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1、现代中西医结合杂志M o d e r nJ o u r n a lo fI n t e g r a t e dT r a d i t i o n a lC h i n e s ea n dW e s t e r nM e d i c i n e2 0 0 9O c t ，1 8 ( 2 9 ) 3 5 4 5 中药黄芪长期毒性试验研究 刘 阳1 ，张云鹏2 ，孙影2 ，张健2 ( 1 河北省唐山市中医医院，河北唐山0 6 3 0 0 0 ；2 华北煤炭医学院，河北唐山0 6 3 0 0 0 ) 摘要】目的观察黄芪煎剂对大鼠的长期毒性反应，以评价其长期用药的安全性。方 法8 0 只W i s t
2、 a r 大鼠随机分为高( 1 8 0g k g ) 、中( 9 0g k g ) 、低( 4 5g k g ) 剂量组和对照组，给 大鼠连续灌服黄芪煎剂9 0d ，给药期间每日观察动物的一般状况。停药后1 ，3 0d 分别处死动 物，测量大鼠体质量，检测血、尿常规和血生化，测定主要脏器质量系数并做病理组织学检查。 结果连续给药3 个月对大鼠的一般状况，血、尿常规，主要脏器质量及其系数均无影响；心、 肝、脾、肺、肾脏无病理变化。除停药1d 后高剂量组7 一G T 高于对照组( P 0 0 5 ) ，其他各 项生化指标与对照组比较均无显著性差异。高剂量组停药1d 后有8 只大鼠胃黏膜呈现糜烂 性
3、损伤并散在点状出血点，光镜组织学检查为炎性改变。另2 只胃黏膜正常。停药3 0d 后高 剂量组有6 只胃黏膜出现糜烂性损伤，但范围较小，程度较轻，且未见有出血点。结论黄芪长期用药对大鼠无明显 毒性，可较大剂量长期服用。 关键词】黄芪；毒性试验；长期毒性；W i s t a r 大鼠 中图分类号 R 一3 3 2 文献标识码】A 文章编号】1 0 0 8 8 8 4 9 ( 2 0 0 9 ) 2 9 3 5 4 5 0 3 L o n gt e r mt o x i c i t ye x p e r i m e n t a ls t u d yo ft r a d i t i o n a lC
4、 h i n e s eh e r bH u a n g q i 。Liu Y a n 9 1 ，Z h a n gY u n p e n 9 2 ，S u nY i n g ，2 ，Z h a n gJ i a n 2 ( 1 ：T r a d i t i o n a lC h i n e s eM e d i c a lH o s p i t a lo fT a n g s h a n ，T a n g s h a n0 6 3 0 0 0 ，H e b e i ，C h i n a ；2 N o r t hC h i n aC o a lM e d i c a lC o l l e g
5、e ，T a n g s h a n0 6 3 0 0 0 ，H e b e i ，C h i n a ) A b s t r a c t ：0 b j e c t i v eI t i st Os t u d yt h et o n gt e r mt o x i c i t yo fH u a n g q io nr a t sa n de v a l u a t ei t ss a f e t yo fl o n gt e r mm e d i c a t i o n M e t h o d s8 0W i s t a rr a t sw e r er a n d o m l yd i
6、v i d e di n t oh i g hd o s e ( 1 8 0g k g ) g r o u p ，m i d d l ed o s e ( 9 0g k g ) g r o u p ，l o w d o s e ( 4 5g k g ) g r o u pa n dc o n t r o lg r o u p T h er a t sw e r ec o n s e c u t i v e l yd r e n c h e dH u a n g q if o r9 0d a y s T h eg e n e r a ls t a t u so f t h ea n i m a
7、l sw a so b s e r v e dd a i l yi nm e d i c a t i o nd u r a t i o n T h ea n i m a l sw e r ek i l l e da te i t h e r1o r3 0d a y sa f t e rd r u gd i s c o n t i n u a n c e T h eb o d yf n a s so ft h er a t sw e r em e a s u r e d T h er o u t i n e c o n t r o lo fb l o o da n du r i n ea n d
8、t h eb l o o db i o c h e m i s t r yw e r em e a s u r e d T h em a s sc o e f f i c i e n to fm a j o ro r g a nw a sd e t e r m i n e da n dt h eh i s t o p a t h o l o g yd e t e c tw a sd o n e R e s u l t sT h e r ew e r en o i n f l u e n c e so fc o n s e c u t i v e l ym e d i c a t i o nf
9、o rt h r e em o n t h so nt h eg e n e r a ls t a t u s ，t h er o u t i n ec o n t r o lo fb l o o da n du r i n e ，t h er - l l a s 8 a n dc o e f f i c i e n to fm a j o ro r g a no ft h er a t s T h e r ew e r en op a t h o l o g i c a lc h a n g e so nh e a r t ，l i v e r ，s p l e e n ，l u n ga
10、n dk i d n e y T h e r ew e r en os i g n i f i c a n td i f f e r e n c e so nt h eb i o c h e m i c a li n d i c a t o r sb e t w e e nh i g hd o s eg r o u pa n dc o n t r o lg r o u pe x c e p t7 一G T i nh i g hd o s eg r o u pa t1da f t e rd r u gd i s c o n t i n u a n c eW a sh i g h e rt h a
11、 nt h a ti nc o n t r o lg r o u p ( P 0 0 5 ) T h eg a s t r i cm u c o s 8o f e i g h tr a t ss h o w e de r o s i o ni n j u r ya n ds p o r a d i cp u n c t i f o r mp e t e c h i ai nh i g hd o s eg r o u pa t3 0d a y sa f t e rd r u gd i s c o n t i n u a n c ea n d t h el i g h tm i c r o s c
12、 o p eh i s t o l o g yd e t e c t i o nW a si n f l a m m a t o r yc h a n g e T h eg a s t r i cm u c o 髓o ft h eo t h e rt w or a t sW a sn o r m a li n h i g hd o s eg r o u p T h eg a s t r i cm u c o s ao fs i xr a t ss h o w e de r o s i o ni n j u r yi nh i g hd o s eg r o u pa t3 0d a y sa
13、f t e rd r u gd i s c o n t i n u a n c e ，b u tt h ee x t e n tW a ss m a l l e r ，t h ed e g r e ew a sl i g h t e ra n dt h ep e t e c h i aw a sn o tf o u n d C o n c l u s i o nL o n gt e r mm e d i c a t i o n o fH u a n g q ih a sn oo b v i o u st o x i c i t yo nr a t s ，S Oh i g h e rd o s
14、eo fH u a n g q ic a nb eu s e df o rl o n gt e r m K e yw o r d s ：H u a n g q i ；t o x i c i t yt e s t ；l o n gt e r mt o x i c i t y ；W i s t a rr a t s 我院用中药“益肾蠲湿合剂”治疗狼疮性肾炎，取得了良 好疗效川。该合剂处方中黄芪为君药，用量较大。为了给该 黄芪用量提供依据，并进一步指导黄芪的临床用量，特进行黄 【作者简介】刘阳( 1 9 7 4 一) ，女，主治医师，主要从事中西医结合 内科临床与科研工作。 【通信作者张健，T e
15、l ：0 3 1 5 2 8 4 1 8 2 5 基金项目河北省唐山市科技局资助项目( 0 4 3 6 2 0 0 1 B 一1 2 ) 芪长期毒性试验，现报道如下。 1实验资料 1 1 材料 1 1 1 制备黄芪煎剂取生黄芪9 0 0g ，水煎2 次，每次煎剂 量10 0 0m L 。2 次煎剂混合为20 0 0m L 再浓缩至10 0 0m L ， 冷藏备用。冷藏期间每周需煮沸1 次再冷藏。 1 1 2 动物W i s t a r 大鼠，7 8 周龄，体质量9 0 1 1 0g 。购 自北京维通利华实验动物技术有限公司。 万方数据 3 5 4 6 现代中西医结合杂志M o d e r nJ
16、 o u r n a lo fI n t e g r a t e dT r a d i t i o n a lC h i n e s ea n dW e s t e r nM e d i c i n e2 0 0 9O c t ，1 8 ( 2 9 ) 1 1 3 仪器J P 一一1 0 0 型架盘式天平( 福州华志( 普力 斯特天平) 科学仪器有限公司) ，C X 2 1 显微镜( 奥林巴斯( 北 京) 销售服务有限公司) ，B T S 一3 3 0 半自动生化分析仪( 深圳 市科柏生物技术有限公司) ，B C 一3 2 0 0 全自动血液细胞分析 仪( 深圳迈瑞生物医疗电子股份有限公司)
17、，U A 一6 6 尿液分 析仪( 深圳迈瑞生物医疗电子股份有限公司) 。 1 2 方法 1 2 1 分组及给药W i s t a r 大鼠8 0 只，随机分为4 组，每组 2 0 只，雌雄各半。分别为高( 2 0m L 黄芪煎剂d ，相当于1 8 0 g k g ) 、中( 1 0m L 黄芪煎剂加1 0m L 生理盐水d ，相当于9 0 g k g ) 、低( 5m L 黄芪煎剂加1 5m L 生理盐水d ，相当于4 5g k g ) 剂量组及对照组( 2 0m L 生理盐水d ) 。以上日给药量分 早、晚2 次灌胃，连续9 0d 。 1 2 2 观察指标给药期间每日观察动物的一般状况，如
18、精 神状态、反应、行为活动、排便情况等；每周测定1 次体质量及 进食量。停药后1d 和3 0d ，每组分别处死1 0 只动物，检测 血、尿常规和血生化指标。系统尸检计算心、肝、脾、肺和肾的 脏器质量系数( 脏器质量( g ) 1 0 0g 体质量) ，描述主要脏器的 病变及重要组织和器官的切片检查。 1 3 统计学处理大鼠体质量、血常规、血生化及脏器质量 系数等计量资料数值均以孟s 表示，数据统计学处理用方 差分析，P 0 0 5 为有显著性差异。上述统计用S P S S1 1 0 3 欺件进行统计处理。 2 结果 2 1 对一般状况的影响各剂量组精神反应、行为活动、皮 毛光泽及粪便均正常。体
19、质量增长、摄食量与对照组比较无 显著性差异。 2 2对血细胞及尿常规的影响 血、尿常规各项检测指标均 在正常范围，给药前后各组间无显著性差异。 2 3 对血生化指标的影响除停药1d 后高剂景组r G T 高于对照组( P O 0 5 ) ，其他各项生化指标与对照组比较均 无显著性差异，见表1 。 2 4 对脏器病理组织学的影响停药1d 及停药3 0d 后各 组动物的主要脏器质量及其系数与对照组比较均无显著变 化。见表2 。心、肝、脾、肺、肾脏无病理变化。高剂量组停药1 d 后有8 只大鼠胃黏膜呈现糜烂性损伤并散在点状出m 点， 光镜组织学检查为炎性改变。另2 只胃黏膜正常。停药3 0d 后高剂
20、量组1 0 只动物中有6 只胃黏膜出现糜烂性损伤，但范 围较小，程度较轻，且未见出血点。另4 只胃黏膜正常。说明 长期大剂量黄芪对大鼠胃黏膜有一定损害，停药后可恢复。 3 讨论 中药黄芪是多年生豆科植物蒙古黄芪或膜荚黄芪的干燥 根。味甘，性微温，归脾肺经，具有补气升阳、益卫固表、托疮 生肌、利水消肿等功效。随着现代研究的进展，其临床应用日 益广泛( 2 | 。黄苠用于治疗肾小球肾炎疾病的报道可追溯到上 世纪2 0 年代，且个体日用量为4 1 0 两( 相当于1 2 0 3 0 0 g ) ”1 。我院临床用黄芪消除尿蛋白，个体日用量为6 0 1 2 0 表1黄芪煎剂灌胃给药9 0d 后停药1d
21、 及停药3 0d 大鼠 主要生化指标( 孟s ) 项目停药时问“对照组低剂量组中剂量组高剂量组 注：与对照组比较，P 0 0 5 。 表2黄芪煎剂灌胃给药9 0d 后停药1d 及停药3 0d 大鼠 主要脏器质量系数( 孑s ) g ，远远超出常规用量，且发现个别患者在用药期间曾出现上 腹胀满的不适反应。 黄芪急性毒性试验已有报道，属无毒范围【4 。黄芪煎剂， 按7 5g ( 生药) k g 和1 0 0g k g 分别给小鼠灌胃4 8h 内未发现 不良反应 4 | 。黄芪煎剂给小鼠一次性腹腔注射L D 5 0 为4 0g k g 【4 | 。本长毒试验各剂量组动物一般状况、血细胞及尿常规 指标
22、均正常，与对照组比较无显著性差异。高剂量组7 一G T 高于动物组( P 0 0 5 ) ，但仍在正常范围内，且无剂量相关 性，其变化无临床意义。其他各项生化指标与对照组比较均 无显著性差异。心、肝、脾、肺、肾脏无病理变化。高剂量组给 药期间大部分动物出现胃黏膜糜烂性炎症改变；停药恢复期， 损坏的胃黏膜可自行修复。此病理变化与临床所见个别患者 大量长期服用黄芪曾出现上腹胀满的不适反应有一致性。 本试验结果表明黄芪属无毒中草药，可( 下转第3 5 4 9 页) 万方数据 现代中西医结合杂志M o d e mJ o u r n a lo fI n t e g r a t e dT r a d i
23、t i o n a lC h i n e s ea n dW e s t e r nM e d i c i n e2 0 0 9O c t 。1 8 ( 2 9 ) 表4 各组大鼠肝细胞脂肪变性和炎症活动度 注：与正常组比较，P 0 们；与模型组比较，P 0 0 1 ；与 血脂康组比较，P 0 0 5 ；与血脂康组比较，P 0 0 1 。 表5各组大鼠肝功能变化比较( j s 。I U L ) 注：与正常组比较，P 0 0 5 ；与模型组比较，P 0 0 5 ；与 血脂康组比较，P 0 O l ；与血脂康组比较，P 0 0 1 。 医学证属“积聚”、“痰浊”、“胁痛”“黄疽”等范畴，其发生与肝
24、、 脾等诸脏功能失调密切相关J 。病因主要与患者饮食不节、 过食肥甘厚味有关。目前脂肪肝的证型划分尚未统一，但笔 者在长期诊疗过程中观察到脂肪肝患者大多有脾气亏虚的情 况。病机主要为饮食不节、嗜酒无度、过食肥甘厚味等损伤脾 胃，以致脾失健运、肝失疏泄，湿热内蕴、痰浊郁结，瘀血阻滞 最终导致痰瘀互结、积于胁下，痹阻肝脉而形成脂肪肝。病位 在肝脾，与痰浊瘀血等病理因素有关，为本虚标实之证。从治 疗角度看，多从“痰”、“瘀”着手，健脾祛瘀化痰成为目前脂肪 肝的中医基本治法。 降脂护肝方的组方从脂肪肝形成的病理生理人手。目前 一般认为肝细胞合成T G 及分泌V L D L 之间的不平衡是形成 脂肪肝的
25、主要原因。通过利胆消导而减少肝中的T G 贮存， 增加V L D L 的排泄有助于脂肪肝的康复。通过现代药理研 究，健脾祛湿药如云苓、白术、猪苓、泽泻、绵茵陈等能使血脂 及肝脂降低；生大黄、枳实、山楂等导滞药能减少胆固醇和中 性脂肪合成以及在肝内沉积，并且促进其在肝内排泄，有利于 减少血中T G 的贮存、增加V L D L 的排泄 7 。8 。降脂护肝方 中太子参、生大黄为主药，太子参健脾益气，生大黄利胆消导； 云苓、白术、猪苓、泽泻健脾化湿；枳实、J I | 朴佐生大黄利胆导 滞；绵茵陈、山楂祛湿消积；丹参活血化瘀；诸药联合起到健脾 消导、护肝降脂的作用。 本实验采用喂食高脂饲料的方法复制高
26、血脂症大鼠动物 模型。该模型血脂水平明显升高、造模周期短、死亡率低、模 型稳定，是适合本研究的理想模型。研究结果显示降脂护肝 方可抑制实用性高血脂症大鼠体质量的增加，可显著降低大 鼠血清T C 、T G 、L D L C 水平，并且呈一定量效关系。其防 治作用与其能够减轻脂类在肝脏积聚，降低炎症反应和保护 肝细胞的作用。本实验还发现降脂护肝方可以减轻实验大鼠 肝脏细胞炎症活动和脂肪变性，具有显著抑制高胆固醇饮食 引起的实验大鼠脂肪肝形成的作用。本研究结果显示采用降 脂护肝方治疗N A F L 能明显改善肝脏脂肪变性，降低血脂， 是一种对脂肪肝有确切疗效、安全的治疗方法，为降脂护肝方 的临床研究
27、提供了实验依据。 【参考文献 1 范建高，曾民德脂肪性肝病 M 北京：人民卫生出版社， 2 0 0 5 ：4 1 6 4 7 5 2 王吉耀脂肪肝临床流行病学 J 中华肝脏病杂志，2 0 0 0 ，8 ( 2 ) ：1 1 5 1 1 6 3 K n o d e lR G ，I s h a kK G ，B l a c kW C ，e ta 1 F o r m u l a t i o na n da p p l i c a t i o no fan u m e r i c a ls c o r i n gs y s t e mf o ra s s e s s i n gh i s t o l o
28、 g i c a la c t i v i t y i na s y m p t o m a t i cc h r o n i ca c t i v eh e p a t i t i s J H e p a t o l ，1 9 8 1 ，1 ( 5 ) ： 4 3 1 4 王泰龄，刘霞，周之平，等慢性肝炎炎症活动度及纤维化程度 计分方案 J 中华肝脏病杂志，1 9 9 8 ，6 6 ( 4 ) ：1 9 5 5 刘菲，钟岚，范建高，等大黄( 庶虫) 虫丸防治非酒精性脂肪性 肝炎的实验研究 J 中西医结合肝病杂志，2 0 0 0 ，1 0 ( 2 ) ：2 7 2 9 6 元勇，赵学印降脂保肝
29、丸治疗酒精性脂肪肝的实验研究 J 中西医结合肝病杂志，2 0 0 8 ，1 8 ( 3 ) ：1 6 7 1 6 9 7 李红德，孙月枝。赵文霞中医药治疗非酒精性脂肪肝的研究进 展 J 长春中医药大学学报，2 0 0 8 ，2 4 ( 1 ) ：1 0 9 1 1 0 8 】杨钦河，杨环文，谢芳，等降脂宁肝胶囊治疗大鼠脂肪肝的实 验研究 J 辽宁中医杂志，2 0 0 8 ，3 5 ( 9 ) ：1 4 2 0 1 4 2 2 收稿日期】2 0 0 9 0 4 0 1 ( 上接第3 5 4 6 页) 较大剂量长期服用。但为避免可能出现的 不良反应，建议临床用量掌握在1g ( k g d ) 为宜。如需要用 至2g ( k g d ) ，不宜长期连续服用。 参考文献 1 】孙影，刘阳，杨方，等益肾蠲湿合剂治疗狼疮性肾炎疗效观察 J 辽宁中医杂志，2 0 0 8 ，3 5 ( 9 ) ：1 3 6 8 1 3 6 9 2 周慧生黄芪的f 临床应用 J 亚太传统医药，2 0 0 7 ，3 ( 5 ) ：3 7 3 8 3 俞凤宾肾脏炎及糖尿病之中药疗法 J 中华医学杂志，1 9 2 3 ， 9 ( 2 ) ：8 7 9 1 4 夏丽英现代医药毒理学 M 天津：天津科技翻译出版公司， 2 0 0 5 ：6 8 7 6 8 8 收稿日期】2 0 0 9 一0 5 2 8 万方数据