反相高效液相色谱法测定替米沙坦片的含量.pdf

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1、实用预防医学2 0 0 7 年 8 月第 1 4 卷第4 期P r a c t i c a l P r e v e n t i v e M e d i c i n e , A u g . 2 0 0 7 , V o l 1 4 , N o . 41 2 2 3 文章编号: 1 0 0 6 一 3 1 1 0 ( 2 0 0 7 ) 0 4 一1 2 2 3 一 0 3 反相高效液相色谱法测定替米沙坦片的含量 刘梅亮， 李茗 摘要: 目 的 建立替米沙坦片的含量测定方法。 方法 采用反相高效液相色谱法。色谱柱为D ia m o n s i lT M C , ， 柱 ( 5 u m , 4 . 6

2、 m m X 2 5 0 m m ) ; 流动相为乙睛一 0 . 5 % 磷酸溶液( 用三乙胺调p H值至6 . 0 ) ( 5 2 : 4 8 ) ; 检测波长为2 9 7 n m; 流速 为1 . 0 m L “ m i n - ; 柱温为3 0 r - ; 以 外标法计算替米沙坦的含量。 结果 替米沙坦在2 8 . 1 6 - 1 4 0 . 8 l eg “ m L 范围内呈 良好的线性关系( r = 0 . 9 9 9 9 ) ， 平均回收率为 1 0 0 . 5 6 %, R S D = 0 . 2 2 %。 结论所建立的方法简便、 快速、 准确， 辅料不 干扰主药测定， 可用于替

3、米沙坦片的含量测定。 关键词: 替米沙坦片; 反相高效液相色谱法; 含量测定 中图分类号: R-3 3 1文献标识码: A D e t e r m i n a t i o n o f C o n t e n t o f T e l m i s a r t a n T a b l e t s b y R P 一H P L C L I U Me i 一l i a n g ， L I Mi n g( D e p a r t m e n t o f P h a r m a c y ， H u n a n P r o v i n c i a l P e o p l e s H o s p i t a l

4、 ， C h a n g s h a 4 1 0 0 0 5 ， H u n a n ) A b s t r a c t : O b j e c t i v e T o e s t a b l i s h a H P L C m e t h o d t o d e t e r min e t h e c o n t e n t o f t e l mis a r t a n t a b le t s . Me t h o d s R P 一 H P L C w a s u s e d in t h is e x p e r im e n t , D ia m o n s iIT M C 1 8

5、 ( 5 p m , 4 . 6 m m X 2 5 0 m m ) a s s t a t io n a r y p h a s e , a c e t o n it r ile 一 0 . 5 %p h o s - p h o r ic a c id ( p H 6 . 0 ， a d j u s t e d b y t r ie t h y la m in e ) ( 5 2 : 4 8 ) a s m o b i le p h a s e w it h f lo w r a t e o f 1 m L “ m in 一 a n d d e t e c t io n w a v e o

6、f 2 9 7 n m. T h e c o n t e n t o f t e lm i s a r t a n t a b le t w a s c o u n t e d b y e x t e rn a l s t a n d a r d m e t h o d . R e s u l t s T h e l i n e a r r a n g e w a s 2 8 . 1 6 一 1 4 0 . 8 u g “ m L 一 ( r = 0 . 9 9 9 9 ) . T h e a v e r a g e r e c o v e r y w a s 1 0 0 . 5 6 %， a

7、 n d R S D = 0 . 2 2 %. C o n c l u s i o n T h e m e t h o d is s im - p le , r a p id a n d a c c u r a t e , a n d is n o t i n t e r f e r e b y e x c ip i e n t s . It c a n b e u s e d f o r t h e q u a l i t y c o n t r o l o f t e l mis a r t a n t a b le t s . K e y w o r d s : T e lm is a

8、r t a n t a b le t s ; R P 一H P L C ; D e t e r m in a t io n 替米沙坦( T e l m i s a r t a n ) 是一种新型血管紧张素II受体的 高度选择性拮抗剂， 可选择性地、 难以逆转地阻滞A T ， 受体， 而 对其他受体尤其是心血管系统的受体无影响， 临床上主要用于 轻中度高血压治疗， 具有起效快、 副作用少、 作用时间长等优 点， 只需每日 给药1 次即可明显降低2 4 h 均压 I 。对血浆中替 米沙坦的检测方法国外多采用同位素C 4 标记法 1 和质谱 法2 1 ， 国内有文献报道采用H P L C紫外检测法3

9、 和荧光检测 法4 1 ， 而对替米沙坦胶囊含量的H P L C 测定国内已有报道s 7 而本文建立了一种新的反相高效液相色谱法测定替米沙坦片 的含量， 方法简便、 快速、 准确， 重现性良好， 可用于替米沙坦片 的质量控制。 1 材料与方法 1 . 1 仪器安捷伦 1 1 0 0 型高效液相色谱仪， V WD检测器， 色 谱工作站( 美国) ; 电光分析天平 ME T T L E R T O L E D O A B 2 0 4 一 N ( 美国) 。 1 . 2样品替米沙坦片 ( 批号: 2 0 0 6 0 8 0 4 1 1 , 2 0 0 6 0 8 2 4 1 3 , 2 0 0 6

10、0 9 1 7 2 5 ) ， 替米沙坦标准品由S ig m a 公司提供。 1 . 3 试剂乙睛及甲醇均为色谱纯试剂， 水为双重蒸馏水， 其 它试剂均为分析纯试剂。 作者单位: 湖南省人民医院药剂科( 湖南长沙4 1 0 0 0 5 ) 1 . 4方法 1 . 4 . 1 色谱条件色谱柱: D i a m o n s if C , ， 柱( 5 u m , 4 . 6 m m x 2 5 0 m m ) ; 流动相: 乙睛一 0 . 5 9 6 磷酸溶液( 三乙胺调p H值至 6 . 0 ) - ( 5 2 : 4 8 ) ; 检测波长: 2 9 7 nn; 流速: 1 . 0 m l -

11、m in - 1 ; 柱温: 3 0; 进样量: 1 0 u l o 在上述色谱条件下， 替米沙坦保留时间约为7 . 1 m in ， 理论 塔板数约为3 0 0 0 ， 与其它峰分离度大于 1 . 5 ， 峰对称性良好， 拖 尾因子在0 . 9 5. 1 . 0 5 之间。 1 . 4 . 2 对照品溶液的制备精密称取替米沙坦对照品约4 0 m g 置5 0 m l 量瓶， 加4 % N a O H溶液0 . 2 m l ， 加甲醇溶解并稀释 至刻度。精密量取 5 m l 置5 0 m l 量瓶中， 加甲醇稀释至刻度。 1 . 4 . 3 供试品溶液的制备精密称取样品( 约相当于替米沙 坦4

12、 0 m g ) ， 按“ 1 . 4 . 2 ” 项方法制备供试品溶液。 1 . 4 . 4标准曲线的制备精密称取替米沙坦对照品3 5 . 2 m g ， 置5 0 m l 量瓶中， 加4 % N a O H溶液0 . 2 m l ， 加甲醇溶解并 稀释至刻度。分别精密量取1 , 2 , 3 , 4 . 0 0 , 5 m l 置2 5 m l 量瓶中， 加甲醇稀释至刻度， 摇匀。精密量取上述各种溶液各 1 0 u l 进 行高效液相色谱分析， 以替米沙坦的峰面积( Y ) 对浓度( X ) 进行 线性回归， 得回归方程 Y = 3 2 1 1 2 X一1 8 0 0 1 ( r = 0 .

13、 9 9 9 9 沁 结果 显示替米沙坦在2 8 . 1 6 - - 1 4 0 . 8 t g “ m l - 范围内峰面积与浓度 呈良好的线性关系。 万方数据 1 2 2 4 实用预防医学2 0 0 7 年8 月第1 4 卷第4 期P r a c t i c a l P r e v e n t i v e Me d i c in e , A u g . 2 0 0 7 , V o l 1 4 , N o . 4 2 结果 2 . 1干扰试验精密称取按处方量配制的空白辅料1 6 5 . 0 m g ( 除主药替米沙坦外) ， 按“ 1 . 4 . 2 ” 项方法制备阴性对照品溶 液。 取对照

14、品溶液、 供试品溶液、 阴性对照品溶液各 1 0 u l ， 分别 注人液相色谱仪， 记录色谱图， 结果表明在该色谱条件下辅料 无干扰。见图 t o 0 . 7 8 %， n =4 ) ， 1 0 3 . 3 8 % ( R S D = 0 . 3 0 %， n =4 ) 。 D e t e c t o r A: 2 9 7 n m 1 5 0 加 e t e c t o r A , 2 9 7 而1 s t 0 .9 1 0 2 03 0 4 .0 5 0 6 0 7 06 . 0 9 0 m in 图 2替米沙坦对照品测定色谱图 0 0 1 -.0 2 -0 3 0 4 :0 5 . 0

15、S T 7 0日 刃9 . 0 m m 图 1空白辅料测定色谱图 2 . 2 精密度实验取“ 1 . 4 . 3 ” 项下同一份样品溶液( 批号: 2 0 0 6 0 8 0 4 1 1 ) 重复进样六次， 测定峰面积， 结果 R S D = 0 . 2 7 %, 表明该方法精密度良好。 2 . 3重复性实验取同一批样品六份( 批号: 2 0 0 6 0 8 0 4 1 1 ) 按 “ 1 . 4 . 2 ” 项方法制备供试品溶液， 分别进样， 按外标法以峰面积 计算含量， 结果R S D = 0 . 2 0 %， 表明该方法重复性良好。 2 . 4 稳定性实验取样品( 批号: 2 0 0 6

16、 0 8 0 4 1 1 ) 按“ 1 . 4 . 2 ” 项方 法制备供试品溶液， 于室温放置， 分别于0 , 2 , 4 , 8 , 1 2 , 2 4 h 重复 进样， 测定峰面积， 结果R S D = 0 . 1 6 %， 表明供试品溶液在2 4 h 内稳定。 2 . 5回收率试验精密称取替米沙坦对照品适量及相当于 处方量的空白辅料， 分别制成高、 中、 低三种不同浓度的溶液， 各三份， 按“ 1 . 4 . 2 ” 项方法制备供试品溶液， 分别进样， 按外标 法以峰面积计算， 平均回收率为 1 0 0 . 5 6 %, R S D= 0 . 2 2 % ( n = 9 ) ， 表明该

17、方法回收率良好。见表 t o 表 1回收率试验结果( n = 9 ) D e t e c t o r A: 2 9 7 n m 0 .0， 0 2 .0 3 0 4 .0 5 .0 6 0l 0 9 09 0 m in 图3替米沙坦样品( 2 0 0 6 0 8 0 4 1 1 ) 测定色谱图 加人量( m g )测定值( m g )回收率( %)R S D ( % ) 5 0 5 0. 5 1 0 1 . 0 0. 3 6 1 0 0. 5 1 0 0. 2 1 0 0 1 0 0 0. 1 8 0. 1 2 nUO Olf 勺.且勺 2 . 6 三排样品的测定精密量取对照品溶液及供试品溶液

18、 各1 0 u l 注人液相色谱仪， 记录色谱图， 按外标法以峰面积计算 含量。对照品溶液色谱图见图2 。批号为 2 0 0 6 0 8 0 4 1 1 ( 见图 3 ) , 2 0 0 6 0 8 2 4 1 3 , 2 0 0 6 0 9 1 7 2 5 的3 批样品含量测定结果分别为 标示量的 1 0 3 . 4 5 % ( R S D二0 . 0 1 %, n =4 ) , 1 0 3 . 2 7 %( R S D= 3 讨论 测定波长的选择: 分别取替米沙坦对照品及空白辅料加甲 醇制成每1 m l 中 约含8 u g 的溶液， 照分光光度法5 ,6 1 测定， 在 2 0 0 - 4

19、 0 0 n m的波长范围扫描绘图， 结果表明: 替米沙坦的甲醇 溶液在2 2 8 . 5 0 nn 和2 9 7 . 5 0 n m波长处有最大吸收， 辅料在 2 9 7 nn 波长处没有吸收， 对替米沙坦的测定不产生影响， 因此 选择2 9 7 n m波长处作为替米沙坦胶囊含量测定的检测波长。 曾采用氢氧化四丁铁磷酸盐缓冲液( p H 8 . 7 1 ) 一乙睛( 3 0 : 7 0 ) 为流动相， 但出峰时间太早( 分别约为 1 . 5和 1 . 3 m i n ) 。调 节缓冲液和乙睛的比 例为( 5 05 0 ) , ( 6 04 0 ) , ( 6 53 5 ) , ( 6 8 :

20、 3 2 ) 均未获得满意结果。并参照高玲等7 1 的研究， 采用甲醇- 水( 含2 . 5%p H 5 . 8 磷酸盐缓冲液) ( 8 0 2 0 ) 为流动相， 但因 为采用的色谱柱不同， 保留时间又太长( 1 0 . 5 m i n ) ， 柱效低， 色谱峰拖尾， 峰对称性差， 故未采用。 替米沙坦分子结构中有两个碱性中心， 且含有梭基( 酸性 万方数据 实用预防医学2 0 0 7 年s 月 第1 4 卷第4 期P r a c t i c a l P r e v e n t i v e Me d ic in e , A u g . 2 0 0 7 , V o l 1 4 , N o .

21、41 2 2 5 文章编号: 1 0 0 6 一 3 1 1 0 ( 2 0 0 7 ) 0 4 一1 2 2 5 一 0 2 病理性黄疽新生儿血清心肌肌钙蛋白I 水平研究 黄彩芝， 莫丽亚， 蒋玉莲， 李爱国， 邓永超 摘要: 目的探讨病理性黄疽新生儿血清心肌肌钙蛋白I ( c T n l ) 水平及临床意义。方法分别采用酶联免疫 法( E L I S A ) 和免疫抑制法测定6 0 例病理性黄疽新生儿血清 。 T n 1 和肌酸磷酸激酶 MB ( C K一M B ) ， 并与3 0 例生理性黄疽 新生儿进行对照比较， 部分病人同时作心电图检查。 结果病理性黄疽新生儿血清。 T n l 和C

22、 K - M B 水平均明显高于 对 照 组( P 0 . 0 1 ) ; 病 理 性 黄 疽 患 儿中c T n l 的阳 性 率( 6 6 . 6 7 ) 明 显高 于C K 一 M B ( 3 5 . 0 0 % , x = 1 2 . 0 4 , P 0 . 0 1 ) 。 结 论c T n l 水平检测可作为新生儿病理性黄疽早期心肌损伤的诊断金指标， 有助于早期诊断和治疗。 关键词: 病理性黄疽; 心肌肌钙蛋白 I ; 肌酸磷酸激酶 M B ; 心肌损伤; 新生儿 中图分类号: R 7 2 2 . 1 7文献标识码: A S e r u m C a r d i a c T r o t

23、 o n i n I i n N e o n a t e s Wi t h P a t h o l o g i c a l J a u n d i c e HU A N G C a i 一z h i ， MO L i 一y a ， J I A NG Y u一l i a n，e t a l . ( D e p a r t m e n t o f C l i n i c a l L a b o r a t o r y ， H u n a n P r o v i n c i a l C h i l d r e n s H o s p i t a l ， C h a n g s h a 4 1 0 0

24、 0 7 , H u n a n ) A b s t r a c t : O b j e c t i v e T o u n d e r s t a n d t h e le v e l a n d c l i n ic a l s i g n if i c a n c e o f s e r u m c a r d ia c t r o p o n i n I ( c T n I ) i n n e o n a t e s w i t h p a t h o lo g i c a l j a u n d ic e . Me t h o d s I n t h e 6 0 n e o n a

25、t e s w i t h p a t h o lo g ic j a u n d i c e , t h e s e r u m le v e ls o f c T n l a n d c r e a t i n e p h o s p h a t e k in a s e M B ( C K 一M B ) w e r e d e t e r m i n e d b y e n z y m e l i n k e d im m u n o s o r b e n t a s s a y a n d im m u n o i n h ib i t a s s a y r e s p e c -

26、 t iv e ly , a n d w h ic h w e r e c o m p a r e d w it h 3 0 h e a l t h y n e w b o r n s . S o m e n e w b o r n s h a d e le c t r o c a r d io g r a m t e s t s t o o . R e s u l t s T h e s e r u m le v e ls o f c T n l a n d C K一M B in n e o n a t e s w it h p a t h o lo g ic a l j a u n d i

27、 c e w e r e s ig n if ic a n t l y h ig h e r t h a n t h o s e o f h e a lt h y n e w b o r n s ( P 0 . 0 1 ) . In t h e n e o n a t e s w it h p a t h o lo g ic ja u n d ic e , t h e p o s it iv e r a t e o f c T n l ( 6 6 . 6 7 %) w a s s ig n if ic a n t ly h ig h e r t h a n t h e p o s it iv

28、e r a t e o f C K 一 M 日 ( 3 5 . 0 0 % , X z = 1 2 . 0 4 ， 户 0 . 0 1 ) . C o n c l u s io n s T h e le v e l o f c T n l s e e m s t o b e a g o ld in - d e x t o d i a g n o s e t h e e a r l y my o c a r d i a l in j u r y in n e o n a t e s w i t h p a t h o lo g ic j a u n d ic e , a n d it is h

29、e l p f u l f o r t h e e a r ly d ia g n o s is a n d t r e a t m e n t o f m y o c a r d i a l i n j u r y. K e y w o r d s : P a t h o lo g ic j a u n d ic e ; C a r d i a c t r o p o n in I ; C r e a t in e p h o s p h a t e k i n a s e M B ; M y o c a r d i a l in j u r y ; N e o n a t e 新生儿病理性

30、黄疽是围生儿的常见病症， 常导致多脏器功 能损伤， 尤其对神经系统的毒性作用早已被临床所关注， 而对 作者单位: 湖南省儿童医院检验科( 湖南长沙4 1 0 0 0 7 ) 作毒简介: 黄彩芝( 1 9 7 6 一 ) ， 女， 湖南玩江人， 本科学历， 主管检验师， 主 要从事临床免疫学研究工作。 心肌损害的报道较少。为探讨病理性黄疽新生儿血清心肌肌 钙蛋白I ( c T n l ) 水平， 并评价其在心肌损伤中的诊断价值， 本文 对6 0 例病理性黄疽新生儿的 。 T n I 和肌酸磷酸激酶 MB ( C K一 MB ) 进行检测， 现将结果报告如下。 中心) ， 在溶液中以两性离子存在，

31、 以乙睛一0 . 5 %磷酸溶液( 用 三乙 胺调p H值至6 . 0 ) =( 5 2 : 4 8 ) 为流动相， p H值低于5 . 0 时 保留时间太短， 色谱峰前沿， p H值高于6 . 0 时保留时间太长， 柱 效低， 色谱峰拖尾。p H值为6 . 0 时替米沙坦保留时间适当， 约 7 . 1 m in ， 并且峰对称性良 好。 因此， 我们建立的反相高效液相色谱外标法测定替米沙坦 胶囊的含量， 方法简便、 快速、 准确， 重现性良好， 结果准确。可 用于替米沙坦片的质量控制。 参考文献 1 蔡霞， 丁金秀， 杨佩垠， 等. 抗高血压新药一替米沙坦 J . 山东医 药工业， 2 0

32、0 3 , 2 2 ( 2 ) : 5 8 . 2 S t a n g i e r J , S c h m id J , T u r c k D , e t a l . A b s o r p t io n , m e t a b o l is m, a n d e x c r e t io n o f i n t r a v e n o u s ly a n d o r a ll y a d m in i s t e r e d 1 4 C I t e lm i s a r t a n in h e a l t h y v o l u n t e e r s J . J C l in P h

33、 a r m a c o l , 2 0 0 0 , 4 0 ( 1 2 P t 0: 1 3 1 2 . 3 S t a n g i e r J , S u C A . P h a r m a c o k in e t i c s o f r e p e a t e d o r a l d o s e s o f a m lo d i p - i n e a n d a m l o d i p i n e p l u s t e l m i s a r t a n in h e a l t h y v o l u n t e e r s 仁 J . J C l in P h a r m a

34、c o l , 2 0 0 0 , 4 0 02 P t 1 ) : 1 3 4 7 . 4 赵霞， 许俊羽， 刘文英. 反相高效液相色谱法测定大鼠血浆中替米 沙坦片的浓度【 J l . 中国药科大学学报， 2 0 0 3 , 3 4 ( 3 ) : 2 4 7 . 5 王健康， 王峰， 张华峰， 等. 反相高效液相色谱法测定人血浆中替 米沙坦片的浓度 J l . 解放军药学学报， 2 0 0 4 , 2 0 ( 2 ) : 1 3 8 . 6 冉兰， 祝小元， 张榕军. 替米沙坦片的含量测定 J l . 华西药学杂 志， 2 0 0 3， 1 8 ( 1 ): 6 1 . 7 高玲， 刘茜， 赵怀清. 反相高效液相色谱法测定替米沙坦片的含量 J 中国药事， 2 0 0 5 , 1 9 ( 4 ) : 2 2 6 一 2 2 7 . ( 收稿日 期: 2 0 0 7 一 0 5 一 3 1 ) 万方数据