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1、慢性吗啡成瘾大鼠纳洛酮催瘾戒断后 CPA 模型的建立 李毅 *, 郝 伟 *, 王绪轶,邓慧琼 (中南大学湘雅二医院精神卫生研究所,湖南 长沙410011) !摘要“目的#建立稳定的吗啡依赖戒断后条件性位置厌恶(CPA)大鼠模型。方法#给予Sprague-Dawley(SD)大鼠吗 啡10mg.kg-1,每天2次,腹腔注射(ip),连续6.5天,在吗啡注射第6天,予纳洛酮催瘾注射:0.3mg.kg-1,ip,1次,并 与条件性位置反射训练箱搭配。 结果#条件性搭配后,研究组试验鼠在伴药侧的时间显著性减少。 结论#慢性吗啡注 射纳洛酮催瘾戒断后CPA大鼠表现出明显厌恶动机,可作为研究阿片类物质戒
2、断所致厌恶的生物学机制的载体。 !关键词“条件性位置厌恶;吗啡;纳洛酮;依赖;催瘾戒断 中图分类号: R395.1文献标识码: A文章编号: 1005-3611(2006)03-0275-03 !“#“$%.2“0 Morphine; Naloxone; Dependence; Precipitated withdrawal !基金项目“国家973(项目号:2003CB515403)和国家自然科学基 金项目(项目号:30370522)资助 *华中科技大学同济医学院附属精神病院; *通讯作者 正性和负性强化机制在物质成瘾中分别起到重 要的作用1。 如物质使用后的快感对物质的继续使 用起到的“拉动
3、作用“以及成瘾者为了避免或缓解物 质戒断带来的痛苦, 往往强迫性地出现觅药行为或 者复吸。物质戒断所致的厌恶,作为重要的负性强化 因子之一对觅药或复吸行为起到重要的 “推动作 用“,从而使物质成瘾的临床疗效不佳。 物质戒 断 后 的 条 件 性 位 置 厌 恶 (conditioned place aversion,CPA)是指由于戒断所致的厌恶动机/ 情绪与特定的环境或信号搭配后,建立条件性反射, 当条件化后的对象再次暴露于相同或相似的环境或 信号时, 表现出明显的厌恶动机以及明显回避条件 性刺激的行为。CPA被广泛地用来研究精神活性物 质的负性强化特性2。 本试验的目的在于建立稳定 可靠的
4、吗啡依赖纳洛酮催瘾戒断后的CPA大鼠模 型,从而为研究物质依赖戒断后厌恶/负性强化的生 物学机制提供载体。 %材料与方法 %对照组:慢性吗啡注射+生理盐水 对照组 (morphine + saline,MS) 和慢性生理盐水注 射+纳洛酮催瘾组(saline + naloxone,SN),分别简称 MS和SN组。 慢性吗啡注射:从第1天(d1)至第7 天(d7)的上午,对照组同期注射等体积的生理盐水。 纳洛酮催瘾注射一次,仍以生理盐水对照注射。处理 因素的施加详见表1。 % 盐酸纳洛酮 (Naloxone Hydrochloride):北京四环医药科技股份有限公司生 中国临床心理学杂志2006
5、年第14卷第3期275 产,批号0312102。 表1试验处理因素的施加方案 注:M=吗啡,10mg.kg-1体重,腹腔注射;N=纳洛酮,0.3mg.kg-1 体重, 腹腔注射;S=等体积生理盐水, 腹腔注射。8AM/PM, 2PM,10AM,均为相应注射的时间点,BID=8AM+8PM。 1.3实验装置 条件性位置反射训练箱: 体积为60cm30cm 30cm(长宽高), 被中间的可抽动隔板 (30cm 30cm),等分为两个小室。 一侧:内侧各面均为黑色, 底面光滑,简称为黑侧。另一侧:内侧各面均为白色, 底面粗糙,简称为白侧。 替代隔板(30cm30cm):一 侧底面有10cm10cm的
6、缺口,以便在试验鼠适应训 练箱和测评位置厌恶时替代原来的隔板。 实验鼠在 两侧内的时间以及“可视性“的戒断症状均由自动录 像系统自动记录。 1.4慢性吗啡依赖纳洛酮催瘾戒断%d4在一侧的时间超过600s而 dJ在另外一侧的时间超过600s的试验鼠。 本研究 阶段共有Q只试验鼠被剔除。在条件化搭配之前,实 验鼠在两侧的时间无明显差异(P R0.0J)。 条件化搭 配期Sd6T:在8AM的吗啡/生理盐水注射后两个小时 (10AM),腹腔注射生理盐水(1mgUkg-1体重)后,将 实验鼠限制在非偏好侧30min。4I后(2PM),MN组 和SN组腹腔注射纳洛酮 (0.3mg.kg-1体重),MS组
7、注射等体积的生理盐水后, 将实验鼠限制在偏好侧 30min。 需要说明的是:这里我们采用的类似非平衡 的方法主要目的是进一步平衡(nulliVW)实验鼠的自 然偏好。 同时自动录像系统记录实验鼠的“可视性“ 的戒断症状,进行躯体戒断症状的评估。包括4项可 数体征:湿狗样抖动(Het dog sIGkes,XDS)、直立 (reGring)、躯 体 拉 伸 (stretcIing)、跳 跃 (Yumping);1 项不可数体征:腹泻KdiGrrIeGT。CPA测评期KdPT:在 8AM的吗啡/生理盐水注射后两个小时 (10AM),让 实验鼠在训练箱内自由探索1Jmin, 并自动记录试 验鼠在两侧
8、内的时间。CPA的训练的实施参见表1。 (结果 (.1三组大鼠%&评定的结果 MN组:CPA条件化后,试验鼠在伴药侧的时间 (s)较条件化前期明显减少(表2),MN组大鼠形成 了明显的CPA。 表(条件化搭配前、后三组试验鼠在伴药侧时间()变化 注: 厌恶分数(s)即测试阶段试验鼠在伴药侧的时间减去条件化前阶段在同 侧的时间。 (.(三组大鼠戒断体征评定结果 三组大鼠在催瘾注射后, 条件化搭配期的戒断 症状比较Z见表3。MN组较对照组有明显的湿狗样 抖动、跳跃和腹泻的表现,而直立和躯体拉伸三组之 间均无明显差异。MN组大鼠表现出部分躯体戒断 症状。 表3条件化搭配阶段催瘾注射对可视性躯体戒断症
9、状的影响 注 P0.0J,P0.01Z与MN组比较(AN_A,SD)。aP0.0JZ 与MN组比较KbisIers eFGct testT。 3讨论 阿片类物质依赖的戒断可以表现为躯体戒断症 状和厌恶动机,两者可能有不同的神经基础,动机方 !“#$#%#&#%#&# !“#“$! 2P6CIinese cournGl oV ClinicGl PsWcIologW _ol.14 No.3 2006 面的戒断症状较躯体方面更为敏感4,其中厌恶动 机和强迫性地觅药和复吸行为尤为相关 5,CPA 的 建立是以厌恶的非条件刺激与条件性周围环境刺激 之间的联系为基础的,与情绪记忆有关6。CPA是衡 量慢性
10、和急性阿片依赖戒断所致的厌恶性动机的一 种敏感的实验7,8。 物质依赖戒断后的CPA行为一旦 建立,往往较难消退9,推测CPA行为的建立可能是 以脑内包括情绪记忆通路在内的复杂的适应性的改 变为基础。试验证据表明,在阿片依赖后拮抗剂注射 催瘾建立的CPA过程中,伏隔核、杏仁核复合体的 中央核群等神经结构内可能发生了较为复杂的神经 生化以及分子生物学方面的可塑性的变化1 。 目前药物成瘾的生物学机制尚未阐明, 成瘾者 的临床疗效不佳,复吸率一直居高不下,严重阻碍成 瘾者回归社会,走向正常生活。 如能对药物戒断后的 厌恶以及相应的负性强化过程的生物学机制进行深 入的研究,必将进一步丰富药物成瘾的理
11、论。本研究 采用慢性吗啡依赖SD大鼠予纳洛酮催瘾后与条件 性位置训练箱一次搭配成功建立了CPA的动物模 型。研究组试验鼠表现出明显厌恶动机,可以作为研 究“吗啡依赖戒断所致厌恶“的载体,来揭示厌恶中 枢状态相关的生物学机制, 为进一步干预负性强化 的用药行为提供帮助。 参考文献 1Tiffany ST, Conklin CA, Shiffman S, et al. What can dep- endence theories tell us about assessing the emergence of tobacco dependence?. Addiction, 2 4,99 (Supp
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