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1、 临床检验杂志2 0 0 6 年第2 4 卷 第1 期 C h i n e s e J o u r n a l o f C li n i c a l l a b o ra t o ry S c i e n c e , 2 0 0 6 , V o l . 2 4 , N o . 1 2 5 i 7顾明波， 杜庆新， 王剑， 等. 哈尔滨地区汉族人群3 个基因座的基性研究 J 遗传学报， 2 0 0 2 , 2 9 ( 9 ) ;7 6 1 -7 6 7 因频率调 查 J 巾国法 医 学 杂志 ， 2 0 0 0 , 1 5 ( 4 ) ; 2 2 4 . 1 0 袁文涛 ， 徐 红岩 . 赵进
2、英 ， 等. 微 卫 星位 点在 基 因组 扫描 中 的信 8 胡晓岩， 工一理， 黄辰， 等 中国新疆锡伯族人群C S F I P O , T H O I ,息表现 J . 中 华医学遗传学杂志,2 0 0 0 , 1 7 ( 2 ) :6 5 - 7 1 . T P O X二个短串联重复序列位点的遗传多态性【 J . 中华医学遗 1 1 张霏， 侯 一 平，吴谨， 等 中国 人群9 号染色体1 0个S T R基因座 传学杂志, 2 0 0 3 , 2 0 ( 1 ) ; 8 2 5 3的遗传多态性及其在法K学中的应M J . 中华医学遗传学杂 9 工 新淮 ， 高树 辉 ， 赖江华 ， 等
3、 新 YA 4 个 民族 S T F基 因座遗 传多 态志 , 2 0 0 0 , 1 7 ( 6 ) ;4 1 7 4 2 0 Re g t le r c y c ti s t r i b u fl o w o f 血 s h o r t t a llAm r e p e a t l o ci lrd t i p l e x i n g m Am d li s t r i c t , t l i m a WA N G H i n g m e i , Z H U A N G We n y u e , L I Z h e n g y i , Z H U A N G We n z h u o (
4、D e p a r h u e n t o f M o lc e u l m B i o lo g y , M e d ic a l C o l l e g e o f B e ih u a U n i v e r s i t y , J il i n 1 3 2 0 1 3 , C h in a ) A b s t r a c t : Ob j e c t i v e T o a n a ly z e th e g e n e ti c p o l y mo r p h i s m o f th r e e s h o r t ta n d e m re p e a t ( S T R) d
5、 o u b le lo c i , n a m e ly , s ix S T R l o c i i n t h e C h in e s e p o p u l a ti o n o f H a n n a ti o n a l it y in J i li n d is tr i c t a n d t o o b ta in t h e c o rr e s p o n d i n g g e n e t i c d a t a . Me t h o d s D N A w a s e x tr a c t e d fr o m t h e b l o o d c e ll s o
6、f o n e h u n d r e d a n d th r e e u n rela t e d i n d i v i d u a l s o f H a n n a t io n a li t y i n J i li n d is t r i c t ; S i x l o c i w e r e d i v id e d in t o t h r e e g ro u p s w h ic h w e r e g ro u p( T P O X + C S F I P O ) , g r o u p U ( D 3 S 1 3 5 8 + D 1 3 S 3 1 7 ) a n
7、d g r o u p I Q ( D 5 S 8 1 8 + D 1 9 S 4 o 0 ) . T h e e x t r a c te d D N A w e r e a m p l if ie d w it h P C H m u lt i p le x i n g m e t h o d . T h e P C R p r o d u c ts w e r e a n a l y z e d师 n o n - r e d u c e d P A G E , f o ll o w e d b y s i lv e r s ta i n in g . T h e a ll e le f
8、re q u e n c y d is tr i b u ti o n s o f s i x S T R lo c i w e r e s t u d ie d b y s t a t is ti c a l p r o c e d u r e s . T h e b e t e r o z y g o s i t y ( H) , d is c r i m i n a t io n p o w e r ( D P ) , p tro b - a b il it y o f e x c l u s io n ( P E ) a n d p o l y mo r p h i c i n f o
9、 r m a t io n c o n t e n t ( P I C )、 。 二c a lc u la t e d . R e s u lt s T h e a ll e le f r e q u e n c i e s o f s ix lo c i w e r e o b ta in e d . T h e g e n o t y p e s d is tr i b u ti o n s o f t h e l o c i w e re c o n s is t e n t w i th H a r d y - We i n b e r g e q u i li b r i u m a
10、 n d h a d h ig h e r h e t e r o z y g o s i t ie s a n d P I C . T h e H, D P , P E a n d P I C w e r e 0 . 7 5 1 1 一 0 . 8 3 7 6 , 0 . 8 2 7 3 一0 . 9 2 4 7 , 0 . 5 1 6 7一 0 . 6 7 1 8 a n d 0 . 7 1 0 0一0 . 8 1 9 5 r e s p e c t iv e l y . C o n e lu - s t o n e T h e t h r e e S T R d o u b le l o
11、 c i e x h i b i te d h i g h e r p o ly m o r p h i s m a n d w e r e b e tt e r g e n e ti c m a r k e r s . T h e d a t a o n t h e a l l e l e freq u e n c ie s o f t h e s e s i x S T R lo c i ma y b e u s e d in i n d iv i d u a l i d e n t ifi c a ti o n , p a t e r n i ty t e s ti n g a n d
12、i n o th e r p o p u l a t i o n g e n e t ic r e s e a r c h e s . K e y w o r d s : s h o n t a n d e m rep e a t ( S T R) ; Wl y m e m s e c h a i n rea c ti o n ( P C R) ; m u lt i p l e x P C H f r e q u e n c y d i s t r ib u t io n s ( 收稿日 期;2 0 0 4 - 1 2 -2 0 , 修回日 期: 2 0 0 5 -0 9 -2 6 ) ( 本
13、文编辑: 陈维忠) 婕 A -q :1 00 1 -7 6 4 K ( 20 0 6 ) 0 1 -0 0 2 5 二中 图 然 号 :8 4 4 6 . 5文 献 欣 码 :B 实验技术 平常念珠菌临床分离株的鉴定探讨 张巧云 ， 张弘 ， 张军民 ， ( 蓬 莱 i f 中 医 医 院 检 验 科， 山 东 蓬 莱2 6 5 6 0 0 ; 2 . 中 国 人民 解 放 军 总医 院 微生 物科 ， 北 京1 0 0 8 5 3 ) 关键词: 念珠菌; 涪养; 鉴定 平常念珠菌( C a n d id a in c o n s p ， 二) 首先由L o d d e r 和K ，一g a
14、r C a n d id a产色培养基， 3 7培养观察菌落颜色 g e r 于1 9 5 2 年报道， 称平常球拟酵母菌( T r a l p二二o pie - 1 . 5 药敏试验根据2 0 0 3 年N C C L S 酵母 菌纸片扩散法药 a a ) , 1 9 7 8 年归念珠菌属 。临床虽不多见 但因对氟康哩敏标准M 4 4 - P 检测氟康哗敏感性。菌液浓度为0 . 5 麦氏 单 多 数 不敏 感 =， 将 其 准 确鉴 定到 种 对 其感 染 患 者的 治 疗至 关位， 用 无 菌 棉 拭子 涂 含2 0 扩 1 葡 萄糖 和0 . 5 y g / m l 美蓝的 重要。国内目
15、前尚未见该菌的相关报道。我们对临床标木M- H培养基,3 5培养2 4 h判读结果。氟康噢纸片含量2 5 分离的3 株平常念珠菌生物学特性及与其表型特征相关的1+ 6 / 片， 判断标准为敏感( S ) - 1 9 m m, 耐药( R) c1 4 m m 。质 念珠菌的鉴别进行了探讨， 现报告如下。控菌株为白念珠菌 A T C C 9 0 0 2 8 ， 质控范围为2 8 - 3 9 m m 1 材料与方法1 . 6 七叶昔水解试验将菌株接种于七叶昔微量鉴定管2 5 l . 1 菌株来源3株平常念珠菌中 I 株从颅内感染患者的培养， 分别于2 4,4 8 , 7 2 h观察结果。 导尿标本分
16、离， 另2 株来 自 气管炎和类风湿性关节炎患者的2 结果 痰标本。3 株菌在沙氏培养基 均生长白色、 光滑、 湿润的酵母样 1 . 2 试剂沙氏培养基( 自制) ; C h r o m a g a r C a n d id a产色培菌落。血清芽管阴性; 2 4 ,4 8 ,7 2 h 显微镜观察玉米吐温 - 8 0 养基( 法国科码嘉公司) ; V it e k 2 1 D - Y S T酵母菌鉴定卡( 法国培养基， 均无厚膜抱子和菌f k 牛长。产色培养基 卜菌落为无 生物梅里埃公司) ; 七叶昔微量鉴定管( 杭州天河公司) 。色。用Vt e k 2 1 D - Y S T卡鉴定3株菌均为
17、平常念珠菌/ 挪威 1 . 3 仪器V i te k 2微生物鉴定仪和药敏试验系统( 法国生念珠菌( C a n d id a in c o n sp ic u a / n o m e g e n s 司 ，根据形态学及七 物梅里埃公司) 。叶曹水解试验2 4 , 4 8 , 7 2 h均为阴性， 最后鉴定为平常念珠 1 . 4 培养 临床送检痰、 尿标本常规 接种沙氏培养基，2 5菌C氟康哇药敏试验A T C C 9 0 0 2 8 抑菌圈为3 3 m m ， 而3 株 培养2 4 - 4 8 h 。取沙氏培养基菌落接种血清, 3 7孵育2h临床菌虽敏感但均接近剂量依赖性敏感( D D S
18、) 判断标准( 1 8 观察芽管产生情况; 接种玉米吐温一8 0培养基 2 5培养，mm) 分别为1 9 ,2 2 , 2 3 m m 2 4 ,4 8 , 7 2 h分别观察厚膜抱子、 菌丝生长情况; 接种C h ro m a -( 下转第3 6页) 3 6 临床检验杂志2 0 0 6年第 2 4卷第1 期C h i n e s e J o u r n a l o f C l i n i c a l L a b o ra t o ry S c ie n c e , 2 0 0 6 , V o l . 2 4 , N o . 1 fi n d in g s in th e B r a u d
19、y w in e i s o la te J . A la J M e d S c i , 1 9 6 6 , 3 ( 4 ) : 3 8 2 40 3 3 R o b e d s E , S c h o u r I . H e r e d ita ry叩a le s e e n t d e n t in e - d e m in o g e n e s is i m - p e r f e c t a J . A m J O rt h o d O ra l S u r g , 1 9 9 3 . 2 5 :2 6 7 -2 7 6 . 4 B a l l S P , C o o k D J
20、, M a rn M, e t . J . L in k a g e b e tw e e n d e n ti n o g e n e s is im p n r f n a a n d G J . A n n H u m G e n e t , 1 9 8 2 ,4 6 ; ( p tl ) :3 5 -4 0 5 1 Z h a n g X , Z h a o J , L i Cs t a l. D S P P m u ta t io n i n d e n t in o g e n e s is im p e r - fe e t . S h i e ld s ty p e 1 J .
21、 N a t G e n e t. 2 0 0 1 , 2 7 ( 2 ) : 1 5 1 - 1 5 2 . P re s s , 1 9 8 9 . 9 , 1 6 7 C ro s b y A H, S c h e rp b ie r -H e d d e m a r , W ij m e n g a C . G e n e t ic m a p i n g o f th e d e n ti o n g e n e s ts i m p e r fe c t. t y p e I I l o c u s J . A m J H o m G e n e t , 1 9 9 5 , 5 7
22、 ( 4 ) ; 8 3 2 -8 3 9 8 1 A p b o H M, H ir s t K L , D ix o o M J , n a a l . R e ri a e m e r a “t h e d e n ti n o - g e n e s i s im p e r f e c t . ty p e R lo c o s to . n i m e v :d o f Ic s th a n 2 c e n ti m - g a n s a t c h ro m o so m e 4 g 2 1 a n d t h e c re a ti o n o f y e a s t a
23、n if ic ia l a h m m e - s o m e wn t ig o f t h e c ri t ic a l re g i o n J . J D e n t R e s , 1 9 9 9 , 7 8 ( 6 ) : 6 S . m b m o k J , F y it , ,h E F , M a m a t is T . M o le c u l a r c lo n i n g . A l a b o ra to r y 1 2 7 0 - 1 2 7 6 . m a n u a l . 2 n d e t: M子 N e w Y . A, Col d S p r
24、in g H a 比“La b o ra to r y P a t h o g e n ic g e n e l in k a g e a n a l y s is o f a f a m i l y w it h d e n t i n o g e n e s is i m p e r f e c t . t y p e I I C U I Y i n g x i a , H O U Y a n n in g 2 , W A N G Y u n h u a ， H A O L ij u n , B A I H o n g c i a , L I F a n g g i u , H U A N
25、 G Y u f e n g ( 1 . l a b o - s t o ry o f R e p r o d u c ti o n a n d G e n e ti e s , N a n j f n g G e n e r a l H o s p it a l o f N a n j i n g C o m ma n d , P L A , N a n j i n g 2 0 0 0 2 , C h in a ; 2 . D e p a r t m e n t o f S t o- m a t o lo g y , N a n j i n g T ra d i ti o n a l C h
26、 in e s e M e d i c i n e H o s p i ta l , 2 1 0 0 0 1 , C h in a ) A b s t r a c t ; Ob j e c t i v e T o m a p t h e p a t h o g e n ic g e n e s o f a fa m i ly w i th d e n ti n o g e n e s is im p e rf e c t. t y p e 1 1 to c h r o m o s o m a l p o s it i o n . Me t h o d s T h e b l o o d s a
27、 m p l e s w e r e c o l le c t e d f ro m th e f a mil y w it h d e n ti n o g e n e s i s im p e d e c t a ty p e I I i n c l u d in g 1 8 i n d i v i d u a l s . We p e r fo r m g e n e ti c li n k a g e a n a ly s i s o f 6 s h o rt t a n d e m r e p e a t l o c i a t t h e reg i o n o f 4 g 2 1
28、 ( D 4 S l 5 3 4 , G A T A 6 2 A1 1 , D S P ( P ) , D M P I , S P P I a n d D 4 S 1 5 6 3 ) a s w e ll a s h a p l o t y p i n g场fl u o r e s c e n t P C R . R e s u l t s T h e 2 lo c i w it h m a x i m u m L o d . c o res w h ic h w a s l a r g e r t h a n 3 w e re Lo c u s G A T A 6 2 AI 1 , Z -3
29、 . 8 6 ( 。 二 0 ) a n d l o c u s D S P ( P ) , Z ma x =4 . 7 2 ( 9= 0 ) . T h e p a th o g e n ic g e n e o f ri te f a m il y m a p p e d to t h e in t e r v a l o f D 4 S 1 5 3 4 - D MP I a t t h e r e g i o n o f 4 咚场h a p lo t y p i n g . 1; 一。 n c lu s i o n T h e p a th o g e n ic g e n e o f
30、th e f a m i l y is lo c a t e d a t c h r o m o s o m e 4 够1 . K e y w o r d s ; d e n ti n o g e n e s i s im p e r f e c t. t y p e I 1 ; s h o rt ta n d e m r e p e a t ; l i n k a g e a n a l y s is ( 收 稿日 期: 2 0 0 5 -0 8 - 12 , 修回日 期二 2 0 0 5 -1 0 -2 0 ) 本文编辑: 陈军) ( 上接第2 5页) 3讨 论 平常念珠菌为条件致病菌，
31、临床并不多见。根据实验室 鉴定程序， 血清芽管试验阴性且在玉米吐温一 50 培养基上不 形成菌丝， 一般报告为光滑念珠菌。如用产色培养基， 光滑 念珠菌菌落呈紫色。而平常念珠菌虽在玉米吐温 一 8 0培养 基! _ 不 产生菌丝， 但在产色培养基上菌落呈无色。如无产色 培养基， 很容易误鉴定为光滑念珠菌。本文报告的目的主要 想提, J 用手工方法鉴定念珠菌时， 在玉米吐温一 8 0培养基上 不产生菌丝的念珠菌除光滑念珠菌外还有其他念珠菌需要 鉴别。区别平常念珠菌与光滑菌的简单试验除产色培养基 菌落有无颜色外， 比较其在玉米吐温- 8 0培养基上的抱子大 小也可区别。光滑念珠菌抱子直径一般为2一
32、3 y m， 明显比 其 他 念 珠菌 抱子 ( 直 径 一 般为2 5 一 4 I t m ) 闭小 。 如 有条 件 还可用同化试验鉴定。另外， 平常念珠菌与其相似菌挪威念 珠菌用七叶昔水解试验即可区别。平常念珠菌为阴性， 娜威 念珠菌为阳 性 】 。 平常念珠菌对氟康哩的药物敏感试验文献报道多为不 敏感， 但M a jo r o s 等W用4 种方法( 不包括纸片书散法) 检测 结果大多 数为浓度依赖性敏感。我们用2 0 0 3 年N C C L S 推荐 的纸片扩散法检测， 3株菌对氟康陛虽敏感， 但抑菌圈直径接 近浓度依赖性敏感折点。推测既有方法学差异， 也存在平常 念珠菌具有潜在耐
33、氟康哇特性， 用氟康哇治疗后再做药敏试 验可能会变为耐药。对此， 我们将进步收集菌株和临床资 料对此问题进行探讨。 参考文献: 川 Y a r o w D, M e y e r S A . P ro p o s a l f o r ame n d m e n t o f th e d ia g n o s is o f th e g e n u s C a .a f i d . B e r k h o u t n o m . n o m . c o n s 1 一 In t J S y s t B a c t e r io l , 1 9 7 8 ,2 8 :6 1 1 -61 5 2 Ma
34、jo r . . L , K a r d o s G , B e la n k A, a a l . R e s t ri c ti o n e n z y m e a n a l y s i s o f r i b o so m a l D N A s h o w s th a n C a n d id a i ns - p io o a c l in i c a l is o la e s c a n b e m is i d e n ti f ie d a s e a n d iJ a mrv e g e n s i s w i th t ra d i tio n a l d i a g
35、 n o s t ic p ro- c e d u r e s J . J C l in M ic m b i o 1 , 2 0 0 3 , 4 1 ; 5 2 5 0 - 5 2 5 3 3 陈世平 . 真 菌感染 学 M _ 沈 阳 : 辽宁科 学出版 社 ，2 0 0 0 . 2 9 8 -3 2 3 4 N b o S , A n d e r s o n M 1 , M o o m C B , e t a l . S p e c i e s d i ff e r e n t ia ti o n b y in t e m ad l y tr a n s c r i b e d s p
36、a c e r P C R a n d H h a l d ig e s t io n o f fl u c o n a z o l- e - s i s ta n t C a n d i d a . d r a s e i., C a n d id a in e n - p iu u a , a n d C a m li d a a o n r g e a - s u t m in . J . J C l in M i c m b io l , l 9 9 7 , 3 5 : 1 0 3 6 - 1 0 3 9 _ 5 M a j o r ca , L , K a r d o s G , S
37、 z a b n B , e t a l. F l u c o n a zo le - s e p ti b ili ty te st in g o f C a n d id , i a c o m p ie u o c l in ic a l is o l a t e s : c o m p a r is o n o f fo u r m e t h o d s J . J A n tin u e m b C h e r n o t h e r, 2 0 0 5 , 5 5 : 2 7 5 -2 7 6 . 收 稿日 期:2 00 5 -0 3 -2 5修 回日 期:2 0 0 5 -0 ， 一) ( 本文编辑: 杨林)