红藻氨酸快速点燃大鼠癫痫模型的建立及其海马神经发生.pdf

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1、论著 文章编号: !“#$%“% (, -?5 染色、 62A 免疫组化染色。结果* 大鼠行为学及深部 M-.#N7!,O4 P-,7#/,.:0./ 7V 0J67?J6:06X,P-.Y-,7 Q7?8-/,5,Z97.:Y-.: %“), 0./ 7V 0J67N-757:X, )W08,6/;0./ 7V 9X?-757:X,Z7550:0 7V H02-1-.0,9-62 H-5-/,6X H02-1,5 A.-06?-/X,Z97.:Y-.: %“)(,Z9-.,) * 6%“#3$/#:!“#$%876,5 08-508?X 6,/ ;7205E )$,+0 ,. 08-508/

2、-1 V71J?E 90 N09,-76 7V /90 6,/? R,? 60176202 NX , -207 1,;06,E -?5 ,.2 62A ?/,-.-.:E .$-/0) 。)?( 公司产品, 用 生理盐水配成 “$ : !) !/ 溶液, 用前 1 5 新鲜配制; 立体定向仪 为江湾“型 A 动物立体定向仪; 深部电极描记采用由成都仪器 厂生产的 BCD1:“E- 型多道生理信号采集处理系统记录并分 析。4,溴脱氧尿核苷 (4,FG?G,1 ,H+GI0*HJ+,EHK) 及小鼠 抗 EHK 抗体均为 %)?( 公司产品。%=EA 免疫组化试剂盒、 -=E 试剂盒为武汉博士德公

3、司产品。 # #组织切片制作: EHK 溶于无菌生理盐水中, 终浓度为 !“ ?) ?/。大鼠处死前 1 H 进行腹腔注射, !“ ?) L), 1 次 H、 间 隔 : 5, 注射 1 H 共 : 次, 最后 ! 次 EHK 注射后 1: 5 处死动物。 常规麻醉、 灌注、 固定、 断头取脑、 冰冻切片, 片厚 :“ !?。待 EHK 免疫组化染色用。 !$ 1# 方法 !$1$ !# 建立 678 模型# # 大鼠麻醉后, 固定在立体定向仪上, 选择右侧侧脑室为靶点, 具体定位参考包新民等 !编著的 大 鼠脑立体定位图谱 , 置入不锈钢导管 (外径 “$ M ?, 内径 “$ : ?) ,

4、 常规肌注 2 H 青霉素, 以牙托粉 N 4“1 胶固定于颅骨上, 术后 M H 开始试验。进行脑内注射时, 将清醒大鼠固定于敞式 装置上, 在埋植的导管内插入注射内管, 其下端超出套管 “$ 4 ?, 另一端经塑料管与微量进样器连接, 将 J。每天 ! 次, 连续 4 H, 每次给药均在 ;: “ 3!“: “ 进行。停止给药后 ! 周, 再以 J+ PL0 F/*+) , 核对给药 部位。 !$ 1$ 1# 脑电描记#在埋植不锈钢导管的同时, 双侧置入深 部电极针, 其靶点: 海马 A=2区、 杏仁核内的中心点、 前额叶皮 质。通过计算机对脑电活动和大鼠行为学表现连续记录 1 5。 注药

5、后 D、 !1 5、 ! H、 !、 1、 2、 :、 D、 ;、 !1 周, 每次抓取 1 只大鼠, 对 海马、 杏仁核、 前额叶皮质进行脑电描记。在对照组以相同的 方法进行脑电描记。电极位置在实验后均经组织学证实无误。 !$ 1$ 2# 行为学观察#视频摄像机监视大鼠行为学变化, 根 据 B(QJ+ 分级 1, 大鼠 678 发作分为 D 级, 即 “、 “、 #、 $、 %、 ?J 内偶尔出现面部肌肉和前肢的抽动, 以注药对侧肢体为主, 向左侧翻滚转圈。!“ 3!2 ?J 内面部肌肉抽搐增多时间延长, 有湿狗样抖动等动作。! 3 D 5 内有眨眼、 刻板点头、 立须、 咀 嚼、 流涎、

6、竖尾巴等自动症出现, 前肢抽动由单侧为主发展到双 侧, 并且还有全身肌阵挛, 最终发展为全身性强直,阵挛性发 作, 大、 小便失禁, 随后出现站立跌倒等, 约 4 3 !“ ?J 发作 ! 次, 每次持续 2“ P 至 1 ?J。D 3 !1 5 内上述发作次数减少, 程 度减轻, 主要为双侧前肢和面部肌肉抽搐、 咀嚼、 流涎。!1 3 1: 5 内, 每 ! 31 小时可观察到单侧肢体和面部肌肉抽搐或点 头等动作, 每次发作数秒。第 D 天开始, 停止给药, 每天仍可观 察到流涎、 身体旋转、 站立跌倒、 间断性地四肢强直抽搐, 每次 持续; P至 1 ?J。以后每天能观察到 ! 3 1 次

7、的肢体和面部肌 肉抽搐, 点头, 双下肢的站立或跌倒等发作类型。停止给药后 ! 周, 再用 J, 发作均可自行终止。对照组大鼠无痫性发作。 # # J+ 分级 # # 实验组大鼠中 只, %级 !1 只, $级 1 只, #级 1 只; 对照组大鼠均为 “ 级。 1$ 2# 动物脑电活动改变 1$ 2$ !# 对照组大鼠的脑电活动#对照组大鼠额叶皮质、 海 马、 杏仁核脑电图显示频率为 D 3 !“ XY 的以 节律为主的低 幅 (小于 1“ !Z) 脑电波, 额叶皮质波幅 海马波幅 杏仁核 的波幅, 没有描记出癫痫波。 1$ 2$ 1# 实验组大鼠的脑电活动# # 注射 J 后, 动物 出现

8、凝视时, 注药侧海马额叶皮质杏仁核描记出单个的小尖 2M;# # 波, 对侧海马额叶皮质杏仁核叶也描记出单个的小尖波, 波幅 比注药侧低。!“ #$% 后, 注药侧的海马额叶皮质杏仁核描记出 单个散在单个棘波。 “!) ; 对侧海马 ; 9 ?,A 3 E$ 3FGHIJ=A HK L :=1 LNG;A O01G;A0HIPDNN ? $ IIND 9N, !., )R ()) : !-) S!.R$ )THGK U %,3D:LG +,“# $%$ VHGQJA0ANH=:=; 0:A P:AJ=A ? $ /0:N, 8“8, .), (8) : -Y S.7$ ,Z0 9 $ +=GN

9、 HK AP IINF, !.-., !, ()) : 8,R S8Y-$ R*:A=1H: 3,6:AP0= ( T$ KK;A HK APHIPDGG :=1 A0M APHO=:J XP= B= 1Q0M1 NA:AQN IIA1 PG HK PQJ:= P0HNIN , *HQN L O0:G P1 JH1G KH0 IIND 0N:0;P ? $ IIM NF , *HF:GF (, “# $%$ KK;AN HK =Q0HA0:=NJ0 :BH=G;A0H;H0A 0:A L: JH1G HK AJIH0:G GHO IIND :=1 AP JH1QG:AH0D :;AN, 8“R, !“R! (! S8) : !8) S!)7$ -刘宗惠$ 癫痫外科治疗进展 ? $ 中华神经外科杂志,8“,!7 (增刊) : 7Y SY“$ .安# 宁,杨#辉,张可成,等$ 颞叶癫!的手术治疗效果分析 ? $ 第三军医大学学报, 8“), 8R (8“) : !-8, S!-87$ !“AN HK KH;:G ;A JHQN PIIH;:JIQN & (&#)* :=1 “+ (&(* ? $ ? WPDNHG, 8“R, R7. (WA )) : -) S-,Y$ (编辑# 汪勤俭) RY-# #

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