福氏佐剂的替代物和抗体生产.pdf

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1、!“! 年 # 月 第 $! 卷第 ! 期 中国实验动物学杂志 %9“) 以抗原免疫动物获得抗血清是制备抗体的经典 方法。为了提高免疫效果, 在免疫的时候, 常辅以佐 剂以改变抗原的物理状态而延长其在体内的滞留时 间, 使抗原缓慢释放, 同时非特异性的促进局部吞噬 细胞反应来增强动物的免疫效果。佐剂的类型较 多, 目前常用的还是福氏佐剂 (17?AB C /BDEFAG, 1/) 。它是一种对大多数抗原都有效的佐剂, 但由 于它的一些副作用限制了它在实验动物上的使用。 因此, 福氏佐剂只能在确实需要的情况下 (如使用的 抗原为小分子可溶性抗原或半抗原) 和强佐剂活性 时使用。 !福氏佐剂的组分

2、和使用 1/ 是用矿物油 (石蜡油) 、 乳化剂 (羊毛脂) 和灭 活的分枝杆菌 (结合分枝杆菌或卡介苗) 组成的油包 水乳化佐剂。这三种成分俱全的佐剂称为福氏完全 佐剂 (17?AB C %;H69?G? /BDEFAG, 1%/) , 不含分枝杆 菌的佐剂为福氏不完全佐剂 (17?AB C AI;H69?G? /BDEFAG, 1/) 。石蜡油因不能代谢而存留在注射的 部位, 这就阻碍了抗原降解或快速反应, 起到抗原储 存作用, 使抗原缓慢持续的释放, 不断刺激机体的免 疫系统而产生免疫反应。乳化剂对于水溶性抗原与 油稳定地乳化是必要的。分枝杆菌具有很强的免疫 刺激作用, 可以非特异性的激

3、活免疫系统。1%/ 用 于基础注射, 而 1/ 用于辅助注射以避免分枝杆菌 蛋白引起的过敏反应。1/ 皮下注射或肌内注射可 导致多种副作用, 例如肉芽肿和无菌性脓肿的形成。 腹腔注射引起腹膜炎。由于这些严重的副作用, 1/ 不允许用于人或动物的疫苗接种免疫。 传统的免疫方案, 包括使用福氏佐剂和某些免 疫程序, 已不再被一些国家的权威机构所接受。据 调查, 在荷兰有 J#K的研究人员使用 1%/, 而且, 用 于多克隆抗体的生产方案差异很大。因此, 在 $LL= 年, 荷兰发布了利用动物免疫技术制备多克隆抗体 的生产指南。主要规定了加强免疫注射的次数、 免 疫途径、 注射量和佐剂的使用, 并且

4、支持使用替代佐 剂来替换 1%/。由于 1%/ 给实验动物带来得严重 的副反应, 对它的使用提出了特别的限制, 规定了 (小鼠和大鼠 CI: “H9; 8= 和 =:8?1 等, 分别与不同的抗原混合, 观察动物免疫效果。除 了记录各种替代物对免疫效果的增强能力外, 还特 别强调替代物对动物的致病性、 对动物临床表现和 行为的影响。结果表明, 虽然这些替代物也存在一 定的副作用, 但一般来讲, 毒性比 79 小。每一种佐 剂的替代物都有它自己的使用范围, 并不是对所有 的各种抗原都表现出促进免疫效果的特性。尽管注 射 789 后, 可导致严重的组织病理变化, 但对动物 的行为基本上无影响 (仅见到很小的行为改变) 。而 且对自身免疫性抗原来说, 789 仍是首选的佐剂。 这一点表明: 合理的使用 789, 并不会对动物产生严 重的疼痛和压抑。这一结果对在大多数的指南中所 提到的 “789 对动物产生副作用” 的说法提出了挑 战。通过对 789 和佐剂替代物应用效果的比较研 究, 建议, 为了诱导 6(*%/%/ ;-0%F*, 6%,;0*L (%0 N#N, P-0QBNQG-QN 万方数据

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