳， 死亡率高。后 经总结实验失败的原因得出， 经口腔直视下插管成功才是整 个心肌梗死模型制备成功的关键!我们参照王响英等 z7 的方 严格无 菌操作 ， 术后抗 感染 结 扎进针 不能 过深 ， 结扎 线不 能拉得 过紧 ， 避 免结扎 部位心肌位 断 选择合适 的麻 醉剂 ， 严格 按公 斤体重 从小剂 全开始麻 醉 开、 关胸时 要注 意避免 缝针 、 手术 器械
8、 刺破肺脏 结扎 部位 略低 ， 呼吸 机保证 供氧 气管插管时不要经过喉头、 动作轻柔避免喉头损伤 呼 吸机辅 助呼吸 、 关 胸前排 出胸 内空气 ， 结 扎关胸 过程迅速 法略加改进， 插管选用一段输液器管， 略作改装， 插好后观察 胸腔， 是否随呼吸机的频率起伏， 确定插管成功后将插管固 定， 切忌插管移动位置， 造成脱管， 切忌插管不要过喉头， 我们 对7例大鼠做了经喉头的气管插管， 术中都很好， 术后全部窒 息死亡， 究其原因， 大鼠声门狭小. 插管后喉头略有水肿便导 致窒息死亡。 2 ) 其次是麻醉。麻醉不可讨IN : 庶醉讨深. 呼P j$ $物. 中 国煤炭工 业医学杂 志
9、2 0 0 6 年 2 月 第 9 卷 第 2 期 1 9 1 术中呼吸机稍微没带到， 大鼠就可能窒息， 导致实验失败。 麻醉药的选择; 徐清斌等冈用抓胺酮， 程方洲等s 7 用乌拉坦麻 醉。我们的经验是乌拉坦对血压的影响很大， 建议不要使用， 氯胺酮应用后大鼠容易出现抽搐不利于手术操作。刘元生 等( s 报道， 用氯胺酮2 5 .g / k g , 戊巴比妥钠6 . 8 mg / k g 、 阿托品 l m g / k g 和利多卡氏I O m g / k g 进行腹腔复合麻醉. 大鼠术后 苏醒快， 无呼吸道分泌物， 无麻醉意外， 死亡率低。我们 曾实 验N抓胺酮6 0 m g / k g
10、, 2 0 %乌拉坦 0 . 1 ml八O O g 联合麻醉也取 得了满意效果。但复合麻醉实际操作过程繁琐故不宜采纳. Y -等E 7 1 用戊巴比妥麻醉， 华平等fa l 使用水合氯醛均取得满 意效果， 我们体会戊巴比妥对血压和心律失常影响比较小， 效 果最好。此外1 0 纬的水合抓醛麻醉效果也不错， 且大鼠苏醒 快 。 3 ) 关闭胸腔时， 要涨肺.这也很重要。关胸前， 应先调整 呼吸插管位置， 直到肺脏充分涨起， 小心关闭胸腔， 避免损伤 肺脏。缝合皮肤口 纵观整个模型制作的全过程， 管理好呼吸是实验成功的 关键操作熟练减少气胸带来的损伤是实验成功的重要环 节， 如果操作熟练3 0 :
11、完成开胸结扎也可以不上呼吸机， 但成 功的几率不足 1 / 3 , 所以对初学者应用呼吸机制作大鼠心肌 梗死模型是可行的 4奋 老 女 献 1 习幻月 5 8 7 O li v e tt i G, C a p J M , Me g g s L G , e t a l . C e l l u l a r b a s is o f c h r o n ic v e n t r ic u la r r e m o d e l in g a f t e r m y o c a r d ia l in f a r c a i o n in r a t s J 7 . C i rc R e s , 1 9
12、 9 1 , 6 8 ; 8 5 6 一 8 6 9 王响英 ， 吴 淑燕 ， 李 苏安 ， 等 . 大 鼠直视 气管插 管方法D . 上海 实验动 物科 学 ,2 0 0 4 , 2 4 ( 2 ) ; 1 0 7 一1 0 8 张 润 峰 ， 王继 生建 立大 鼠心肌 梗 死模 型 的若 干 间题 探讨 C J 7 . 山西医科 大 学学报 ， 2 0 0 4 ,3 5 ( 2 ) : 1 3 一1 5 徐清斌 ， 张馥敏 ， 扬 志健 ， 等. 局 部注 射 自 体 骨髓间充 质干细 胞 修复 心梗后 心肌 的实验 研究E l l _ 江苏 医药杂志 , 2 0 0 4 , 3 0 (
13、4 ) 2 6 6-2 6 7 程方 洲 . 马业新 ， 余细球 ， 等. ML A 预处 理对 老年 大 鼠心肌 缺 血 一再灌 注损伤 的影 响及 N F - a B在其 中的作用 月. 现代 医 学 ， 2 0 0 5 ,3 3 ( 4 ) ; 7 4 一7 7 刘 元生 ， 陈运 贞. 慢性 心肌梗 塞大 鼠实验模 型 月 重庆 医科 大 学 学报 , 2 0 0 么2 7 ( 2 ) : 1 5 3 一 1 5 5 Y a u T M , F u n g K, We is e l R D, e t a l . E n h a n c e d my o c a r d ia l a n
14、 g io g e n e s is b y g e n e t r a n s fe r wit h t r a n s p la n t e d c e ll s J . C ir c u - Ia t i o 6 ,2 0 0 1 , 1 0 4 ( s u p p l l ) ; 1 2 1 8 一 1 2 2 2 华平 ， 熊利 华 ， 张华 ， 等_ 骨 髓间 充质干 细胞移植 重建大 鼠缺血 心肌 的实验研 究 J 7 . 中华 显徽 外科 杂 志 , 2 0 0 4 , 2 7 ( 5 ) 1 117 一 1 1 9 F 2 0 0 5 -1 2 -0 7收稿 2 0 0 5
15、-1 2 -2 3 修回二 国川 文 章编 号1 0 0 7 一 9 5 6 4 1 2 0 0 6 1 0 2 一 0 1 9 1 一0 1 经外周插管的中心静脉导管在 神经外科患者的临床应用及管理 1 0 0 0 2 8 北京市， 煤炭总医院神经外科李润英 关键词经 外周擂 管的 中心静脉 导管 : 神 经 外科 ;静 脉 治疗 中图 分类号R 4 7 2 . 9文献标 识码B 1临 床 资 料 2 0 0 0年9月一2 0 0 5 年 9月我院神经外科病房经外周插 管的中心静脉导管( P I C C ) 患者6 0例， 男 3 1例， 女2 9 例。平 均年龄 5 1岁。其中应用于脑出血
16、患者2 3例， 脑外伤患者 1 9 例， 脑瘤患者1 0 例、 脑转移瘤患者 8 例。 采用美德医用导管研制集团生产的P I C C, 根据身体条件 及用药情况分别选用4 . O F导管、 4 . 5 F导管。 2操 作 方 法 具体操作方法如下 确定穿刺点， 首先选择上肢较粗的 浅静脉。如肘正中静脉、 贵要静脉、 头静脉。测量插人长度， ( 患者上肢外展9 0 0 , 测量 自预定插管人点至锁骨头， 然后向下 至第三肋间) 。上臂扎止血带， 充盈血管， 选定穿刺点， 彻底 消毒穿刺野。戴无菌手套， 常规铺无菌巾， 再次消毒穿刺 野， 用穿刺针刺人所选定的静脉。见回血后松止血带， 左手 固定针
17、头， 右手向内送管， 直至预定长度.退出穿刺针， 修 剪长度， 固定缝合翼， 撤针芯套肝素帽， 用专用固定器固定. 用无菌敷料掩蔽穿刺点， 穿刺区域弹力绷带包扎2 4 h ， 接上 输液装置即可输液。 3 管理 操作前向患者解释P I C C的使用方法、 用途、 优点及注意 事项。家属签定P I C C置管同意书、 主管医生签字、 操作者签 字， 并由医生开出医嘱; 无菌敷料 2 4 h更换， 以后每周更换 2 次无菌敷料.护士每日测量上臂周径并记录 每夭输液前后 用2 0 -1 盐水冲管， 输掖结束后用5 - - 8 -1 肝素盐水封管弓 患者 床头卡上记录置管时间、 型号、 长度、 上臂周径， P I C C穿刺成功率高， 有效地减少反复穿刺的痛苦， 为患 者提供了一条安全有效的静脉治疗通路， 值得推广。