卤虫卵质量的检验方法研究.pdf

《卤虫卵质量的检验方法研究.pdf》由会员分享，可在线阅读，更多相关《卤虫卵质量的检验方法研究.pdf（5页珍藏版）》请在三一文库上搜索。

1、口岸卫生控制第1 3 卷第6 期 卤虫卵质量的检验方法研究 刘友序天津出入境检验捡疫局( 天津，3 0 0 4 5 6 ) 接要螽虫努已缀普遍应臻雩水产养蘸监，其质量至关重要。该文结合实际戆盖译经验，余绍了一 套卤虫卵质量指标和检测方法。卤虫卵的质量包括孵化百分率、孵化效率、孵化速率、孵化量、孵化 时间、水分、杂质。 关键谲蠢虫蠢虫努孵纯裣潮穷法 中图分类号 R 一3 3文献标识码B l 前言 卤煦卵作为商品投入市场，国际上已有几十年 的历史。近年来中国卤虫卵的生产、收购、销售及加 工出曩，也在开展中。扶2 e 越纪3 0 年代，美国豹 S e a l e ( 1 9 3 3 年) 和挪威的R

2、 o l l e f s e n ( 1 9 3 9 年) 发现用 卤虫的无节幼体是鱼虾类幼体的最好饵料后，加之 近年来水产养殖的发震迅速，对赢虫努酌需求羹嚣 益加大。有关方面的调查资料表明，中国是卤虫资 源量较大的国家之一。国外对卤虫卵的商品市场已 基本上走主正轨，但中国对卤虫郛这一商品的生 产、供应与销售，目前还十分混乱。尤其一些投机分 子借可乘之机弄虚作假。此外，也有某些基层单位 懿工传入员，急功近剩，对逸盎穿不蹶资源的合理 开发，进行灭绝式的捕捞，严重的破坏了中国岗虫 自然资源的生态平衡，以致资源衰退，不利于资源 的合理嚣发，致使中国痞虫鞠酶商瑟质量逐霉下 降，得不到国际信誉。影响出口

3、创汇，给国家造成很 大的经济损失。 鉴予上述情况的严重恶果，必须引1 ：2 隽戒。为了 解决这一问题，该文参阅了国外的资料，结合中国的 具体情况，经过研究改进，提出一套卤虫卵质量指标 和检测方法。 此方法的思想依据是：考虑理论上的完善性；生 产经营中的实用性。 2 检验方法 根据国际上的惯例，卤煦卵质量包括以下三个 方面：孵化指标；水分；杂质f I l 。关于卤虫卵饵料营养 学的研究，虽然已经开始，并已发展虱耀当水平，但 一2 4 一 实骏研究 是还没有在生产经营中普遍应餍。根据孛箧的具体 情况，从三个方面入手，制定如下凡项质量指标：孵 化效率；孵化百分率；孵化时间；水分；重杂质；溶解 及懋浮

4、性杂质；轻杂质；孵纯量；孵化速率。 孵化效率是指每克卤虫卵样晶( 原料或加工产 品) 在一定的时间内能孵出多少个无节幼体。 孵化百分率是在一定的时闯睫，一百个有胚胎 的卵能孵出多少个无节幼体。 孵化时间是从开始孵化到孵化结束所经历的时 阕。孵化时闼禳重要，不露品系懿样品必须是在裰嗣 的时间进行质量比较才行。即2 4h 的孵化百分率与 4 8h 的孵化百分率无法进行比较( 进口卵孵化时间 一般为2 4h ，黧产饔一般采用4 8h ) 。 水分指湿基水分。 杂质部分根据操作方法，人为的化成三项，重杂 凌是指剩震院薰法分离，潮饱帮卤水漂洗将砂主、无 机杂质等沉下的部分。 溶解及悬浮性杂质指在操作过程

5、中，经过 1 5 0 2 0 0 磊尼龙筛绢，饱和岗永及淡水漂洗，用小筛 网滤出的部分，包括无机盐及悬浮的小颗粒杂质等。 轻杂质是指用比重分离法，以淡水漂洗上浮的 部分，包括空壳、草等。 孵化量是指1g 卵在特定时间内，能孵出多少克 于重的无节幼体( 指l 龄虫，即I n s t a r1 ) 。 孵化速率楚指从1 0 的无节幼俸孵出到9 0 的 无节幼体孵出之间的时间间隔；即：T s ( 孵化速率) = T 9 0 - T I O ，( T 9 0 是从开始孵化到9 0 的无节幼体孵 出的爵闯，T I O 类缎) 。 万方数据 第1 3 卷第6 期刘友序卤虫卵质量的检验方法研究 3 操作方法

6、及仪器物品 3 1 孵化指标 分析卵的孵化质量指标一般用一种专用装置。 将若干个小试管( 5m L - 1 0m L ) 装在一个可旋转的架 子上，旋转速度为5 转m i n 。在试管中放卤虫卵，加上 海水，留出0 5c l n lc m 的空隙，盖上试管口，然后 连续不断的旋转，使气泡水流不断上下运动，充分接 触水体。这样卵的孵化效果较好。孵化用水一般用天 然海水，但如果p H 值低于8 2 时，可以用碳酸氢钠调 节，碳酸氢钠的用量，每升海水加0 5g lg 左右，同 时起到缓冲p H 值的作用。也可以人工配置孵化液阁 ( 孵化条件可参考有关资料) 。 具体操作方法是，称取2 5 0m g

7、样品，放在1 0 0m L 量筒中，加入约8 0 m 旃水，装入气石充气，搅拌1h ，这 时卵已充分吸水膨胀。然后定容至1 0 0 m L ，用微量自动 吸液管取0 2 5m L ，放入小试管中，加入约5m L 海水，封 口后固定在旋转架上，进行孵化。一般每个样品需做 5 1 0 个平行样。 孵化结束，如2 4h 或4 8h 后，对每个小试管分 别计数，计算各项平均数。 计数方法是用内径8c m 左右的聚氯乙烯塑料 管或其他材料截成高为1c n l 左右的小圆环，用9 1 4 粘合剂，把2 0 0 目以上的尼龙筛绢与小圆环底部黏 合上，做成小筛子。把小试管中的孵化液全部倒在小 筛子上，经几次冲

8、洗后，小试管中管壁及试管塞上的 卵全部转移到小筛子上。另外，由于液体虑出去了， 所以无节幼体无法游动，便于在显微镜下计数。这样 就解决了卵及无节幼体计数的困难。下一步，用一个 比小筛子略大一些的培养I ，培养皿上打上格，把小 筛子放在培养皿中，在显微镜下( 低倍镜，宽视野) ， 用血球计数器一个格一个格的计算无节幼体数，算 出平均数，计算孵化效率。 计算公式： 孵化效率= 每个小试管中无节幼体的平均数 4X4 1 0 0 然后，用次氯酸钠去壳处理，方法是用一个培养 皿，加入一些浓次氯酸钠试剂，加上一点自来水，把 小筛子放在培养皿中，几分钟后就能去掉小筛子上 样品的残壳，空壳和未孵化的卵壳，再对

9、未孵化的卵 胚数和伞状幼( 卵胚发育到无节幼体的过渡状态) 。 分别算出平均值，计算百分率。 计算公式： 孵化百分率= 已孵出的幼体数，( 幼体数+ 伞状 幼+ 未孵化的卯胚数) 进行孵化速率的测定，具体操作如前，从孵化开 始后，每隔一定的时间取出5 个小试管测定孵化百 分率，得到时间与孵化百分率的关系，以时间为横坐 标，孵化百分率为纵坐标画图得到孵化曲线，结果详 见图1 。 1 0 0 零8 0 爨6 0 娶4 0 婪2 0 O 1 0 0 零8 0 篓6 0 皿4 0 薹2 0 0 ( 孵化时阳】：h ) 图B 图1卤虫卵的孵化曲线图 图A 是从巴西M a c a u 盐场采集的不同批号的

10、卤虫卵的 孵化曲线。 图B 是从美国加利福尼亚州旧金湾采集的卵样。三条曲 线代表三个批号。 f 此图摘自M a n u a lf o rt h ec u l t u r ea n du s eo fb n n e s h r i m pa d e m i ai na q u a c u l t u r e 比利时卤虫参考中心编写) 但是有些卵的孵化百分率达不到9 0 ，测定其 孵化速率也同样是作出孵化曲线只是T s _ T x T 。( T x 代表孵化百分率达到最高时的时间) 。 孵化速率反映了卵的孵化同步程度。在应用上， 应尽量获得较多的一龄虫，因为一龄虫营养价值高。 如果不同步，先孵出的

11、已变成二龄虫，有些还没有孵 化，这样降低了卤虫无节幼体的饵料营养价值。T s 越 小，越同步，T s 越大质量越差f 3 J 。 孵化量或叫孵化产出，一般通过计算得到。 计算公式： 孵化量= 孵化效率n ( n 为某一品系的单个卤 虫无节幼体( 一龄虫) 的干重量的统计均值) 。 孵化效率也可以通过孵化百分率和好卵率计算 2 5 万方数据 口岸卫生控制第1 3 卷第6 期 得到。 计算公式： 孵化效率= 好卵率孵化百分率x i n 1 0 4 ( m 为菜一品系的卤虫卵每克千卵的个数的统 计均值，单位：万个克干卵) 对于m 与r l 两个品系特性参数，严格地说应该 通过实验得到。另外，如果产地

12、相同，但批号不同的 卤虫卵，m 与n 两个参数也存在微小的差别，而产地 不同，即不同品系的囊虫卵，m 与1 1 蠢时会有较大酶 差别。 考虑到卤虫卵的直径应近似分别与m 和n 两个 参数墼线性关系。 不同品系的商虫卵的赢径( 吸水膨胀后) 圜外已 经检测过( 见表1 ) ，m 与n 两个参数也已经检测过分 剐绘出卤虫卵直径( 吸承膨胀后) ，与秃节幼体酶个 体干熏r l 和每克干卵含有的卵数m 之间的关系曲线 ( 见图2 ) 。对m 和n 未知的品系在生产经营中为了 检验静的孵化攒掭，可以经过海水浸泡后测辩麓壹 径，从图2 中近似地查到m 与n ，然后利用公式计 算。这个经验方法，经过作者的实

13、践，证明，在实际工 作中| ：较方便。 表1 荫斑卵直径 暇水膨胀后) 与无节幼体裔臼个体干重n ( o _ - ) 1 龄_ 搬) 和每克干卵含有的卵数m ( 万个成平卵J 之间的关系 3 2 温基水分 湿基水分可以用水分测定仪或用烘箱干燥至恒 重称璧，干燥温度为6 0 ，一般称量时用精度百分 之一，或千分之一酌天平称5g 左右。 计算公式： 水分量= 样晶重量一样品于重量 瀑基水分百分数= 水分量，样品重量 一2 6 一 ，_ 、 舔 玲 积 0 恢 2 0 02 l O2 2 02 3 02 4 02 5 02 6 02 7 02 8 02 9 0 蠢虫卵直径( n m ) 疆2 卤擞翔

14、誊径 鞍零膨胀磊。鸯笼节妨体酶个体干董 n 1 1 龄虫) 和每克干卵含商的卵数m 之间的关系的经验曲线 3 3 杂质 愚精发百分之一或千分之一酶天平称5g l Og ， 用10 0 0m L 翻3 “ 液漏斗漂洗，方法是比重分离法。 具体操作是把卤姬卵样品放入分液漏斗中，加 入瓷秘蠢承浸泡3 0r a i n lh ，然瑟漂洗，搅拌或摇动， 然后静置，重杂质( 比重大于饱和卤水) 沉到底部，卤 虫卵、空壳及草等( 比熏小于饱和卤水) 漂在表面，用 1 5 0 - 2 0 0 謦小筛子牧集重杂质，( 小筛子的裁作方法 如前) 一般每个样品需要重复漂洗3 5 次。然后用自 来水冲掉小筛子收集的重

15、杂质上吸附的饱和卤水。 第二多用自来本漂洗有胚胎翡穿沉到分滚漏斗 底部，轻杂质( 包括空壳、草等比煎小于自来水) 浮在 表面，用小筛子分别收集卵和轻杂质，用自来水再冲 洗一下夺筛子。一般每个样品需要用自来水反复漂洗 5 次以上。溶解及悬浮性杂质( 指无机盐及其他微小颗 粒) 都被小筛子过滤除去了，必须通过计算得到。 重杂质，轻杂质和有胚胎的卵经过于燥至恒重 ( 温度6 0 ) 用天平称量得到具体数字。 计算公式： 溶解及慧浮性杂质= 样品重襞一重杂质一轻杂 质一水分量一卵干重 总杂质= 重杂质+ 溶解及悬浮性杂质+ 轻杂质 总杂质百分数= 总杂质量，样品量 好卵率= 卵干重样品量 湿基水分吾分

16、数+ 总杂质百分数+ 好卵率= 1 0 0 以上描述了九个嫒量指标的检验方法和所用的 勰卯弘格麓努记”粥瓣勰舸拍笛麓筋丝甜哼疆“ 万方数据 第1 3 卷第6 期 刘友序卤虫卵质量的柃验方法研究 仪器物品，这个方法操作并不难，从理论上讲也是比 较严谨的。但是，在生产经营中笔者总希望检验操作 越简单越快越好。所以，把上述方法简化成如下的操 作方法。 4 简化方法 4 1 质量指标 简化方法的指标：孵化百分率；湿基水分；好卵 率；孵化时间。其他质量指标可以通过计算得到。 4 2 操作方法 从上述孵化百分率的操作方法中可以看出，孵 化百分率的测定，与每个小试管中加入的卤虫卵个 数无关，它只是一个相对百

17、分数，所以操作可简化如 下：用小勺取一点点肉虫卵，放人5 0 m l A 烧杯中，加 上海水，用吸管吸一些加入小试管中，观察吸管中的 卵个数，为了便于计数( 太多了计数困难) ，通过估计 使每个小试管中卵的个数控制在1 0 0 个左右( 个数 差别大没有关系) ，其他操作如前。 湿基水分的操作方法不变。 测定好卵率用分液漏斗( 但最好自己制作类似 的装置，用有机玻璃或其它透明材料均可，上口开大 一些，便于搅拌，加样和加卤水，自来水等，排料口也 应大一些，便于排放。可以买特制的小金属阀或塑料 阀等) 。操作方法如前，只是仅仅收集有胚胎的卵，用 自来水再冲洗一下小筛子上的好卵，然后放烘箱中 干燥至

18、恒重( 6 0o C ) ，称量并计算好卵率。 4 3 其他指标的计算方法 计算公式： 孵化效率= 好卵率孵化百分率X i n X1 0 “ ( m 为某一品系的卤虫卵每克干卵的个数的统 计均值，单位为万个，克干卵) ， 孵化量= 孵化效率n 总杂质百分数= 1 0 0 - 湿基水分百分数一好卵率 以上描述了简化方法的操作和计算，从测定孵 化速率的方法中可以看出，利用简化方法，同样也可 以做到并画出孵化曲线。 5 方法准确性可靠性的实验证明 此方法在科研和生产经营中经一年多的实践， 并检验了几百个样品，确认方法较准确，可靠，也较 实用。 实验证明： 实验1 孵化指标测定结果的重现性 用山西运城

19、盐湖的卤虫卵。共使用了两个批号 的样品，分别为A 和B 。测定孵化效率和孵化百分 率。每个批号的样品分别做两次，每次做五个平行样 ( 5 个小试管) ，结果两次差别很小，结果详见表2 。 实验2 湿基水分和杂质测定结果的重现性 用陕西省定边县盐湖的卤虫卵测定，分别做三 个平行样，结果很相近，结果详见表3 、4 。 以上实验表明，使用此方法结果重现性好。对于 孵化指标的检验，最好多做些平行样，例如做1 0 个 平行样，结果更准确，水分和杂质一般做l 2 个平行 样就可以了。 表2 ，孵化时间为4 8h ，5 个试管分别计数后，计 算平均值，然后再取同一个样品做第二次，比较两次 的结果。 注意通过

20、计算消除称量误差。 计算公式： 孵化效率= 每个小试管中的无节幼体的平均 表2山西运城的两批样品A 和B 的孵化效率和百分率 一2 7 万方数据 口岸卫生控制 第1 3 卷第6 期 表35 样品中卤虫卵的杂质和好卵率 表45 样品的湿基水分比较结果 数4 4 1 0 0 2 5 0 1 称样量( m g ) 6 讨论 该文所介绍的方法，是在实践中，参考国外的方 法，经过笔者的修改补充形成的，文内提出的九个质 量指标均相互有关，但又是互不可缺的。 在应用上，卤虫卵原料的孵化效率可以近似地 反映出孵化生产能力，因为杂质和水分都降低原料 的孵化效率。假如收购是为了进一步加工生产更纯 净的产品，那么必

21、须考虑成本核算及物料衡算。即多 少公斤原料能生产1 公斤加工产品、杂质和水分的 含量应满足加工产品的质量要求，所以总杂质和水 分必须知道。孵化百分率是有胚胎的卵的质量好坏 的反映，同时也是加工产品质量高低，售价多少的参 考指标。孵化速率是卵在水产养殖中应用时，从营养 学考虑质量好坏的指标。另外，如果T s 越小，孵化操 作越方便。由于不同品系的无节幼体大小不一样，因 此只从无节幼体的个数上看还不能反映其孵化产 出，所以，又引入一个孵化量的概念。所以，上述指标 从理论上到实用上都是必要的。 根据笔者的经验，在实际检验过程中应注意以 下几个方面： 测孵化效率时，使用的微量自动移液管应选择精 度高一

22、些的，吸管头开口应稍大一些，另外取样时，必 须充气，使卵在1 0 0m L 量筒中均匀混合，否则易产生 误差。或者使用简化方法，然后计算孵化效率。 用天平称量时应注意天平的精度与样品量的关 系，应尽量多取几位有效数字。 无论是测水分，测杂质还是测好卵量，在烘箱中 干燥至恒重时，应注意上下翻动，否则由于6 0 温 度不是太高，表面一层干燥了，底层还有水分，不容 易除去。 注解外国人名、地区名称不翻译，便于查阅。 参考资料 【1 】比利时国际卤虫参考中心M a n u a lf o rt h ec u l t u r ea n dU S eo f b r i n es h r i m pa r t

23、 e m i ai na q u a c u l t u r e 【2 1 刘友序，张富生陈自强，等盐田生物技术在国内外的开发 和应用轻工业部制盐丁业科学研究所项目报告 【3 】蔡亚能第一期全国卤虫学习班资料汇编山东海洋学院生 物系 I n v e s t i g a t i o no nm e t h o d s o ft h eq u a l i t yt e s to fA r t e m i a c y s t s L i uY o u x n T i a n j i ne n t r y e x i ti n s p e c t i o na n dq u a r a n t i n

24、 eb u r e a uo ft h eP R C h i n a ( T i a n j i n ，3 0 0 4 5 6 ) A b s t r a c tT h eq u a l i t yo fA r t e m i ac y s t si sm o s ti m p o r t a n ti na q u i c u h u r e T h et e s tm e t h o d so fA r t e m i ac y s t sa n d q u a l i t y i n d e xa r ei n t r o d u c e di n t h i s p a p e rw

25、i t ha c t u a le x p e r i e n c e s T h eq u a l i t yi n d e xc o m p r i s e sh a t c h i n g p e r c e n t a g e ，h a t c h i n ge f f i c i e n c y ，h a t c h i n gr a t e ，h a t c h i n go u t p u t ，h a t c h i n gt i m e ，m o i s t u r e ，i m p u r i t y K e yw o r d s A r t e m i aA r t e m i ac y s t sh a t c h i n gt e s t 收稿日期2 0 0 8 0 9 2 2 2 8 万方数据