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1、第掰卷筹7 期 2 0 0 6 年7 月 纺织学摄 J o u m a lo f1 b x t i l eR e s e a r c h V 蠢。2 7嚣o 7 J u l 2 0 0 6 文章编号：0 2 5 3 9 7 2 1 ( 2 0 0 6 ) 0 7 0 1 0 4 0 5 纤维载体固定化酶的制备及其应用 聂华丽，朱利民 ( 东华大学生物科学与技术研究所，上海2 0 0 0 5 1 ) 摘要介绍了以纤维为载体固定化酶的制备技术，包括传统固定化技术( 物理吸附法、包理法、离子结合法和共 价缩合法) 和新型的固定化技术( 光辐射法和生物分子法) ，分秽亍了以纤维为载体的酶固宠化技术在纺
2、织领域的应 用及存在的问题，展望了以纤维为载体的酶固定化技术的发展前景。 关键词纤维；酶固定化；纺织；应用 中凰分类号：鹞1 0 1 4文献椽识码：A 薹睫b e ra ss 珏阳o n 硒r 主瓣趣o b 邋z e de 程z y 越ea 魏di 据a p 挈滥c a 垂i 鳃 N l 嚣H u a l i 。Z 至差UH 一戚n ( 加m m e 矿脐D 妇i c o Z 船据聊麟& 曰如泖_ I l 锄，踟嘶抛国梆渺，嘞戚 2 0 0 0 5 l ，蕊批) A b s t 糟c tn ep r e p a r a t i o n“i m m o b i I i z e de n 嚣y m
3、 eo n舶e ri sr e v i e w e d 强et e c h n i q u e so f e n z y m e i 嗍o b i l i z 贰i o ni n c l u d i n gt h e 眺d i t i 锄a lm e 出o d s ：a d s o I p t i o H ，e n 黻p n l e n t ，e o v 烈e n b o n d i n ga n de m s s l i 珏k i n g ， a n dt h el a t e s to n e s ： p h o t o c h e r n j c a l m e t h o d s a
4、n db i o m i m e t i cm o l e c u l a r r e c o g n i t i o n a r ei n t m d u c e d I t s a p p l i c a 疽o n 泌e x t i l e ，e x i s 疽n gp f o b 王e m s ， 绷df u t 娃r e p r 。s p 卵o ft h e i 瑚m 如i l i z e de n z y m et e c h n 撰o g y 批 d i s c u s s e d K e y 驿o r l s嚣b e r ；e n z y f n e i l 毪￥撼b 鑫i z
5、a i o n ；t e x t i l e ；a p p l i e 毪l i o n 酶催亿反应箕有燕物专一性、徨仡离效性、反应 条件温和等优点，符合环保的要求，因而受到研究人 员的高发重视。酶是一种妇氨基酸组成的蛋白质， 其高级结构对环境十分敏感，温度、p H 值、有机溶 剂、金属离子等因素均有可能使酶丧失生物活力。 即使在酶反应的最适条件下，酶也会失活，随着反应 时间的延长，反应速度会逐渐下降，反应后不能回 收，只裁采用分搦法进行生产，这些闽题对予现幸弋化 工业来说，酶还不是一种理想的催化剂。从2 0 世纪 6 0 年代起，研究人员抱解决酶催化问题作为重要的 研究对象，认为把酶固定在适
6、合的载体上就有可能 解决这救问题，从而固定化酶的研究迅速发展起 来。尽管固定纯酶露连续生产、提高产量、降羝成 本，但是工业巾广泛应用固定化酶还是很少的，原因 是函定讹酶的成本幕贵，盈将其应用予规模讫的工 业化生产非常困难心o ，因此发展一种便宜的、能工业 讫生产酶载体材料楚菲常青必要的。 与其它载体相比，以纤维为载体的固定化酶具 有如下优势瞪1 ：1 ) 纾维能敝多种形态满足不同需求， 包括束状、短丝、长丝、纱线、织物( 机织、针织、非织 造) ；2 ) E l j 于纤维的长径比大，因而具有较大的表面 积，剃于催纯反应的进行；3 ) 在中空纤维中，其孔经 大小的变化还可以控制反应速率；4 )
7、 具有良好的机 械强力糯稳定性；5 ) 和鬏粮状载体裙魄，更容易从反 应媒介中分离出来；6 ) 纤维已工业化生产，价格便 宜，易于取得，更利于固定化酶的工业化生产。因 此，本文对以纾维为载体的酶固定化技术及其在纺 织领域的应用加以综述。 1制备技术 酶在纤维上的固定化有很多方法，但对任何酶 毅穰窭期：2 5 一1 0 2 5修鏊日期：2 麟一一O l 作衡简介：聂华丽( 1 9 7 8 一) ，女，博士生。主要研究方向为生物与酶化学。 万方数据 PDF Watermark Remover DEMO : Purchase from www.PDFWatermarkR to remove the
8、watermark 第7 襄聂华嚣等：纾维载体固定纯酶憋裁备及萁应蔫【重0 5 】 都适用的方法是没有的，酶的固定化方法通常按照 用于结合的化学反应的类型进行分类。 1 1 传统的霄定忧技术 1 1 1 非熬价结合法 薹1 1 。l 物理吸融法物理吸附法是通过物理吸 附将酶固定于纤维载体的一种固定化方法H 曲J 。物 理吸附法具有酶活性中心不易被破坏和酶高级结构 变化少的傀点，因而酶活力损失较少。若能找到适 当静载落，这是很好酶方法。僮由予酶与载豁糨互 作用弱，酶易脱落等缺点，影响循环使用。 1 1 1 2包埋法包蠼法是将酶包埋于纤维中以 达到霞定像戆曩的，尤其适用于中空纾维H 引。包理 法一
9、般不需要与酶蛋露的氨基酸残基进行结合反 应，很少改变酶的高级结构，酶活回收率较高，但是 在包埋时发生化学聚合反应，酶容易失活，必须巧妙 设计反应条俸，使之亿学反应爵不至予破坏酶的活 性部位和活性中心。由于只有小分子可以通过纤维 扩散，并且这种扩散阻力还会导致网定化酶动力学 行先酶改变，扶丽降低酶活力，因戴，包理法哭逶震 于小分子底物和产物的酶，对于那些作用于大分子 底物和产物的酶是不适合的。 1 1 1 3 离子结合法离子结合法是酶通过离子 键结合予舆骞离子交换基的纤维载体酶匿定纯方 法n 1 1 2 。离子交换纤维依靠电性排斥或体积排斥作 用，既可以提高固定化酶的稳定性，又能有效地消除 其它
10、物质的予拢。离子缝合法的撵佟筒单，处理条 件温和，酶的高级结构和活性中心的氨基酸残基不 易被破坏，能得到酶活回收率较高的固定化酶。但 是载体和酶的结合力比较弱，容易受缓冲液种类瓢 p 疆值熬影响，在离子强度高酶条件下反应霹，酶往 往会从载体上脱落。 1 1 2 化学结合法 差。l 。2 。l 菸侩结合法共徐缝合法因酶分子与载 体之闻的共价结合而呈现良好的稳定性及重复使用 性，是目前最受关注的一类酶固定化方法。归纳起 来有两类，一是将载体的有关基团活化，然后和酶中 与催讫活缝无关豹基霾反应。另一种是在载豁上接 上一个双功能试剂，然后将酶偶联上去。可与载体 共价结合的酶的功能团有理氨基或e ，氨基
11、，a 、D 或7 位的羧基、辕基、羟基、眯唑基、酚基等。参与共份结 合的氨基酸残基不应是酶催化活链所必需的，否则 会造成固定后酶活力的宪全丧失。 共价结合法与离子结合法和物理吸附法相比， 其优点是酶与载体结合牢固，一般不会因底物浓度 高或存在盐类等原因而轻易脱落。但是该方法反应 条件苛刻，操俸复杂，两且赉予采震了比较激烈的反 应条件，会引起酶蛋白高级结构的变化，破坏部分活 性中心，因此往往不能得到活力高的固定化酶，酶活 回收率一般在3 9 左右，甚至疯物的专一性等酶的 性旗也会发生变化。 常见的共价结合法有以下几种。 1 ) 8 硫酸酝乙砜基苯胺( S E s A ) 法。在碱性条 锌下与叠一
12、硫酸涨乙砜基苯胺( S E s 矗) 反应，生成薅氨 基苯磺酰乙基纤维素，然后重氮化，与酶偶联u3 “1 。 此法的优点是在酶分子与载体之间间隔了对氨基苯 磺酰乙基( A B s 嚣) ，这样偶联在载露上的酶蛋自分子 就有较大的摆动自由度，可以减少大分子载体造成 的空间位阻，提供固定化酶的活力。 2 ) 活化酯法。含羟基的载体可先用对甲苯磺 醮氯活纯，然着缀容易与酶的巯基或者懿基反应拉o 。 3 ) 芳香烃化反应。含凝基的载体在碱性条件 下和均三氯三嗪等反应，在引入活泼的卤素后能直 接与酶的氨基、酚羟基或巯基等反应强o 。 4 ) 缩合反应。这是利用羰二亚胺的活化作用， 使氨基和羧基直接偶联形
13、成肽键的反应，适用于带 羧基和带氨基的载体n J 。在弱酸条件( p H 值为4 7 5 5 ) 下，羰二强胺与羧基反藏生成投活泼的酰基异 脲衍生物，可立即与氨基缩合成酰胺键。 5 ) 重氮法。带有芳香胺基的载体，先用亚硝酸 镳处理成重氮盐褥生物，然魅在湿程的条件下秘酶 分子上相应的基阂如酚羟基、咪唑基或胺基进行偶 联，得到固定化酶“。 6 ) 过碘酸氧化法。纤维素葡聚糖经过碘酸氧 毒 ：凌餍二季基砜氧纯裂解葡萄糖巧，产燕二醛高聚 物，每个葡萄糖分子含2 个醛基，然后和酶偶 A 1 6 ，1 7 口 。 其它共价结合法还有演化鬣法、环氧他法、叠氮 法翻酰氯酰化法等。 1 1 2 2 载体交联法
14、载体交联法是利用双功能 或多功能试剂在酶分子与载体闻进行交联反应，以 共徐键裁备霞定纯酶的方浚狰湛搪。引。参与交联反 应的酶蛋白的官能团有N 末端的a 氨基、赖氨酸的 e 氨撼，酪氨酸的酚基、半胱氨酸的巯基和组氨酸的 咪唑基等。最常用的交联剂是戊二醛，绩合过程 觅图l 。交联法反应条件比较激烈，固定化的酶活回 收率较低，但适当降低交联剂浓度和缩短反应时间 有利予固定化酶比活力的提高。 万方数据 PDF Watermark Remover DEMO : Purchase from www.PDFWatermarkR to remove the watermark 【1 0 6 】 纺织学报第2
15、7 卷 广C l = C C H ，一C 瓣，一镶0 矗一。i 。 N H 臣妇 图l 戊二醛交联法 1 2 新型的固定化技术 1 2 1 光辐射等物理技术 光壤射等物理技术应用予酶固定化，大大捉进 了这一领域的发展。光辐射技术在聚合物表面固定 生物活性物质的研究比较活跃。光弓l 发聚合常被藤 于制备固定化酶的纤维或对纤维材料进行改性，然 后用于酶固定化的载体，文献 2 0 利用电子辐射在 聚乙燎中空终维上接枝交换基团2 一羟乙基骏基 ( 一N H C ，地O H ) 和苯基，然后用此活化的载体固定 & 一淀粉酶，得到了较高的酶固定量，水解淀粉的速率 分别是2 。5 、4 2k ( h L )
16、 。文献 2 1 利用紫外辐射 法将过氧化氢酶固定于聚酯纤维和锦纶6 6 纤维，最 大静酶圈定量分裂为3 2 。2 、2 2 。O 唰g ，酶活保持率 分别为1 1 3 、1 8 3 。文献 1 1 利用电子辐射在 中空纤维上接棱离子交换基团二乙胺基，然后通过 离子吸附固定抗坏血酸维生素C 氧化酶。这种方 法操作简单，反应迅速，节约成本，但是反应在光的 辐射下，戆容易失活。 1 2 2 利用生物分予实现酶的固定 乖l 耀生物分子a v 菇n 和狡o t i n 的亲秘性，用 b i o i n 修饰载体和酶，再利用a v i d j n 将载体和酶连接 起来，此法与载体交联法原理相似，但是处理
17、条件更 滠稳，减少了化学交联剂对酶活麴不利影响，麓褥到 酶活回收率高、结合牢固的固定化酶睢3 | 。例如 M A m o u n a s 裁帮a v 通n 每i o t i n 技术在纤维素织物上固 定了脲酶，与传统的共价结合法相比，酶活力提高了 近1 0 倍，酶的稳定性也显著提高，延长了近 2 d 2 3 埘 。但是，这辫方法愿材料毙较昂贵。 2 存在问题及采取策略 2 1 存在问题 酶在固定化过程中，最大的问题是酶的流失、失 活等问题，从而限制了固定亿酶的应孺效率，现就存 在的阔题具体分析。 1 ) 酶固定化的过程中，失涌的酶量较大。一般 认巍，酶活性的失去是出予酶蛋自通过几种氨基酸 残基
18、在纤维上的附着造成的，由于酶疆白多点附着 在载俸上，弓| 越了固定诧酶蛋自无彦定向释结构变 形的增加，从而使酶失活。2 ) 有些酶与纤维的相容 性很差而中毒失活，因为对不同类型的酶，应注意纤 维材料的选择。3 ) 围定化酶过程中，可能存在纤维 载体的污染，如溶剂、产物等的影响，从而造成酶的 失活。 2 。2 采取策略 解决上述问题可采取如下策略：1 ) 采用新载体。 研镧新型纤维材料，以提高纤维材料与酶分子之阚 的相容性，避免中毒失活。2 ) 采用新方法。一些新 技术如磁性技术】、生物大分子技术及辐射技术等 不断运耀予固定化酶的制备。另外，天然酶分子易 受外界环境的影响而失滔，用高分子物质对酶
19、分子 进行登要的修饰改链，哥以增魏酶与绎维材料之阅 的生物相容性，增加酶对有机溶剂的耐受性和环境 稳定性。经研究发现，木瓜蛋蠡酶固定予纾维材料 后，贮藏稳定性提高，但耐洗涤性很差，为改善其洗 涤性能，如果将木瓜蛋白酶进行化学修饰，其耐化学 试剂性翻洗涤性会有所提高，对本瓜蛋自酶的化学 修饰已展开研究，有望在这方面取得突破性进展，这 将为并发功畿牲织物提 魏薪思路。3 ) 采震新祝理。 酶的固定化技术经过几十年的研究已经发展成为酶 定向固定亿毅术隧矧，研究表明，已有几条途径使酶 黉自能够以有序的方式附着在载体表面，从而避免 了酶蛋白的多点附着引起的无序定向和结构变形， 实瑰了酶的定向固定化，使酶
20、活性损失降低到最小 程度。 3 在纺织领域的应用 环保是酶在纺织应用中的鲜明特色，由于具有 较好的专一性、温和性和高效性等生物催化特性，酶 殴广泛蕴赐予纺织工业2 8 q 川，从前处理到最后的织 一 曲 峭+ 卤 万方数据 PDF Watermark Remover DEMO : Purchase from www.PDFWatermarkR to remove the watermark 第7 期聂华丽等：纤维载体固定化酶的制备及其应用 【1 0 7 】 物整理，几乎每一个湿加工过程中，酶都可以发挥其 独特的作用。而以纤维材料为载体的固定化酶，不 仅为功能纺织品3 的开发提供了新的思路，并且
21、结 合到纺织品的多孔性和其独特的物理机械性能，为 开发生物活性材料提供了一种思路，如生物酶过滤 膜、生物反应袋、生物反应器等。 但是，目前在纺织工业中采用的酶处理方法也 存在以下缺点：1 ) 酶的稳定性差，容易失活；2 ) 酶催 化反应后，与反应体系混在一起，难于回收，不利于 连续化生产，产物分离纯化困难，产品成本较高。但 必须要注意的是，酶固定化后，酶成为固定相，处理 对象必须存在于流动相之中，但是纤维及其纤维制 品在湿加工过程中属于固定相，对这点来说，固定化 酶对于纺织加工中的某些过程是不利的。然而，在 纺织工艺中有着诸多的流动处理对象，如双氧水分 解处理。“，纺织加工的废液处理等。在环境
22、保护 日益为人们所重视的今天，纺织废水处理的问题越 来越迫切，而固定化酶在这方面将具有独特的优势。 另外，将有特殊功能的酶固定在织物表面，可赋予织 物特殊功能，也给功能纺织品的开发提供了新的思 路。文献 3 2 把脂肪酶固定于棉织物上，以期产生 功能性的织物，但是在洗涤一次后，酶的活力全部丧 失。在非衣料领域用酶固定化的织物是有应用前景 的，如文献 3 3 将有机磷的水解酶固定于棉织物上， 开发了一种医疗用织物，可制成绷带、棉签、医用纱 布和对伤口有疗效功能的服装。 4结束语 综上所述，以纤维为载体的酶固定化技术及应 用研究已得到长足进展，但仍有很大的发展潜力。 对现有纤维材料改性，开发新的纤
23、维材料，采用新的 固定化技术及对新的理论探讨等将成为这一领域的 研究方向。尤其是生物技术在这一领域的应用，将 受到越来越多的重视。随着酶的固定化技术的发 展，其应用前景将十分广阔。黼 参考文献： 1 刘春叶，王亚明酶的固定化及化学修饰 J 云南化 工，2 0 0 2 ，2 9 ( 5 ) ：2 9 3 1 2 N e d i mA ，s h a n 甜i a nY I m m o b i l i z a t i o no fa s p e r 舀l l u so r y z a e p g a l a c t o s i d a s eo nt o s y l a t e dc o t t o
24、 nc l o t h J E n 2 y m ea n d M i c m b i a lT e c h n o l o g y ，2 0 0 2 ，3 l ：3 7 1 3 8 3 3 c o o k eTF F i b e r sa ss u p p o r t sf o rc a t a l y s t s ：as u r v e yo ft l l e l i t e r a t u r e J J o u m a lo fP o l y m e rE n g i n e e r i n g ，1 9 9 0 ，9 ( 1 ) ：l 一2 2 H o n 昏a oD ，Z h i k
25、 a n gX ，Z h e n g w e iD ，e ta 1 I m m o b i l i z a t i o n o fc a r l d i a d am g o s al i p a s eo np o l y p r o p y l e n em i c r o f i l t r 8 t i o n m e m b r a n em o d i f i e db yg l y c o p o l y m e r h y d m l u s i so fo l i v eo i l i nb i p h a s i cb i o r e a c t o r lJJ E n z
26、y m ea n d M i c r o b i a l T e c h n o l o g y ，2 0 0 5 ，3 6 ：9 9 6 1 1 0 2 T a k o u aD ，C y n t h i aM ，L i o u b o vK ，e ta 1 S t m c t u r ef i b e r s u p p o r t s f o r g a sp h a s eb i o c a t a l y s i s 【J E n z y m e a n d M i c m b i a lT e c h n o l o g y ，2 0 0 5 ，3 6 ：9 1 1 9 1 6 M
27、 o e d e rM ，M a n i nC ，K o e l l e rG D e g r a d a t i o n o f h y d r o x y l a t e dc o m p o u n d su s i n g l a c c a s ea n dh o r s e r a d i s h p e m x i d a s ei m m o b i l i z e do nm i c r o p o r o u sp o l y p m p y l e n eh o l l o w 矗b e rm e m b m n e s J J o u m a lo fM e m b r
28、 a n es c i e n c e ，2 0 0 4 ， 2 4 5 ：1 8 3 1 9 0 R e n a t oSF r e i r e N e l s o nD u r a n L a u mTK u b o t a E f e c t so f f u n g a ll a c c a s ei m m o b i z a t i o np m c e d u r e sf o rt h ed e v e l o p m e n t o fab i o s e n s o rf o rp h e n o lc o m p o u n d s J T a l a n t a ，2
29、0 0 l ，5 4 ： 6 8 1 6 8 6 0 p w i sK ，K n i t t e lD ，S c h 0 1 l m e y e rE ，e ta 1 I m m o b i l i z a t i o n o fc a t a l a s eo nt e x t i l ec a r r i e rm a t e r i a l s J A A T C CR e v i e w ， 2 0 0 4 ，( 1 2 ) ：2 5 2 8 D e yG ，N a g p a lV ，B a n e r j e eR I m m o b i l i z a t i o no fa A
30、 m y l a s e f 而mB a c i u u sc i r c u l a n sG R S3 1 3o nc o c o u n t 仙e r J A p p l i e dB i o c h e m i s t r ya n dB i o t e c h n o l o g y ，2 0 0 2 ，( 1 2 ) ：3 0 3 3 1 4 W e n t e nI G ， W i d i a s a IN E n z y m a t i ch o l l o w肪e r m e m b r a n eb i o r e a c t o rf o r p e n i c m i
31、nh y d m l y s i s J D e s a l i n a t i o n ，2 0 0 2 1 4 9 ：2 7 9 2 8 5 T o m o m iK ，K y o i c h iS ，K a z u y u k iS ，e ta 1 I m m o b i l i z a t i o no f a s c o r b i ca c i do x y d a s ei nm u l t i l a y e r so n t op o r o u sh o l l o w 一曲e r m e m b r a n e J J o u m a lo fM e m b r a n
32、es c i e n c e ，2 0 0 1 ，1 9 l ： 2 0 7 2 1 3 S h i n g oE ， Y a s u h i mM P r o t e a s ei m m o b i l i z a t i o no nc o p o l y ( e t h y l e n e a c r y l i ca c i d )6 b r e J J o u m a lo fA p p l i e d P 0 l y m e rS c i e n c e ，1 9 9 0 ，4 l ( 1 1 1 2 ) ：2 7 5 3 2 7 6 7 彭立风，刘新喜棉织物上s E s A 活
33、化法固定化脂肪 酶工艺的研究 J 食品工业科技，2 0 0 1 ，2 2 ( 2 ) ：3 0 3 2 郭海学纤维素载体固定化糖化酶的研究 J 扬州 教育学院学报，2 0 0 1 ，1 9 ( 3 ) ：1 1 一1 3 刘海燕，杨更亮，孙素芳，等一种简化的重氮化法制 备固定化酶的载体合成方法 J 离子交换与吸附， 2 0 0 3 ，1 8 ( 3 ) ：2 0 5 2 1 0 刘新喜，彭立凤棉纤维膜上高碘酸钠法固定脂肪酶 J 河北师范大学学报( 自然科学版) ，2 0 0 1 ，2 5 ( 1 ) ：8 0 8 2 1 0 1 彭立凤，谭天伟脂肪酶膜固定化方法的研究 J 中 国油脂，2 0
34、0 0 ，2 5 ( 1 ) ：5 8 6 1 P e n gY ，Z h i k a n gX ，Z h e n g a n gW ，e ta 1 C o m p a r i s o n o f h y d r o l y t i ca c t i v i t i e si na q u e o u sa n do r g a n i cm e d i af b rl i p a s e s i m m o b i l i z e dp o l y ( a c r y l o n i t r i l e - c o m a l e i ca c i d ) u l t r a 正l t r
35、a t i o n 1 J 1Jjj 1 J 1 j 4 5 6 7 一 一8一 一9一 们 r = _ 幻 列 钔 列 鲥 “ 胡 r L r L r L r L r L r L r L r L r L r|-rL r L r L r I L r L 万方数据 PDF Watermark Remover DEMO : Purchase from www.PDFWatermarkR to remove the watermark 【1 0 8 】纺织学报第2 7 卷 h o l l o w 鑫b e r 拄艳掰b r 锄e J 。如u m a lo fM o I 征a r a 魄l y s 呈
36、s ， 2 5 ，3 2 ：1 1 5 一1 2 1 1 9 w e iG ，E 1 iR M o d i f i e d8 l a s sf i b e rm e n 吐) r a l n ea n di t s a p p l i c a t i o nt om e m b r 锄e 碰n i t yc b r o m a t o g r a p h y J J o u r n a l 醴燃e 翻_ b r 3 珏eS c i e n c e ，2 3 ，2 1 5 ：1 4 l 1 5 5 。 2 0 s u g u r aM i u m ，N o b o mK u b o t a ，H
37、 i d e t a k 8 H i g h - t I I m u 曲p u t h y d r o l y s i so fs t a hd u r i n gp e n n e a t i o n a c r o s sa 吨m y l a s e _ i m 瓣。槭z e dp o 姻u sb o l l o w 一鑫k r 翔e m b r n e s j 。R 旋i a 如n P h y s i e sa n dC h e m i s t l y ，2 0 0 2 ，6 3 ：1 4 3 一1 4 9 。 2 1 0 p w i sK ，K n i t t e lD ，B a h
38、n e r sT ，e ta 1 P h o t o c h e m i c a l e n 嚣y m ei m m o b i l i z 8 t i o no nl e x d l ec a r r i e rm a t e d a l sIJ E n 搿n e r i n g8 羽“f eS e i e n c e s ，2 5 ，5 1 ) ：6 3 6 7 。 2 2 B h a r d w a jA ，L e eJ ，G l a u n e rK ， e ta 1 B i o f u n c t i n 砒 m e m _ b r a n e s ：a nE P Rs t u d
39、yo fa c t i v es i t es t n l c t u r ea n d s 溺疆n ，。f | 撼p i a n 魏。蛰一e o v a l e n 娃yi l n l n o b i l i 嚣e do n 斑es 珏娃a e e o fm o d i f i e dp o l y ( e t h e r ) s u 渤n em e m b r a n e st h m u 曲t h e a v i d i n _ b i o t i nl i n k a 只e J J o u r n a lo fM e m b r a n es c i e n c e ， 1 9 9 6
40、 ，1 1 9 ：2 4 l 一2 5 2 。 2 3 】 A m o u n a sM ，馘a g n eV ，l n n o o e 嫩C ，e t 蠢E l a b o a t i o n8 n d c h e m i c a Jr e a c t i v i t yo f e n 硝m em o d i f i e d i o n e x c h a n g i n g t e x t i l e s J E 懈y m ea n dM i c r o b i a lT e c h n o l o g y ，2 0 0 2 ，3 l ： 1 7 | 一1 7 8 2 4 M a g n
41、eV ，A m o u n a sM ，I n n o c e n tc ，e ta 1 E n z y m et e x t i l e f o rr e m o v a lo fu r e aw i t hc o u p l i n gp m c e s s ：e m 节m a t i cr e a c t i o n a n de k c 扛D d i 矗l y 8 i s 【j D e d a l i l 哇i o n ，2 0 0 2 ，l - 4 4 ：1 6 3 一l 聪 2 5 辩a nL ，w e 主w ，“n 垂iC ，e t 越骶1 ep r e p a r a f i
42、o na n d c a t a l y t i c a l l ya c t i v ec h 锄c t e r i z 砒i o no fp a p a i ni m m o b i l i z e do n m a g n e t i cc o m p o s i t em i e I D s p h e r e s J E n 彤H 地a n dM i c r o b i 昱l 弱】 2 7 2 8 2 9 3 0 3 1 3 2 】 3 3 】 T e e l l n o l o g y ，2 0 0 4 ，3 5 ：1 5 2 l 。 V i 豳w 勰半潦S ，确a 髓撞c | l
43、 a r y y aD ，瓣黼n gW ，蠛雒舅l e d i r e c t e da n dr a n d o me n z y m ei m m o b i l i z a t i o no nf u n c t i o n a ! I i z e dm e m b r a n e s ：b n e i cs t l l d i e sa n dm o d e l s J J o u m a l 蠢艇e | 鞋赫鞠d i 拍e e ，| 9 9 5 ，l 髓：l 一6 v i s h w a n a t hS ，W a n gJ ，B a c h 8 sLG ，e ta 1 S i t
44、e d i r e c t e d a n dm n d o mi m m o b i l i z a t i o no fs u b t i l i s i no n h n c t i o n a l i z e d m e m l 珊n e s ：a e t i v 丑yd e l e l 挂l i 珏a 虹o ni n b 单l e o u sa 癜。强8 弱i e m e d i a J 】B i o t e c h n o lB i o e n g ，1 9 9 8 ，6 0 ：6 0 8 6 1 6 O n a rN ， S a r i u 与u kM U s eo f e n
45、z y m e s a H dc h i t o s a n b i o p o l y m e fi nw ld y e i n g j H b 糟s & T e x m e si nE a s 淹m E u r o p e ，2 5 ，1 3 ( 1 ) ：5 4 s i n g I lM ，G o e lA E 托c to fe n z y m e s0 nt h ed y e i n ga n d c o l o u r1 6 臻s n e s 8p p e r t i e so fw o o lf a b r i e J 。 C o 王o u r a g e ， 2 0 睡，5 l
46、( 6 ) ：1 9 2 3 M i s h mA ，e 南e lA E n z y m eb a s e ds h r i n kp r o o f i n go fb l e n d e d w o o u e nf a b r i c J J o u r n a lo ft h e7 r e x t i l eA s s o c i a t i o n ，2 0 0 3 ， g ( 3 ) ：l 钟一l ， E l S a y e dH ，H 锄e dR ，K a n t o u c hA ，e ta 】E n z y m e - b a s e d f e l t p m 雒n go
47、fw o o l J A A l cR e v i e w ，2 0 0 2 ，( 1 ) ：2 5 2 8 。 何中琴，王雪良脂肪酶在棉织物上的固定化 J 】印 染译丛，2 0 0 0 ，( 8 ) ：5 7 5 8 G 矗m s l e yJK ，习F 曲e g 娃mPS ，J 8 m e sRW ，e a 1 An o ￥e l e n z y m 昏b a s e dm e 出o df o rt | l ew o u r 畦一s u r f 矗c er e m o v a la n d d e c o n t a m i n a t i o no f o 堪a I l o p h o s p h o r u s n e ea 舻n t s J A m 商e a nC h e m i c 8 lS o c i 晰，2 0 0 l ，7 9 2 ：3 5 4 9 万方数据 PDF Watermark Remover DEMO : Purchase from www.PDFWatermarkR to remove the watermark