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1、1 2 6现代检验医学杂志第2 3 卷第3 期2 0 0 8 年5 月JM o dL a bM e d ，V 0 1 2 3 ，N o 3 M a y 2 0 0 8 探讨血红蛋白与转铁蛋白联合检测对于消化道出血的诊断价值 杜鹏，刘蕊，许鹏展( 天津市人民医院检验学部，天津3 0 0 1 2 1 ) 摘要：目的评价同时检测血红蛋白( H b ) 与转铁蛋白( T f ) 在粪便隐血试验中的临床价值。方法对4 0 例健康人及】7 0 例有消化道出血的患者的粪便标本分剐用单克隆抗体法、转铁蛋白肢体金检测法以及化学法( 匹拉米洞半定量检测法) 进 行检测。单克隆抗体法检测H b ，转铁蛋白胶体金检测
2、法检测T f ，化学法检测H b 。结果化学法检测上消化道出血的阳性 率为4 5 2 ，检测下消化道出血的阳性率为5 7 4 ，检测健康组阳性率为1 7 5 。单克隆抗体法检测上消化道出血的阳性 率为4 8 4 ，检测下消化道出血的阳性率为6 6 7 ，检测健康组阳性率为2 5 。转铁蛋白方法检测上消化道出血的阳性 率为4 1 9 ，检测下消化道出血的阳性率为6 4 8 ，检测健康组阳性率为2 5 。单克隆抗体法与转铁蛋白法一项为阳性 即为阳性的上消化道出血的阳性率为5 4 8 ，下消化道出血的阳性率为7 0 4 ，健康组阳性率为2 5 。结论粪便中的 H b 与T f 联合检测可大大提高消化
3、道出血及大肠肿瘤的阳性检出率。 关键词：便潜血；单克隆抗体法；转铁蛋白检测法；化学法 中图分类号：R 5 7 3 2 ；R 4 4 6 1 3 3 文献标志码：A文章编号：1 6 7 1 - 7 4 1 4 ( 2 0 0 8 ) 0 3 1 2 6 - 0 2 粪便隐血试验是临床上诊断消化道出血的常用指标， 1 1 材料和方法“消康保”便潜血，是采用免疫夹心检 已知的化学法易出现假阳性结果，是因为易受饮食和药物测方法，以及诊断试剂均由万华普曼生物工程有限公司生 的影响，单克隆抗体法与化学法相比，灵敏度、特异度都有产。便潜血( O B ) 半定量测试卡，利用匹拉米洞来做显色 了很大的提高，在临
4、床上已得到广泛应用，但由于H b 易受剂，在酸及H z 0 ：的作用下与H b 反应产生紫蓝一紫红的颜 胃内各种消化酶的作用和肠道内的细菌分解的作用而变色，据此判断结果，由珠海贝索生物技术公司生产。 性，结果易出现假阴性，而同时测定H b 与T f 对消化道出 1 2 对象1 7 0 名经内窥镜确诊有消化道出血的患者及 血性疾病的阳性检出率有明显的提高。为了探讨转铁蛋白4 0 例经内窥镜检查无消化道出血性疾病的健康者。 方法与单克隆方法在临床上的应用价值，我们选择了本院 2 结果消化道出血患者与健康者粪便中H b 和T f 检出 1 7 0 例经内窥镜确诊有消化道出血的患者( 包括胃及肠的 结
5、果的比较见表1 。从表1 中看出化学法在检测健康组中 溃疡、出血、肿瘤、息肉) 和4 0 例健康者分别用三种方法检出现了1 7 5 的假阳性率。而转铁蛋白胶体金检测法与单 测，报告如下。克隆检测法仅出现了1 例阳性。其它6 例阳性者在检测前 l 资料与方法均食入了动物肉类。 表1各分类组粪便中H b ，T f 同时测定与化学法检测H b 的结果比较( ) 3 讨论 3 1 从表I 中可看出上消化道出血的患者粪便中，转铁蛋 白检测法的敏感性略低于单克隆抗体法，这是由于在血液 中H b 和T f 的比值为5 1 2 1 ，而粪便中H b 和T f 的比值 为5 4 1 ，尽管H b 在胃肠内受到消
6、化酶和细菌的作用易变 性，T f 在肠道内有抗茵能力强，性质比较稳定的特点，但如 果出血很少，那么转铁蛋白检测法则达不到它的检测下限， 因此出现假阴性结果。而联合检测H b 和T f 时发现阳性率 为5 4 8 ，说明在检测上消化道出血时有一部分单克隆阴 性的病例出现了假阴性，原因有三：过量大出血而致反应 体系中抗原过剩出现前带现象；上消化道出血后，血红蛋 白或红细胞经过消化酶降解变性或消化殆尽，已不具有原 来的免疫原性，抗原性发生改变；病人血红蛋白与单克隆 抗体不匹配可致假阴性 I 。 3 2 从表1 中还可看出在下消化道出血患者中转铁蛋白 仍不如单克隆抗体法敏感，这是因为约有1 0 的病例
7、出现 T f 值较低的现象 2 。已知遗传性无转铁蛋白血症、各种恶 性疾病、炎症为主的多种疾病均可导致转铁蛋白值低下 3 ， 况且只有在大肠癌患者的粪便中才出现大量的转铁蛋白， 因此转铁蛋白法易出现假阴性的结果，但联合检测H b 和 T f 发现阳性率为7 0 4 ，这是由于当消化道大量出血时， 单克隆抗体法出现了前带现象，造成假阴性，转铁蛋白法就 不出现假阴性吗? 不是的，由于粪便中H b 和T f 的比值为 5 4 1 ，所以转铁蛋白检测法与单克隆抗体法相比较而言， 不易出现前带现象，当粪便为脓血便时，仍需稀释5 0 1 0 0 倍后再进行检测，通过上述比较我们得出，联合检测H b 和 T
8、 f 对检测消化道出血更具有I 临床意义，可起到优势互补的 作用。 3 3 化学法在上消化道出血、下消化道出血患者中的检出 率略低于转铁蛋白测定法和单克隆抗体法。因为化学法的 检测范围在0 5 - g m l 以上，而单克隆抗体法在0 2 0 5 - g m l 。据报道当患者食入动物的肉、血、肝脏、含过氧化物 的蔬菜、V i t C 、铁剂、中药等干扰物时，易出现假阳性结 果 “。而本实验中的1 7 0 例均为消化道出血的患者，所以没 有出现假阳性过高的现象。目前胶体金免疫层析技术只是 定性检测，仅给出阳性或阴性结果，不能对消化道出血病人 作者简介。杜鹏( 1 9 6 8 一) ，男，大专，
9、主管技师，E - m a i l l y y k l 0 1 1 2 6 c o i n 。 万方数据 现代检验医学杂志第2 3 卷第3 期2 0 0 8 年5 月 JM o dL a bM e d ，V 0 1 2 3 ，N o 3 ，M a y 2 0 0 81 2 7 进行疗效观察 5 ，很难确定定量反应关系，不能报告强阳 性、弱阳性或加号( 。卅，H ，+ ) ，因此观察止血程度欠佳， 而化学法可根据反应时间和颜色深浅大致估计出血量的多 少( 半定量) ，适合对临床的正确引导。 参考文献： 1 马小露，李艳莲血红蛋白、转铁蛋白联合免疫法检测 便潜血在临床中的应用 J 大连医科大学学报，
10、 2 0 0 3 ，2 5 ( 4 ) ：2 7 8 2 8 0 2 三好博文免疫学便潜血：粪便中血红蛋白、转铁蛋白 同时检测的实用性 J 日消集检志，1 9 8 9 ，8 3 ( 1 ) ：9 7 3 4 3 5 杨明，丛玉隆章子其转铁蛋白与血红蛋白同时检 测消化道出血 J 临床检验杂志，2 0 0 3 ，2 1 ( 2 ) 8 3 8 5 韦常丽粪便潜血单克隆抗体法临床应用的探讨 J 广西中医学院学报，2 0 0 3 ，6 ( 4 ) ：5 6 5 7 K a b i rS R e v i e wa r t i c l e ：c l i n i c b a s e dt e s t i n
11、 gf o rH e l i c o b a c t e rp y l o r ii n f e c t i o nb ye n z y m ei m m u n o a s s a yo f f a e c e s ，u r i n ea n ds a l i v a lJI A l i m e n tP h a r m a c o lT h e r ， 2 0 0 3 ，1 7 ( 1 1 ) ：1 3 4 5 - 1 3 5 4 收稿日期：2 0 0 7 1 2 2 4 E l 。I S A S T A R 全自动酶标分析仪工作计划表编辑应用 王庆国 ( 徐州市第一人民医院检验科，江苏徐
12、州 2 2 1 0 0 2 ) 中图分类号：R 4 4 6 9 文献标志码：A 文章编号：1 6 7 1 7 4 1 4 ( 2 0 0 8 ) 0 3 1 2 7 0 2 E L I S A S T A R 是瑞士H A M I L T O N 公司生产的9 6 孔抓板动作之间的时间间隔至少是4S ，可通过观察加样“动 酶标板全自动分析处理系统，它集合了标本和控制品加注、作信息栏”的结束时间调整移动微板开始时问或观察移动 试剂加注、微板孵育、微板洗涤、条码读取和比色结果判读微板“动作信息栏”结束时间调整加样开始时间；对于同一 功能于一体，是新一代的全自动酶免分析一体机，但分析仪实验项目，加样
13、与抓板动作在与其它实验项目动作无冲突 实验项目的工作进度、完成整个实验所需时同的安排完全的情况下动作可连续进行。 依赖于工作计划表，由计划表充分体现出来。为了更好的缩 3 分配洗板机根据工作计划表所列实验项目合理分配 短实验工作时间，提高工作效率，防止实验项目工作进度的洗板机，即两个洗板单元动作重合时一定是w a s h A 和 冲突，如何编辑好工作计划表显得尤为重要，笔者结合实际w a s h B ，而不能同时为W a s h A 或w a s h B ，可通过鼠 编辑应用经验对其阐述，以供同仁参考。标指针选中洗板图块左击，在洗板“动作信息栏”的“调整洗 一个完整的实验工作计划表是由加样(
14、红色图块) 、抓板位置”选择，选择原则是避免洗板机冲突。将洗板后与抓 板( 黑色图块) 、孵育( 绿色图块) 、洗板( 蓝色图块) 、判读( 黄板动作之间的时间间隔设置至少2m i n 以免出现机械手 色图块) 组成，其中加样包括加标本( 或稀释液) 、加酶、加显。抢板”现象，可通过观察洗板“动作信息栏”的结束时问，调 色剂、加终止液。多个实验项目的工作计划表编辑顺序应从整移动微板“动作信息栏”的开始时间。 左向右。按组合加样排列编辑。4 合理安排工作进度工作计划表在尽量保证加样、抓 1 分组联合加样根据工作计划表中所列实验项目进行板、孵育、抓板、洗板动作连续的情况下：加标本和加酶之 分组组合
15、，分析仪最多设有四种组合，即0 ，1 ，2 ，3 ，可通过问的时间间隔可以适当延长。计划表未做编辑时加样与加 “动作信息栏”的“调整组合加样”选择。四种组合仅为随机酶一般无时间间隔，均为红色图块，可通过鼠标指针选中红 选择，并不代表加样顺序，加样顺序是由计划表的左边向右色图块最后加酶部分左击，调整加样“动作信息栏”的开始 开始的，组合加样分组越多，完成实验所需时间就越长，如时间，设置时间间隔。目的是为了错开洗板机，避免冲突。 果有启动稀释微板架或稀释管的实验项目必须单独列为一洗板后与抓板与加样之间的时间间隔可以延长。目的一是 组( 如H B c A b ) 。无论将何组实验项目列为开始加样组都
16、需为了错开酶标仪比色判读，二是为了避免洗板机冲突。加 要将“动作信息栏”的“调整开始时间”设置至少1S ，否则仪酶( 或显色剂) 、抓板、孵育动作连续无间隔；孵育、抓板、洗 器会提示错误信息：“Y o um u s tb ei ns h o w c h e c k b o xm o d e板动作连续无间隔；孵育、抓板、加终止液动作连续无间隔， t os e tt ot h i sd a t e ”。本实验室是将H B c A b 单独列为一组首 加终止液后与抓板、终点法判读时间间隔亦不能超过1 0 先开始加样，H C V A b ，H E V A b ，P r e S l A g 列为一组其次
17、加 m i n ，以免影响比色结果。 样，H B s A g ，H B s A b ，H B e A g ，H B e A b 列为一组最后加样。分5 检查、保存、运行水试验按上述方法编辑完工作计划 组联合加样的目的既减少了加标本所需的时间，又有效地表后，点击检查。只有仪器提示检查通过后再点击保存，给 利用了洗板机，避免洗板机冲突。调度表命名，否则重新检查工作计划表每个实验及其之间 2 加样、抓板动作编辑仪器首先加样组合的实验项目 的每个动作是否有冲突。完成工作计划表后可点击退出，用 ( 如H B c A b ) t l 样、加酶、抓板、孵育动作可连续进行，中间水替代各种试剂运行一次水试验，观察各个动作之间有无 无间隔时间。除非是分组联合加样的实验项目，否则加样动冲突，发现问题及时解决并记录下来或终止水试验重新调 作不能与加样动作重叠交叉；加样动作不能与机械手抓板 整计划表。只有水试验运行成功，方能说明本工作计划表做 动作重叠交叉( 因加样枪与机械手在同一机械臂上) I 抓板实验可行。 动作与抓板动作不能重叠交叉。对于不同实验项目，加样与6 单独加样编辑在工作量较大( 需要做两批或更多批标 作者简介：王庆国( 1 9 6 9 一) ，男，本科，副主任技师，主要从事免疫、生化检验工作T e l ：0 5 1 6 8 5 8 0 3 1 2 4 万方数据