活血通腑方对实验性腹腔粘连TGF-βmRNA表达的影响.pdf

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1、第2 2 卷第1 2 期 2 0 0 4年 1 2月 中W L簇 岁学刊 C H I N E S E A R C H I V E S OF T R A DIT I O N A L C H I N E S E V o l . 2 2 No . 1 2 D e c. 2004 江苏省中医药局资助项目( 0 3 2 0 ) 活血通腑方对实验性腹腔粘连下 G F - p m R N A 表达的影响 曾莉陈卫平赵凤鸣夏国守陈海燕翟亚春周玉春金桂兰 ( 南京中医药大学第一临床学院, 2 1 0 0 2 9 , 江苏南京刀第一作者女, 1 9 6 2 年生, 副教授, 副研究员, 博士研究生) 摘要: 目

2、的: 探讨活血通腑方对大鼠 腹腔粘连转化生长因子一 际R N A表达水平的影响及与粘连级别 的关系 , 研究其防治腹腔拈连的作用机制。方法: 追模大鼠随机分为A ( 假手术组) , B ( 模型组) , 以活血通腑 方组) , D ( 对照组) , 分别进行胃内药物灌注, 用逆转录一 聚合酶链反应( 一步法R T - P C R ) , 凝胶图像系统分 析T G F - 日 m R N A表达情%X , 、 非参数检验方法分析枯连变化情况, 观察药物的影响作用。结果: 5 , 2 1 天各组 光密度比值分别为0 . 0 2 6 , 0 . 7 7 , 0 . 1 5 , 0 . 3 6 ; 0

3、 . 0 6 2 , 0 . 1 8 6 , 0 . 0 9 7 , 0 . 6 9 3 。其表达强度表现均为D B C A , B 组降低实验性大鼠T G F - P m R N A表达作用十分明显。 腹腔拈连4 组比较有极显著差异( P B C A o T G F 一 队 m R N A表达5 天时活 血通腑方组是对照组的0 . 4 2 倍, 是假手术组的5 . 7 7 倍; 2 1 天时活血通腑方组是对照组的0 . 1 4倍; 是假手术组 的1 . 5 6 倍。 显示活血通腑方组对T G F 一 P m R N A的表 达有明 显的 调控作用, 其降 低实验性大鼠T G F 一 阿R N

4、 A 表达水平的作用最大, 特别是术后2 1 天时, 其作用几近 假手术组表达水平。提示活血通腑方防治腹腔粘连的机 制可能与其有效调节T G F 一 R m R N A的 表达有关。 表 1各组腹腔粘连级别分值表 组别分级l d 3 d 5 d 7 d 2 1 d ( N= 2 5 ) ( N= 2 5 ) ( N= 2 5 ) 4 0 D 1 2 1 ( N= 2 5 ) 2 2 1 1 3 1 4 5 5 3 3 讨论 T G F - p 通过自 分泌和旁分泌机理激活成纤维细胞 产生胶原, 阻断纤维蛋白溶解酶原激活物, 增加血管形成 和趋化成纤维细胞、 单核细胞及巨噬细胞, 破坏纤维蛋白

5、溶解与合成平衡, 导致细胞外基质沉积而有助于粘连的 形成(5 ) 。腹腔粘连是腹部手术后常见而棘手的间题, 常 引起肠梗阻、 慢性腹痛, 以及不孕、 不育等, 而且粘连很难 通过再次手术加以改善。资料显示腹部外科手术后的粘 连发生率约占9 0 %( 6 ) . 近年对中医药在粘连防治方面作用的研究日益加 强, 认为中 药尤其复方作用广泛, 既能促进组织修复, 降 低组织炎症反应和渗出, 又能减少腹腔毛细血管通透性, 促进腹腔巨噬细胞吞噬功能和促进微循环, 多靶点、 多环 节发挥作用。资料显示, 通腑活血中药俱有促进肠管蠕 动, 缓解肠系膜血管受阻状况, 改善腹腔血液循环, 防止 组织缺血之功(

6、7 ) ; 活血化疲药能抗炎、 解毒、 镇痛, 还能调 节肠管运动, 加速腹腔渗液吸收、 抑制结缔组织增生等西 药所不可替代的作用(8 ) 0临床效方活血通腑方中大黄、 芒硝为主药通里攻下, 不仅有泻下通腑、 泻火解毒作用, 还兼有活血化痪之功; 合用理气活血之品桃仁、 红花、 三 棱、 荻术、 赤芍、 延胡、 木香、 莱放子等更增通痞逐癖之能。 我们推测活血通腑方具有调控腹腔粘连各个阶段的多种 生长因 子和细胞因 子, 尤其是转化生长因子p 等, 以及与 调节纤溶酶 原激活 物的 活性作用和T G F - P 蛋白 基因 水 平、 抑制术后腹腔粘连的发生有关。实验研究发现活血 通腑方能使大鼠

7、术后血浆、 腹腔液中 F I B的含量降低、 F D P 含量升高, 并与粘连程度相关。进一步运用于实验 性腹腔粘连, 因徐洪雨等(9 ) 报道四磨汤口 服液应用于腹 部外科术后有顺气降逆, 消积止痛, 调理胃肠功能, 明显 减少粘连性肠梗阻的发生, 腹部外科术后值得应用; 药效 2 2 3 7 万方数据 中医药学刊2 0 0 4 年第2 2 卷 学研究亦从实验角度充分支持四磨汤的功能主治和用药 依 据( 1 0 ) 。 因此, 本实验将其作为阳性对照药, 观察对 T G F - R 蛋白 基因 表达水平的影响。 上述实验结果可以看出活血通腑方有明显抑制 T G F - S m R N A表达

8、的作用, 其下调实验性腹腔枯连 T G F 一 (3 m R N A表达水平是对照组的0 . 1 4 倍, 几乎接近 模型对照组表达水平; 活血通腑方组大鼠粘连处数少, 级 别低, 且易于分离, 分离后粘连面无出血, 甚或无粘连形 成, 与对照组等比较P 值均小于0 . 0 1 。于是, 我们认为, 活血通腑方防治大鼠术后腹腔粘连作用可能与其抑制 T G F 一 际R N A表达有关; 活血通腑方能下调实验性腹腔 粘连T G F 一 伽R N A表达水平, 影响粘连程度。 参考文献 ( 1 ) 曾莉, 张亚大. 中药胃管注入加保留灌肠治疗沾连性肠梗阻 7 2 例 J ) . 南京中医药大学学报

9、, 2 0 0 1 , 1 7 ( 5 ) : 3 2 3 - 3 2 4 幻曾莉, 翟亚春, 等 活血通暗方有效剂量筛选实验研究( J ) . 南 京中医药大学学报, 2 0 0 4 . 2 0 ( 5 ) : 3 0 9 -3 1 1 ( 3 ) 翁 永 强, 涂 彦 渊 , 等. 转 化 生 长 因 子一 R 多 克 隆 抗 体 预防 腹 腔 枯 连的实验研究。 . 中国 普通外科杂志, 2 0 0 2 , 1 1 ( 1 2 ) : 7 4 1 - 7 4 5 ( 4 ) P h ill i p s R k s , D u d l e y . H A F . T h e E f f e

10、 c t o f T e rt i a c y D i n e L a v a g e a n d T r a u m a o n V i s c e r a l a n d P a r i e t a l O . P e r i t o n e d U l t a s t r u c t u r e a n d A d h e s i o n , B r J S u r g , 1 9 8 4 , 7 1 : 3 7 ( 5 陈志新. 腹腔粘连的形成及术后预防 J ) . 中国普外基础与临 床杂志, 2 0 0 3 , 1 0 ( 5 ) : 5 0 9 -5 1 0 ( 6 ) S c o

11、 t t C o o m b e r D , w h a w e ll S A , V i p o n d M N , e t a l . H u m a n i n - t r a p e r i t o n e a l f i b r in l y t i c r e s p o n s e t o s u r g e ry ( J ) . B r J S u r g , 1 9 9 5 , 8 2 ( 3 ) : 4 1 4 ( 7 李爱科, 魏凤玲, 等. 通腑、 活血中药防治术后肠粘连的实验 研究 J ) . 北京中医 药大学学报, 2 0 0 1 , 2 4 ( 5 ) : 2 3

12、 - - 2 5 ( 8 ) 陈木水 活血化癣法在钝性腹部损伤中的应用 J ) . 中西医结 合实用临床急救杂志, 1 9 9 6 , 3 ( 2 ) : 6 5 ( 9 徐洪雨, 胡玲. 四磨汤口服液在腹部外科术后的应用体会 ( J ) . 中国社区医 师, 2 0 0 2 , 1 8 ( 1 6 ) : 3 8 ( 1 的邹元宵, 陈子渊, 等. 四磨汤口服液对胃肠功能影响的实验 研究自 . 湖南中医药导报, 1 9 9 9 , 5 ( 9 ) : 3 6 - - 3 8 I D O P r e s c r i p t i o n o n e x p e r i me n t a l a

13、b d o mi n a l c a v i t y a d h e s i o n T G F一p mR N A e x p r e s s e s c o r r e c t l y o f s i d e A b s t r a c t : o d j e r t i t e : P ro b i n g i n t o a n d i n v i g o r a t i n g b lo o d c ir c u la t io n a n dt h e i n t e s t i n e s i n t e rn a l o r g a n s p r e s c r i p t i

14、o n ( I D O P r e - 2 2 3 8 a n d r e a c t ( a f o o t w o r k R T一 P C R) , g e t p i c t u r e n e t w o r k a n a l y s is T G F 一P m R N A e x p r e s s e s t h e s i t u a t i o n , t h e m e t h o d o f i n s p e c t i o n o f t h e p a r a m e t e r a n a l y s e s t h e a d h e s io n c h a

15、 n g e , o b s e r v e t h e i n fl u e n c e f u n c t io n o f t h e m e d i c i n e . R e s u l t s : 5 , T h e m e r e d e n s i ty r a t i o o f e v e ry g r o u p is i n 2 1 d a y s r e s p e c t iv e l y 0 . 0 2 6 , 0 . 7 7 , 0 . 1 5, 0 . 3 6 , 0 . 0 6 2 , 0 . 1 8 6 , 0 . 0 9 7 A 6 9 3 . I t

16、i s D B C A t h a t it e x p r e s s e s i n t e n s ity a n d d is p l a y s , v e ry o b v io u s t h a t g r o u p B r e d u c e s e x p e r i m e n t a l r a t T G F 一 P n R N A e x p r e s s e s f u n c t ion. 4 g ro u p s o f a b d o m i n a l c a v i ty s a d h e s i o n r e l a t iv e l y h

17、a v e a r e m a r k a b l e d if f e r en c e ( P 0 . 0 1 ) . C o n c l u s i o n : M a y 悦i n s t e a d o f s u p p r e s s i n g T G F 一 助R N A t o e x p r e s s a n d h a v e s o m e t h i n g t o d o w i t h t h a t a b d o m i n a l c a v i ty s a d h e s io n a c t s o n t o I D O P r e s c r

18、i p t i o n a f t e r p r e v e n t i n g a n d c u r i n g t h e r a t s s k i ll ; I D O P r e s c r i p t io n a n d c a n r e d u c e e x p e r i m e n t a l a b d o m i n a l c a v i t y a d h e s i o n T G F 一 伽R N A e x p r e s s c o m p e t e n c e , i n fl u e n ce t h e a d h e s io n d e

19、g re e . K e y w o r d : I D O P r e s c r i p t i o n ; A b d o m i n a l c a v i t y s a d h e s i o n ; T G F 一 际R N A 端 少 、 心 卜司卜G 护诏卜招卜4 乒司 护 .心1 , 心 卜d卜心 卜喇卜司卜诏卜司 p. 心卜 卜 峭护司尹叼夕ti口卜卜司卜司卜. a 卜司卜d卜喊户哨护d卜司,阅口、心卜心卜司卜诏 ( 上接第2 2 3 5 页) 评估分二个阶段进行。第一阶段: 自目 评估中值得注意的几个问题。 评。由评估对象对照评估指标进行自评, 要求评估对象重视自 评评

20、估实践中我们认为, 要提高中医药继 在举办项目 过程中, 根据评价指标和主要观察点进行逐续教育项目 培训质量, 主要应依靠项目主办单位自身的 项自我评分。同时根据评估要求, 组织学员进行评估, 最努力。中医药继续教育项目评估要达到预期的目的, 发 后算出自评总分。第二阶段: 复评。由行业管理部门组挥评估的诊断和改进功能, 必须重视被评对象的自评过 织专家进行复评。对评估对象的自 评结果进行复核, 指程。被评对象在项目 培训过程中, 可以对照评估指标, 规 出主要成绩和缺点。提出整改意见, 并进行评分。范约束培训过程。 5 中医药继续教育项目评估实践专家复评组织专家组复评是中医药继续教育项目 2 0 0 3 年下半年, 在浙江省中医药管理局的领导下,评估不可缺少的环节, 在自 评的基础上, 专家根据被评对 浙江省中医药继续教育中心组织专家对浙江省8 个中医象提供的资料进行复评与专家组进行实地同步评估, 对 药继续教育项目进行了评估。评估达到了预计的目的,评估效果起着至关重要影响。另一方面, 专家组的组成 取得了在探索、 完善评估方案、 监控项目培训质量、 督促必须有权威性, 责任心强, 处事公正, 努力做到规范化, 切 规范办班等多方面的收获。以下是在中医药继续教育项忌随意性。 中医药学刊 万方数据

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