牛膝多糖对抗原诱导的肥大细胞活化的影响.pdf

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1、1 3 0 2 中国药理学通报C h i n e s eP h a r m a c o l o g i c a lB u l l e t i n 2 0 0 8O c t ；2 4 ( 1 0 ) ：1 3 0 2 5 牛膝多糖对抗原诱导的肥大细胞活化的影响 黄丰1 ，童晓云2 ，张荣华1 ，蔡宇1 ( 1 暨南大学药学院，广东广州5 1 0 6 3 2 ；2 广州中医药大学第一附属医院，广东广州5 1 0 6 3 2 ) 中国图书分类号：R 一3 3 2 ；R2 8 4 1 ；R3 2 9 2 4 ；R3 9 2 1 2 ； R 5 9 3 1 0 5 3 1 ；R9 7 6 文献标识码：A

2、 文章编号：1 0 0 1 1 9 7 8 ( 2 0 0 8 ) 1 0 1 3 0 2 0 4 摘要：目的观察牛膝多糖( a c h y r a n t h e sb i d e n t a t ap o l y s a e e h a r i d e s ，A B P S ) 对肥大细胞活化脱颗粒的影响。方法运用大 鼠被动皮肤过敏反应( P C A ) 实验，用比色测定法检测A B P S 在体内对肥大细胞( M C ) 影响；体外实验将A B P S 分为高、 中、低3 个剂量组，然后分别将其加入抗原致敏的R B L - 2 H 3 细胞中( 大鼠嗜碱性粒细胞白血病细胞，国际公认的M

3、C 研 究模型细胞) ，观察A B P S 对R B L - 2 H 3 细胞脱颗粒的影响。 结果A B P S 能明显抑制大鼠P C A 、R B L 2 H 3 细胞脱颗粒。 并能抑制R B I 一2 H 3 细胞释放组胺、肿瘤坏死因子仪及白细 胞介素4 ；抑制R B L 2 H 3 细胞中A k t 和p 3 8 的磷酸化。结论 A B P S 的抗过敏作用与抑制肥大细胞的脱颗粒及炎性物质 释放有关；A B P S 抑制肥大细胞的活化与抑制A k t 和p 3 8 的 活性相关。 关键词：牛膝多糖；被动皮肤过敏反应；肥大细胞；脱颗粒 肥大细胞( m a s tc e l l ，M C )

4、 是I 型变态反应速发 相的主要靶细胞，M C 可被多种因素包括过敏原、超 氧化物、补体蛋白、神经肽及脂蛋白激活并脱颗粒。 M C 膜表面表达I g E 高亲和力受体，可被受体依赖性 和非依赖性刺激剂活化。M C 活化后可产生和释放 多种参与变态反应的炎性介质，这些介质影响内皮 细胞、上皮细胞、神经、平滑肌细胞等，从而引起多种 症状和综合征。有报道指出牛膝多糖( a c h y r a n t h e sb i d e n t a t ap o l y s a c c h a r i d e s ，AB P S ) 能减少哮喘大 收稿日期：2 0 0 8 0 2 1 3 ，修回日期：2 0 0

5、 8 0 6 1 3 基金项目：暨南大学引进优秀人才科研启动基金资助项目( N o 2 0 0 3 0 1 ) 作者简介：黄丰( 1 9 7 1 一) ，男，博士，副研究员，硕士生导师，研究 方向：中药药理学，通讯作者，T e l F a x ：0 2 0 3 3 0 91 7 6 7 ，E m a i l ：h f t x y y y a h o o e o l u c n 鼠气道M C 的数量并抑制M C 脱颗粒旧J ，但牛膝多 糖抑制M C 脱颗粒的具体机制尚未阐明，故本实验 以R B L - 2 H 3 为主要研究对象，探讨A B P S 对M C 功 能的影响，并初步阐明其作用的分子

6、机制。 1 材料与方法 1 1 材料 1 1 1 实验动物健康W i s t a r 大鼠，辛6 各半，体 重( 2 0 0 2 0 ) g ，购自广州中医药大学实验动物中 心，动物质量合格证：0 0 1 4 9 3 8 。 1 1 2 细胞大鼠嗜碱性粒细胞白血病细胞R B L - 2 H 3 ，购自中国科学院典型培养物保藏委员会细胞 库。常规培养条件为：D M E M 培养液( 胎牛血清 1 0 ) ，3 7 ，5 C 0 2 。 1 。1 3 主要试剂A B P S 购自泰安中荟植物生化有 限公司，纯度9 5 ( 批号：9 7 0 5 0 7 ) ；M T T ( 批号： M 5 6 5

7、5 ) 、a n t i D N PI g E 单克隆抗体( 克隆号：S P E 一 7 ) 、二硝基苯基化人血清白蛋白( D N P H S A ，批号： A 6 6 6 1 ) 、氮卓斯汀( 批号：Y 0 0 0 3 2 7 ) 、组胺检测试剂 盒( 批号：R E 一5 9 2 2 1 ) 购自S i g m a 公司；肿瘤坏死因 子O t ( T N F d ，批号：2 0 0 1 0 7 3 2 ) 、白细胞介素4 ( I L 一4 ， 批号：2 0 0 7 1 1 3 2 6 ) 检测试剂盒购自武汉博士德；A n t i A k t ( 批号：9 2 7 2 ) 、a n t i p

8、 h o s p h o A k t ( S e r 4 7 3 ，批号： 9 2 7 1 ) 、a n t i p 3 8M A P K ( 批号：9 2 1 2 ) 及a n t i p h o s p h o p 3 8M A P K ( T h r l 8 0 T y r l 8 2 ，批号：9 2 1 1 ) ，购自C e l l S i g n a l i n gT e c h n o l o g y ；蛋白裂解液( 批号： 2 0 0 7 0 2 3 1 A ) ，闪晶分子生物科技有限公司； L Y 2 9 4 0 0 2 ( 批号：4 4 0 2 0 2 ) 、S B 2 0

9、3 5 8 0 ( 批号：5 5 9 3 8 9 ) 购自C a l b i o c h e m 。 1 1 4 主要仪器台式高速冷冻离心机为德国 S i g m a 公司生产，3 - 1 8 K 3 K 3 0 型；G e l D o c1 0 0 0 成像 定量分析仪、M i n i T r a n s B l o t 、伯乐6 8 0 一酶标仪均为 美国B i o R a d 生产。 a c t i v i t yc o m p a r e dw i t ht h eM P P + 一t r e a t e dc e l l sa tt h e s a m et i m ep o i n

10、 t M o r e o v e r ，p r e t r e a t m e n tw i t hv e r b a s c o s i d ep r o m o t e dt h ee x p r e s s i o no fB c l - 2 C o n c l u s i o n s v e r b a s c o s i d eh a dt h en e u r o p r o t e c t i v ec a p a c i t yt oa n t a g - o n i z eM P P + i n d u c e da p o p t o s i si nS H S Y 5Ye

11、 e H s ，a n d m i g h tb eu s e f u li nt r e a t i n gP a r k i n s o nd i s e a s e K e yw o r d s ：v e r b a s c o s i d e ；a p o p t o s i s ；h y d r o g e np e r o x i d e ；S H S Y 5 Yc e B s ；m i t o c h o n d t i a lm e m b r a n ep o t e n t i a l ； r e a c t i v e o x y g e ns p e c i e s ；

12、c y s t e i n e r e q u i t i n ga s p a r t a t e p r o t e a s e3 万方数据 中国药理学通报C h i n e s eP h a r m a c o l o g i c a lB u l l e t i n2 0 0 8O c t ；2 4 ( 1 0 ) 1 3 0 3 1 2 方法 1 2 1 被动皮肤过敏反应( P C A ) 实验1将W i s t 1 i t 大鼠随机分为6 组，包括正常对照组、模型组( 予 生理盐水) 、A B P S 高剂量组( 9 0m g k g 叫) 、A B P S 中剂量组( 3 0m

13、g k g 。1 ) 、A 1 3 P S 低剂量组( 1 0m g k g 一) 及阳性药物对照组( 氮卓斯汀l O m g k g 。1 ) ， 每组8 只大鼠。 1 2 1 1 模型组、A B P S 高、中、低剂量组及阳性药 物对照组用灌胃方式给药，连续7d ，每天1 次； d8 将各组大鼠用乙醚麻醉，在背中线两侧距脊柱 1 5C I T I 处把毛剪光，每侧剪2 点( 从脊柱1 5c m 处 开始，向腹部尽量将毛剪光，至少3e mx3c m 以 上) ，每点间隔1 5 2c m ，然后于各剪毛处注射 l O I x ga n t i D N PI g E ，4 8h 后，进行抗原攻击

14、，分别予 各大鼠尾静脉注射2 0 0I L gD N P H S A 、伊文思蓝 昆合 液( 1 D N P H S A 与1 伊文思蓝等体积混合) ；3 0 r a i n 后，断头处死动物，翻转背部皮肤，剪下蓝斑皮 肤、剪碎，置于5m l 丙酮一生理盐水( 7 ：3 ) 的带塞离 心管中，充分摇匀，浸泡4 8h ，去上清液，于6 1 0r i m 测定光密度。 1 2 1 2 正常对照组不给药，注射a n t i D N P I g E ，不进行抗原攻击( 不予1 D N P H S A ，给予l 伊文思蓝) 其余同给药组。 1 2 2 A B P S 对B - 氨基已糖苷酶、组胺、T N

15、 F 一0 【及 I L 一4 等生成的影响t 4 1实验分为6 组，包括正常 对照组、模型组、A B P S 高剂量组( 2 0g L 。) 、中剂 量组( 1 0g L 1 ) 、低剂量组( 0 5g L “) 及阳性 药物对照组( 氮卓斯汀，0 0 3g L 叫) ；1 3 一氨基已糖 苷酶为肥大细胞脱颗粒反应的间接替代指标，3 ，4J 。 1 2 2 1 模型组、A B P S 高、中、低剂量组及阳性药 物对照组在R B L - 2 H 3 细胞( 5X1 0 L “) 中加入 a n t i D N PI g E ( 2 0 0 斗g L “) 致敏，培养过夜，换洗新 鲜培养液后，分

16、别加入A B P S 高、中、低剂量组”1 ，以 0 0 3g L 一氮卓斯汀作为阳性对照，作用6 0r a i n ， 洗净，然后各组分别加入D N P H S A ( 2 0 斗g L “) ， 孵育3 0 一6 0m i n ( B 一氨基已糖苷酶、组胺3 0m i n ； T N F 一仅、I L 46 0r a i n ) ，取适量细胞上清分别用于测 定上述指标。 1 2 2 2 正常对照组以等量体积的D M E M 细胞 培养液代替a n t i D N PI g E ( 不致敏) ，不给药，其余处 理同给药组。 1 2 3M T T 测定1 A B P S 对R B L 2 H

17、3 细胞活性的 影响在R B L - 2 H 3 细胞( 5X1 0 9 L “) 中加入a n t i - D N Pl g E ( 2 0 0 斗g L 。) 致敏，培养过夜，换洗新鲜培 养液后，分别加入A B P S 高( 2 0g L 。1 ) 、中( 1 0g L 。1 ) 、低剂量组( 0 5g L 一) ，作用6 0r a i n ，洗净， 然后各组分别加入D N P H S A ( 2 0 “g L 。) ，孵育 6 0m i n ，洗净，换为新鲜的D M E N 培养液( 胎牛血清 1 0 ) ，培养4h ，加入M T r ，置于3 7 、5 C 0 2 条 件下4h 。取出

18、、吸取上清液，加入D I V I S O0 2m l 孔，混匀3 0m i n 后在酶联检测仪上5 7 0n m 波长测 A 踟。值，以A 铷。间接反映存活细胞数量。 1 2 4 蛋白印迹1在R B L - 2 H 3 细胞( 5 1 0 L 1 ) 中加入a n t i D N PI g E ( 2 0 0I x g L 。1 ) 致敏，培养 过夜，换洗新鲜培养液后，分别加入A B P S ，以 L Y 2 9 4 0 0 2 ( 1 5m g L 。1 ) 及S B 2 0 3 5 8 0 ( 1 0m g L 。) 分别作为阳性对照( L Y 2 9 4 0 0 2 为A k t 阳性对

19、 照，S B 2 0 3 5 8 0 为p 3 8 阳性对照) ，作用2 0r a i n ，洗净， 然后各组分别加入D N P H S A ( 2 0 I 山g L 。) ，去上 清，加入细胞裂解液，置于冰上作用2 0r a i n ，1 00 0 0 x g ，1 0o C ，离心1 0r a i n ，取1 5 1 J , l ( 8 0 斗g 总蛋白) 上 清液电泳( S D S P A G E ) 、转膜，分别加入A k t 及p 3 8 的一抗和二抗，并显影、定影。 1 3 统计学分析试验数据应用S P S S1 1 0 进行 处理，各组间比较采用单因素方差分析。 2 结果 2 1

20、 A B P S 对大鼠被动皮肤过敏反应( P C A ) 的影 响通过比色反应，由T a bl 可知，A B P S 可明显减 少染料的渗出，高( 9 0m g k g 叫) 、中( 3 0m g k g 一) 剂量组的吸光度值与模型对照组比较，差异 具有统计学意义( 尸 0 0 5 ) 。 T a b1E f f e c to fA B P S0 1 1P C Ao fr a t s ( x s ，l = 8 ) 2 2 A B P S 对肥大细胞脱颗粒及组胺、T N F Q 和 几4 等生成的影响T a b2 结果提示，A B P S 各剂量 组均能抑制抗原诱导的R B L - 2 H

21、3 细胞脱颗粒( B 一氨 基已糖苷酶为肥大细胞脱颗粒的经典替代指标) ， 差异均有显著性( P 0 ，0 5 ) ；T a b3 结果提示，A B P S 高( 2 0m g L 一) 、中( 1 0m g L 。1 ) 剂量组可抑制 抗原诱导的R B L - 2 H 3 细胞释放组胺、I L 4 及T N F 一 仅，差异具有统计学意义( P 0 0 5 ) 。 万方数据 中国药理学通报C h i n e s eP h a r m a c o l o g i c a lB u l l e t i n 2 0 0 8O c t ；2 4 ( 1 0 ) T a b2E f l e e to

22、fA B P So nt h er e l e a s eo f d e g r a n u l a t i o nf r o mR B L 1 - 1 3c e l l s ( z 5 。n = 5 ) T a b3E 黝o fA B P SO I ! t h er e l e a s eo fh i s t a m i n e 、I L - 4a n d T N F - 瑾f r o mR I B L - 2 l Bc e i I s ( x s n = 3 ) D o s eH i s t a m i n eI L 4T N F n G I O U D g ：垦：!噬：垦：! g ：坠：

23、 ! g ：生：! N o r l I l a l 0 1 4 2 2 1 1 1 44 - 2 31 2 54 - 3 1 C o n t r o l02 3 8 54 - 3 0 21 5 5 64 - 1 9 44 3 0 6 3 5 4 A m l a s t i n e0 0 3 7 7 5 8 2 5 8 9 8 2 + 1 8 2 5 2 0 1 A B P S ( H )2 O1 3 2 6 1 4 5 + 8 6 44 - 1 2 6 + 2 5 6 74 - 3 1 ，6 A B P S ( M ) 1 0 1 9 6 24 - 2 5 8 + 1 2 2 34 - 1 0

24、 1 + 3 4 4 84 - 4 1 5 A B I ) s ( L ) 0 52 4 1 9 2 3 41 6 2 8 9 24 1 9 8 5 2 8 2 3M T T 结果 从T a b4 可知，上述实验所用 A B P S 浓度对R B L - 2 H 3 细胞活性几乎无影响。 T a b4E f f e c to fA B P So nt h eR B L - 2 H 3c e l lv i a b i l i t y ( z 3 ，n = 5 ) G r o u pI ) o s e g L “ A 锄( 0 1 ) ) N o r m a l00 8 2 0 3 C o n t

25、 r o l00 8 34 - 0 2 A z e l a s t i n e0 0 30 7 8 0 1 A B P S ( H ) 2 00 8 24 - 0 2 A B P S ( M ) 1 0 0 7 94 - O 3 ABPS(L05 0 8 0 0 2 2 4 A B P S 对A k t 和p 3 8 磷酸化的影响F i g1 、2 结果显示，A B P S 可抑制D N P H S A 诱导的A k t 和 p 3 8 的蛋白磷酸化。 3 讨论 M C 是I 型变态反应速发相的主要靶细胞，也 是I 型变态反应性炎症的主要启动细胞，在哮喘等 与I 型变态反应密切相关的疾病占有重

26、要作用。如 F i g1 E f f e c to fA B P So np h o s p h o r y l a t i o no fA k ti nR B L 2 I Dc e l l s F i g2E f f e c to fA B P So np h o s p h o r y l a t i o no f p 3 sM A P Ki nR B L - 2 H 3c e l l s 研究显示：哮喘大鼠气道壁M C 明显增多。研究还 发现：M C 膜表面表达I g E 高亲和力受体F c a R I ，被 受体活化后会脱颗粒，同时释放包括组胺、I L 4 在内 的多种参与变态反应的炎

27、性介质，这些介质人类过 敏性哮喘速发相反应和迟发相反应中均发挥重要作 用【8 一引，因此如何有效地抑制M C 脱颗粒就成为抗 I 型变态反应药物研发的重点。 A B P S 是从中药牛膝中提取的一种多糖化合 物，具有免疫调节作用，如李昌崇等【1 1 J 报道A B P S 有抑制哮喘大鼠气道嗜酸性粒细胞( E O S ) 性炎症的 作用，并能通过抑制S T A T 一6 的活性抑制I L 4 的合 成；张海燕等I 引报道A B P S 在体内可抑制M C 脱颗 粒，但未报道A B P S 能否抑制M C 释放组胺、T N F 仅 及I L 4 等重要炎性因子，也未对其作用的机制进行 进一步的研

28、究。我们的结果显示A B P S 在体内、体 外均可抑制M C 脱颗粒，同时，A B P S 在体外还能抑 制M C 分泌组胺、I L 4 及T N F 一0 【等与I 型变态反应 相关的因子，这可能是A B P S 对抗I 型变态反应的 重要机制之一。 研究表明，在M CF c s R I 主导的信号通路中， A k t 的活化与M C 脱颗粒及分泌T N F 仅、I L 4 密切相 关，而p 3 8 则与包括l L 4 在内的多种细胞因子的分 泌相关| 1 “。T N F 一仅是重要的炎性因子，在哮喘的病 理变化中具有多重作用，如它可激活T 细胞分泌多 种炎性细胞因子，并可趋化嗜酸粒细胞释

29、放白三烯、 血小板活化因子、前列腺素等炎性介质，从而加重哮 喘的反应；M C 产生的T h 2 细胞因子I L 4 在变应原 诱导的变态反应中能有效地激活B 细胞分泌I g E ， 而血清中总I g E 水平和特异性I g E 水平的增高是引 起哮喘发病的关键环节之一。I L 4 还可激活T 细胞 产生更多的I L 4 ，进一步促进炎症反应。F i g1 、2 的 结果表明，A B P S 可能通过抑制A k t 的磷酸化，一定 程度地抑制了R B L - 2 H 3 细胞的脱颗粒。此外，与对 照组相比，A B P S 能明显减少R B L - 2 H 3 细胞分泌I L 4 的分泌，这可能与

30、其抑制p 3 8 及A k t 的活化有关； 万方数据 中国药理学通报C h i n e s eP h a r m a c o l o g i c a lB u l l e t i n 2 0 0 8O c t ；2 4 ( 1 0 )1 3 0 5 此外，有报道指出，虽然p 3 8 与多种细胞因子的分泌 相关，但在M C 的活化过程中，p 3 8 的磷酸化可能与 ，I N F 一仅的生成无关。例。因此，A B P S 可能通过抑制 R B L - 2 H 3 细胞中A k t 的磷酸化，从而抑制其T N F 仅 的生成。 参考文献： 1 M a r c h a n dF ，M e c h e

31、 r iS G u i l l o mL 。e ta 1 H u m a n8 e 咖I r E m e d i a t e dm a s tc e l ld e g r a n u l a t i o ns h o w sp o o rc o r r e l a t i o nt oa l l e r g e n s p e c i f i cl e Ec o n t e n t J 1 A l l e r g y ，2 0 0 3 ，5 8 ( 1 0 ) ：1 0 3 7 - 4 3 2 张海燕，方军，胡小光，等牛膝多糖对幼年哮喘大鼠气道壁 嗜酸性粒细胞和肥大细胞的影响 J 中国药理学通

32、报， 2 0 0 6 ，2 2 ( 6 ) ：7 3 5 8 2 Z l m n gHY ，F a n gJ ，H uXG ，e ta 1 E f f e c t so f a c h y r a n t h e sb i d e n t - a l ap o l y s a c c h a r i d c so ne o s i n o p h i la n dm a s tc e l l si na i r w a yo fy o u n g a s t h m a t i cr a t s J m 讥P h a r m a c o lB u l l ，2 0 0 6 ，2 2 ( 6 )

33、 ：7 3 5 8 3 S h i nY W ，B a e E A ，C a i x F ，e ta 1 I n v i t r o a n d 伽v v o a n t i a l l e r - g i ce f f e c to ft h ef r u c t u so fe v o d i ar u t a e c a r p aa n di t sc o n s t i t u e n t s J B i o lP h a r mB u f f ，2 0 0 7 ，3 0 ( 1 ) ：1 9 7 9 4 】K i mSH ，K i mSA ，P a r kMK ，e ta 1 P

34、a e o n o li n h i b i t sa n a p h y l a e t i cr e a c t i o nb yr e g u l a t i n gh i s t a m i n ea n dT N F a l p h a J I n tl m m u n o p h a r m a c o l ，2 0 0 4 ，4 ( 2 ) ：2 7 9 8 7 5 王宇学，宁勇，曹淑彦牛膝多糖诱导单核细胞H L A D R a m R N A 表达的实验研究 J 湖北中医学院学报，2 0 0 5 ，7 ( 1 ) ： 3 9 4 1 5 W a n gYx ，N i n gY

35、，C a oSY E x I ，e m 圯n t a lm s e a r c ho fm o n o c y t e s t i m u l a t e db ya c h y r a n t h e sb i o l e n a t a t ap o l y s a e c h a r i d e st h a tl e a dt o e x p r s i o n 矗H L A D R am R N A J JH u b e iC o i lT C M ，2 0 0 5 ，7 ( 1 ) ：3 9 4 1 6 江凤林，冯俊，郑智丹参酮A 对A n g 诱导的心肌肥 大中c 一、c m y

36、 c 和c - j u n m R N A 表达的影响 J 中国药理学 通报，2 0 0 7 ，2 3 ( 1 ) ：5 5 9 6 J i a n gFL ，F e n gJ ，Z h e n gZ E f f e c to ft a a s h i n o n eI Io nt h em R - N Ae x p r e s s i o no fc 一、c m y ca n de - j u ni na n g i o t e n s i nI I i n d u c e d h y p e r t r o p h yo fc a r d i o m y o q t t e 8 J C h

37、 i nf 丌，j I 口叫B u l l ，2 0 0 7 ，2 3 ( 1 ) ：5 5 9 7 L i n w o n gW ，H J l l t w aN ，A o y a m aS ，e la 1 I n h i b i t i o no ft h ea n t i g e n i n d u c e da c t i v a t i o no fr o d e n tm a s tc e l l sb yp u t a t i v eJ a n u sk i n a s e 3i n h i b i t o r sW i l l P 1 3 1a n dW i l l - P 1

38、5 4i naJ a n u sk i n a s e3 i n d e - p e n d e n tm n n e r J 】B r J P h a r m a c o ，2 1 1 0 5 ，1 4 5 ( 6 ) ：8 1 8 2 8 8 K o v a r o v aM ，R i v e r aJ Am o l e c u l a ru n d e r s t a n d i n go fm a s tc e l lR e - t i v a t i o na n dt h ep r o m i s eo fa n t i a l l e r g i ct h e r a p e u

39、 t i c s J C u r rM e d C h e m ，2 0 0 4 ，1 1 ( 1 5 ) ：2 0 8 3 9 1 9 吕艳青，栗原博组胺在机体免疫反应中的作用 J 】中国药 理学通报，2 0 0 7 ，2 3 ( 1 ) ：1 3 6 9 】“lYQ ，K u r i h a s aHS T h er o l eo fh i s t a m i n ei ni m m u n er e a c t i o n s J C h nP h a r n m lB u f f ，2 0 0 7 ，2 3 ( 1 ) ：1 3 6 1 0 张予阳，刘岩，付守廷脑缺血与炎症反应 J 中

40、国药理学 通报，2 0 0 6 ，2 2 ( 1 ) ：5 9 1 0 Z h a n gYY ，K uY ，F usT C e r e b r a li s c h e m i cd a n l a g ea n di n t l a m m a t o r yr e a c t i o n J 铂讯P h a r m a c o l B u f f ，2 0 0 6 ，2 2 ( 1 ) ：5 9 “ 李昌崇，叶乐平，苏苗赏，等牛膝多糖对哮喘大鼠信号转导子 和转录激活子6 表达的影响 J 中国应用生理学杂志，2 0 0 6 ， 2 2 ( 2 ) ：2 1 0 - 4 1 1 “cc ，Y

41、 eLP ，S uMS ，e t8 1 E f f e c to fa c h y r a n t h e sb i d e n t o t a p o l y s a c e h a r i d eo ns i g n a lt r a n s d u c e ra n da c t i v a t o ro ft r a n r i 【p t i o n6 a n di t sm R N A e x p r e s s i o ni na r a tm o d e lo fa s t h l I l a J C h i nJ4 0 - p lP h y s i o l ，2 0 0 6 ，

42、2 2 ( 2 ) ：2 1 0 4 1 2 F r o s s iB ，R i v e r aJ 。H i r s c hE ，e ta 1 S e l e c t i v ea c t i v a t i o no fF y n P D Ka n dp 3 8M A P Kr e g u l a t e sI L 4p r o d u c t i o ni nB M M Cu n d e r n o n t o x i cs l 删c o n d i t i o n J ，l m m u n o l ，2 0 0 7 ，1 7 8 ( 4 ) ：2 5 4 9 5 5 1 3 K o r

43、a n t e n gRD ，S w i n d l eEJ ，D a v i sBJ ，e ta 1 D i f f e r e n t i a lr e g u l a - l l o no fm a s tc e l lc r t o k i n e sb yb o t hd e x a m e t h a s o n ea n dt h eI ) 3 8m i - t o g e n - a c t i v a t e dp r o t e i nk i n a s e ( M A P K ) i n h i b i t o rS B 2 0 3 5 8 0 J 】 c j i nE

44、x pl m m a m d ，2 0 0 4 ，1 3 7 ( 1 ) ：8 1 - 7 E f f e c to fa c h y r a n t h e sb i d e n t a t ap o l y s a c c h a r i d e so n a n t i g e n i n d u c e da c t i v a t i o no fm a s tc e l l s H U A N GF e n 9 1 ，T o N GX i a o y u n 2 ，Z H A N GR o n g h u a l ，C A IY u l ( 1 C o l l e g eo f P

45、 h a r m a c y ，J i n a nU n i v e r s i t y ，G u a n g z h o u 5 1 0 6 3 2 ，C h i n a ；2 t h eF i r s t 够Z 妇以H o s p i t a lo f G u a n g z h o uU n i v e r s i t yo fT C M ，G n a n g z h o u5 1 0 6 3 2 ，C h i n a ) A b s t r a c t ：A i m T o i n v e s t i g a t et h em e c h a n i s mo f a n dp 3

46、8w e r em e a s u r e db yW e s t e r nb l o t R e s u l t s a c h y r a n t h e sb i d e n t a t ap o l y s a c c h a r i d e so nd e g r a n u l a t i o n T r e a t m e n tw i t ha c h y r a n t h e sb i d e n t a t ap o l y s a c c h a r i d e s o fm a s tc e l l s M e t h o d s T h ee x p e r i

47、m e n to fp a s s i v ew a sf o l l o w e db yad e c r e a s ei nP C Ao fr a t sa n dB h e x c u t 鲫t e o u sa n a p h y l a x i sw a su s e dt od e t e r m i n et h ee f f e c t o s a m i n i d a s e ，h i s t a m i n e ，T N F 一仪，I L 4 ，A k ta n dp 3 8o f o fa e h y r a n t h e sb i d e n t a t ap o

48、 l y s a c c h a r i d e so nd e g r a n u l a - R B L - 2 H 3c e l l si n d u c e db ya n t i g e n C o n c l u s i o n s t i o no fm a s tc e l l si nv i v o F o ri nv i t r os t u d y ，v a r i o u s A c h y r a n t h e sb i d e n t a t ap o l y s a c e h a r i d e sm i g h ts u p p r e s s d o s e so fa c h y r a n t h e sb