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1、文章编号: !“#$%,-0$1$(%; (#%? !; ($(; #? !* * * 文献标识码: ; 9191,-0$1+ , 35 碳酸盐缓冲液中, 避光逐滴将 ./0“ 加入力达霉素辅基蛋白碳酸盐缓冲液中, 22?电磁 搅拌 = 。反应方程式见图 。 !“ #“ #$%A9BCAD E, 分离纯化1%A9BCAD E, 柱 长 )- F3, 直径 + 2 F3, 以磷酸盐缓冲液 (-+ - 3657 8, 9: ;G+ H) 平衡并洗脱, 紫外检测在 2=- I3 处收 集第一峰组分。 !“ #“ %$ 透析袋纯化1 -+ 2,N, 考虑到 17/=2 0CEB=7B C72/W 值和
2、反应体系的温度。邵荣光 等 -对力达霉素辅基蛋白重建的条件进行了研究, 认为反应体系的 W 在 ) X $ 之间, 温度在 #Y X “,Y较好, 故此本试验反应体系的 W 值选择为 .Z , 反应温度选择为 #Y。 !“ !$ 力达霉素辅基蛋白中共有 + 个氨基, 其中包含 $ 个赖氨酸氨基, 在反应体系中按 LV4FPH $ +Z “的摩尔比进行投料, 反应结果显示一分子 LV4 辅基蛋白只与一分子 FPH 相连。文献 (报 道, FPH 主要与赖氨酸上的 ! 氨基反应, 故此推测 力达霉素辅基蛋白的结合位点应在赖氨酸上。 !“ %$ 动物试验表明, 力达霉素有一定的肺毒性。但 力达霉素导致肺毒性的机理、 作用的靶位目前尚未 明确。将力达霉素辅基蛋白标记上荧光物质, 可以 在体外通过免疫组化的方法观察力达霉素辅基蛋白 作用的靶位。 参考文献: $ !孙一伟, 李电东, 甄永苏 Z 烯二炔类大分子抗肿瘤抗生素 H$#, 抗肿瘤研究进展 9 JZ R=/:D, 主编, 阮幼冰, 主译 Z 免疫荧光基础*实验新原 理及其临床新应用 4 Z 北京: 人民卫生出版社, #Z .*$(Z $($空军总医院学报 #) 年第 # 卷第 “ 期