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1、2 6 3 2 现代中西医结合杂志M ( ) d e mJ 0 u r n a lo fI n t e g r a t e dT r a d i t i o n a lC h i n e s ea n dW e S t e mM e d i c i n e2 0 0 9A u g ，1 8 ( 2 2 ) 结肠灵汤对肠易激综合征大鼠肠组织及 脊髓后角脑肠肽表达的影响 彭蔚，潘锦瑶，马军，郑德俊 ( 广州医学院附属广州市第一人民医院，广东广州5 1 0 1 8 0 ) 【摘要 目的 探讨结肠灵汤对肠易激综合征大鼠肠黏膜及脊髓后角P 物质( S P ) 、血 管活性肠肽( V I P ) 阳性神经
2、纤维表达的影响。方法将实验动物分为对照组、模型组、西药 组及中药低、高剂量组。采用结肠慢性刺激法制作肠道高敏性大鼠模型。观察各组大鼠肠道 敏感性指标，用免疫组织化学法对各组大鼠回盲部、结肠及脊髓后角S P 、v I P 的表达进行半 定量分析。结果各治疗组大鼠肠道敏感性指标均有明显改善，结肠灵汤能降低大鼠肠组织 S P 、V l P 的免疫表达及脊髓后角S P 的免疫表达，呈一定量效关系。结论结肠灵汤可改善肠 道敏感性症状，其机制可能在于调节肠道初级感觉神经纤维S P 、V I P 的分泌。抑制伤害性初 、 级传入末梢上行释放S P ，减弱背角神经兴奋性，从而提高内脏痛闽，改善腹痛腹泻症状。
3、关键词结肠灵汤；肠易激综合征；脑肠肤；血管活性肠肽；脊髓后角 中图分类号】R 一3 3 2 文献标识码 A 文章编号】1 0 0 8 8 8 4 9 ( 2 0 0 9 ) 2 2 2 6 3 2 0 4 E f f e c t so fJ i e c h a n g l i n gd e c o c t i o n 仰t h ee x p 麟i o mo fb m i n 印tp e t i d ei ni n t 鹤“n e 锄dp 惦t e r i 叫h o mo fs p i n a l r di nt h er a tm o d e Io fi r r i t a b I eb o
4、w e Is y n d r o m e P e n gW e i ，P a nJ i n y a o ，M aJ u n ，Z h e n gD e j u n ( T h eF i r S t 脚l e s b 卿t a lo fG 1 I a r 】弘h 叫A “i l i a t e dt o ( I 幽擎h o uM e d i c a lC 。l l e g e ，G u a n 舻h o u5 1 0 1 8 0 ，G 娜g 如n g ，C h i m ) A b s t r a c t ：o b j e c t i v eI ti st oe x p l o r et h ee
5、 f f e c tdJ i e c h a n g l i n gd e c o c t i o no nt h ep o s i t i v ee x p r e S s i o no fs u b s t a n c eP ( S P ) a n dv a s o a c t i v ei n t e S t i n a lp e p t i d e ( V I P ) i ni n t e s t i n ea n dp o s t e r i o rh o mo fs p i n a lc o r di nt h er a tm o d d0 fi 州t a b l eb o w e
6、 ls y n d r o m e ( I B S ) M e t h o d sT h ev i s c e r a lh y p e r s e 璐i t i v i t yr a t sw e r ei n d u c e db yc h r o n i cs t r e S se x c i t a t i o no nc o l o n ，t h e nt h ee x p e r i m e n t a la n i m a l sw e r er a n d o m l yd i v i d e di n t o n t r o lg r o u p ，m o d e lg r
7、o u p ，w e s t e mm e d i c i n eg r o u pa n dg r o u p so fh i g ha n dl o w d o s a g eo fJ i e c h n g l i n gd e c o c t i o n T h ei n d e x e so fi n t e s t i n es e n s i t i v i t yi ne a c hg r o u pw e r eo b S e r 、，e d T h ee x p r e s s i o n s0 fS Pa n d V I Pi ni l e o c e c a Ij u
8、n c t i o nt i s s u e ，c o l o nt i S S u ea n dp o s t e r i o rh o mo fs p i l l a l r dw e r ea n a l y z e dS e m i q u a n t i t a t i v e I yw i t hi m m u n o h i s t o c h e m i s t r ym e t h o d R 鹤u l t ss e n s i t i v ei n d e x e so fi n t e s t i n e si ne v e r yt r e a t m e n tg r
9、 o u pw e r ea l li m p r o v e do b v i o u s l y J i e c h a n g l i n gd e c O c t i o nc o u I dd e c r e a s et h ee x p r e s s i o l l So fS Pa n dV I Pi ni n t e s t i n et i s s u ea n dS Pi np o s t e r i o rh o mo fS p i n a lc o r d ， a n di t se f f e c td e p e n d e do nt h ed O s eo
10、fJ i e c h a n g l i n gd e c o c t i o n C b n c l u s j 佣J i e c h a n 9 1 i n gd e c o c t i o nc a ni m p r o v et h es y m p t o m so f i n t e s t i n es e n s i t i v i t y I t sm e c h a n i s mm a yb e t h a ti tc a na d j u s tt ot h es e c r e t i o no fS Pa n dV I Pi ni n t e s t i n a I
11、p r i m a r ys e n s o r y n e r v ef i b r e ，a n di n h i b i tt h ed e l i v e r yo fS Pf r o mp r i m a r yn o c u i t ya f f e r e n tf i b e r ，r e d u c et h ee x c i t a b i l i t yo fD R Ga n di n c r e a s e v i s c e r a lp a i nt h r e s h o l d ，i no r d e rt oc u r ea b d o m i n a lp
12、a i na n dd i a r r h e a K e yw o r d s ：J i e c h a n g I i n gd e c o c t i o n ；i r r i t a b l eb o w e ls y l l d r o m e ；b r a i n g u tp e p t i d e ；s p i l l a Ic o r d 肠易激综合征( I B S ) 是一组包括腹痛、腹胀、排便习惯和 大便性状异常持续存在或间歇发作，但又缺乏明显形态学和 生化指标异常可以解释的症候群，其病因和发病机制目前尚 不完全清楚。内脏高敏感性是I B S 最重要的病理生理特征之 一，
13、而P 物质( S P ) 、血管活性肠肽( V I P ) 等脑肠肽可能起重要 作用。本实验采用醋酸直肠慢性刺激法造成肠道高敏性I B S 大鼠模型，通过观察肠道敏感性指标及回盲部、结肠及脊髓后 角中S P 、V I P 阳性神经纤维表达的变化，探讨自拟方结肠灵 汤对l B S 的作用机制。 作者简介 彭蔚( 1 9 8 2 一) ，女，硕士，主要研究方向为消化系统 疾病的中西医结合治疗。 1 实验资料 1 1 实验动物及模型制备S P F 级新生S D 大鼠5 0 只，雌雄 各半，年龄8d ，由广州中医药大学实验动物中心提供，动物合 格证号：0 0 2 8 2 6 3 。参考文献 1 方法，
14、采用醋酸结肠慢性刺激 法造成肠道高敏性I B S 大鼠模型。正常对照组大鼠每天直肠 内给予相同容积的生理盐水。连续造模2 周。 1 2 实验药品结肠灵汤由党参1 5g 、茯苓1 5g 、白花蛇舌 草3 0g 、白芍1 2g 、素馨花1 0g 、枳壳1 2g 、糯稻根1 5g 、甘草6 g 等组成，药品购自广州市第一人民医院，水煎后溶液按要求 浓缩到所需浓度。得舒特( 匹维溴铵) ，法国苏威制药厂生产， 碾碎后溶于蒸馏水中，每毫升含药1 5m g 。 1 3 分组及给药将实验动物随机分成正常对照组、模型 万方数据 现代中西医结合杂志M o d e mJ 叫r n a lo fI n t e g
15、r a t e dT r a d i t i o n a lC h i n e s ea I l dw e s t e mM e d i c i n e2 0 0 9A u g ，1 8 ( 2 2 ) 2 6 3 3 组、结肠灵汤低剂量组、结肠灵汤高剂量组、得舒特组，每组 1 0 只。在醋酸刺激停止后第2 天开始，正常对照组和模型组 各给予生理盐水1 0m L k g 灌胃，得舒特组予得舒特1 0m L ( 1 5m g ) k g 灌胃，结肠灵汤低剂量组、高剂量组分别予结肠 灵汤1 0m L ( 含1 5 9 生药) k g 及1 0m L ( 含3 0g 生药) k g 灌 胃，每天1
16、次，连续给药2 周。 1 4 实验试剂及仪器 兔抗s P 抗体为北京博奥森生物公 司产品，兔抗V I P 抗体为武汉博士德生物公司产品，即用型 兔二步法检测试剂盒、3 ，3 一二氨基联苯胺( D A B ) 显色试剂 盒为北京中杉金桥生物公司产品。仪器为I m a g e P r oP 1 u s 6 0 病理图像分析系统。 1 5 观察指标 1 5 1 肠道敏感性测定参考文献 2 方法，给药2 周后记 录肠道敏感性指标：直肠内球囊扩张引起腹部抬起、背部拱 起的容量阈值。注水量为1 0m L 时3n l i n 内腹部收缩次数。 1 5 2 免疫组化测定直肠扩张结束lh 后，予戊巴比妥钠 腹腔
17、注射麻醉，分别取回盲部、结肠及腰椎膨大处脊髓共3 处 组织，1 0 中性甲醛固定，常规石蜡包埋，切片( 4m ) 。免疫 组化染色采用非生物素二步法，组织切片脱蜡至水；枸橼酸盐 缓冲液微波修复抗原1 5m i n ；加内源性过氧化物酶封闭液1 0 m i n ；加一抗4 过夜；加二抗3 0m i n ；n A J 3 显色剂镜下控制显 色反应时间；苏木素复染。以P B S 代替一抗作为阴性对照。 用I m a g e P r oP l u s6 0 病理图像分析系统分析S P 、v I P 免疫 反应阳性纤维的平均光密度值( o D ) 。0 D 值越大，染色越强。 每张切片随机取2 个视野分
18、析，取其平均值。 1 6 统计学处理用S P S s1 1 5 统计软件处理，所得数据以 孟s 表示，组间差异比较采用单因素方差分析，显著性标准 设定a = 0 0 5 。 2 结果 2 1 肠道敏感性测定结果见表1 。 表1各组大鼠肠道敏感性指标测定结果( j s ) 注：与正常对照组比较。P O 0 5 ；与模型组比较，P 0 叭； 与模型组比较，P O 0 5 。 2 2 回盲部、结肠及脊髓后角S P 表达结果 在回盲部、结 肠黏膜中，S P 能神经元主要位于肌问神经丛，呈梭状，呈较强 的棕黄色反应( 见图1 和图2 ) ；在脊髓中，S P 能神经元主要分 布于后角的I 、V 板层，其余
19、板层也有少量阳性细胞，呈棕 黄色至褐色( 见图3 ) 。各组比较见表2 。 图1 回盲部S P 阳性表达( 2 0 0 ) 图2 结肠黏膜中S P 阳性表达( 2 0 0 ) 图3 脊髓背角s P 阳性表达( 2 0 0 ) 表2 各组大鼠回盲部、结肠及脊髓S P 表达的 o D 值比较( j s ) 注：与正常对照组比较，P O 0 5 ；与模型组比较，P 0 0 5 ； 与模型组比较，P 0 0 1 。 2 3 回盲部、结肠及脊髓后角V I P 表达结果在回盲部、结 肠黏膜中，V I P 能神经元主要位于肌间神经丛或直接伸入环 形肌层，胞浆及神经纤维均呈较强棕黄色反应( 见图4 和图 5
20、) ；在脊髓中，V I P 能神经元主要分布于后角的、V 板层，呈 黄色( 见图6 ) 。各组比较见表3 。 3 讨论 近年研究发现，内脏敏感性增高是I B S 最重要的病理生 理特征之一 3 | 。内脏过敏的发生有2 种模式 4 ：一种是自下 万方数据 2 6 3 4 现代中西医结合杂志M 0 d e r nJ o u m a lo fI n t e g r a t e dT r a d i t i o n a lC h i n e s ea n dw e S t e mM e d i c i n e2 0 0 9A u g ，1 8 ( 2 2 ) 图4 回盲部v I P 阳性表达( 2
21、0 0 ) 图5 结肠黏膜中v I P 阳性表达( 2 0 0 ) 图6 脊髓背角v I P 阳性表达( 2 0 0 ) 表3 各组大鼠回盲部、结肠及脊髓V I P 表达的 o D 值比较( 孟s ) 注：与正常对照组比较，P 0 0 5 ；与模型组比较，P 0 0 5 ； 与模型组比较，P 0 0 1 。 而上的模式，即由胃肠黏膜的感觉刺激使局部神经内分泌产 生变化，作用于初级传人神经末梢，随之发展成脊髓水平的中 枢致敏，持续的背角神经元高兴奋性，引起长时间传人冲动增 加，造成高级中枢反应增强；另一种是自上而下的模式，即由 于环境、心理因素刺激，大脑某些核团反应性发生改变，引起 内脏自主调节
22、和内源性疼痛调节系统变化，发生感觉过敏。 分布于肠道壁的初级感觉神经纤维负责介导各种伤害性感觉 的传人，而脊髓背角是内脏感觉传人纤维的会聚处，是肠道与 大脑间进行信号传递的中继站。两者是内脏感觉产生的重要 神经生理学基础。本实验同时选择肠组织与脊髓背角作为观 察部位，观察结肠灵汤对模型大鼠s P 、V I P 阳性神经纤维表 达的影响，在现有文献中鲜有报道。 脑肠肽是具有神经递质和胃肠激素双重功能的小分子多 肽，在调节内脏感觉、分泌和运动中起着重要作用。S P 与 V I P 分别是兴奋性与抑制性神经递质的代表 5 | ，在胃肠道分 别介导收缩效应与舒张效应。S P 广泛分布于中枢和外周神 经
23、系统，在中枢可调节神经元兴奋性，参与调节神经内分泌功 能，是伤害性传入纤维末梢释放的兴奋性神经递质，又具镇痛 功能。王巍峰等【6J 认为，从肠道肌问神经丛到脊髓后角到边 缘系统可能存在一条S P 能神经传导通路，从而参与内脏痛 觉信号传导，也参与胃肠动力的调节。而v I P 在中枢和外周 神经系统、胃肠道、呼吸道和生殖道等部位广泛分布，能使全 身及内脏血管平滑肌舒张，能刺激多种胃肠激素分泌，刺激胃 肠黏膜分泌水和电解质。V I P 与I B S 患者的腹泻、便秘和腹 痛等症状关系密切。 本实验结果显示，在回盲部与结肠部，模型大鼠S P 及 V I P 阳性神经纤维的表达均较正常对照组明显增强，
24、与董文 珠等 7 | 、陈晓敏等研究结果基本一致；在脊髓背角，S P 阳性 神经纤维表达明显升高，而v I P 阳性表达无显著性差异，与 王巍峰等【9 j 研究结果一致。该结果提示S P 可能在整合内脏 感觉传人中发挥作用，而V I P 可能仅参与局部胃肠黏膜水和 电解质的分泌，又或者在脊髓水平存在负反馈调节，使其表达 趋于正常，其确切机制还有待进一步研究证实。 中医学无I B S 之病名，根据临床表现归属于“泄泻”、“腹 痛”、“郁证”等范畴。情志失调是本病主要病因，脾虚肝旺、肝 脾不和是基本病机。结肠灵汤是广州市第一人民医院中医科 临床经验方，由四君子汤基础上加用素馨花、白芍、枳壳、白花
25、蛇舌草等组成，具有健脾舒肝、清热祛湿之功效。临床疗效观 察显示，该方尤对腹泻型肠易激综合征、溃疡性结肠炎等有较 好疗效。本研究发现，结肠灵汤能改善肠道敏感性症状，呈一 定量效关系。高剂量结肠灵汤可显著降低模型大鼠肠组织 S P 及V I P 表达，使其趋于正常；高低剂量结肠灵汤能降低脊 髓后角S P 表达，但对V I P 表达的影响无显著性差异。由此 推测，该方的作用机制可能在于调节肠道初级感觉神经纤维 S P 、V I P 的分泌，抑制伤害性初级传入末梢上行释放S P ，减弱 背角神经兴奋性，从而提高内脏痛阈，缓解腹痛腹泻症状。 参考文 献 】 1 A L c h e rE D ，K a w
26、 a s a k iM ，P a s “c h aP J An e wm o d e Io fc h r o n i c v i s c e r a lh y p e r s e n s i t i v i t yi na d u l tr a t si n d u c e db yc o l o ni 玎i t a t i o n d ur i n gp 0 3 t n a t a ld e v e l o p m e n t J G a s t r o e n t e m l ，2 0 0 0 ，1 1 9 ( 5 ) ： 1 2 7 6 1 2 8 5 2 刘雁冰，袁耀宗，陶然君，等大鼠
27、肠道高敏性模型的建立及其 内脏敏感性评估 J 中华消化杂志，2 0 0 3 ，2 3 ( 1 ) ：3 4 3 8 3 王伟岸，钱家呜，潘国宗肠易激综合征的发病机制 J 胃肠病 学和肝病学杂志，2 0 0 1 。1 0 ( 2 ) ：9 9 一1 0 2( 下转第2 6 9 7 页) 万方数据 现代中西医结合杂志M o d e mJa I l r n a 】o fI n t e g r a t e dT r a d i t i o m lC h i n e a n dw e s t e mM e d i c i n e2 0 0 9A u g ，1 8 ( 2 2 ) 2 6 9 7 肱骨小头
28、冠状面移位型骨折手术方式的选择 陈其义，孔晓海，梅宗贤，王睿，佟兴业 ( 江苏省南京市中西医结合医院，江苏南京2 1 0 0 1 4 ) 关键词】肱骨小头；冠状面骨折；骨折固定术；肘关节 中图分类号 R 6 8 3 4 1 文献标识码 B 文章编号】1 0 0 8 8 8 4 9 ( 2 0 0 9 ) 2 2 2 6 9 7 0 1 肱骨小头骨折占肘部损伤O 1 1 ，冠状面移位型掌着地跌倒时，沿桡骨向上传导的剪切暴力可经桡骨头将肱 骨折多采用手术治疗，其方式较多。我院1 9 9 3 年4 月一2 0 0 7 骨小头撞断，造成肱骨小头冠状面骨折，骨折片向前上移位， 年1 0 月采用不同的手术
29、方式治疗肱骨小头冠状面移位型骨甚至发生1 8 0 。翻转。 折1 1 例，现分析总结如下。3 2 手术入路的选用以往多采用肘关节外侧切口【3 】，近年 l 临床资料强调肘关节前侧入路优势【4 J ，本组均为肘关节外侧切口。笔 1 1 一般资料本组男5 例，女6 例；年龄1 9 5 3 岁，平均者认为肘关节外侧入路表浅直接，损伤小，无损伤神经血管的 3 7 5 岁；右侧5 例，左侧6 例；交通事故伤2 例，骑车跌伤4风险，切口内可完成自后向前的方式固定。而前侧入路损伤 例，平路摔倒5 例；B r y a n 分类：I 型6 例，型5 例；均为闭合大，有损伤肘前神经血管的风险，在切口内只能自前向后
30、固 伤；手术时间3 5d 。 定，造成肱骨小头关节软骨面损伤。 1 2 治疗方法患者取平卧位，伤肢屈肘置于胸前，臂丛麻3 3 内固定方式的选择本组早期用粗丝线、细钢丝或克氏 醉气囊止血带下手术。采用肘外侧切口，在外髁上分离部分 针固定，因固定不确切，需辅助较长时间的外固定，不利于肘 仲肌群，切开外侧关节囊，暴露骨折块，将肘适度内翻，清除积 关节功能的恢复。螺钉可提供可靠的固定，便于早期行肘关 血或凝血块，冲洗识别骨折面，去除游离的骨和软骨碎片，复节功能锻炼。可吸收螺钉不仅具有良好的生物力学特性，而 位肱骨小头骨折块，暂用巾钳固定。内固定方式：2 例为粗 且也能达到非负重骨骨折固定强度的要求，其
31、有以下优点： 丝线或细钢丝将骨折块外侧缘与肱骨骨折面的外侧缘贯穿一 具有可吸收的特性，避免二次手术；避免了金属内固定物带 针固定。2 例用细克氏针自后向前交叉固定。2 例为2来的应力遮挡和骨质琉松；在骨愈合过程中可逐渐降解吸 枚松质骨螺钉从后向前固定，钉尖达关节软骨面下。另5 收，是理想的生物学固定材料；对影像学检查无干扰。 例用l 2 枚可吸收螺钉自后向前置人固定。骨折块较小的 肱骨小头冠状面骨折为关节内骨折，伴有移位者大多复 用1 枚钉，辅以骨折外缘钻孔丝线固定，防止骨块旋转。位困难，即使勉强复位，也难以很好地维持，而且还需要长时 1 3 术后处理术后2 4 4 8h 拔除引流皮片，预防感
32、染3 5 间外固定。积极的开放手术，可达到直视下解剖复位、可靠固 d 。肘屈曲9 0 。前臂中立位石膏外固定，粗丝线或细钢丝和克氏 定的目的，利于肘关节功能的恢复。可吸收螺钉所具有的特 针组6 周，螺钉组3 周。拆除石膏后，患肢逐渐功能锻炼。性，可作为固定首选方式之一。 2 结果 参考文献】 患者术后均未发生血管、神经损伤，术后X 线片显示解 【1 胥少汀，葛宝丰，徐印坎实用骨科学 M 3 版北京：人民军 剖复位。随访1 1 个月2a ，平均1a1 6 个月，均达骨性愈合， 医出版社，2 0 0 5 ：4 3 2 无一例发生骨折块缺血坏死。根据H s s 肘关节功能评价标 2 】刘志雄骨科常用
33、诊断分类方法和功能结果评定标准 M 北 牡优9 例，良2 例( 丝线和克氏针固定各眠 3 妻荔釜喜塞意荔鬣孙头骨折的处矗中国骨 3 讨论 伤1 9 9 9 ，1 2 ( 5 ) ：7 2 3 1 肱骨小头冠状面骨折的特点 肱骨小头位于肱骨下端 4 李文基，梁小军，张霖肘前入路螺钉固定治疗肱骨小头骨折 前外侧部，与肱骨干长轴成3 0 。角，其前方及下部为关节软骨 J 中华骨科杂志，2 0 0 6 ，2 6 ( 1 ) ：1 7 2 0 面，与桡骨头凹构成肱桡关节。当肘关节伸直、前臂旋前、手 收稿日期 2 0 0 9 一0 3 一0 1 ( 上接第2 6 3 4 页) 4 周吕，柯美云神经胃肠病学
34、与动力：基础与l 临床 M 北京：科 学出版社，2 0 0 5 ：3 5 8 5 谢启文神经肽 M 上海：复旦大学出版社，2 0 0 4 ：3 5 5 ；3 6 0 6 王巍峰，杨云生，孙刚，等肠易激综合征大鼠P 物质能神经通 路的改变 J 世界华人消化杂志，2 0 0 5 ，1 3 ( 2 ) ：2 1 4 2 1 8 7 董文珠，邹多武，李兆申，等肠易激综合征患者内脏敏感性的 机制研究 J 中华消化杂志，2 0 0 4 ，2 4 ( 1 ) ：1 8 2 2 8 陈晓敏，张燕华，毛峻岭，等肠易激综合征患者结肠黏膜P 物 质、血管活性肠肽和肥大细胞的变化 J 胃肠病学，2 0 0 8 。1 3 ( 4 ) ：2 2 8 2 3 0 9 王巍峰，杨云生，孙刚，等肠易激综合征大鼠模型脊髓后角神经递 质表达的改变 J 胃肠病学和肝病学杂志，2 0 0 6 ，1 5 ( 4 ) ：4 0 5 4 0 8 【收穑日期】2 0 0 9 一0 4 1 5 万方数据