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1、 2014届毕业生毕业论文 多菌灵和石灰对阿魏菌丝生长的影响学生姓名 学 号 7041210219 所属学院 生命科学学院 专 业 应用生物科学 班 级 14-2班 指导教师 塔里木大学教务处制目 录摘要1 关键词1 引言1 1.材料与配方21.1.1供试菌种2 1.1.2母种培养基2 1.1.3麦粒种培养料2 1.1.4石灰多菌灵配方表2 1.2试验方法2 1.2.1母种活化2 1.2.2麦粒种制作21.2.3石灰多菌灵培养基配方制作3 2.结果与分析32.1纯石灰对菌丝生长影响3 2.2纯多菌灵对菌丝生长影响3 2.3石灰多菌灵互作多菌灵互作对菌丝生长影响43.小结与分析53.1小结53.
2、2分析5参考文献6致 谢7石灰和多菌灵对阿魏蘑菇生长影响陶文惠（塔里木大学生命科学学院 新疆阿拉尔 843300）摘要：阿魏菇菌丝在不同浓度的石灰和多菌灵的(PDA)培养基上进行试验，结果表明：石灰在3%以内的浓度对阿魏菇菌丝生长抑制作用不明显，在4%浓度石灰对阿魏菇菌丝有很强的抑制作用。而多菌灵浓度小于0.15%的对阿魏菌丝生长没有明显抑制作用，多菌灵浓度大于0.15%对阿伟菌丝有抑制作用。关键词：阿魏菌丝；石灰；多菌灵Limeand theeffects of carbendazim onferulicmushroom growthTaoWenhui（College of Life Sci
3、ences ，Tarim University，Alar Xinjiang 843300）Abstract: Pleurotus ferulae mycelium in different concentrations of lime and carbendazim (PDA) medium for testing, results showed that: Lime in concentration within 3% of Pleurotus ferulae mycelium growth inhibition was not obvious, there is a strong inhi
4、bitory effect on ferulae mycelium in 4% concentration of lime. The concentration of less than 0.15% carbendazim ferulic no mycelial growth was significantly inhibited, carbendazim concentrations greater than 0.15% for Awei mycelium inhibition.Keywords:A Weirands;lime;Carbendazim阿魏菇又称阿魏侧耳（Pleurotus f
5、erulae Lanzi），属侧耳科，子实体单生，菌盖直径5-15厘米，初期扁半球形后渐平展，最后靠近基部下凹扁形，表面有龟裂斑，始终为白色，较厚，菌褶延生，稍密，菌褶淡黄色，菌柄白色，长2-6厘米，向基部渐细。野生阿魏菇主要分布于新疆噶尔盆地荒漠区的伊犁、塔城、和阿勒泰地区，其中阿勒泰地区青河县的阿魏菇以色泽纯正、味道鲜美、营养价值高而享誉国内外1。阿魏菇春季生于阿魏植物的本质上，它集药用、美容、食用于体，营养成份全面而且含量又高，被研究食用菌的世界学者美誉为当今食用菌皇后，在食用菌族中与羊肚菌并列为姐妹菌，是一种高档的药、食两用菌。如今阿魏菇是腐生于药用植物阿魏上的珍稀食用菌，味道鲜美，肉
6、质细嫩，口感油腻，清香悠长，是难得的烹饪佳品，素有西天白灵芝之美誉，历来作为山珍列入名贵菜肴。它营养丰富，蛋白质、氨基酸、维生素、灰分等含量高于平菇、香菇、木耳、银耳等食用菌，它含有17种氨基酸，其中六种为人体所必需，其中赖氨酸和精氨酸含量较高是人体所必需的人本身不能合成的，并富含不饱和脂肪酸、多糖、钙、磷和锌、锰、硒等多种微量元素，营养价值很高。它还具有很高的保健价值，其过氧化物歧酶（SOD）的含量高于普通蔬菜一倍多；能促进新陈代谢，抵抗衰老，增强机体免疫力，对调节人体生理平衡起积极作用。易于消化吸收，营养成分齐全，有很高的药用价值，由于阿魏菇生长在药用植物阿魏上,因此又具有中药阿魏的药物功
7、效,能防癌抗癌、防治老年人心血管病、妇科肿痛、儿童佝偻病和软骨病,同时具有治疗胃病、伤寒、产后瘀血、消积、杀虫、解毒、治气管炎、肠胃炎、痢疾、疟疾、腹部肿块、肝脾肿大、腕腹冷痛以及治疗肠道寄生虫等作用。特别是阿魏菇富含真菌多糖,有增强人体免疫力、调节人体生理平衡的作用。据甘勇、吕作舟首次对阿魏蘑多糖的免疫活性进行研究,结果表明阿魏蘑多糖能够极显著地提高小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬能力2,以及赵祁、肖杰等通过阿魏菇对小鼠免疫功能的影响研究,进一步指出阿魏菇能维护小鼠机体内环境的稳定,保持正常生理活动的进行,具有增强人体免疫力、调节人体生理平衡的作用3。在国外,广泛分布在南欧、中非和北非,包括摩洛哥、中
8、非、法国、西班牙、土耳其、捷克、匈牙利及前苏联南部地区,同我国近邻的印度克什米尔地区也有分布4-8。20世纪50年代初,法国、印度和德国的科学家先后进行了驯化栽培及遗传分类方面的研究,1974年印度在克什米尔分离到阿魏菇天然菌株,并在椴木上驯化栽培成功。1974年法国的Cailleux和Diop进行阿魏菇的驯化栽培试验,并利用废麻和麦草,加上燕麦粒,驯化栽培成功8。1983年,中国科学院新疆生态与地理研究所的科技人员就对该菇进行组织分离和驯化栽培,获得成功,并于1985年通过鉴定。1996年元旦,北京市通州区,从新疆引进阿魏菇菌种,进行试验栽培获得成功,1997年成立北京金信食用菌公司,进行规
9、模化生产。从此, 阿魏菇产业快速发展,为我国食用菌产业的壮大注入了强劲力量,也为农民增收发挥了重要作用。因此, 阿魏菇不仅具有较高的营养价值, 还具有重要的药用和经济价值。本次实验中所使用的石灰和多菌灵是两种常用的抑霉剂，能够相对控制食用菌栽培中的污染发生，但不同食用菌对石灰和多菌灵敏感性表现出较大的差异，有的不敏感，有的表现为极强的抑制作用。在栽培阿魏菇的过程中，很多菇农为了控制污染在栽培料中加入石灰和多菌灵而造成栽培失败。本次实验目的是为了探讨阿魏食用菌栽培失败的原因，是否由石灰和多菌灵所致，我对不同浓度的石灰和多菌灵对阿魏菌丝生长的影响进行了试验。本地优势：南疆地区棉花的种植面积较大，棉
10、籽壳可以作为食用菌栽培的重要原料同时棉籽壳的价格较低，可以降低食用菌栽培的成本，有利于食用菌产业的发展。1材料1.1.1供试菌种阿魏菇母种由生命科学学院食用菌研究所提供 。1.1.2母种培养基母种培养基（PDA）：马铃薯200g、水1L、葡萄糖20g、琼脂20g。1.1.3麦粒种培养料麦粒培养料：麦粒1000g，粪草20%，石灰2%。1.1.4石灰多菌灵配方表将石灰多菌灵配方加入PDA培养基。表1 石灰多菌灵配方表(%) 石灰多菌灵A1(0)A2(1%)A3(2%)A4(3%)A5(4%)B1(0)A1B1A2B1A3B1A4B1A5B1B2(0.1%)A1B2A2B2A3B2A4B2A5B2
11、B3(0.15%)A1B3A2B3A3B3A4B3A5B3B4(0.2%)A1B4A2B4A3B4A4B4A5B4B5(0.25%)A1B5A2B5A3B5A4B5A5B51.2试验方法1.2.1母种活化先将马铃薯洗净去皮，挖去芽眼，切片，把1L水倒入锅中，加入200g马铃薯片，用文火加热煮熟，过滤，取滤液。将滤液倒入锅内，同时把称取的20g琼脂剪碎加入锅中，文火加热、搅拌，待琼脂完全融化后，再加入20g葡萄糖，搅拌均匀后倒入量杯内，趁热分装试管（分装量占全试管的1/5）。将试管擦净，塞好胶塞。10支1捆，用报纸包住硅胶塞的一头放入高压锅灭菌。严格按照要求操作，121，30min。灭菌，摆斜面
12、。接种前紫外线杀菌30min,接种前要用75%的酒精棉球擦拭双手每步都严格按照无菌程序操作,接种时应使菌种保持在酒精灯无菌区域。挖取菌种种块直径不小于3mm，放入含有培养基的试管中。至于恒温箱中避光培养，温度设置为25。培养20天长满试管斜面后，放入4冰箱中保存备用。1.2.2麦粒种制作称小麦1000g用清水将麦粒漂洗3遍，除去灰尘、麦糠等杂物，同时也减少培养基中杂菌的基数。在制种的前一天下午，用2的石灰水浸泡小麦，浸泡15小时。小麦捞出后在煮麦锅内煮沸，水沸腾后再煮20分钟左右，当麦粒达到“无白心，不开花”的标准后及时捞出，沥干多余水分。煮麦时加水不可偏少（水分偏少可能将麦粒煮糊），麦粒成熟
13、度是关系麦粒菌种制作成败的关键。将麦粒摊开，晾除表面水分，麦粒不沾手时及时收起。加入20g石灰和200g牛粪，搅拌均匀。装瓶（麦粒装至瓶肩即可）、封口。立式高压灭菌锅121灭菌4小时。自然冷却后接阿魏母种。1.2.3石灰多菌灵培养基配方制作先将马铃薯洗净去皮，挖去芽眼，切片，把适量的水倒入锅中，加入马铃薯片，用文火加热煮熟，过滤，取滤液。将滤液倒入锅内，同时把称取的琼脂剪碎加入锅中，文火加热、搅拌，待琼脂完全融化后，再加入葡萄糖，搅拌均匀后倒入量杯内，分装到25个250ml锥形瓶中再在每个锥形瓶中加入1.14配方混合的石灰和多菌灵。将锥形瓶擦净，用封口膜封好再在外面用报纸将封口膜包好，并用报纸
14、包好空培养皿10个一包。放入高压锅灭菌。严格按照要求操作，121，灭30min。再将锥形瓶中的培养基分装到培养皿中，每个锥形瓶倒3个培养皿。冷却后在培养皿中间接一粒阿魏麦粒种培养。待接种完毕将培养皿倒置于平面上室温培养。每隔4天画一次线共画三次。计算菌丝生长速度，菌丝生长速度公式= 两次测量数据之差 / 两次测量间隔。2结果分析2.1纯石灰对菌丝生长影响表2 纯石灰菌丝生长表（cm/d）石灰IIIIII平均值显著性水平0.05显著性水平0.053%0.240.260.250.25aA2%0.240.230.220.23 bcAB4%0.230.210.220.22 cd BC1%0.190.1
15、90.230.20 de CD00.170.180.190.18fDE从表2可以看出在0.05水平，3%石灰与2%石灰之间有显著差异，2%石灰与4%石灰之间无明显差异，2%石灰与1%石灰有显著差异，4%石灰与1%的石灰差异不显著，1%的石灰与无石灰的差异显著。在0.01水平，3%石灰与2%石灰无极显著差异，3%石灰与4%石灰差异极显著，2%石灰与4%石灰无极显著差异，2%石灰与1%石灰差异极显著，4%石灰与1%石灰无极显著差异，石灰4%与无石灰的差异极显著，1%石灰与无石灰无极显著差异。从以上分析可以得出以下结论阿魏菇菌丝生长速度3%石灰2%石灰4%石灰1%石灰0%石灰。3%石灰与其他几组存在
16、显著性差异。 2.2纯多菌灵对菌丝生长影响表3 纯多菌灵菌丝生长表（cm/d）多菌灵IIIIII平均值显著性水平0.05显著性水平0.0500.170.180.190.18 f DE0.1%0.170.180.190.18 f DE0.15%0.180.160.170.17Fg EF0.2%0.130.150.140.14 i GH0.25%0.110.130.120.12 j H从表3可以看出在0.05水平，无多菌灵与0.1%多菌灵差异不显著，0.1%多菌灵与0.15%多菌灵差异不显著，0.15%多菌灵与0.2%多菌灵差异显著，0.2%多菌灵与0.25%多菌灵差异显著，在0.01水平，0.1
17、5%多菌灵与0.2%多菌灵差异极显著，0.2%多菌灵与0.25%多菌灵无极显著差异。从以上分析可以得出以下结论阿魏菇菌丝生长速度0%多菌灵0.1%多菌灵0.15多菌灵0.2多菌灵0.25%多菌灵。0%、0.1%、0.15%但与其他配方存在显著差异。2.3石灰多菌灵互作多菌灵互作对菌丝生长影响表4 菌丝生长速度表（cm/d）组数配方123平均值显著性水平0.05显著性水平0.01A4B10.240.260.250.25a AA4B20.230.240.250.24abABA3B10.240.230.220.23bcABA3B20.240.220.230.23bcABA4B30.220.240.2
18、20.23bcABA3B30.220.230.210.22 cd BCA5B10.230.210.220.22 cdBCA2B10.190.190.230.20 deCDA5B20.20.210.190.20 eCDA2B20.210.200.190.20eCDA1B20.170.180.190.18 f DEA2B30.190.170.180.18 f DEA1B10.170.180.190.18 f DEA5B30.190.170.180.18 f DEA4B40.190.170.180.18 f DEA3B40.170.160.180.17 fg EFA1B30.180.160.170.
19、17Fg EFA5B40.170.150.160.16 gh EFGA2B40.160.150.170.16 gh EFGA3B50.150.140.160.15 hi FGA4B50.140.160.150.15 hi FGA1B40.130.150.140.14 i GHA2B50.140.150.130.14 i GHA1B50.110.130.120.12 j HA5B50.110.130.120.12 j H从表4可以看出在0.05水平，配方A4B1与配方A4B2差异不显著，配方A4B1与配方A3B1差异显著，配方A4B2与配方A3B1差异不显著，配方A4B2与配方A3B3差异显著，
20、配方A3B1与配方A3B3差异不显著。在0.01水平配方A4B1与配方A3B3存在极显著差异，配方A4B2与配方A3B3无显著性差异。表5 石灰多菌灵互作多菌灵互作表由上图可以看出石灰为3%多菌灵为0.1%配方菌丝生长速度最快，可能是石灰和多菌灵对菌丝有共同促进的作用。3小结与分析3.1小结从表2在石灰小于3%时对菌丝生长有促进作用可能是为菌丝提供矿物元素和适合的PH值，当石灰浓度为4%有抑制作用可能是石灰使PH变得不适合菌丝生长。从表3分析可以得出在纯多菌灵培养基上培养时，多菌灵对阿伟菇菌丝有抑制作用。当多菌灵浓度在0.15%以内对菌丝抑制作用不明显。当多菌灵浓度大于0.15%时对菌丝有明显
21、的抑制作用。实验结果表明，在不同浓度石灰和多菌灵配方下菌丝生速度各不相同，其中配方A4B2 0.1%的多菌灵和3%石灰菌丝长势最好，其次是配方A4B3 0.15%的多菌灵和3%石灰。长势最差的配方是A1B5 0.25%多菌灵和A5B5 0.25%多菌灵4%石灰，由此得出0.1%多菌灵和3%石灰配方是阿魏菇菌丝最适生长配方。3.2分析影响阿魏菇菌丝生长因素有很多，经此次试验影响阿魏菌丝生长的因素有：培养皿受到污染，导致培养皿中生长杂菌，原因可能是灭菌不彻底，接种时操作不规范等。参考文献1 卯晓岚，中国大型真菌 郑州:河南科学技术出版社,20002 甘勇，吕作舟 阿魏蘑多糖理化性质及免疫活性研究-
22、菌物系统2001年02期3 赵祁，肖杰，王勤阿魏菇对小鼠免疫功能的影响-中国食用菌2001年01期4 陈忠纯，阿魏侧耳的研究 干旱区研究11991,(2):94955 陈忠纯，阿魏侧耳的栽培技术 干旱区研究11994,11(2):65686 牟川静，曹玉清，马金莲,陈魏侧耳一新变种及其培养特征 菌物学报,1987,6(3):1531565贾身茂,高喜梅1白灵菇产销现状和发展前景 食用菌,2005,(2):47 郑焕春， 颜丽君. 白灵菇菌株选优试验报告J. 食用菌， 2008,（5）： 2021.8 陈恒雷， 吕杰， 张军， 等. 阿魏菇母种培养基配方优化研究J 食用菌， 2006， （3）：
23、 2223. 致 谢值此论文完成之际，谨向曾经关心、帮助、支持和鼓励我的老师、同学、亲人和朋友致以最真诚的谢意和最忠心的祝福！首先，我要感谢我的导师胡建伟老师。论文是在老师的悉心指导下完成的。老师对本选题十分重视。提纲、完成初稿、修改完善到最后的定稿都一一过问，花费了大量心血。他的耐心教导给予了我很多灵感，使我受益匪浅。在此，也向以下老师表示衷心的感谢！衷心感谢曾经指导过我学业的各位老师，他们的指导和帮助为本文的完成奠定了良好的专业基础。衷心感谢周围的同学和朋友，我们一起走过了难以忘怀的岁月，缔结了永恒而真挚的友谊。在论文完成过程中得到了你们无私的帮助，在此深表谢意！最后要感谢我的家人对我的全力支持，他们为我付出的太多，他们在生活和精神上的支持是我顺利完成学业的根本保证！还有许许多多给予我学业上鼓励和帮助的师长、朋友，在此无法一一列举，在此也一并表示忠心地感谢。8