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1、第2 5 卷第4 期 2 0 0 4 年 8 月 杭 州 医 学 高 等 专 科 学 校 学 报 J o u rn a l o f H a n g z h o u M e d i c a l C o l l e g e Vo l . 2 5 A u g N o . 4 2 0 0 4 文章编号: 1 0 0 8 一 4 8 9 4 ( 2 0 0 4 ) 0 4 一 0 1 5 9 一 0 3 大鼠膀胧出口梗阻模型的建立及其生物学特性 计颧烽 ， 周卸来2 ， 王华 ， 陈善闻 ， 沈周俊 ( 1 . 浙江大学医学院附属第一医院， 浙江 杭州 3 1 0 0 0 3 ; 2 . 杭州师范学院医
2、学院 外科教研室， 浙江 杭州 3 1 0 0 1 2 ) 摘要: 目的建立一种理想的大鼠膀胧出口梗阻( B l a d d e r O u t l e t O b s t r u c t i o n , B O O ) 模型并研究其生物学特性。 方法 雌性S p r a g u e - D a w l e y 大鼠2 0 只， 随机分成对照组和实验组， 每组 1 0 只。实验组大鼠在麻醉下用直径 l n u n 的硬膜外麻醉导管由尿道插入膀胧作支架后， 沿尿道外口做“ 0 ， 字形切口切开皮肤， 游离尿道， 用 3 / 0 丝 线结扎游离的尿道; 对照组仅做插管， 切开皮肤， 游离尿道， 但
3、不结扎尿道。术后5 周， 测定大鼠膀眯的最大容 量和重量， 并分别取膀胧、 输尿管和肾组织行病理组织学检查。结果9 只实验组大鼠膀胧内有颗粒状或泥 沙状结石。实验组的膀胧重量和最大容量均显著高于对照组( P 0 . 0 0 1 ) 。和对照组比较， 实验组大鼠膀胧 壁和输尿管肌层明显增厚， 间质纤维化明显， 结构紊乱; 肾小管部分扩张， 肾间质水肿、 纤维化明显。结论大 鼠膀胧出口梗阻后， 膀胧的形态和功能发生明显改变， 并同时引起肾和输尿管等上尿路结构的明显病理改变。 关健词: 膀胧出口梗阻; 逼尿肌; 上尿路 中图分类号: R - 3 3 : R 6 9 5文献标识码: A Es t a
4、b l i s h me n t o f mo d e l o f b l a d d e r o u t l e t o b s t r u c t i o n i n r a t s a n d i n v e s t i g a t i o n o f i t s b i o l o g i c a l c h a r a c t e r s J I H a o - f e n g t ， Z H O U X i e - l a i 2 ， W A N F H u a , e t a l . ( 1 . T h e F ir s t A f f i l i a t e d H o s p
5、 i t a l o f M e d i c a l C o ll e g e o f Z h e j ia n g U n i v e r s i ty , H a n g z h o u , Z h e j i a n g 3 1 0 0 0 3 , C h i n a ; 2 . S u r g i c a l D e p a rt m e n t , M e d i c a l C o ll e g e o f H a n g z h o u T e a c h e r s C o ll e g e , H a n g z h o u , Z h e j i a n g 3 1 0 0
6、 1 2 , C h i n a ) A b s t r a c t : O 讨e c t i v e T o e s t a b li s h a n i d e a l m o d e l o f b l a d d e r o u t l e t o b s t ru c t i o n i n r a t s a n d i n v e s t i g a t e i t s b i o l o g i c a l c h a r a c - t e r s . Me t h o d s 2 0 f e m a l e S p r a g u e - D a w l e y r a t
7、 s w e r e r a n d o m l y d i v i d e d i n t o c o n t r o l a n d e x p e r i m e n t g r o u p s e q u a ll y . S u r g i c a l o b s t r u c t i o n w a s d o n e i n t h e e x p e r im e n t a l g ro u p b y 3 / 0 s i l k t h r e a d ty i n g a r o u n d t h e e p i d u r a l- b l o c k - c a
8、t h e t e r i z e d u r e t h r a l o o s e - l y f r o m a “ o “ c u t f o ll o w i n g t h e u r e t h r a a ft e r a n e s t h e s i a , w h i l e t h e s a m e o p e r a t i o n e x c e p t ty i n g g r o u n d t h e u r e t h r a w a s d o n e i n c o n t r o l g ro u p . T h e m a x i m a l c
9、a p a c i t y a n d w e i g h t o f e a c h r a t s b l a d d e r w e r e e x a m i n e d , a n d t i s s u e s o f b l a d d e r , u r e t h r a a n d k i d n e y w e re re m o v e d f o r p a t h o l o g i c a l e x a m i n a t io n a ft e r 5 w e e k s . R e s u l t s T h e g r a n u l a t e d o
10、r s a n d y c a l c u l u s w a s f o u n d i n 9 r a t s o f t h e e x p e r i m e n t g ro u p . T o c o m p a r e w i t h t h e c o n t r o l , t h e m a x i m u m c a p a c i ty a n d w e i g h t o f t h e b l a d d e r s o f t h e e x p e r i - m e n t g r o u p w e r e o b v i o u s l y h i g
11、h e r t h a n t h o s e o f t h e c o n t r o l g ro u p ( P 0 . 0 0 1 ) ， w h i l e t h e h y p e r tro p h y d e t r u s o r a n d u re t h r a l p a r i e s , t h e i n t e r s t i t i a l f i b ro s i s , t h e d i s o r d e r e d s t r u c t u r e , t h e p a rt ia l d i l a t e d r e n a l t u
12、 b l e , t h e e d e m a a n d f i b ro s i s re n a l i n t e r s t i - t i a l i n t h e e x p e r i m e n t g r o u p c o u l d b e o b s e r v e d o b v i o u s l y . C o n c l u s i o n A f t e r b l a d d e r o u t l e t h a d b e e n o b s t r u c t e d , t h e f i g u r e a n d f u n c t i o
13、 n o f b l a d d e r c h a n g e d e v i d e n t l y , a n d a t s a m e t i m e o b s t r u c t i o n i n d u c e d p a t h o l o g i c a l c h a n g e s o f t h e u p p e r u r i n a ry o b v i o u s l y . K e y w o r d s : B l a d d e r o u t l e t o b s tr u c t i o n ( B O O ) ; d e t r u s o r
14、 ; u p p e r u ri n a ry ( J H a n g z h o u M e d C o l l ， 2 0 0 4 , 2 5 : 1 5 9 一 1 6 1 ) 收稿日期: 2 0 0 4 - 0 4 -1 8 作者简介: 计颧烽( 1 9 8 2 一) ， 男， 浙江湖州人， 硕士研究生。 1 5 9 万方数据 第 2 5 卷第 4 期 2 0 0 4 年 8 月 杭 州 医 学 高 等 专 科 学 校 学 报 J o u r n a l o f H a n g z h o u M e d i c a l C o l l e g e Vo l . 2 5 A u g
15、N o. 4 2 0 0 4 女性膀既出口梗阻( F e m a l e B l a d d e r O u t l e t O b - s t r u c t i o n , F B 0 0 ) 性疾病的病因及发病机制至今尚未 完全明确， 因此， 建立一个技术上可行， 功能、 形态上 类似于人类 F B 0 0的理想的动物模型成为研究 F B 0 0的迫切要求。目前针对膀胧出口梗阻的研究 皆着眼于膀胧逼尿肌的形态改变和功能障碍， 国内 外尚无有关膀胧出口梗阻引起上尿路功能及形态学 改变的基础性研究报道。本实验应用尿道外口结扎 法成功建立大鼠膀胧出口梗阻模型， 并研究其引起 的膀耽、 肾和输尿
16、管等上尿路结构的明显病理改变， 特介绍如下。 2 . 3 病理组织学变化和对照组比较， 实验组各器 官光镜下有如下改变: 膀胧: 膀胧壁肌层明显增 后， 有大量明显增厚的肌纤维束存在; 肌细胞大小不 一， 形状多样， 排列紊乱; 间质纤维化明显， 纤维组织 呈致密分布， 结构紊乱( 见封二， 图 1 ) ; 输尿管: 输 尿管管径明显增粗， 管壁肌层明显增厚， 和肾盂连接 处管口扩张( 见封二， 图2 ) ; 肾: 肾小管部分扩张， 肾间质水肿、 纤维化， 弥漫性炎性细胞浸润， 纤维组 织呈致密分布， 结构紊乱( 见封二， 图3 ) 0 表 1 两组大鼠膀胧重t和最大容I的比较 组别 1 材料
17、与方法 1 . 1 实验动物模型的建立雌性S p r a g u e - D a w l e y 大 鼠2 0只， 由浙江省实验动物中心提供。体重( 2 0 0 - 2 5 0 ) g ， 随机分成对照组和实验组， 每组1 0 只。手术 方法: 用3 %异戊巴比妥钠腹腔内注射麻醉大鼠( 剂 量为6 0 m g / k g ) ， 麻醉成功后仰卧位固定大鼠， 常规 消毒铺巾后， 用直径 1 m m的硬膜外麻醉导管蘸少 许石蜡油后， 由大鼠尿道插人至膀胧， 再沿尿道外口 做“ O ， 字形切口切开皮肤， 游离尿道约0 . 5 c m .以 导管为支架， 用 3 / 0丝线结扎游离的尿道， 缝合皮
18、肤， 固定导管。对照组仅做插管， 切开皮肤， 游离尿 道， 但不结扎尿道。 1 . 2 测定指标术后5 周， 麻醉下测定大鼠膀胧的 最大容量， 完整切取膀耽测其重量， 并分别取膀胧、 输尿管和肾组织行福尔马林固定， 酒精梯度脱水， 石 蜡包埋， 切片， H E染色， 光镜下观察组织形态学的改 变。膀胧容量测定: 麻醉下， 将直径 1 m m硬膜外导 管由尿道外口擂人膀胧， 先排空膀胧内的尿液， 再向 膀胧内灌注生理盐水， 当导管周围出现溢液时， 此时 灌注的生理盐水量为膀胧最大容量。 对照组 实验组 n 1 0 1 0 膀胧重量( g ) 0. 1 2 7 t 0. 0 1 9 0 . 6 2
19、 4土0 . 0 2 5 4 膀胧最大容量( m l ) 1 . 5 t 0. 1 6 3 . 5 t 0 . 2 0 4 注: 组间均数 t 检验, d p 0 . 0 0 1 , v 。 对照组。 2 结果 2 . 1 肉眼所见 9 只实验组大鼠膀胧内有颗粒状或 泥沙状结石。和对照组比较， 实验组大鼠膀胧明显 增大， 壁增厚， 在内壁见有大量明显的小梁状结构向 腔内突出; 输尿管明显增粗、 增厚; 肾体积增大， 颜色 灰白， 肿大有囊性感; 肾盂扩张， 肾实质变薄。 2 . 2 膀耽重量和最大容量见表1 ， 表中结果显示 实验组的膀胧重量和最大容量均显著高于对照组 ( P 0 . 0 0
20、1 ) 。 1 6 0 3 讨论 女性膀脱出口梗阻性疾病在女性排尿异常疾病 中的比例， M a s s e y 等 I 和C a r r 等:报道分别为 2 . 7 % 和8 . 0 %， 国内 吴天平等3 1 和谭剑敏等4 报道 分别为5 . 2 %和1 0 %。其病因及发病机制尚未完全 明确， 命名也多样化， 如膀脱颈挛缩、 女性前列腺病、 M a r r io n 病等。咎其原因主要可能有以下几个方面: 膀胧颈部平滑肌增生、 肥厚; 膀耽颈部纤维性增 生; 膀胧括约肌和逼尿肌共济失调; 女性前列腺 病; 慢性泌尿道炎症。因此， 建立一个技术上可 行， 功能、 形态上类似于人类 F B 0
21、 0的动物模型成为 研究 F B O O的迫切要求。本研究结果显示， 该梗阻 模型梗阻作用确切， 效果明显， 膀胧出口在梗阻一定 时间后出现重量与容量的改变， 且有明显的逼尿肌 形态改变， 从而证实了逼尿肌形态改变与膀脱出口 梗阻之间的联系， 所以可作为研究 F B O O有效的动 物模型。 许多研究表明， 膀胧出口梗阻后膀胧逼尿肌发 生增生、 肥厚及功能障碍的机制有: 突触膜的破坏 及突触后的去神经化; 线粒体膜的破坏， 线粒体功 能障碍及线粒体酶活性下降; 内质网膜的破坏和 细胞内钙稳态失调; 膀胧壁内一氧化氮合成酶及 内皮素受体改变; 膀胧壁血供改变 卜 。 。以兔、 猪、 大鼠及豚鼠等
22、动物制成的动物模型虽可证实上 述的病理生理变化， 但尚未明了解各种机制间的相 互作用、 影响及联系。所以膀胧出口梗阻后膀胧逼 尿肌的功能及形态学改变、 分子水平的变化及其遗 万方数据 第 2 5 卷第 4 期 2 0 0 4 年 8 月 杭 州 医 学 高 等 专 科 学 校 学 报 J o u r n a l o f H a n g z h o u M e d i c a l C o l l e g e V o l . 2 5 ， N o . 4 A u g . ， 2 0 0 4 传学基础， 是以后研究的B O O的一个主要方向。 膀胧出口梗阻引起的上尿路功能及形态学改 变， 国内外尚无此
23、类基础性研究报道。目前针对膀 胧出口梗阻的研究皆着眼于膀胧逼尿肌的形态改变 和功能障碍， 而忽视了上尿路的病变情况。然而， 临 床上大部分 B O O患者在诊疗过程中已有肾积水等 上尿路病变， 而且其中许多患者在长期服药或手术 后， 上尿路功能不能很好地恢复， 形成治疗上的难 点。如何正确评价 B O O程度对上尿路的影响， 如何 针对不同的患者制定相应的诊疗方法， 也是以后研 究的主要方向。 参考文献 1 M a s s e y J A , A b r a m s P H . O b s t r u c t e d v o i d i n g i n t h e f e m a l e J
24、. B r J U r o l , 1 9 8 8 , 6 1 ( 1 ) : 3 6 一 3 9 . 2 C a r r L K , We b s t e r G D . B l a d d e r o u t l e t o b s t r u c ti o n i n w o m e n J . U r o l C l i n N o r th A m, 1 9 9 6 , 2 3 ( 3 ) : 3 8 5 一3 9 1 . 3 吴天平， 戴群生， 周宗兴， 等. 女性排尿困难9 7 例的尿动 力学分析及其临床愈义 J l . 首都医科大学学报， 2 0 0 0 , 2 1 ( 1 )
25、 : 5 1 一5 2 . 4 谭剑敏， 朱晓明. 尿流动力学在女性尿道综合征诊治中 的应用【 J l . 临床泌尿外科杂志， 2 0 0 0 , 1 5 ( 6 ) : 2 6 2 一 2 6 3 . 5 H a r r i s o n S C , F e r g u s o n D R , D o y l e P T . E ff e c t o f b l a d d e r o u t fl o w o b s t r u c ti o n o n th e i n n e r v a ti o n o f th e r a b b it u r in a ry b la d d e
26、r J . B r J U r o l , 1 9 9 0 , 6 6 ( 4 ) : 3 7 2 一 3 7 9 . 6 H a u g a a r d N , P o t t e r L , We i n A J e t a l . E ff e c t o f p a rt i a l o b s t r u c - ti o n o f t h e r a b b i t u r i n a ry b l a d d e r o n m a l a t e d e h y d r o g e n a s e a n d c i t r a t e s y n t h a s e a c
27、 t i v i t y J l . J U r o l , 1 9 9 2 , 1 4 7 ( 5 ) : 1 3 9 1 - 1 3 9 3 . E r r a t u m i n : J U r o l 1 9 9 2 , 1 4 8 ( 6 ) : 1 9 2 2 . 7 Z d e r i c S A , R o h r m a n n D , G o n g C e t a l . T h e d e c o m p e n s a t e d d e - t r u s o r II : e v i d e n c e f o r l o s s o f s a r c o p
28、l a s m i c r e t ic u l u m f u n c t i o n a f - te r b l a d d e r o u t l e t o b s t r u c ti o n in t h e r a b b i t J l . J U r o l , 1 9 9 6 , 1 5 6 ( 2 P t 2 ) : 5 8 7 一 5 9 2 . 8 K h a n M A , D a s h w o o d M R , T h o m p s o n C S e t a l . U p 一 二 g u l a t i o n o f e n d o t h e li
29、 n ( E VA ) a n d E T ( B ) ) r e c e p t o r s a n d d o w n - r e g u l a t i o n o f n it ri c o x i d e s y n t h a s e in t h e d e t r u s o r o f a r a b b i t m o d e l o f p a r - t ia l b l a d d e r o u t l e t o b s t r u c t i o n J . U ro l R e s , 1 9 9 9 , 2 7 ( 6 ) : 4 4 5 一4 5 3. 9
30、 S h a b s i g h A , H a y e k O R , W e i n e r D e t a l . A c u t e i n c re a s e i n b l o o d fl o w t o t h e r a t b l a d d e r s u b s e q u e n t t o p a r t i a l b l a d d e r o u t l e t o b s t r u c t i o n J . N e u ro u r o l U r o d y n , 2 0 0 0 , 1 9 ( 2 ) : 1 9 5 一 2 0 6 . 1 0
31、B e r g g r e n T , U v e li u s B , A m e r A. D e n e r v a t i o n a n d o u t l e t o b - s t r u c t i o n i n d u c e a n e t s y n t h e s i s o f c o n t r a c t i l e a n d c y t o s k e l e t a l p r o t e i n s i n t h e u r i n a ry b l a d d e r o f t h e m a l e r a t J . U ro l R e s , 1 9 9 6 , 2 4 ( 3 ) : 1 3 5 一1 4 0 . 1 61 万方数据