《泼尼松制剂对小鼠免疫功能的影响.pdf》由会员分享，可在线阅读，更多相关《泼尼松制剂对小鼠免疫功能的影响.pdf（2页珍藏版）》请在三一文库上搜索。
1、现代中西医结合杂志M o d e mJ o u r n a lo fI n t e g r a t e dT r a d i t i o n a lC h i n e s ea n dW e s t e r nM e d i c i n e2 0 0 9M a r 1 8 ( 7 )7 2 9 泼尼松制剂对小鼠免疫功能的影响 杨梅，刘 琦，李怀清，杨立行，王达兵，陈永，彭军，舒莉萍 ( 贵阳医学院，贵州贵阳5 5 0 0 0 4 ) 摘要目的了解不同剂量的泼尼松制剂对小鼠特异性争非特异性免疫功能的影响。 方法以肌肉注射O 2 5m L A t g 、0 1 2 48m L k g 、0 0 5
2、m L k g 的用药量将小鼠分为高、中、低 剂量组，同时设一对照组，连续用药1 0 d 。分别检测各组小鼠的体质量、胸腺指数、脾脏指数、 巨噬细胞的吞噬率、中性粒细胞的吞噬率、T 淋巴细胞E 花环率、溶血素效价和抗绵羊红细胞 抗体形成细胞的水平。结果高剂量组与对照组相比，除巨噬细胞的吞噬率、T 淋巴细胞E 花环率、胸腺指数无显著性差异外，其余各项指标都有显著性差异；中剂量组、低剂量组与对 照组相比，体质量、胸腺指数、脾脏指数、中性粒细胞吞噬率、溶血素效价有显著性差异，其余 各项指标无显著性差异。结论高剂量的泼尼松制剂对体质量、脾脏质量、中性粒细胞吞噬 功能、B 淋巴细胞分泌抗体的能力、抗绵羊
3、红细胞抗体形成细胞的水平有抑制作用。中、低剂量的泼尼松对体质量、脾 脏质量、胸腺质量、中性粒细胞吞噬功能、B 淋巴细胞分泌抗体的能力有抑制作用。 关键词】泼尼松；胸腺指数；脾脏指数；特异性免疫；非特异性免疫 中图分类号】R 一3 3 2 文献标识码 A 文章编号】1 0 0 8 8 8 4 9 2 0 0 9 ) 0 7 0 7 2 9 0 2 E f f e c to fp r e d n i s o n eO ni m m u n ef u n c t i o no fr a t Y a n gM e i ，L i uQ i ，L iH u a i q i n g ，Y a n gL i
4、】【i n g ，W a n gD a b i n g ，C h e nY o n g ，P e n gJ u n ，S h uL i p i n g ( G u i y a n gM e d i c a lC o l l e g e ，G u i y a n g5 5 0 0 0 4 。G u i z h o u ，C h i n a ) A b s t r a c t ：O b j e c t i v eI t i st oe x p l o r et h ee f f e c t so fp r e d n i s o n eo fd i f f e r e n td o s a g e
5、o ns p e c i f i ca n dn o n s p e c i f i ci m m u n e f u n c t i o no fr a t s M e t h o d sR a t sw e r ed i v i d e di n t oh i g hd o s a g e m i l dd o s a g ea n d l o wd o s a g eg r o u pa c c o r d i n gt 0t h eu s e dd o s a g e o f0 2 5m L k g 0 1 2 48m E k sa n d0 0 5m L Lb yi n t r a
6、r u s c u l a ri n j e c t i o n A n o t h e rg r o u po f r a t sw e r ec h o s e na sc o n t r o l g r o u p A f t e r1 0d a y s t r e a t m e n t ，t h ei n d e xo ft h y m u sg l a n da n ds p l e e n ，f u n c t i o no fa b d o m i n a lc a v i t ym a c r o p h a g ea n dn e u - t r o p h i l ，a
7、n t i b o d yp r o d u c t i o n ( S R B C P F C ) a n ds e r u mh a e m o l y s i nt i t e r s 。E r o s e t t ef o r m a t i o nw e r eo b s e r v e dr e s p e c t i v e l y R e s u l t sT h e r ew e r es i g n i f i c a n td i f f e r e n c e si na l lt h ei n d e x e se x c e p tf o rp h a g o c
8、y t o s i sr a t eo fp h a g o c y t e ，S R B C P F Ca n di n d e x o ft h y m u sg l a n d ( P 0 0 5 ) i nt h eh i g hd o s eg r o u pc o m p a r e dw i t ht h ec o n t r o lg r o u p T h e r ew e r en os i g n i f i c a n td i f f e r e n c e si n t h ei n d e x e se x c e p tf o rt h y m u si n d
9、 e x ，s p l e e ni n d e x ，n e u t r o p h i lf u n c t i o n ，p r o d u c t i o no ft h eh e m o l y s i na n t i b o d yi nt h em i d d l e d o s eg r o u pa n dl o wd o s eg r o u pc o m p a r e dw i t ht h ec o n t r o lg r o u p C o n c l u s i o nH i g hd o s eo fp r e d n i s o n eh a si n h
10、 i b i t i o no nb o d y w e i g h t ，s p l e e nw e i g h t ，p h a g o c y t o s i so fp h a g o c y t e s ，a n t i b o d yp r o d u c t i o no fBl y m p h o c y t e sa n dE r o s e t t ef o r m a t i o n M i l d a n d l o wd o s eo fp r e d n i s o n eh a si n h i b i t i o no nb o d yw e i g h t
11、，s p l e e nw e i g h t ，t h y m u sg l a n dw e i g h t ，p h a g o c y t o s i so fp h a g o c y t e s ， a n t i b o d yp r o d u c t i o no fBl y m p h o c y t e s K e yw o r d s ：p r e d n i s o n e ；t h y m u sg l a n di n d e x ；s p l e e ni n d e x ；s p e c i f i ci m m u n er e s p o n s e ；n
12、 o n s p e c i f i ci m m u n er e s p o n s e 泼尼松又名醋酸泼尼松龙，此药属于肾上腺皮质激素类 药物，对机体有抗炎、抗过敏等多种作用。临床上主要用于过 敏性与自身免疫性炎症疾病的治疗，是进行器官移植后常 用的药物。本实验旨在探讨不同剂量的泼尼松对小鼠免疫功 能的影响情况，现报道如下。 1 实验资料 1 1 材料 【作者简介】杨梅( 1 9 8 4 一) ，女，现就读于贵阳医学院临床医学系。 通信作者】舒莉萍，女，硕士，副教授主要从事基础免疫学教 学和相关领域的科研工作。E m a i l ：g y s l p 4 5 6 y a h o o c
13、o r r l c n 基金项目】贵阳医学院教改赉助项目( 2 0 0 5 1 1 ) 1 1 1 药品泼尼松( 醋酸泼尼松龙注射液) 由浙江仙琚制 药股份有限公司生产，批准文号为国药准字I - 1 3 3 0 2 0 8 2 4 。规格 为5 m L ：0 1 2 5g 。 1 1 2 实验动物健康昆明种小鼠8 0 只，雌雄各半，体质量 2 0 2 2g ，由贵阳医学院实验动物中心提供。 1 2 方法 1 2 1 配药将泼尼松用无菌生理盐水稀释1 0 0 倍，浓度为 5 0 0 m L ：0 1 2 5g 备用。 1 2 2 动物分组及给药小鼠按每组2 0 只分为正常对照 组、高剂量组( O
14、 6 2 5m L 次) 、中剂量组( 0 3 1 2m L 次) 、低剂 量组( 0 1 2 5m L 次) ，每组雌雄各半。每天经大腿肌注2 次 ( 早晚各1 次) ，连续用药1 0d 。然后眼球放血，颈椎脱臼处死 万方数据 7 3 0 现代孛嚣嚣缭会杂志M o d e mJ o u r n a lo fI n t e g r a t e dT r a d i t i o n a lC h i n e s ea n dW e s t e r nM e d i c i n e2 0 0 9M a r ，1 8 ( 7 ) 小鼠，分别检测各项指标【2 J 。 1 。2 3 免疫动物 1 。2
15、。3 。1 黪舅搜缓爰药第4 天采羊盘，第6 天下午洗缡莩 红细胞配成1 的S R B C 悬液，将备缰取l O 只( 壤雄对半) 腹 腔注射配好的S R B C0 5m L 。 1 2 3 2 非特异性组用药第8 天下午，将各组来注射S R B C 豹小鼠各取5 只，羧腔注射淀粉肉汤，lm E ( 以螽捻测巨隧 缨胞吞遴搴) ；雳楚第l O 天下午绘糕余5 哭夺鬣黢麓注射肉 汤1m E ( 以备稔 曼5 中性粒细胞稃噬率) 。 1 2 4 标本收集眼球放血。肌液收集在加有肝索的塑料离 心管中，离心肠，特异性组的取上清液以备溶血素效价用，非 特异缝组豹款漉淀缨蕤，惩H a n k s 渡洗涤嚣
16、建港怨续魏提取 液提取淋巴细胞，制备淋巴缨臆懋液以备检测T 淋巴细胞E 花环率。颈椎脱臼处死小鼠，特异性组打开腹腔取脾脏研磨 成单细胞悬液，洗涤制成脾细胞悬液以备o y I s 实验用；非特异 性组打开羧腔，漱腹垃滚涂片，取圭鹣黪脏翻胸骡，分别称凌量。 1 。3 裣溅摇栋 1 3 1 胸腺指数、脾脏指数的梭i 魁称小鼠体质徵及脾脏、 胸腺的质量，用下列公式计算：胸腺指数= 胸腺质甓，J 、鼠体 殿蹩，脾脏指数= 脾腑指数J 、鼠体质激。 1 3 2 巨噬细胞番嘴率、中性粒细胞褥蠛率( 体内法) 的梭测 镜下褒察瑗冀蘧撬诗数1 0 0 令吞噬缫貔孛有吞噬迹象的缨 胞数，按下列公式计髯：吞噬百分率
17、= 器噬鸡红细胞的蜃噬细 胞数1 0 0 个巨噬细胞1 0 0 ，吞噬酉分率= 吞噬白色葡萄 球菌的中性粒细胞数1 0 0 个中性粒细胞1 0 0 。 1 。3 。3T 港巴细胞嚣受体检测 E a 、E t 兹环率)将淋既缨 蕤懋滚涂筹染色嚣镜下计数1 0 0 令孛魏筏缨戆孛春吞瞧迹象 的细胞数，仿照上述公式计算吞噬率。 1 3 4 溶血素效价用提取的上清液分别检测各组小鼠的 溶舷索效价。 1 。3 。5 羲俸形成缨稳黪检测震骆缀魏奔每豹缀莩级缨缝 分光光度诗定量测定浚测定备好的脾细胞悬液的O D 馕。 1 4 统计学处理数据用j s 表示。统计学处理用s P s S 1 1 5 软件做方差分
18、析。 2 缝累 泼尼橙鼹夺鬣嚣特异茬嚣特冥往免疫凌毙戆影豌绩聚凳 表1 和表2 。 3 讨论 表1泼尼松对小鼠非特异免疫功能的影响( i s ) 注：与对照组比较，P 0 0 5 ；与对照组比较，P 0 0 1 。 表2泼尼松对小鼠特异免疫功能的影响( 茗土s ) 注：与对照缀鹾：较，P 0 0 5 。 泼尼松可防止或抑制细胞介导的免疫反应，延迟性的变 态反应，减少T 淋巴细胞、单核细胞、嗜酸性粒细胞的数目， 降低免疫球蛋囱与细胞表面受体黝结合能力【3 ，并抑制自细 憝会素戆舍成怒鼗菝，簌瑟簿爨零涤已蘩瑰囊游戮蟹缍憨转 化，并减轻原发免疫反应的扩展；可降低免疫复合物通过基底 膜，减少补体成分及
19、降低免疫球爝白的浓度。本窟验结果显 示，E 花环率只有在高剂量组才降低，其功能活性受到的抑制 作用不弱显，霹以看出浚尼羧对缨臆免疫的撺裁住耀不明显。 忿实验慰，l 、鬣络蠢的巨噬缨胞懿吞噬凌能没有骥纛影睫，两 高、中、低剂最对小鼠中性粒细胞的吞噬功能都有徽强的抑制 作用，可见泼尼松对小鼠机体的固有免疫系统有抑制作用，且 主要作用于中燃粒细胞。高、中、低剂量组小鼠的外周免疫器 官一脾脏和中枢器官一胸腺的质量减少和体积减小，体质量 也甓漫减轻，堡高剩豢对胸豫豹抑制掾耀因个体差异瑟不鞠 最，浚慰橙对耱周免疫器官静捧裁程发强手中枢免疫器宙。 免痰过的小鼠体内的抗绵羊红胞抗体的数目明显减少。B 淋 巴细
20、胞分泌抗体的功能受到抑制 4 ，说明泼尼松对体液免疫 的抑制作用强于细胞免疫。 ( 衷心惑漆麦穗菝擎旄免疫学裁碾蜜童嚣、攮志莩、臻努 英、龙世棋、装华各镶老师对本课题的失力帮助争捂导辩盼 感谢贵阳医学院公哭激生学院扬星老师在数据处理上给予的 帮助! ) 【参考文献】 【1 】癸簸链，裁恭穰。溅学免疫学【M 】4 凝北京：孛匿辩掌技零大 学出版社，2 0 0 5 ：1 5 5 1 5 7 2 刘恩岐，尹海林。顾为望医学实验动物学 M 北京：科学出版 社。2 0 0 8 ：1 2 9 1 3 0 ；1 3 7 1 3 9 【3 】差兰兰，姊人翦骥凑免疫学鞠免疫糗验【鹾3 。霓家：辩学技零 支鬏出蕨柱，2 0 0 4 ：1 1 6 1 1 8 ；1 2 3 1 2 6 4 芮耀诚实用药物手册 M 】2 版北京：人民军医出版社， 2 0 0 7 ：5 6 9 5 7 5 收横日期】2 0 0 8 0 8 2 5 万方数据