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1、江 苏 预防 医 学2 0 0 3 年9 月 第1 4 卷 第3 期 J ia n g s u P r e v M e d , S e p , 2 0 0 3 , 业 1 4 , N - . 3 毒 3 W 与 表 圣马 全 梅毒R P R实验假阳性反应分析 吴征， 梁文腌 ( 江苏省血液中心， 江苏 南京 2 1 0 0 4 2 ) I 文 献标识 码I C I 中 图分类号】 R - 3 3 【 文 章编号】 1 0 0 6 - 9 0 7 0 ( 2 0 0 3 ) 0 3 - 0 0 7 0 -0 2 【关 链 词 】 梅毒; 快速血浆反应素试验; 假阳性 梅毒是能经血传播的疾病之一。
2、梅毒螺旋体 ( t r e p o n e m a p a l l i d u m ) 的血清学初筛试验主要有不 加热血清反应素试验( U S R ) 和快速血浆反应素试 验( R P R ) ， 两者的 灵敏度， 特异性及符合率相似， 但 由 于R P R法具有操作简单、 快速和成本低等特点， 更适于大批量献血员样本的筛选， 是目 前临床实验 室最常用的过筛梅毒患者的检测方法。梅毒确证试 验主要有被动血凝试验( T P H A ) 和被动明 胶颗粒凝 集试验( T P P A ) 。它们分别是用不同的载体吸附作 为抗原的梅毒螺旋体超声粉碎后的悬液， 检测特异 性的I g m和I g G抗体，
3、 其特异性和敏感性均较 U S R和R P R为高 I 。 本文 用，T P P A法确 证经R P R 试验呈阳 性反应的 血清标本， 发现R P R试验存在着 假阳性反应， 并对R P R试验出现生物学假阳 性反应 的原因作了初步分析。 1材 料 与 方法 1 . 1 试剂和 仪器 初检和复检试验使用上海荣盛 公司 和上海科华 公司生产的R P R试剂， 确证试验使 用的T P P A试剂购自日 本富士公司， 使用仪器为国 产多用振荡器。 1 . 2 标本 取自 江苏省内健康献血员血清标本和 卫生部临检中心提供的T P 质控血清标本。 1 . 3 方法 初筛和复检试验使用R P R法， 具
4、体步 骤为: 在2 3 -2 9 C 室温中， 将R P R抗原悬液1 滴加 入5 0 1, 1 待测血清 或血浆中， 将卡片在振荡器上振荡 8 m i n ， 并在3 m i n内完成观察结果; 确证试验使用 T P P A法， 具体步骤为: 试剂于室温平衡3 0 m i n ， 活 化致敏明胶颗粒。在U型板上将血清作1 : 4 0 和 1 : 8 0 两个稀 释孔， 并分别于这两个稀释孔中 加人非 致敏颗粒和致敏明 胶颗粒， 室温孵育2 h 。 结果判断: 强阳性， 凝集颗粒均匀地覆盖孔底; 阳性， 颗粒形成 大的环， 外缘粗糙而多形; 可疑， 颗粒聚集成致密的 环状， 外 缘圆而平滑(
5、凡出 现可疑凝集反应的标本均 作定量试验) ; 阴 性， 颗粒集中 在孔的中 央呈钮扣状. 外缘圆而光滑或颗粒紧密沉于孔底中 央。 未致敏的 颗粒不出 现凝集。 试验严格按试剂盒说明书的要求 进行操作。 R P R初检为阳 性时， 用不同厂家的R P R 试剂进行重复检测， 如检测结果仍为阳 性， 再用T P P A法进行确证试验。 2 结果 在总 计8 6 5 6 4 份血清或 梅毒质控血清标 本中， 共有5 6 份R P R试验检测阳性的血清标本。 阳性血 清标本加检了T P P A确证试验， 其中 有4 0 例经丁 P - P A确证为阳性, 1 6 例为阴性， 假阳性率为2 8 . 6
6、 % ( 1 6 1 5 6 ) 0 3 讨论 本试验结果与国内 报道的献血员梅毒筛查的假 阳 率 基本相符 C z ,a l造成 梅毒R P R试验出 现假阳 性 反应的原因是多方面的。 首先， 在整个检测过程中 可 能存在着一些“ 技米比 “ 误 差因素， 如操作失误、 环境 温度、 振荡频率、 判断时间过长和判断的准确性等因 素， 可导致假阳性反应。另外， 下列因素都可能导致 梅毒R P R试验出现假阳性反应: 标本因素， 如 果标本中 纤维蛋白含量较高、 溶血、 脂血， 或保存运 输不当， 血清中 有游离脂肪酸析出， 可导致假阳 性反 应; 试剂因素， 由于R P R试剂中胆固醇含量较
7、 高， 易形成颗粒性沉淀物， 故不同厂家、 不同批次的 试剂， 对同一标本的检测就有可能出现假阳性反应; 献血员的身体状况， 如果献血员献血期间患有下 列疾病， 例如疟疾、 斑疹伤寒、 回归热、 猩红热、 巨细 胞病毒肺炎、 风湿性心脏病、 痛风、 麻风、 性病性淋巴 肉 芽肿、 病毒性肝炎、 系统性红斑狼疮等急 性感染或 收 稿日 期: 2 0 0 3 - 0 1 - 1 0 作者简介 吴征( 1 9 5 9 -) ， 女 江苏南京人， 主管医 师 万方数据 学2 0 0 3 9 J l 丝壁笙 3 置 J ia n g s u P r e v M e d 竺 S e p , 2 0 0 3
8、 , V o l 1 4 , N o . 3 自身免疫性疾病， 患者的血浆标本中 均可能存在反 应素， 可与R P R试剂发生凝集反应， 造成假阳 性. 梅毒R P R试验假阳 性反应的产生主要是由于 R P R试 验本身方法学的缺陷所致。 R P R试验是用 于 筛选梅毒病人的非特异性试验， 并非确证试 验。 确 证梅毒患者， 除了使用梅毒的血清学确证试验方法， 如T P H A , T P P A或其他试验方法， 还应结合临床 病史、 体征、 治疗史 和流行病学的情况进行综合的评 判 因 此， 分析影响梅毒R P R试验检测结果的因素， 对于提高检测质量， 保障输血安全， 避免血液资源的
9、浪费， 更好地为人民 健康服务， 具有现实意义。 薛晓 光， 陈门 玲. 梅 毒R P R , T R U S T , T P H A , T P P A的试验对 比 分析 J l . 海 峡预防医 学杂志, 2 0 0 0 . 6 ( 2 ) , 4 7 . 付 海 军， 王 忠 发. 献 血者 梅 毒 反 应素 检 测 及 确 证试 验 月 . 中 国 输血杂志, 1 9 9 7 , 1 0 ( 2 ) : 8 6 5 . 邱艳. 郑静， 高东英， 等. 对血 站采用非 特异 性血清试 验筛选血 液 结 果 的 评价 口 . 中 国 输 血 杂 志, 1 s s s . u: 2 7 .
10、毒 3w 与 ?r 紫外分光光度法测定氯己定 丁建森， 李凌 ( 苏州市疾病预防控制中心， 江苏 苏州 2 1 5 0 0 3 ) 1 文献标识码】 C 中 图分类号 R -3 3 1 1 0 0 6 -9 0 7 0 ( 2 0 0 3 ) 0 3 -0 0 7 1 -0 2 【关 越 词 】 抓己 定; 紫外分光光度法; 测定; 消毒液 氯己 定化学名称1 . 6 一 双( 正一 对氯苯双肌) 己 烷， 又名洗必泰， 是一种常用的皮肤粘膜消毒剂， 具有杀 菌范围广、 毒性小、 合成简单、 性能稳定、 使用方便等 特点。 自1 9 5 4 年 合成以 来已 得 到广 泛的 应用。 目 前 测
11、定 方 法有容量 分析法和高效液相色 谱法。 前者 适 用于 浓度 较高的 产品; 后者 仪器昂 贵， 操作繁琐。 作 者采用紫外分光光度法对氯己 定进行测定， 结果满 意。 1 试验部分 1 . 1 试剂与仪器 氯己 定标准溶液: 称取含量为 9 9 . 5氯己 定。 . 5 g 加少量 纯水溶解置1 0 0 m 1 容量 瓶中， 加水至刻度， 并再稀释至0 . l m g / m l 。仪器为 P E R K I N一E L M E R L A M B O A 2 U V / V I S分光光 度计。 1 . 2 试验方法 ( 1 ) 样品 处 理: 取适量样品 用纯水逐级稀 释， 使 氯
12、己定含量为1 2 士6 m g / L ， 备用。 ( 2 ) 标准曲线制备及样品测定: 吸取氯己定标 准溶液。 . 4 , 0 . 8 , 1 . 2 , 1 . 6 , 2 . O m l 置1 0 m 1 具塞比 色 管中， 加纯水至刻度( 其浓度相当于4 , 8 , 1 2 , 1 6 , 2 0 m g / L ) , 混匀， 用 纯水校正空白， 标准溶液与样品 溶液作测定溶液， 用 l c m石英比色杯， 波长 2 5 5 . 8 n m比 色定 量。 1 . 3 计葬 X=A XF / 1 0 0 0 0 X为样品中氯已 定含量( %) ; A为曲 线 上查得的 含量( m g
13、/ L ) ; F 为稀释倍数。 2 结果与讨论 2 . 1 线性范围 在1 2 天内， 分别对 4 , 8 , 1 2 , 1 6 , 2 0 m g / L 按方法进行6 次测定取平均值， 其回归方 程Y=0 . 0 3 0 5 2 x -0 . 0 0 2 3 1 ， 相关系数r =0 . 9 9 9 7 , 具有良 好的线性关系。 2 . 2 精密 度试验 结果见表1 。 其相对标准偏差 ( R S D ) 为1 . 2 5 % 4 . 5 0 %e 收 稿6 期 2 0 0 3 - 0 6 -1 6 作老简 介: 丁建森( 1 9 5 7 -) . 男， 江苏无妈人， 副主任 技师. 万方数据