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1、中国实用神经疾病杂志2 0 0 7 年 1 0月第 1 0卷第 7 期C h i n e : e j o u r n a l o f P rac t i 亡 a l N e rvo u 日 众5 os e s o 比 2 0 0 7 ， V ol . 1 0N o . 7 论 著 碱性成纤维细胞生长因子对脑出血大鼠大脑组织、 海马 S O D和 MD A的影响 李倩茗， ， 韦红巧 ， 黄俊杰2 ， 黄巨 恩， ， 李炳 ， 1)广西医科大学生理学教研室南宁 5300212)右江民族医孕院生理学教研室百色 5330003)广西医科 大学组胚学教研宣南宁5300214)新乡医学院生理学教研室新乡
2、 453 00。 【 摘落1 目 的 砚察峨性成纤雄细胞生长因 子对大成脑出 血后山 血灶周围脑组织和出 血侧海马超氧化肠嫂化膝( 以 D ) 、 丙二 醛( MD A ) 的影响。方法采用脑内注射胶原畴建立大灰脑山血棋型， 脑出血模型建立成功的动肠分为模型组、 生理盆水对瓜组和 拢性成纤雄细胞生长因 子治疗组， 每组又分为1 、 3 、 7d3 个时间点。砍性成纤雄细胞生长因予治疗组按8 解 9 / 吨别1肌内注射。然 后检侧各组血肿周围脑组织和出血侧海马中以) D活力和 MD A含圣。结果 1)城性成纤维细施生长因子治疗组与生理盆水对双 组比， 3 d 、 7 d 时血钟周围脑组织5 O
3、D活力均明显增高( 尸 3 分者说明 动物脑出血模型建立成功， 脑出血模型建立成功的动 物人选本实验， 人选 90 只Wi s ta r 大鼠随机抽签法分 为模型组、 生理盐水对照组和碱性成纤维细胞生长因 子治疗组， 每组又分为1 、 3 、 7 d3个时间点， 每组每个时 间点10只。各组动物生命体征平稳后( 苏醒后24h)， 碱性成 纤维细胞生长因 子治疗 组按8 拼 9 /k9 剂量肌内 注射， 1 次/d; 生理盐水对照组肌内注射与碱性成纤维 细胞生长因子治疗组相同剂量的生理盐水， 1 次/d; 模 型组不作任何干预。各组动物饲养环境、 条件均相同: 分笼普通饲养， 自由饮水摄食， 室
4、温26 ， 湿度50% 一60%饲养。 各组大鼠到相对应的时间点断头处死迅 速取出血侧大脑出血灶周围脑组织和出血侧海马， 置 于生理盐水中洗去表面残血， 然后用生理盐水分别制 成 10%大脑组织匀浆和海马组织匀浆， 3 0 0 O r/m in离 心 20min后分别取大脑组织上清液、 海马组织上清液 万方数据 2 待测定。 1 . 4 S O D 、 MD A测定用U V一1 7 0 0 萦外可见分光 光度计( 日本岛津公司) ， 在波长为5 50 。 比色测定 大脑组织上清液、 海马组织上清液S O D活力， 5 D活 力检测采用黄嗦岭氧化法， 结果以 u/m g p ro t 表示。 在
5、波长为5 32 n m比色测定血清 MD A含量， MD A含 量检测采用硫代巴比妥酸法， 以n m ol / m g p ro t 表示。 大脑组织匀浆蛋白定量、 海马组织匀浆蛋白定量按采 用考马斯亮蓝染色法测定. 1 . 5 统计学分析采用S P S Sn. 。 软件对实验数据 进行统计学处理， 所有数据用J 士: 表示， 组间比较采 用 t 检验。 2 结果 2 . 1 碱性成纤维细胞生长因子对血肿周围脑组织 S O D活力和 MD A含且的影响 2 . 1 ， 1 碱性成纤维细胞生长因子对血肿周围脑组织 S O D活力的影响: 见表 1 。 表 1 碱性成纤维细胞生长因子对血肿周围脑组
6、织 大 脑5 O D 活 力 的 影 晌( 至 士5 ， n 导1 0 ， u / m g p r o t ) 组 别l d3 d7 d 衰3 碱性成纤维细胞生长因子对出血侧海马组织 大脑SOD活力的影晌( 至 士5 ， n 令1 0 ， u / m g p r o t ) 组 别l d3 d7 d 摸型组 生理盐水对照组 俄性成纤维细胞 生长因子治疗组 2 0 2 . 4 1 士6 9 2 6 1 日 5 . 8 3 士8 6 7 3 2 1 7 . 7 7 士9 5 . 8 9 2 1 2 ， 2 9 土9 19 4 2 3 6 . 4 2 士9 45 3 2 4 35 5 士8 52 2
7、 2 1 2 . 2 9 士8 2 . 9 5 2 4 1 . 3 6 士， 8 ， 5 2 3 格留士犯田山 与模型组比较， . 尸 0 . o 5 ) 。碱性 成纤维细胞生长因子治疗组与生理盐水对照组相比， ld和3 d 时出血侧海马S O D活力差异均无统计学意 义( 尸 。05) ; 7d时出血侧海马S O D活力增高( P 0 . 0 5 ) 。 碱性成纤维细胞生长因子治疗组与生理盐水对照组相 比， l d 时血肿周围脑组织S O D活力略有增高， 但两者 差异无统计学意义( P 0 . 0 5); 3d、 7d 时血肿周围脑组 S O D活力均明显增高( 尸 0 . 0 5 ) ，
8、 差异有统计学意 呈 . 2 碱性成纤维细胞生长因子对血肿周围脑组织 含量的影响: 见表2 . 裹 2 砚性成纤维细胞生长因子对血肿周. 织义2. M DA 脑组织M o 含t的影晌【 厉 士， ， 。 ，1 0 ， u / mg p r o t ) 组 别 模型组 生理盐水对照 组 喊性成纤维细跑 生长因子治疗组 ; : 凝; ; 7 . 8 7 士2 8 2 吕 ， 4 1 士 3 5 8 6 . 9 7 士3 . 0 9 6 . 2 8 士2 ， 2 1 启 . 9 9 士3 ， 6 15 . 4 8 士2 . 1 3 .41 5 士2 . 2 0 曰 与模型组比校， . 尸 。 . 0
9、 5 ) 。 碱性成纤维细胞生长因子治疗组与生理盐水对照组相 比， l d 时血肿周围脑组织 MD A含量略有下降， 但两 者差异无统计学意义( 尸 。 . 0 5); 3d和7d 时血肿周围 脑组织均明显下降( P 00 5)。碱性 成纤维细胞生长因子治疗组与生理盐水对照组相比， l d 和7 d 时出 血侧海马M D A含量差异均无统计学意 义( 尸 。 . o 5); 7 d 时出血侧海马M D A含量下降( P 。 . O 5 ) ， 差异有统计学意义。 3 讨论 S O D是 自由基清除剂， 将 0 矛歧化成 氏 和 H 。 q， 后者在过氧化氢酶的作用下变成 H : 0 ， 从而保
10、 护细胞免受氧自由基的攻击。S O D活力高低可间接 反映机体清除氧自由基的能力。自由基攻击膜脂中的 不饱和脂肪酸， 使其发生氧化， 脂质过氧化产物丙二醛 ( MD A ) 就会升高。脂质过氧化是造成生物体氧化损 伤的主要原因。通过测定体内MD A含量， 可间接反 映体内自由基对机体的损伤程度。 如 。近年研究表 明 乳 112， 脑出 血后脑水肿及脑损伤的病理生理机制与 自由基代谢紊乱有关， 脑出血后主要由于脑血管痉挛、 脑水肿及颅内压增高， 导致脑血流量减少以及脑组织 代谢紊乱， 造成神经细胞不完全性缺血、 低氧， 使氧分 子变成衡 ， 黄嚓吟脱氢酶转变为黄嗦岭氧化酶。同 时A T P降解
11、为次黄嗦吟， 从而引起一系列自由 基反 应， 产生大量的氧自由基。自由 基作用于生物膜， 引起 脂质过氧化反应， 损伤神经细胞膜及膜的一些重要酶 系统如N a+一K 十 一A T P 酶， 导致细胞水肿及C 犷 + 超 载， 诱导神经细胞损伤， 引起继发性脑损害。 作为神经营养因子之一的碱性成纤维细胞生长因 子， 具有多种生物活性， 可促进的神经元的存活及突起 生长， 对神经有保护作用。在正常组织与细胞中， 碱性 成纤维细胞生长因子主要分布于脑、 肝、 肾、 骨、 软骨等 组织， 碱性成纤维细胞生长因子的受体广泛分布于神 万方数据 中国实用神经疾病杂志2 0 0 7 年1 0 月第 1 0 卷
12、第7 期C h i o e ， e j o u 。 l ofP r . ct i cal N 。 卿 u ， 以: eas e : o c 2 0 0 7 ， V o l . i oN o . 7 3 . 经元、 胶质细胞、 平滑肌细胞、 成纤维细胞和内皮细胞 等多种细胞中. 尤以神经元中含量最为丰富。碱性成 纤维细胞生长因子与其受体结合， 能产生广泛的细胞 效应， 促进细胞增生分化和血管生成， 阻止细胞凋亡， 修复损伤组织l2 胡。 本研究发现通过用碱性成纤维细 胞生长因子治疗脑出血， 3d、 7d 后血肿周围脑组织 S O D活力比生理盐水对照组均明显增高; 而 3d、 7d 血 肿周围脑
13、组织 MD A含量比生理盐水对照组均明显下 降。 但碱性成纤维细胞生长因子对海马组织自 由基的 作用比大脑皮质组织慢， 用碱性成纤维细胞生长因子 治疗脑出血 7d后出血侧海马S O D活力比生理盐水对 照组明显增高( P 0 . 0 5); 而 7d 后出血侧海马MD A 含量下降( 尸 。 . o 5) 。 说明 碱性成纤维细胞生长因子 可明显抑制脑出血后血肿周围脑组织和出血侧海马 M D A表达， 并提高s O D活力， 从而具有神经保护作 用。其主要机制为: 碱性成纤维细胞生长因子是血管 内皮细胞的促有丝分裂原， 能促进血管增生， 引发新生 血管的生成， 同时碱性成纤维细胞生长因子又能扩
14、张 血管， 改善局部脑血流量， 使脑出血后脑血流量增多， 减轻神经细胞缺血缺氧， 减少氧自由 基生成(14 。 参考文献 1 赵性泉， 王拥军 . 脸出血后继发性水肿和神经损害的机制 刀.国 外医 学 脑血管疾病分册， 2 0 0 斗 ， 1 2 ( 3 ) : 5 7 1 5 7 3 (2 夏鹰， 陈衔城， 季扭东， 等.脑出血血肿周围脑组织的糖代谢、 氧 自由基及血脑屏障的变化与脑水肿形成的关系 D. 复旦学报( 医 学版) ， 2 0 0 0 ， 2 9 ( 2 )1 1 9 一1 2 1 3 孟凡超， 类季宇 杨霄鹤， 等，实验性脑出血大鼠脑水肿的动态变 化 J . 中国实用神经疾病杂
15、志. 2 0 0 ， ， ( 3 ) : 7 6 9 4 K i 爪MS ， K i mCJ， J u n gH S ， et吐凡b rob la 吕 t g row t hfa c 的 r 一zi n - d u “昌 d i f f e ren t i a t i 呱 anda 闪Pto 胡 of A， k iot 吟 o u rcel l s J . J P a t h ol， 2 0 0 4 ， 2 0 2 ( 1 ) : 1 0 3 1 0 8 5 N a k a m u . T ， X I G， H u aY， e t al .I n t r a e r e b ra l h e
16、m orrha g ein m 泣 “， m 叼e l c har a ct e r i z a t 互朋 . n d a p p l l门t i on fo r g e n e t i皿ll y m 团1 - fi edm i 沈 J . J C e r e b 砚。 。 d 刊o wMe t a b ， 2 0 0 4 ， 2 4 ( 5 ) : 4 8 7 一4 9 4 6 李红玲， 李玉敏， 杨静自体血注人法和胶原酶注人法诱导脑出 血动物模型的比较 J . 中国临床康复， 2 0 06， 1 。 ( 8): 1 481 50 (7 许东， 文玉军， 张莲香， 等. 胶原酶注人小鼠尾状核
17、建立脑出血模 型 J . 中国实验动物学报， 2 0 0 6 ， 1 4 ( 1 ) : 3 6 一3 9 幻包新民， 舒斯云. 大鼠脑立体定位图谱 M ， 北京 人民卫生出版 社， 1 9 9 1 . 2 8 4 6 9 E 比 d 巴s on J B， P i t t s L H， T s 幻M， e t a l . R a tm id 己ec e r e r a l a 找 e r y 0 民 l u s i o n : e v a l u a L l o n o f t h e m 山 e l a n d d e ve l o 卿e n t o f a n e 帅 fo g ic e
18、xa而n a t i o n 叮S t r o k e ， 1 9 8 6 ， 1 7 ( 3 ) 4 7 2 4 7 6 1 0 H a l l i w e l l B L ， G u t t e t d 罗J M P r e e R 旧 d i c al s i nBio l 叩y a n dMe d i - c i n e M ， o x ford: C l a r edo nP r e 日 3 ， 1 9 9 5 . 2 0 3 2 一2 0 4 6 1 1 C h e r u 匕 i n 泣 A ， P o l i d o 石MC ， 氏曲n occ h i M， et公A n t
19、i o 元 d a n t p r o - n 派 e a n de a r i 丫o u t c o m e云 n日 t rok ep a t le o t s J . S t r o k e ， 2 0 0 0 ， 3 1 ( 1 0 ) : 2 2 9 5 一2 2 9 8 铭 李欣欣， 戴德靓. 碱性成纤维细胞生长因子对脑缺血的保护作 用 J . 药学进展， 2 0 0 3 ， 2 7 ( 1 )2 3 2 6 1 3 P e l u so J J . Ba吕 i c王 i b r o b l a s tg r o wthf a c 切r ( 1 心F G)r e g u l a t
20、i o no f t h e p l a 吕 口 a b ra n e 喇己 u mA T P a s c ( P M C A ) a 日 件rto f a n a n t i 一a Pop t otic m氏h a n i ， mo 王 acti o n J 氏侃h e mP h . m. col ， 2 0 0 3 ， 6 6 ( 8 ) : 1 3 6 3 1 3 6 9 1 今 R o s e n b l 目 t t s ， l ri k u r a K， C ada y C G， e t aL 压s i c 6 b 拍b l . s t g mw t h fac tor d i l
21、a t ” r a t p i a l a rt e nol e s 口 .JC e r e bB I o od F l ow Me tab . 1 9 9 4 ， 1 4 ( 1 ) . 7 0 7 4 ( 收稿 2 0 0 7 一 0 6 一 1 1 修回2 0 0 7 一 0 7 一 2 0 ) 大鼠创伤性脑内出血中红细胞对脑水肿的影响 刘劲芳。 洛阳4 7 1 0 0 3 徐立新”刘运生幻 2 ) 中南大学湘推医院长沙 4 1 。 。 。 5 【 摘要】 目的研究红细厄对创伤性脑内出血( T lcH ) 后脑水肿的影响.方法自由落体打击造成大氛脑外伤， 借助鼠脑立 体定向仪向伤区脑皮质
22、内注射全血 wB)、 溶解红细胞( L R I 犯) 或压积红细胞( P R B C ) ， 制作 T ICH模型。于伤后 1 、 3 、 sd 处死大鼠， 取伤区脑组织浏含水黄及N a+ 、 K + 、 C 扩 +含蚤， 并作病理检查。结果(1) T BI、 wB 和 P R BC 3 组第3d 的脑含水量最高， L R 狱 二 组 第l d 的含水量最高; 4 组间比林， 第ld时L R Bc 含水量最高， 第3d时PRBc 和w B组含水1最高。( 2 ) N a+的变化与含水1的变 化相一致。结论T lcH所形成的脑水肿校单纯脑外伤重。在T lcH中， 红细胞对早期脑水肿的形成无明显作
23、用， 而对迟发性脑水 肿的形成有重要作用。 【 关健词】 创仿性脑内出 血; 脑水钟; 红细胞; 大氛 【 中圈分类号 R 一3 3 文献标识码 AE 文章编号】 1 6 7 3 一 5 1 1 0 ( 2 0 0 7 ) 0 7 一 0 0 0 3 一 0 3 E ff 吮 .ofer ， I h r 倪yte on h ra inede 砒 ofrat ， 1 伍t 刚 m a t l c l n t ra民 代 b 门 I b e m o 口 h a 孚s h Bao 动。 月 9. 工 “ 0 肠月 9 几 “ 1 ， L 址 L 葱 ， eta lD 亡 - P a 八 ， e n t o fNe“ ro s “ 研心 r y . 补巴 F 艺 朽 t A j 了 滋 破 云 a 耐 H 。 户 i ta l 术 口 H e na几 Scie n c e E r v t hro c v t 。 : R a t 脑内出血( i n t ra c e r e b r a l h e m o r r h a g e ， I C H) 主要包括创伤性脑内出血( t r a u mat i c i n t r a c e r e b ra l h e m o r - 万方数据