1、附录A（规范性）发热伴血小板减少综合征血清特异性抗体桧测A.1IgM捕获EiJSA法（MacE1.ISA）检测SFTS病雨IgM抗体A.1.1原理根据抗原抗体特异性结合的原理，用醉标板中预包被的抗人IKV抗体（抗UtS）捕获待检测血清中的IrM抗体,加入侪标病毒抗原.或先后加入病毒抗原与解标特异性抗体.反应后加底物显色.显色程度与特异性IgM抗体含做呈正相关.A.1.2实验材料可根据所用试剂盒的相关要求进行调整.a）洗板机、处标仪、恒温温箱或水浴笛（37C2C.b）IO1.2001.可网移液器、10m1.吸管.C）稀作血清用的试管，d）蒸馋水或去离子水，e）吸水纸.f） SFTS病毒IgM抗体
2、E1.ISA检测试剂盒.A.1.3检测步骤应参考所选用试剂盒说明书进行检测.主要步骤如下.a）在包披板中加入样品稀粮液,100U1./孔,然后在相应孔中加入阴、阳性对照以及待检血清各101.b）封板膜时板后混匀，37X?姆H30min.C）用洗涤液冲洗6次，拍十。（1）每孔加入辣根过氧化物脚标记的病毒抗原，或先后加入病毒抗原与薜标特异性抗体100M1.然后重更步骤1和c）.e）于各反应孔内加显色液，混匀后置37t避光显色15min.f）加终止液（主要成分为1111.1.硫酸溶液）于好反应孔，50M1./孔，轻拍泥匀。g） 30汨内于45。仁波长处（建议用双波长450nm63Qn检测）读取每孔的
3、吸光度。A.1.4结果判Si在阴、阳性对照成立的情况下，待检血清OD假小临界伯者为阳性，小于临界伤者为阴性。临界值计算公式：够界值=阴性对照平均OD假（阴性对照OD值若小于005,则按005计算+Q.10。A.1.5意义IBM抗体阳性，衣示世者新近或曾经想染SFrS病毒，可用于临床诊断参考.A.2胶体金等标记法快速检测SFTS病毒1.gM1.gG抗体A.2.1原理在用硝酸纤维素度制备的免及层析试纸条上包被抗入IgY单克隆抗体、抗人IgGR克隆抗体，可插狭人血清中IgM和IgG抗体，采用SFTS病毒抗原作为标记抗原，若样本中含病毒特异性的IgM、IgG抗体，则检测区相应位置出现条带，A.2.2试
4、验材料可根据所用试剂;的相关要求进行调整.a）肢体金标记试纸条快速IgY/IgG检测试剂盒；b）滴管或加样器.A.2.3检测步骤应参考所选用试剂盒说明书进行检测，主要步骤如下,a）挺开铝箱袋，取出试剂卡，平建于水平桌面上做好标记，b）将血清标本用镀择液稀择（1:10Cn后,取适量（60u1.80U1.）滴加于测试卡上的样品孔内,c）5mn20min内观察结果.A.2.4结果判断在质控区出现紫色条带显示检测成立,拉测区出现融色条带衣示SFTS病毒特异性IKM和/或IKG抗体阳性.A,2.5意义IKwJt体阳性,衣示患者新近或曾经感染SFTS荻毒，可用于临床诊断参考.IgG抗体阳性,提示患者曾受到
5、SFrS病毒感央；恢复期较急性期IgG抗体阳转，可确诊，A.3间接酶联免疫吸附试脸脸测抗SFTS病毒IgC抗体A.3.1原理招SFrS病毒抗原包被他标板,结合样本中病毒特异性抗体,再加他标记的抗人IgG抗体进行检测.反应后加底物显色或发光，显色程质或发光强度与特异性IgG抗体含量呈正相关.A.3.2试验材料可根据所用试剂盒的相关要求进行调整。a）洗板机、的标仪、恒温湿箱或水浴箱（37C2,Cb）IC1.U1.20OU1.可周移液器、10m1.吸管。C）稀择血清用的试管.d）蒸端水或去离子水.e）吸水纸.f） SFTS桥毒IgGtt体E1.1.SA检测试剂自。A.3.3检测步磔应参考所选用试剂盒
6、说明书进行检测，主要步骤如下,a）在包被板中加入样品稀择液，100n1.孔，然后在相应孔中加入阴、阳性对照以及不同稀林度的恃检血清.b）封板膜封板后混匀.37T娣育40三in.c）用洗涤液冲洗6次，拍干.d）每孔加入辣根过氧化物防标记的再结合物1001.,然后曳复步骤h）和c）.e）于各反应孔内加显色液，混匀后就37C避光显色15min.f）加终止液（主要成分为1n1.1.磷酸溶液）于年反应孔，50u1./孔，轻拍混匀.g） 30min内干450nm波长处读取每孔的吸光度.A.3.4结果判断在阴、阳性而照成立的情况卜，待检血清OD值M临界值者为阳性，小于临界值者为阴性,临界值计算公式：临界优-
7、阴性对照平均OMfi（阴性对照0值若小于0.05.则按0.05计算）+0.10.A.3.5意义阳性结果,提示曾受SFTS病毒感染.恢发期血清抗体滴度比急性期抗体阳转或滴度有，1倍或以上升高.可确诊“A.4间接免疫焚光法（IFA）榜测SFTS病SjIgG抗体A.4.1原理利用抗原抗体反应具有高度的特异性的特点，将不影响抗原抗体活性的荧光色素标记在抗体上，与其相应的抗原结合后，在荧光显微境卜早.现一种特异性荧光反应.根据荧光整做钺卜是否存在特异性荧光进行结果判定.A. 4.2试验材料材料与试剂如卜，可根据所用试剂盒的相关要求进行调整。a）抗原片：SFTS精毒标准毋株感染VCrUE6制备，低温干燥保
8、存。b） R1.阴性对照：患者恢一期血清（阳性对照）、阴性血清.c）英光素标记羊抗人（或像抗人Igc抗体.d）常用稀林液：IXPBS,伊文思世等。e）荧光显澈镜。A. 4.3检测步彝应参考所选用试剂盒说明书进行检测，主要步骤如下,a）用IXPBS稀择待检血清，从1:20开始做4倍连续梅铎至1:320,或至所需要的林择度.b）按照稀译度从高到低的顶序依次加入恃检血清,加入城以殂盖细胞抗原面为准（若为双份血清，最好上排为急性期如清.下排为恢复期血清）,同时设阳性、阴性对照,在37C湿余好育30min.c）用IXPBS洗涤3次，每次5min,再用蒸谣水洗涤3次脱盐，室品收干.d）用含伊文思性PBS按
9、工作浓度稀作受光结合物，斑孔加入适汆（以完全（茨细胤面为准），在37C湿怠孵育30min,然后步骤同c）.e）荧光显微段观察结果.B. 4.4结果判断细脆内病毒特异性荧光为黄绿色颗粒，分缶在感染细胞的帼浆内.根据是否出现特异性荧光、荧光亮便、出现灵光的阳性细胞数占比定工或定性对结果进行判定,荧光反战大致分为，无特异性荧光者为“”.检测抗体滴度时,以能观察到明显特异性荧光反应的最高血清稀科度的倒数表示.C. 4.5意义阳性结果.表明曾受到SFTS病毒感染：愦复期血清抗体阳转.或抗体滴度较急性期抗体滴度有4倍或4倍以上开岛.可确诊.B1.3检测步理应参考所选用试剂盒说明书进行抽测，主要步骤如卜a）
10、病毒RNA提取：按试剂说明书操作.制符病糅RNA.b）逆转录合成CDNA：可用随机引物或病毒特弁性引物,按照逆转录试剂盒说明书进行.c） IjeR犷增：盘据所用PCR扩增试剂盒,配置反应体系.第一轮PCR反应体系的上下游引物为外套引物，模板为CDMU建议反应条件：95C3min预变性：94C30SeC变性、55*C30SeC退火、7291Inin延伸,共35个循环：72TIomin延伸。笫二轮PCR反应体系的上下游引物为内伸引物,模板为第一轮PCR产物.建议反应条件：953min预变性;94C30sec变性、52C30SCC退火、72-C45SeCSi伸,共40个循环：721CIomin延伸.
11、d） 结果判定：1.5%浓度琼脂糖电泳分析,根据犷地条带大小进行鉴定.若条带的分子量与预期片段大小相同，则表明SFTS病毒核酸扩增阳性。必要时.可进行：e） PCR片段的回收和核甘酸序列测定：切下特异分子量条带,用凝胶电泳回收试剂盒回收纯化所扩增的DNA片段,测序仪测序.B. 1.4意义排除PCR污染后，扩增到特异性条带可确诊，阴性结果不能排除标班感染B.2实时荧光定量RT-PCRGIRT-PCR）法检测SFTS病而核酸8.2.1原理根据SFTS病曲蔚因现序列特征，设计特异性引物和特异性荧光标记核酸探针,可快速实现病毒检测探针结合部位位于引物结合区域内,其5端和3端可分别标记不同的荧光素.称为
12、报告荧光基团（用R表示）和淬灭荧光基团（用Q表示,淬灭荧光基团也可用小沟结合物（MGB）.当引物和探针同时与目的基因片段结合时，探针R基团发出的荧光信号被Q基团所吸收，仪器检测不到R所发出的荧光佶号：当PCR扩增延伸到探针结合部位时，Taq懒发挥5-3外切核酸前的功能，将探针水解成单核甘酸，探针上的R基团游窗择放，所发出的笑光不再为Q旗团所泮灭，可被检测仪接收识别，随若PCR循环扩珀反应的延续，R和Q热团游离于溶液中的量不断增加.仪器UJ维续检测到R所发出的荧光信号。qRT-PCR可定性或定豉检测标本中的病毒核酸.8. 2.2试验材料主要试剂及仪潺设法如卜，uj根据所用试剂的相关要求进行调整.
13、a） RNA提取试剂盒.b） SFTS病毒核酸检测引物及探针（表2）,或其他SFTS病毒实时荧光RT-RCR检测试剂盒.C）移液器（10H1.,201.,100H1.200U1000D及配套吸头、PCR反应管、离心管（1.5m1.及管架、台式离速离心机、普通冰箱、旋涡混合器、实时荧光PCR仪等，表2SFTS病毒实时荧光RT-PeR法核酸检测参考引物及探针序列片段引物名称ti序列(5,-3,)SS-FI101-1125GGCTCCCTCAAGCAcTTGTAAAS-R1155-1178TgccttcaccaagactatcaatgtS-Probe1127-1146TCXHSRed-TTCTGTe
14、nGCTG(;CT(XX；C(；C-B1.1.Q2MM-F13691393,GGTGGCTGTTCTC11TTGM-R1424-1445GCCTTAAGGACAnGGTGAGTAW-Probe1394-1420IAM-TCATCCTCC1C(JATATGCG(ICCC-BIIQ11.1.-F31383162AGTCTAGGTCATCTGATCCGTnAG1.-R3209-3230TGTAAG1.TCGCCCTnGTCCAT1.-Probe31683197HEXCTGCGCGCCTTCGTGGTAjTGGGB1.1.Q1.8. 2.3检测步骤应参考所选用试剂盒说明书进行检测，主要步骤如下.a）病
15、说Rw提取：按试剂说明书掾作，制备病毒RNA,b）实时荧光RT-PCR扩增：根据所用实时荧光RT-PCR检测试剂，配置犷墙反应体系。使用SFTS病甫特异性引物和探针进行实时荧光PeR扩埴.建议反应条件：5030min；95TIOairu9515see.60C45sec.扩增40个循环.反应条件可根据所用试剂和荧光PCR仪器进行优化调整.9. 2.4结果判断以荧光PCR反应的前315个循环的荧光信号作为本底信号,以本底信号标准差的10倍作为荧光阈值标本扩增产生的荧光信号达到荧光阈值时所对应的循环数为循环间值（Ct值）,以Ctft38可判断为阴性，C1.值处于3510之间者，需采用另一套耳物探针或
16、其他检测方法进行检测判断。10. 2.5意义排除污染后，检出病揖核酸可确诊,用于甲期诊断，阴性结果不能排除病称感染.B-3病毒分离11. 3.1原理病毒必须依赖易礴活细胞进行增殖.基于这一特性,利用SFTS病毒圾礴细胞,如VerOE6和Yer。细胞等对SFTS病毒进行体外培养增殖，一般不产生可见细胞病变，可通过观察细胞内和培养上酒中SF1.S病毒蛋白和核酸的存在情况，检验病毒是否存在。12. 3.2试验材料主要试剂及仪器设备如下，可根据所用试剂的相关要求诳行调整，a） 10200U1In1.移液器、无的吸头。b） 96孔/24孔组织培养板,或T25细跑培养瓶等。c） Vero/VeroE6细胞
17、等.d）细胞生长液、维持液与Hank，s液。e）CO1i笄箱、生物安全柜、倒置显微镜.83.3实验步鳏a）样本处埋和稀择：患者急性期血清标本用Hank，s液适当桶糅后（如1:10、1:20等）可宜接用于病毒分跻；级税等标本僭研磨后离心后，取适瑕上消液用来接种细物.财怀疑污染的标本，一般使用较大剂依抗生素（如有寄素I万电位，流霉素1万微克，和制霉菌素适诉）处理后经12（M）Og离心20min,去除大部分细值和杂质，在进行插格细恂培养分离时设置一个同样糅择的正常人血清做阴性对照.b）细胞接种：以T25细胞培养瓶为例.将培养好的单层细胞上清弃掉.fHankS液洗涤2遍,取处理后的血清或组织研磨液标本
18、0.51.m1.接种球层细胞.37CCO：培养箱中吸附2h后用无菌Hanks洗涤细胞层12次，每次5b1.,最后加入维持液5m1.,379培养.每隔34d换雒持液.c）培养至第7d10d刮取少质细胞点抗爆片阴亍免疫荧光或采用实时夷）1.RT-PCR方法等曲J嘴定，如果阳性（分离到的第一代精毋需有细胞免疫荧光阳性的检测结果）,则收集上清或抱续接种新鲜细恂进行病毒培养：如果检测结果仍为阴性,则收泉培养液，冻存于TOC或液氮中以饴取新检测，细胞需维续传代.d）连续传代：用腴版消化以上步骤中检测为阴性的细胞.I134m1.新斛培养液悬浮细胞，取2（1.5-21.）细胞足液与大约同等数局的新鲜制品的正常
19、细胞联合培养，虫或步骤G悔测至第3代，取朝余1/2（1.5-2m1.）细咆悬液离心后保存于TOC待查.e）病毒抗原和核酸检测：刮取少浆细胞制备抗原片，利用SFTS粉诉特界性抗体迸行免疫荧光悔测，如果受光检测阳性，说明存在病毒复制。对阳性分面物参照SFTS病毒核酸检测方法，提取核酸，m行序列测定分析.B. 3.4结果判断a）经SFrS病毒特异性抗体检测用于分离病毒的细旭，荧）t阳性说明标本中存在感染性SFTS病毒.b）连续传代培养，检出病冷特异性核酸拷贝数有所上升，说明标本中存在感染性SFTS病毒.B.3.5意义分离到病毒可确诊,阴性结果不能排除病毋喜染。附录C资料性)发热伴血小板减少综合征病原
20、学，流行病学、临床表现、实脸室检测和罢别诊断C.1就原学发热伴血小板减少媒合征病毒(SCYerCfeverwiththrombocytopeniasyndromevirus.SFTSV)为分节段的单股负融RNA病毒.星球形,表面为腑质双层包膜,表面有刺突.例病常糖蛋白构成,基于病毒所引发疾病的主要临床特征而命名.病毒学分类属臼妗纤细病毒科(Phenuiviridae,班达烧毒属(及Cfa1.rusgenus).分类名为大别班达病毒(BnndavirvsJabieense)。2014年.国际病毒分类命名委员会(internationa1.Comnitteeontaxonomyofviruses.
21、ICTY)将其归类于布尼亚病毒科白蛉病毒跳，命名为SFTS病毒(SFTSvirus)。2016年，ICTV对布尼亚样病毒进行重新分类,于2017年3月，将原布尼亚病毒科白蜷病毒属(Ph1.eb。VirUS)和无包膜的单股负链RM植物病毒纤细病毒场(Tenuivirus)的词根(Ph1.ebovirus+Tenuivirus-PhenUiViridac)组合而成白蛉纤细病毒科或简称为白纤病毒科.班达病将期的命名根犯该属首个分卷病毒所在地印度研扎(Bhanja)和SFTS病毒的首次发现时的命名大别山病毒(DabieMountainvirus,DBMY)的融合(Bhanjavirus+DabieMo
22、untainvirus-Bandavirus).病毒基因S1.由3个片段组成,分别为大、中(明小(三)片段，分别编码RNA依赖性RNA聚合酸(RdRP或1.1.fi臼八犍去臼(GPsGn和GC,以及核衣壳蛋臼(N)和非结构蛋白(NSs，母个病由颗粒至少应包装一个持贝1.、M和S核衣壳，但成熟的病用颗粒内并不一定包装等摩尔比的核衣壳，病毒颗粒内UJ包装相等或非等摩尔比1.、M和SRNA.SFTSVm通过自然突变、奥组和曳田等方式而诳化,形成丰富的遗传多样性,基于基因组序列生物佑息分析，可将病毒分为AF六个班因型，范因型别分布呈现一定空间聚集特征，主要流行区多存在多个基因里同时流行，提示SFTSV
23、可能存在较远距离的踏区域传播“生化和形态学研究显示,SFTSY总化学含量分别为2%R21、58%蛋白质、33%脂肪和7%碳水化合物.病毒禽子的沉降系数在400500s之间,蔗糖中的浮力需度为1.161.18gc三3,ft化艳(CSCI)为1.201.21.RzCm3.SF1.SY在4七能保持相对稳定，1周内病毒感染性无明显下降。空温(25公)状态下6h,物体表面病毒可雏持感染性，对热敏感，37C保存，整或性下降较快,60C下30分钟可灭活病毒.对脂质溶剂或非岗子去污剂敏礴,可去除病毒包膜.导致病毒失去过染性.对强酸、碱、紫外莲和常用含筑消毒剂等敏感.可灭活病毒,在川3.0条件下，病毒活力有损杏
24、但不能完全灭活病毒。C.2流行病学发热伴血小板减少综合征流行是病毒、宿主动物、婢媒生物和易感齐之间的相互作用的结果，常受流行区温度、湿度和降水等气候条件、生态环境、宿主动物种群动态、经济社会发展、以及人群生产生活特征等因素影响.自2010年.本病病因明确以来.我国发热伴血小板减少综合征波及地区不断扩大，每年报告病例数呈不断上升趋势，C.2.1传染源C.2.1.1携携带病般的婢为揖要传染源.婢发育过程为变态发育.分为卵、幼虫、若虫和成虫四个阶段，除卵外的所有发育阶段均匍吸血.更换宿主.已知有多种婢可迷杂和携带SFrS病毒，长角血姊为主要谛存宿主和传播媒介,病毒可经卵垂直传播和跨期传播，曾在姊的
25、卯、幼虫、若虫和成虫等不同发方阶段抽出病毒。长角血婢具有孤雌生殖的特性，易F造成种群及其所携带病原大范围播散.地方性流行区淹行病学调查显示,婢的带毒率波动范围约为0.6%-5%.婢叮咬和吸食宿主的血液可对宿主造成直接伤害，如皮肤过陂反应、班得幼科发育等，同时可传播衲毒、细曲、立克次体、原虫等多种JR要病原体，主要通过唾液、场底神经节体液、中顺返流、排泄物等传播，导致娜传疾病。婢虫的分布与自然环境密切相关,环境变化，特别是气候和景观的变化.可能优进了婢的空间扩张和SFTSV的传播.C.2.1.2患者人若染SFTS病毒后可产生较高水平病用血疥，急性期愿者血液、血性分遂物、排泄物及其污染物中均可检出
26、病毒.少数患者病毒IfI1.症期长.整个病程中持续存在,尤其是部分型症和死亡病例,在病程后期血液中感后性病毒含量高,传染性强.无防护接触患者（死者）血液、血性分泌物、排泄物及其污央物可造成病毒传播。国内外均有SFTS患在引发院内博染以及因参加本柄死亡者不安全葬礼引发聚集性校情的报道.C.2.1.3动物感鎏枪击的动物可为传染源,动物储存宿主尚不明确,牛、羊等家养动狗和咕齿类动物、刺猾等野生动物均可感染病毒，地方性流行区,家养动物，特别是牛和山羊,SFTSV第染率高.大多数动物感染后,病猴血症水平低.持续时间短,多无明显疾病症状可发挥病毒扩放宿主作用.有报道显示，猫、犬、狐狸、水貂、骆驼等动物感杂
27、后可出现明显症状接至死亡，包括好鹿、野猪、野生猱和果子狸等野生动物中，可检测到病毒抗原和抗体，病毒血症期灼为570天，接触患病或死亡动物及其污染物可造成病毒传播，C.2.2传播途径C.2.2.1主要经携带病毒的”叮咬传播发热伴血小板减少琮合征主要经携带病毒的豌叮咬传播,以长角血婢为主.除长角血婢外,曾从碣黄血婢、龟形花挑、豪猪血婢、台湾血婢、巨棘血小等婢中分离到病毒,从咯群血婢、血红用头姊、微小牛螂、跟小病头姊、草原革姊、亚洲璃眼姊、I本硬婢等婢中检出病毒RNA。C.2.2.2可通过接触引发人与人之间传播人与人之间传播主要通过接触患者或因本病死亡尸体血液、血性分泌物、排泄物及其污染物等引发。特
28、定条件卜，血液或血性分泌物、排泄物及其污染物可因啜溅、溢活或干燥后搅动等原因形成气溶股,通过口鼻腔枯原或沾染皮肤破损处而传播.C.2.2.3可通过接触发病或本病死亡动物引发动物到人的传播有通过接触发病或死亡的瑶、犬、骆驼、果子狸、短理等动物而感染的报道。C.2.3人群易感性人群普遍易感,感染后可获得免疫力.血液中特异性抗体可持续数年,在木胡流行地区，在丘陵、山地、林地等区域生活的居民、从事户外生产活动的人群及旅游者感染风险较高。患拧的医护、陪伴和探视人员,以及死亡患者殓殖人员如未进行规范防护,具有较高的雪染风唆.C.2.4流行特征本病高度散发,具有一定空间聚集性.本病的流行受气候、环境、蚓的季
29、节性消长以及人树与婢接触机会等因素影响,发病其U明显季节性，各地流行季节及季节高峰。所爱界-我国般每年3月份报告病例数开始逐渐增多，57月达发病高峰，之后发烧数逐步下降，部分地区可在910月份出现小的发嵇商峥，故止2023年，中国大陆地区有27个省份报告发热伴血小板减少粽合征病例,若诊疗不及时.中老年病例病死率可高达20%以上.病例分布呈现一定空间聚集性，绝大部分病例发生在山东、河南、安徽、湖北、辽宁、浙江和江苏等7个省份。韩国、I木、越南、泰国、统甸等国鸵也有本地憾染烧例报告，11本、帏国均于2013年首次报告本地病例，破至2023年，日本中西部的长崎县、鹿儿岛县、山口县及宫崎县等30个府县
30、共报告930例病例（死亡103例,病死率11.08%）,绝大多数病例为40岁以上病例（占总病例数的97.4%），病例多发生于4T0月:特国全国共报告1885例病例（死亡354例,病死率为18.施），主要分布于济州、江原道、庆尚北道、忠清南道等地,物例多发生在570月份。C.2.4.1季节性发热伴血小板减少综合征全年均可发病，多发,春夏季节，一般3月份报告病例数逐步增多,57月达到月峰,之后呈现卜降趋势，个别省份9T0月出现小高峰，11月后下降，12月至次年2月仅行少数病例报告.各地发病高峰受气候、地理位理等因素影响而有所差异.C.2.4,2地理分布本稿以散发为主.具有一定地域疑集性.近年来，报
31、告病例地区呈逐步扩大趋势。在中国.发热伴肌小板减少综合征多分布在山区和丘陵地带.包括台湾省在内黑计28个省份曾有病例报告，主耍集中在山东、河南安徵、湖北、辽宁、浙江、江苏笫7个省份.C.2,4.3年龄、性别、职业分布各年龄组人群均可发病.95%以上报告病例集中在40岁以上人群.病死率随年龄增长相应增高.忠者性别差别不明显，病例职业以农民为主，85%以上的病例为农民，多为农、林业从业者。C.3临床表现潜伏期为5d14d.多为6d9（1.本病起嵇急，临床上病程可分三期:初期、极期和恢复期.C.3.1初期又称发热期，为病初1d3d,栖程长者可至1周，发热，体温多为38C40C,可高达40C以上.伴乏
32、力以及食欲不振、恶心、呕吐、腹痛（多为腹壁触痛、腹泻（多为无痛性桶便）等甫化道症状，部分患者出现肌肉酸篇、腹泻，少数出现神惠淡漠，查体常见单恻股股沟或颈部、腋窝等浅去淋巴结肿大伴触捕，较大者局部红、肿、热、描明显，般无皮疹。C.3.2极期亦称多器官功能损否期。一般发生在病后1冏左右，常马可与发热期迎餐，持续高热，可早.稽用热，部分患者发热减退后症状绑续加重，出现极度乏力、消化道症状明U加里部分患拧可出现下颌、四肢等不自主抖动伴肌张力增高.理症患拧可出现皮肤糜斑、消化道出血、肺出血烦班不安、谑妄,达至抽播、昏迷，可因循环衰崩、呼吸衰竭、弥漫性血管内凝血等死亡。C.3.3恢复期一般病后2周左右，体
33、温逐渐恢夏正常，症状逐渐绽蟀，有并发症者病程可延长.C.3.4预后大多数忠者预后良好,但老年患老、既往有基础疾病、出现精神神经症状、出血做向明显以及UID、AST、A1.T、CK等血清的活性持续增高的患者.狡后差.C.4实验室检测本病发病Y期无相异性,确诊需要病原学和免疫学检测阳性结果.SFTS病毒属二类病原体.具有较而致病性,涉及感染性样本的操作,如病毒分离培养、未羟培外的阳性或疑蚁阳性样本的灭活、检测等能在生物安全：线(BS1.-2)或以上实蛤室开展，动物感染实骁在动物生物安全:级(ABS1.-3实龄室开展，灭活后的样本核酸检测,可在相应的专门区域或实验室进行,产格按照分区操作原则操作.实
34、脸室个人防护应按照相应实验室生物安全防护等级要求执行。C.4.1临床实验室检查早期临床实验室检查可见具仃提示意义的诊断指标.发病早期做常规检查可见血小板和白细咆计数下降，白细胞计数下降多为(1.0-3.0)X1071.,iR流者可V1.OXK)/1.；血小板计数减少，多为(3060)X101.,羽症者可V30X10/。发病早期外周血白细施轻度降低.随着病情进展至极期，外周血臼细胞、血小板进行性降低,外周血臼细胞下降可先于血小板减少.生物化学检查可见乳酸脱乳的(I.I)H),肌酸激触(CK及谷草转氨陋(AST),谷内转制酣(A1.T)等升高，可进行性上升，达正常侑10倍以上，提示多脏器功能受损“
35、池里、危重型病例铁蛋白、D-：聚体、CRP,淀粉前、脂肪的、炎症因子如白细胞介素-6(I1.f)等均可显著升高,尿常规检存，半数以上柄例出现货白尿(+),少数病例出现尿潜血或血尿.凝血功能检查可现凝I仙功能异常，曲眼凝血的原时间(PT)和活化部分凝血活的时间(APTn延长。C.4.2病原学检测C.4.2.1样本采集、保存和运输烧原特异性检测，一般来集血标本，可为血清、全血、血浆等，也可采集呼吸道、消化遒、屎液和热使标本血清来集时,用无菌口空管，采集患者急性期(发病后1周内)和恢S1.期(与急性期标本采集间隔不少于3天,一般发病后2-4周)善抗我血标本3-5m1.,及时分离血清,分装保存于带螺旋
36、鼓、内有垫圈的冻存管内.如血液样本自采集到实验室接种细胞的时间少于1天，可在低温或室温条件下转运，如超过24h者，需将标本保存在-70C以下，干冰运输，用于病带特异性核酸、抗原和抗体检测及就原体分肉，采集患者呼吸遒、分泌物、呕吐物等样本时,可应川拭子进行采集.将采集后的拭子标本放置在含有少量无菌盐水或璘酸盐线冲液的无衡容器中，使用商业化的执子时，标本保存液应适合用于相应的检测目的，以上标本如果1小时以内不能开展检测，均应低温保存和运输,C.4.2.2病原学检测一般在SFTS发病后7天内患者血标本病原学检测检出率高，在发病IO天以上的忠者血液中检出病毒核酸、分离到病毒的报道并不少见，部分死亡病例
37、整个病程均可检出高教出病Af.用于精意分离的血液标本通常需枭第35m1.采集的方式取决于实脸目的和实脸室偏好，可为全血、白细胞、血浆或血清.全血、白细胞和血浆需要收集到含有抗凝剂的试管中,常用的抗凝剂是乙二胺四乙酸（EDTA）（紫管）、肝素（绿管、柠梭酸前与糖（黄管）.血清标本衢要收集到不含抗凝剂的试管中（红管）或含有促凝剂的管。抗凝剂中，肝索对某些聚合酬流反应I*CR具有抑制作用，影响核酸筛交检测结果。C.4.2.3免疫学检测SFTSV感染进入快友期后（发病7天以后），随存时间的廷长，患者标本中病毒特异性核酸、抗原等指标的检出率不断降低，抗体的检出率逐步升高.免疫学检*J方法易于形成适合现
38、场快速检使用和高逋Ift筛查检测使川的检册试剂,在疾病诊断和流行病学词查方面具有也要意义.IgM抗体可在患者发病23天后检出，发病5天后检出率明显上升,可持续到发病后6个月，部分可达一年以上。IgG抗体在发病710天后检出率高，可持续5年以上。因此，一般单价标本抗体检测不能实现确诊目的，双份血清抗体阳转或恢发期滴度较急性期1倍及以上增高者,可确诊.如病毒核酸和抗原等指标检测阴性,双份血清标本IgG抗体检测均为阴性，可做排除诊断：少数束症患者，从发病到死亡整个病程中郎不能检出特异性抗体.C.5鉴别诊断C.5.1与其他婢传疾病相鉴别姊碱干节肢动物门蛛形纲姊螭目婢总科，姊总科又分为硬姊科及软婢科，目
39、前，全世界已知婢类800余种，我国已发现Ho余种，各行份均有分布，不同地区优势蛭种类可能不同。婢叮咬人后可引起过敏、溃疡或发炎等症状一般均较轻微,少数患者会经历虚弱或麻痹.并逐渐向上移动，类似于其他神羟系统疾病（如格林-巴南综合征或肉毒毒素中毒等），通常可在消除蚪虫后24小时内恢笑，可能是婢虫唾液中的毒素引起的婢虫麻卿.笠种病原体（物毒、细胞、寄生虫）可通过姊虫叮咬吸血传播，使人患病，已知婢可携带80余种病毒、30余种细曲、30余种原虫，经婢媒传播的疾病早期常有类似的症状和体征，发热、发冷是G常见的症状，其次是瘙痒、头痛、乏力和肌肉酸摘，有的会出现关节搂痛、皮疹等.需进行鉴别诊断疾衲主要有克里
40、米亚-刚果出血热（又称新疆出血热）、婢传黄病毒第染、人粒细恂无的体杭、埃立克体标、掰点热、莱姆病、野兔热、巴贝斯虫病等。相应病原体分离培养、特异性抗原、抗体或核酸检测阳性有助于诊断.C.5.2与其他病毒性出血热类疾病相差别烧毒性出血热是一组由病毒引起的严重急性、常可伴出血的传央病的统称，早期临床表现无特异性,多表现为发热.部分病例可发展到皮下、体腔和内脏出血.甚至休克、昏迷和神经功能障碍等，具有较高的病死率.可引发出血热的病毒种类多，主要包括丝状病毒科、沙粒精毒科、汉坦物毒科、白蛭纤细衲毒科和黄病毒科部分成员，此外副钻病毒科的尼帕病尚和亨群拉精缺弹状病毋科的下刚果病那（BaS-C3恨。VirU
41、s,BASY）也可用兄出Jfc热样症状.病毒宿主和媒介类型广泛.包括非人灵长类、啮齿类动物、翼手目动物、家侍和节肢动物等,有的病原体宿主尚不明确.病毒传播方式更杂,包括人人传播、宿主动物人、动物-动物、媒介生物-动物-媒介生物、蟆介生物-媒介生物等多种方式.人间盛情多为敢在的不规律的，难以预测，实验室检测手段主要包括病毒分离，病毒核酸、抗原和抗体的定性或/和定量检测.在我国流行范困较广的病用性出血热主要包括肾媒合征出血热、登革热/申症登革热等.C. 5.3与导致血小板和臼细胞下降的疾旅相鉴别许多疾柄可引起血小板战少症，主要病因可为血小板生成呆过少、血小板破坏量过多和滞留于脾内的血小板过多.白血
42、病或其他件胞疾病.可导致骨便不能生成足鲂的血小板.肝硬化、骨解纤维化和戈谢病等，肿大的脾脏会捕荻血小板.导致血流中的血小板数减少.许多疾病还可应免疫性、血栓性和溶血性等衲因造成血小板M少，有些药物（如肝素、某些抗生於、乙热、抗辅药物和率宇）可因砰处毒性导致骨劭生成的血小板减少，血小板受破坏M增加.前小板减少早期可导致皮下出血表现为皮肤瘀点、瘀成或紫鹿、牙歌出血、使血或尿也，月经量地多等.随着血小板数目的减少，出血加曳可表现为消化道等腔道出血、陵内出血等。可引起白细胞减少的病因干j很多，可为粒细胞造血功能低下或红系及巨核系造血旺盛抑制粒系造血而可引起白细胞减少症，可由细的、病饰感染，药物因索（如
43、化疗药物及丙硫就喘啜等抗甲状腺药物）.结缔组织病（系统性红斑狼险、类风湿性关节.炎.干燥综合征等,消化系统疾病（肝硬化、牌功能亢进、肝炎等等原因而引起，多为血液系统疾病引发，包括各类良性血液病（如巨幼细胞性贫血、阵发性睡眠性血红近白尿症等以及恶性血液病（如白血病、淋巴揄、骨M1.增生异常综合征、件SU增殖性疾病等。与本病需要进行鉴别诊断的感染性疾病主要包括败血症、伤寒、恙虫病（又称从林风疹伤寒、流行性斑挎伤寒（乂称我传国格伤寒、地方性斑搂伤寒（又称双型图格伤然、黑热桥、EB病毒感染等。相应病原体分类培养、特异性抗体或核酸检测阳性有助于诊断。与本林需要进行鉴别诊断的血液系统疾病或结筛加织病主要包括如淋巴糊、噬血细胞嫁合征、系统性红班狼疮等.骨骼穿剌或活检、淋巴结活检病理检查或自身免疫相关抗体检测有助于诊断.
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