清热抗感冲剂对小鼠IL-2水平影响的实验研究.pdf

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1、第2 3 卷第1 0 期 20 05年 1 0月 中医药学刊 A R C H I V E S OF T R A D IT I O N A L C H I N E S E ME DICIN E V o l . 2 3 N o . 1 0 O c t 二 2 0 05 文章编号: 1 0 0 9 一 5 2 7 6 ( 2 0 0 5 ) 1 0 一1 7 9 6 一 0 2 清热抗感冲剂对小鼠I L一 Z 水平影响的实验研究 王岌, 乔模, !司丽萍, 马彦平, 王欢 ( 山 西中医 学院, 山 西太原0 3 0 0 2 4 ) 摘要: , 1 的: 通过检A ll 清热杭感冲荆对实验性免疫低下

2、小鼠及正常小鼠血清I L - 2 水平的影响, 探讨 该冲荆对免疫功能的调节作用。方法: 选取昆明种小鼠1 0 0只, 雌雄各半, 其中5 0只腹腔注射环磷鱿胺 3 m g / 0 . 2 m L / 只 , 每天给药1 次, 连续7 天, 造成免疫低下小鼠, 然后随机分为模型组、 中药对照组( 银翘解毒 片组) 、 西药对照组( 7 一干扰素组) 、 小荆童组、 大荆蚤组; 其余 5 0只随机分为正常空白对照组( 即生理盐水 组) 、 中药对照组、 西药对照组、 小荆童组、 大荆童组。上述各组连续用药3 天后, 处死, 未血, 离心取血清, 采 用放免 Y 测黄仅检浏I L - 2 含童。结

3、果: 清热杭感冲剂能显著提高正常小鼠和注射环礴耽胺引起的免疫低 下小鼠血清中I L - 2 生成水平( 统计学处理P 0 . 0 1 ) 。结论: 清热杭感冲剂对小鼠的细胞免疫功能有明显 的增强作用。 关键词: 清热杭感冲荆; 免疫调节; I L 一 2 中图分类号: R一 3 3 2文献标识码: B 1 7 9 6 清热杭感冲剂为科研组自拟经验方剂, 临床运用多 年, 效果显著, 已有另文专题报道。本方主要含有僵蚕、 薄荷、 银花、 连翘、 桔梗、 射干、 大黄等药物, 具有辛凉解 表、 清热解毒、 宣降蕴热的作用。临床用以治疗上呼吸道 感染, 疗效显著。笔者试图用现代科学方法从分子水平 对

4、其作用机理进行实验研究, 为临床用药提供理论根据。 本实验主要从清热抗感冲剂对小鼠I L 一 2 的影响研究该 冲剂的免疫调节作用。 1 材料与方法 1 . 1 实验材料实验动物: 昆明种小鼠体重为( 2 0 1 2 ) g , 1 0 0 只, 雌雄各半, 由山西医科大学实验动物中心提 供。通风环境饲养, 温度( 2 2 士 1 ) -, 湿度5 0 %一6 0 %. 实验药物: 清热抗感冲剂( 将本方药物水煎、 浓缩、 真空 干燥、 制成冲剂, 每袋6 g 。由山西中医学院附属医院制 剂室提供) ; 银翘解毒片( 中天制药有限公司提供, 批号为 2 0 0 2 1 2 0 4 , 经粉碎、

5、 研磨、 过筛, 制成散剂) ; 7 一 干扰素( 丽 珠集团丽珠生物工程制药厂提供, 批号为2 0 0 3 0 9 0 1 ) ; 环 磷酞胺( 江苏恒瑞医药股份有限公司提供, 批号为 0 3 1 0 1 0 2 1 ) 0主要实验试剂: 白细胞介素一 2 放免药盒 由解放总医院科技开发中心放免所提供。实验仪器: S N 一 6 9 5 A型智能放免Y 测量仪、 电子精密天平、 离心机 等。 1 . 2 实验方法 试剂配制: 清热抗感冲剂灌胃液的制 备: 取清热抗感冲剂加蒸馏水溶解, 分别配制成实验所需 的低浓度2 3 3 m g / 0 . 8 m L 和高浓度4 6 6 m g / 0

6、. 8 m L 溶液。 银翘解毒片灌胃液的制备: 取银翘解毒片粉碎后散剂加 收稿B期: 2 0 0 5 一 0 4 一 0 4 荃金项目: 山西省科委攻关课题( 2 0 0 0 ) 作者简介: 王岌( 1 9 4 6 一 ) , 女, 教授, 硕士研究生导师, 研究方向: 时令病防治研究。 蒸馏水溶解, 配制成浓度为4 5 . 5 m g / 0 . 8 m L的溶液。Y - 干扰素注射液的制备: 将 下 一干扰素加注射用水溶解成 浓度为5 万U I / m L 的溶液 。环磷酸胺注射液的制备: 将环磷酞胺加生理盐水配制成浓度为1 5 m g / m L的溶 液 2 , 3 ) 0 分组及给药

7、: 将 1 0 0只小鼠, 雌雄各半, 随机分成 两大组: 正常组将5 0 只小鼠再随机分成5 组分别给药如 下: 生理盐水组: 腹腔注射生理盐水 0 . 8 m L / 只; 中药对 照组: 银翘解毒片水溶液灌胃每只4 5 . 5 m g / 0 . 8 m L ; 西药 对照组: 腹腔注射Y 一 干扰素每只1 万U I / 0 . 2 m L ; 小剂 量组: 清热抗感冲剂水溶液灌胃每只2 3 3 m 以 0 . 8 m L ; 大 剂量组: 清热抗感冲剂水溶液灌胃每只4 6 6 m g / 0 . 8 m L o 免疫功能低下组: 将 5 0只小鼠腹腔注射环磷酸胺每只 3 m g / 0

8、 . 2 m L , 每 天给药1 次, 连续7 天 2 ) 。 然后 再随 机分 成5 组, 其中1 组作为对照, 其余4 组分别给药如上述正 常组后4 组。 上述各组每天给药1 次, 连续3 天。 血液的采集: 最后1 次给药2 4 h 后, 处死小鼠。采 用断头采血法, 每只采血0 . 8 -1 . 2 m L , 2 0 0 0 r / m i n 离心 2 0 m i n , 取血清速冻, 采用放免Y 测量仪检测I L 一 2 含量。 1 . 3 实验资料处理所有实验数据均以均数士标准差 ( X土 : ) 表示, 组间显著性检验采用 t 检验。 2 结果 2 . 1 清热抗感冲剂对免

9、疫抑制小鼠I L -2 水平的影响 见表 1 . 从表1 可见, 用环磷酞胺免疫抑制的小鼠的血清 I L - 2 水平显著低于正常对照组。表明环磷酞胺在抑制 T 细胞增殖的同时, 对I L - 2 的生成也产生影响。大、 小剂 量的实验药物均能提高免疫抑制小鼠的血清I L 一 2 水平 达到正常。表明实验药物对免疫抑制小鼠的细胞因子有 中医药学刊 第 1 0期 王岌等: 清热杭感冲荆对小鼠I L - 2 水平影响的实验研究 促进作用, 作用与Y 一 干扰素相近。 2 . 2 清热抗感冲剂对正常小鼠I L -2 水平的影响见 表 2 0 表 1 清热抗感冲剂对免疫抑制小鼠I L 一 2 水平 的

10、影响( X .1 s , n = 1 0 ) 生理盐水组 环磷酞胺组 环十中药对照组 环十 西药对照组 环十小剂量组 环十大剂量组 I L 一 2 的水平( n g / m L ) 3 . 9 0 0土0 . 1 7 3 3 . 3 9 0 土 0 . 2 7 4 3 . 5 1 6士0 . 2 2 8 4 . 1 3 9 1 0 . 2 1 8 * * * 4 . 0 5 8 1 0 . 3 8 5 * * * 3 . 9 9 2 士 0 . 1 4 6 0 * * 注: 与正常组( 生理盐水组) 比较, A A A P 0 . 0 0 1 ; 模型组 ( 环 磷 酞 胺组) 比 较, c

11、o o p 0 . 0 0 1 0 表2 清热抗感冲剂对免疫抑制小鼠I L 一 2 水平 的影响( X1s , n =1 0 ) I L 一 2 的水平( n g / m L ) 生理盐水组 中药对照组 西药对照组 小剂量组 大剂量组 3 . 9 0 0士0 . 1 7 3 3 . 9 8 2 土0 . 1 7 7 4 . 2 1 1 士0 . 1 8 2 4 . 2 6 2土0 . 2 2 6 4 . 2 0 4 士0 . 1 4 6 象。有资料表明, 上呼吸道感染患者, 多存在免疫球蛋白 及其亚类的部分缺乏, T细胞亚群比例失调, 细胞因子活 性降低等现象 5 , 6 0 I L - 2

12、是机体复杂的免疫网络中具有重要作用的细 胞因子, 可促进多种T细胞亚类的增殖与分化, 促进N K 细胞的杀伤功能, 促进B细胞的增殖与分化, 促进多种 细胞因子或其受体的表达, 在抗感染方面发挥重要作 用 8 0 本次实验结果表明, 清热抗感冲剂对免疫抑制小鼠 和正常小鼠能够对I L 一 2 的生成产生影响。清热抗感冲 剂既能防护环磷酸胺所致免疫力低下小鼠的T细胞产 生I L 一 2 的反应, 也能提高正常小鼠血清I L 一 2 水平, 可 推测清热抗感冲剂能使T细胞增殖活化, 使I L 一 2 的分 泌增多。这可能是其调节机体免疫能力的机理之一 4 结论 本实验研究表明: ( 1 ) 清热抗

13、感冲剂对正常小鼠及免 疫低下小鼠均具有正相的免疫调节作用, 尤其对小鼠的 细胞免疫功能有明显的增强作用。( 2 ) 清热抗感冲剂在 不使用补益药物的情况下, 提高了小鼠的免疫功能, 为中 医“ 祛邪即以扶正” 的学术思想提供了理论依据。 参考文献: 1 盛 八 盛 2 IJ叫es曰,.J 飞41、 r,J卜Lr.L ,IJ,esJJlee.J 6,尹凡 呼Lr.LlL 注: 与正常组( 生理盐水组) 比 较, “ P 0 . 0 0 1 o 从表2 可见, 大、 小剂量的实验药物作用与 下 一干扰 素相似, 可以明显提高正常小鼠血清 I L - 2的水平, 说明 实验药物能显著提高T淋巴细胞分

14、泌生成 I L 一 2 细胞 因子, 对正常小鼠细胞因子也有促进作用。 3 讨论 现代医学认为, 机体免疫系统在抗感染过程中发挥 着重要作用。特别是在抗病毒感染中, 细胞免疫显得尤 其重要4 3 。因此, 从免疫学角度探讨药物抗病毒的作用 和机理是现代医学的一个新课题。从近几年的文献中, 发现上呼吸道感染的人群, 普遍存在免疫功能低下的现 张天托. Y 一 于扰素对免疫低下小鼠结核分支杆菌感染的 影响 i l . 中国防痛杂志, 2 0 0 3 , 2 5 ( 3 ) : 1 3 2 -1 3 3 郭鸽. 人类疾病的动物模型( 第 1 辑) M . 人民卫生出版 社, 1 9 8 2 , 2

15、4 6 一2 4 8 熊晓玲. 部分扶正固本中药对小鼠I L - 2 产生的双向调节 作用【 i l . 中国实验临床免疫学杂志, 1 9 9 1 , 3 ( 4 ) : 3 7 - - 3 9 龚非力. 医学免疫学 M . 科学出版社, 2 0 0 1 . 2 8 1 一 2 8 2 马少春 反复呼吸道感染患儿外周血淋巴细胞Ym 亡及其与 免疫功能的相关性探讨【 i l . 中国实用儿科杂志, 1 9 9 9 , 1 4 ( 2 ) : 1 0 1 一1 0 2 李桦. 反复呼吸道感染患儿免疫功能的探讨【 i 1 . 宁夏医学 杂志, 1 9 9 5 , 1 7 ( 3 ) : 1 7 2

16、一1 7 3 龚非力. 医 学免疫学【 M 科学出版社, 2 0 0 1 . 2 4 8 - 2 4 9 徐晓玉. 防感片对小鼠脾细胞分泌I L一 2 影响的实验研究 7 l . 中国实验方剂学杂志, 2 0 0 2 , 8 ( 4 ) : 3 4 - - 3 6 S t u d y o n t h e E f f e c t o f Q in g r e K a n g g a n Mix t u r e o n t h e I m m u n e F u n c t io n in Mi c e WA N G J i , Q I A O Mo , Y A N L i - p i n g ,

17、 MA Y a n - p i n g , WA N G H u a n ( T h e D e p a r t m e n t o f T r a d i t io n a l C h in e s e Me d i c in e i n S h a n x i , T a i y u a n , 0 3 0 0 2 4 , S h a n x i , C h i n a ) A b s tra c t: O bjectiv e : T o stu d y th e effect o f Q in g re K a n g g a n M ix tu re o n th e le v el

18、o f IL 一 in h y p o im m u n e an d n o rm al CIPIN m ic e , t o e x p l o r e t h e im m u n e r e g u la t in g f u n c t io n o f Q m g r e n a n g g a n M ix t u r e . M e t h o d s : m ic e i n d u c e d n y p o i m m u m t y b y m -药 t r a p e r i t o n e a l i n j e c t i o n o f 1 7 9 7 学刊 Q

19、 i a o j i e d u Mi x t u r e . t a b l e t , We s t e r n c y c l o p h o s p h a m i d e w e r e r a n d o m l y d i v i d e d i n t o f i v e g r o u p s : m o d e l g r o u p , T C M g r o u p w h i c h t o o k Y i n m e d i c i n e g r o u p w h i c h t o o k y - i n t e r f e c t i o n , a n d

20、 t w o g r o u p s w i t h d i f f e r e n t d o s a g e s o f Q i n g r e K a n g g a n T h e r e s t 5 0 m i c e w e r e a l s o d i v i d e d i n t o t h e s a m e 5 g r o u p s . T h e l e v e l o f I L - 2 w a s d e t e c t e d w i t h r a d io i m m u n o a s s a y . R e s u l t s : Q i n g r

21、e K a n g g a n Mi x t u r e c a n s i g n i f i c a n t l y i n c r e a s e t h e l e v e l o f I L一 2 i n s e r u m i n n o r m a l a n d h y p o i t n m u n i t y m i c e . C o n c l u s i o n : Q i n g r e K a n g g a n Mi x t u r e c a n m a r k e d l y t h e c e l l u l a r i mmu n o r e s p o n s e i n mi c e K e y w o r d s : Q i n g r e K a r g g a n Mi x t u r e ; I m m u r e H g u l a t i n g f u r c t i o n ; I L 一 2

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