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1、脂树种子的化学成分分析摘 要脂树（Sindora glabra Merr. ex de Wit）别名蚌壳树（海南）、曲脚楠（琼中）、科楠（吊罗）、油楠(国内)，木质部内富含油脂，可燃性能与柴油相似，故又称“柴油树” 或者“石油树”，是我国热带地区用途十分广泛、经济价值高的珍贵稀有植物。脂树具有作为能源植物开发利用的巨大潜力。本次实验选取海南产脂树种子（由种子与种柄两部分组成）作为研究对象，分别对种子（柄）化学组成进行预分析；并测定种子（柄）中水分、总氮、粗脂肪、多糖和灰分的含量、同时对种子（柄）中油脂的理化性质进行分析研究；为今后脂树的进一步综合开发利用提供基础。定性分析是根据物质的物理特性、
2、特征性化学反应等初步识别和鉴定某些组分。实验结果表明，脂树种子含有多肽及蛋白质、糖类、黄酮类、内酯类、油脂等化学成分，可能含有甾体、三萜皂甙、酚类、有机酸、鞣质、蒽醌类、挥发油、香豆素等化学成分，不含有氨基酸、生物碱、强心甙等化学成分；脂树种柄中含有氨基酸、多肽及蛋白质、糖类、油脂等化学成分，可能含有黄酮类、酚类、有机酸、鞣质、挥发油、其它脂类等化学成分，不含有甾体、三萜皂甙、生物碱、香豆素、内酯类、强心甙、蒽醌类等化学成分。通过相关文献检索及查阅，确定了脂树种子（柄）中水分、总氮、粗脂肪、多糖、灰分含量的测定方法：常压烘箱（105）干燥法测定脂树种子中水分含量、凯氏定氮法测定脂树种子中总蛋白
3、质含量、索氏提取法测定种子中粗脂肪含量、苯酚-硫酸法测定脂树种子中多糖含量、 550灼烧法测定脂树种子中总灰分含量。结果显示，脂树种子中水分、总蛋白质、粗脂肪、多糖、灰分含量分别为：10.50%、3.70%、4.08%、34.40%、1.87%，脂树种柄中水分、总蛋白质、粗脂肪、多糖、灰分含量分别为：13.32%、3.95%、17.64%、10.87%、3.16%。其水分、总氮、粗脂肪、多糖、灰分含量总和分别为：种子57.69%、种柄49.82%，其它物质可能为有机酸、鞣质、黄酮类等。种子和种柄除了粗脂肪（种子，4.08%；种柄，17.64%）和多糖（种子，34.40%；种柄，10.87%）含
4、量有较大的不同外，其它成分含量差别并不大。通过相关文献检索及查阅，确定了脂树种子（柄）油脂理化性质的分析方法：韦氏法测定脂树种子油脂的碘价、电位滴定法测定酸值，氢氧化钾-甲醇溶液法测定皂化值，称重法测定比重。结果显示，脂树种子油脂的碘价、酸值、皂化值、比重（g/mL）分别为：109.01、3.91、154.56、0.91，脂树种柄油脂的碘价、酸值、皂化值、比重（g/mL）分别为：52.00、8.44、201.25、0.89。种子和种柄油脂除了比重差别不大以外，其它理化性质均有较大不同，其中，种子油脂碘价109.01，属于半干性油，种柄52.00属于不干性油。种子油脂的皂化值远远小于种柄油脂的，
5、说明前者脂肪酸分子量更大，亲水性更弱。关键词：脂树；定性分析；定量分析；理化性质AbstractSindora glabra Merr. ex de Wit，which has various names in different areas, is widely distributed in tropical regions in the world, and in Hainan as far as China is concerned. Its xylem is rich in oil, and its physicochemical property is similar to dies
6、el, which makes Sindora glabra Merr. ex de Wit be called “diesel tree” or “petrolic tree”. Sindora glabra Merr. ex de Wit is endowed with high economic value and is widely used in various areas. In a word, it has great potential in development value.This paper devotes to analyze the component of see
7、ds (composed of seedstalk and seed) of Sindora glabra Merr. ex de Wit, using seed of the plant growing in Hainan as experimental subject. The components of the seed have been qualitative analyzed, and also, the main components, such as moisture, polysaccharide, protein, raw oil, and ash, are quantit
8、ative analyzed. At the same time, the physicochemical properties of the oil were made a preliminary study. This paper means to provide a scientific basis for development and utilization of Sindora glabra Merr. ex de Wit.According to physical characteristics, characteristics of chemical reactions etc
9、., some components was made the initial recognition and identification. The results show that the Sindora glabra Merr. ex de Wit contains different kinds of chemical components, such as polypeptide and protein, polysaccharide, flavonoid, Ketolides, oiL in seed for sure, and it probably contains ster
10、ides, Saponins, phenols, organic acid, tannin, anthraquinon, volatile oil, coumarin possibly, but dont contain amino acid, alkaloid, cardiac glycoside,etc. in the seedstalk, there must be part of amino acid, polypeptide and protein, polysaccharide, oil, there maybe some flavonoid, phenols, organic a
11、cid, tannin, volatile oil, Ketolides,etc, there is no sterides, Saponins, coumarin, alkaloid, cardiac glycoside, etc.Through consulting literature, experimental methods are determined, such as, Moisture content is decided by Oven (105 ) dry and determination of moisture content, protein content by m
12、icro-Kjeldahl determination of total protein, raw oil content by oil content determination, polysaccharide content by Phenol-Sulphate colorimetry, and ash content by 550 burning method. The results shows content of different composition in seed, such as moisture, protein, raw oil, polysaccharide, an
13、d ash, is 10.50%，3.70%，4.08%，34.40%，1.87%；in seedstalk, the dates respectively are, 13.32%，3.95%，17.64%，10.87%，3.16%. To sum all the above ingredients up, we can get the total: in kernel, 57.69%, in seedstalk, 49.82%. the rest of the ingredients may be organic acid, tannin, flavonoid,etc. The conten
14、ts of different composition are all familiar except raw oil (seed, 4.08%;seedstalk, 17.64%) and polysaccharide content(seed, 34.40%; seedstalk, 10.87%).Through referring documents, methods of analyzing physicochemical properties of oil is determined, such as iodine value is decided by wijs method, a
15、cid value by potentiometric titration method, saponification value by Potash-methanol method, and density by theoretical method. Results show the above four physicochemical properties of seed correspondingly are 109.01, 3.91, 154.56, 0.91; dates of seedstalk correspondingly are 52.00, 8.44, 201.25,
16、0.89. The physicochemical properties of oil from seed and seedstalk distinguish from each other. For example, iodine value of oil from seed is 109.01, belonging to semi-drying oil, while seedstalk is belonging to non-drying oil. And also, saponification value of seed is far less than it of seedstalk
17、, which shows that the former has larger molecular weight, and weaker hydrophilicity. Keywords: Sindora glabra Merr. ex de Wit; Qualitative analysis; Quantitative analysis; physicochemical property目 录摘 要1目 录51 文献综述71.1 脂树资源概述71.1.1 脂树的形态特征及分布71.1.2 脂树的主要用途与经济价值81.2 脂树种子概述91.2.1脂树种子的形态及构造91.2.2 脂树种子中
18、的化学成分91.2.3 脂树种子的应用101.3脂树种子化学成分研究的意义102 实验部分112.1定性分析112.1.1 脂树种子的采集和保存112.1.2 脂树种子成分的定性分析112.2定量分析162.2.1 脂树种子中水分含量的测定162.2.2脂树种子中总氮含量的测定162.2.3 脂树种子中灰分含量的测定182.2.4 脂树种子中粗脂肪含量的测定182.2.5脂树种子中多糖含量的测定192.3脂树种子油脂理化性质测定212.3.1 比重测定212.3.2酸值测定212.3.3皂化值测定222.3.4 碘价测定233 结果与讨论253.1定性分析253.1.1 脂树种子化学成分的定性
19、分析253.1.2 讨论283.2定量分析283.2.1 脂树种子中水分含量的测定283.2.2 脂树种子中总氮含量的测定303.2.3 脂树种子中灰分含量的测定323.2.4脂树种子中糖类含量的测定333.2.5 脂树种子中粗脂肪含量的测定363.3脂树种子油脂理化性质测定373.3.1 比重测定结果373.3.2酸值测定结果383.3.3皂化值测定结果393.3.4碘价测定结果404结论43补充说明44致 谢45参考文献461 文献综述脂树（Sindora glabra Merr. ex de Wit）别名蚌壳树（海南）、曲脚楠（琼中）、科楠（吊罗）、油楠，木质部内富含油脂,在树干打洞后能
20、够产油,单株产量高达3.5公斤,其色淡黄或淡棕色,含有78%的挥发油分 朱亮锋,陆碧瑶.”柴油树”油楠J.林化科技通讯,1982,( 2):70.，可燃性能与柴油相似，故又称“柴油树” 或 “石油树” 何和明,吴燕丽.海南岛泌油植物油楠J.特种经济动植物,2001,(4):36-39.，属于国家二级保护植物，是我国热带地区用途十分广泛、经济价值高的珍贵稀有植物，尤其在科技手段越来越发达生物柴油的利用前途一片光明的今天，油楠作为绿色能源植物颇具前景 顾龚平,张卫明.燃油植物油楠的资源开发利用J.中国野生植物资源,2008,(4):14-16.。脂树生长在海南岛尖峰岭、吊罗山、霸王岭三大林区，树高
21、最高约3 0米，最大胸径超过1.2米。20世纪八十年代，由于岛上森林日遭破坏，油楠的分布范围大为缩小，资源日益减少，甚至除了三大林区尚存数量不多的大树，其他各县均极稀少，甚至绝灭 黄全.海南岛的油楠J.林业科技通讯,1981,(10):21.。但是自从脂树被国家列入二级保护植物以来，在海南多地已有自然保护区对脂树资源加大了保护力度，另外采取人工栽培的方式，使脂树的规模日益增大，数目逐渐增多 李海滨,曾冬琴.海南油楠资源概况及其培育对策J.热带林业,2011,(3):30-33. 。1.1 脂树资源概述1.1.1 脂树的形态特征及分布（1）形态及生物学特征脂树属于油楠属，苏木科常绿乔木，约20种
22、，分布于亚洲和非洲的热带地区，其中脂树S. gLabra Merr.ex de Wit 我国海南岛亦产之。高2030米，胸径1米以上，高大魁梧。最大的高35米，胸径1.8米，非常壮观。偶数羽状复叶，小叶210对；花小，两性，组成圆锥花序；萼外面常有软刺（国产种），有一极短的管和基生的花盘，裂片4，上面2枚合生；花瓣1，很少2片；雄蕊10，上面1枚稍短而无花药，其他9枚合生成一束，上面的最长，突出；花药丁字着生；子房具短柄，有胚珠27颗；荚果扁平，斜圆形，果瓣硬，有散生、短的直刺，很少无刺；种子12颗 李荣生,尹光天,杨锦昌,等.油楠作为能源植物开发利用的思考J.生物质化学工程,2006,(S1
23、):161-164.。（2）地理分布脂树生长在海南岛尖峰岭、吊罗山、霸王岭三大林区，主要分布在海拔500米以下的热带常绿季雨林中。尖峰岭林区以五、六、十一林场为最常见。它常与青皮、倒卵阿丁枫、灯架、子京、高山榕和光叶巴豆等乔木树种混生。粗略估计尖峰岭林区脂树的资源约有10,000立方米。 1.1.2 脂树的主要用途与经济价值（1）脂树的主要用途脂树是热带、亚热带的能源树种，其树干含有一种类似煤油的淡棕色可燃性油质液体，木质内含有丰富的油脂，用棉花蘸上一点火就着，可燃性能与柴油相似，可作为柴油的代用品。当脂树长到1215米高，胸径4050厘米时，脂树的心材部位就能形成黄色油状树液，分泌出树脂。当
24、削开它的韧皮部或砍断枝丫时，油脂就会自行溢出，易燃且气味清香，无需加工，就可放在柴油机内做燃料或用做照明。林业工人和当地居民常用来点灯照明，叫它“煤油树”。根据资料记载，一株成年油楠一年可产50斤油。最多可产100斤。一株伐倒后的脂树可从树心中流出几十斤油状物。在采伐过程中，有的植株锯到心材时，柴油就顺流而出;有的则在伐倒的树干断面上，渐渐分泌出油来。一棵大树采集一次就能流出78斤油，一天能产“柴油”1015千克。1981年初，华南植物研究所的科研人员，从吊罗山采集了脂树，经过蒸馏、化验，油液中75左右是无色透明具有清淡木香香气的芳香油 杨锦昌,尹光天,吴仲民,等.海南尖峰岭油楠树脂油的主要理
25、化特性J.林业科学,2011,(9):21-27.，25是棕色树脂类残渣。油中有11种化合物，其中依兰烯含量40.8，丁香烯30.5、杜松烯6.4，其他华拔烯、蛇麻烯等都在4.4以下。脂树在我国海南岛有一定的蕴藏量，可供开发利用。我国政府和有关部门已制定了保护和发展计划，在广东、广西和福建等省区已成功引种栽培 陆碧瑶,李毓敬.油楠油挥发成分的研究J.林产化学与工业,1982,(1):26-30.。脂树材质优良，易加工，干燥后稍开裂，并稍有变形，心材耐腐，是建筑、高级家具的优良用材。脂树的气干密度为0.520.85g/cm3，木材之比重约为0.60.7，木材结构略粗，木肌细致。心材部分有含油之触
26、感，纹理通直略交错，心、边材区别明显，心材黄褐色至红褐色，边材色浅，心材有时具有深色条纹，具有些许香气。具有由薄壁细胞包围之同心园弧状排列之纵向树脂沟，薄壁细胞有围孔，短翼状及带状，并有具多室结晶的散生薄壁细胞，与称为Sepetirpaya (Pseudosindora属)之木材极为相似，唯不具纵向树脂沟。脂树在东南亚热带地区也有分布，在菲律宾等国，居民也常采集脂树油来点灯。 另外，脂树油还可用来做香料和治疗皮肤病。（2）脂树有着很高的经济价值脂树是海南岛名贵的家俱材，优良的造船和建筑材，尤其供作大件板料、上等家俱、室内装饰及船材等，传统经济价值很高。而现代先进的科学加工工艺赋予它更高的经济价
27、值。其树干所泌油分既能直接与柴油混燃，代替一部分的原料，而且经过研究，其树干油与种子所提炼出的油含有多种芳香油，可以做香料，也有一定的医药作用。1.2 脂树种子概述1.2.1脂树种子的形态及构造脂树花两性小型，黄色，苞片卵形叶状；全部密被毡毛，花序呈圆锥状顶生和腋生，花期56月；荚果圆卵形且稍为膨胀，顶端有短喙无毛，荚瓣具大刺，内有胶质体，果体内有近圆卵形、棕黑色种子12枚；果熟于8月下旬，荚果由青色转为黑褐色时便可采收。采下的脂树种子质地致密而坚硬，难以粉碎，且有一层棕黑色、光滑而致密的种皮，用一般的物理方法极难将其剥离。种仁呈白色，略带微黄，规格约1cm2cm。种柄略小，无皮，呈深棕色，较
28、种子部分易粉碎。1.2.2 脂树种子中的化学成分对未知成分的中草药等天然产物，在分离其有效成分之前，作一初步检查，及了解其中所含成分的概貌是很有必要的。本课题主要研究的是脂树种子的化学成分。第一步需先通过预实验对种子进行定性分析，以了解种子中各种化学成分的存在与否来确定研究方向。对未知成分的脂树种子进行一次初步的分离，比较各部分的得量，并按其可能存在的成分选择适当的鉴别反应。进行试验，必要时可以进行纸层析或薄层层析鉴定，最后作出合理的判断。系统预试方法很多，常采用的为递增极性溶剂法，就是根据中草药成分亲脂性强弱，选用各种极性不同的溶剂，依次进行提取，使分为若干部分，并按其可能存在的成分选择适当
29、的鉴别反应。最后作出较合理的判断。如将中草药原料依次用石油醚、乙醚、乙醇、水等溶剂进行提取，化学成分依亲脂性强弱依次被提取出来，或者先用甲醇、丙酮等弱亲脂性溶剂提出绝大多数成分，然后用酸性水溶液温浸提出多糖、蛋白质等，总提取物再进一步用溶剂提取，分出酸性、碱性、中性成分、水蒸汽蒸馏分出挥发性成分，本实验就采用后一种方法。实验样品是将种柄与种子分开，并分别用粉碎机粉碎，达到250目之后的粉末。1.2.3 脂树种子的应用脂树种子因其产量少，采收期集中，且采收难度大，故到目前为止对脂树种子的利用还处在研究阶段。根据实验结果显示，脂树种子中含有的油脂种类多样，可以开发为香料及药物等，具有一定的开发利用
30、价值。1.3脂树种子化学成分研究的意义脂树是我国二级珍稀保护植物，其种子也有很高的经济价值。自从被列入国家二级保护植物以后，对其的保护日益增强，更有利用人工培育的方式来增大脂树的规模以及数量。随着脂树资源的逐渐扩大，对其的利用也有着愈来愈重要的意义。目前脂树化学的研究仅仅局限在对脂树树干产油的研究方面，而对其种子成分的研究尚未见报道。随着对脂树种子成分的研究在更大的范围内开展，必然会使得对其种子的深加工成为可能。脂树种子油脂的增香、医用价值使其得到越来越多的关注。本篇论文对脂树种子的化学成分进行研究可以为以后的应用打下理论基础。2 实验部分2.1定性分析2.1.1 脂树种子的采集和保存脂树种子
31、采自海南中部山区，经海南省林业科学研究所李大周高级工程师鉴定为脂树。采集后的脂树种子风干后密封后于常温下保存于干燥箱备用。2.1.2 脂树种子成分的定性分析(1)实验仪器、试剂及实验材料 实验仪器 R201L 旋转蒸发仪，上海申生科技有限公司KQ218 超声波清洗仪，昆山市超声波仪有限公司ZF-2型 三用紫外灯，上海安亭电子仪器厂DZF型 真空干燥箱，上海精宏实验设备有限公司BP211D型 电子天平，德国sartorius公司FLBP-250型万能高速粉碎机，上海菲力博食品机械有限公司HH-S2数显恒温水浴锅，常州国华电器有限公司KSW-2D-11电阻炉温度控制器，沈阳市节能电炉厂TDL-40
32、B离心机，上海安亭电子仪器厂试剂氢氧化钠，AR，天津化学试剂厂硫酸铜，AR，广东汕头市西陇化工厂无水乙醇，AR，广东光华科技股有限公司浓盐酸，AR，北京北化精细化工有限责任公司浓硫酸，AR，广东东红化工厂冰醋酸，AR，广州番禺力强化工厂碘化钾，AR，广州番禺力强化工厂锌粉，AR， 广东台山化工厂碘，AR，天津市福晨化学试剂厂茚三酮，AR，国药集团化学试剂有限公司 -萘酚，AR，上海亭新化工厂甲基红，AR，天津市天新精细化工开发中心甲基绿，AR，天津市天新精细化工开发中心氨，AR,汕头市西陇化工厂有限公司香草醛，AR，天津市福晨化学试剂厂茚三酮，AR，国药集团化学试剂有限公司硝酸银，AR，国药集
33、团化学试剂有限公司石油醚3060沸程,AR,天津市富宇精细化工有限公司乙酸乙酯，AR，广东光华科技股有限公司。实验材料常温保存风干后的脂树种子(2)实验原理及操作方法实验原理定性分析是识别和鉴定纯物质或物料中组分的分析方法。组分常指元素、无机和有机官能团、化合物，有时也指含有一种或几种物质的一个物相。定性分析常在定量分析之前进行，它为设计或选择定量方法提供有用的信息。定性分析根据物质的物理特性（如颜色、臭味、比重、硬度、焰色等）、特征性化学反应（如特征颜色、沉淀的生成或溶解、特征气体和特征臭味的出现等）、生化现象（如只要存在痕量的某些重金属元素，就能促进或抑止某些微生物的生长；也可以利用酶的特
34、殊选择性去检出物质）来初步识别和鉴定某些组分。脂树种子中存在多种有效成分，根据特定的颜色反应及实验现象初步断定某种有效成分是否存在。操作方法取采集的种子和种柄两部分，分别用粉碎机粉碎（过250目筛）后按照以下构架处理，得到各待测液 何钢,文亚峰.人心果乳汁成分的定性分析J.经济林研究,2004,(2):38-41.。种子成分预实验构架如图2-1所示：图2-1 种子成分预实验构架具体各物质分析方法 李会宁,赵桦,杨培君.构树乳汁成分的定性检识J.汉中师范学院学报(自然科学),1999,(3):43-46.：a.挥发油和油脂油斑试验：将试液滴于滤纸上，能自然挥发或加热后挥发者可能为挥发油。如果出现
35、持久性的透明斑点，可能为油脂。香草醛浓HCl试验，将试液滴于滤纸上，喷洒试剂如显紫、兰、黄、红色可能含挥发油。b.甾体、三萜皂甙泡沫实验：取样品的水溶液2mL于带塞试管中，用力振摇3min，若产生持久性（维持10min以上）蜂窝状泡沫，且泡沫量超过液体体积的1/3，则表明可能含有皂甙类物质。氯仿-浓硫酸试验(Salkowshi反应)：将2mL试品的氯仿液，置于试管中，沿管壁滴加浓流酸2mL，氯仿层出现红色，硫酸层有绿色荧光。(如试品不是氯仿溶液，则需将其蒸干，再加2mL氯仿溶解)。c.蛋白质、多肽和氨基酸双缩脲实验 安银岭.植物化学M.吉林:东北林业大学出版社,1996,12-34.：取样品的
36、水溶液1mL，加入10%的氢氧化钠溶液3滴，充摇匀后，逐渐滴加1%的硫酸铜溶液12滴，边加边摇，显示紫色，则可能含有蛋白质或氨基酸。茚三酮(Ninhydrin)试验：取试液0.5m1，加入试剂12滴摇匀，在沸水浴上加热数分钟，应出现兰色，紫色或红紫色，或将试液滴于滤纸上，烤干，喷洒试剂，再于100加热。25分钟呈色亦可。d.糖类、多糖、甙类-萘酚实验（Molisch紫环反应） 周晓峰.中国森林生态系统定位研究M.哈尔滨:东北林业大学出版社,1994.261-273;346-370.：取样品水溶液1mL，加入10%-萘酚乙醇试剂12滴振摇后，倾斜试管，沿管壁慢慢加入0.5mL浓硫酸，静置，观察两
37、层溶液界面的变化，若出现紫色环，则可能含有糖类、多糖、甙类。费林实验：取样品水溶液1mL，加入新配置的费林试剂45滴，在沸水浴上加热数分钟，若出现氧化亚铜砖红色或黄色沉淀，表明可能含有糖类或甙类。e.有机酸pH值的测定：取冷藏的种子，用pH计进行测定，若其PH值在3.85.4之间，表明可能含有有机酸类物质。硝酸银实验：取试液少许加5AgN03试剂，出现白色沉淀(在毛细管中作)。溴酚蓝实验：溴酚兰试验：将试液滴于滤纸上，喷洒0.1溴酚兰的乙醇液立即在兰色背景上显黄色斑色。f.酚类和鞣质明胶沉淀试验，取供试品水溶液，过滤，加入明胶试液L2滴，出现混浊或白色沉淀可能有鞣质。铁氰化钾-三氯化铁反应：精
38、密吸取样品溶液适量分别置于10 mL容量瓶中,加70%的乙醇至2 mL，加0.8 mL 0.01mol/L十二烷基硫酸钠(SDS)溶液，0.4 mL铁氰化钾-三氯化铁显色剂，摇匀，暗处静置5 min，用1 mol/L的冰醋酸稀释至10 mL，暗处静置30 min。三氯化铁反应：用40%的三氯化铁和60%的水，当然三氯化铁多些，或者用温水（不是热水，以防油漆脱落）可使反应速度快些。另有，先将一定量的三氯化铁溶于浓盐酸中，再加蒸馏水稀释，质量比为35%的三氯化铁：65%的水。取1支试管，加入样品总酚溶液2mL，再加入1%三氯化铁1mL，观察颜色变化。g.生物碱类碘-碘化钾实验：取样品的乙醇溶液1m
39、L，滴加23滴碘-碘化钾试液，若有棕红色沉淀生成，则含有生物碱类物质。苦味酸实验：试品中性水溶液与苦味酸试剂作用产生黄色沉淀，或混浊为阳性反应。h.强心甙亚硝酰铁氰化钠反应(1egal反应)：将试品溶于23滴吡啶中，加入0.3亚硝酰铁氰化钠溶液12滴，再滴加10NaOH溶液呈红色，渐渐消退。碱性碱性苦味酸实验：3,5-二硝基苯甲酸试验(Kedde氏反应)，将试品少许加乙醇数滴溶解，加入Kedde试剂，呈紫色。三氯化铁-冰醋酸实验：取试液1mL加0.5FeCl3，醋酸溶液1mL，沿管壁滴加H2SO41mL，二液面间出现棕色环(或其他颜色)，冰醋酸层呈绿色兰色。i.香豆素、内酯类及其它脂类荧光试验
40、：羟基香豆素类的极稀水溶液发生兰色荧光，加氨后呈黄色荧光。异羟肟酸铁反应：取1N盐酸羟胺甲醇液0.5mL，置于小试管中，加试液数滴，加2N氢氧化钾甲醇液使溶液呈碱性，在水浴上煮沸2分钟，冷却后滴加5HCI使溶液呈酸性，加1FeCl3溶液12滴，若出现紫红色，表现有香豆素或其他酯类，内酯化合物。氢氧化钠盐酸反应：取试品的乙醇液2mL，加1NaOH液1mL，于沸水浴上加热10分钟(若有沉淀过滤除去)，于澄明液中加2HCl液酸化后，溶液变混浊，为内酯、香豆素类反应。j.蒽醌类碱液试验(Borntragers 反应)：取试液1mL加1NaOH溶液1mL，即呈红一红紫色，亦有呈兰色者，表示可能有羟基蒽醌
41、。醋酸镁试验：取试液0.5mL，加人试剂23滴，若有羟基蒽醌类，则会出现橙、兰、紫色等。颜色随羟基数目、位置而定。k.黄酮类 李秀信,王荣花,杨一秀.一点红黄酮成分的分析及含量测定J.西北植物学报,2002,21(4):42-43盐酸-锌粉实验：取样品的乙醇溶液1mL，加入少量锌粉，再加45滴浓盐酸，置60水浴锅中加热2min，若显示红色，表明含有黄酮类物质。铝盐络合反应：取试样甲醇液0.5mL，滴加1AlCI3甲醇溶液，呈深黄色，放置后出现黄色荧光者为3,5-游离羧基或邻二羟基黄酮类。氨熏试验：将滴有试液的滤纸，加上1滴氨水，立即置紫外灯下观察，有极明显的黄色荧光斑点。2.2定量分析2.2.
42、1 脂树种子中水分含量的测定(1)实验原理将一定量的脂树种子粉末放在105烘箱内，在常压下烘干至恒重，遗失的重量为所含水分量。(2)实验仪器及材料仪器BP211D型电子天平，德国sartorius公司， DZF-6021型真空干燥箱，上海精宏实验设备有限公司材料粉碎后常温密封保存的脂树种子粉末(3)实验步骤 GB 5497-1985 粮食、油料检验水分测定法取三只洁净的小烧杯，在110烘箱中烘1h，准确称重。用已恒重的小烧杯分别称取三份种子以及种柄平衡试样，在105烘箱中烘3h，取出，冷却称重；在相同条件下再烘约0.5h，冷却称重，直至两次称重之重量差小于0.002g。2.2.2脂树种子中总氮
43、含量的测定(1)实验原理凯氏定氮法测定总氮含量分为样品消化、蒸馏、吸收和滴定4个过程。其原理是样品中含氮有机化合物与浓硫酸在催化剂作用下共热消化，含氮有机物分解产生氨，氨又与硫酸作用，变成硫酸铵。然后加碱蒸馏放出氨气，氨气经过量的盐酸标准溶液吸收，再用氢氧化钠标准溶液滴定过量的盐酸，求出总氮量。(2)实验仪器、试剂及实验材料实验仪器凯氏定氮法全套装置AY220电子分析天平，岛津（香港）有限公司试剂硫酸钾（AR，广州化学试剂厂）、硫酸铜（AR，广东汕头市西陇化工厂）、浓硫酸（AR，广东东红化工厂）、40%氢氧化钠溶液、指示剂（0.1%甲基红乙醇溶液）、 0.01mol/L盐酸标准溶液、0.01m
44、ol/L氢氧化钠标准溶液注：所有试剂均用不含氨的蒸馏水配置实验材料粉碎后常温密封保存的脂树种子粉末(3)实验操作步骤 GB-T5511-2008 谷物和豆类 氮含量测定和粗蛋白质含量计算 凯氏法样品处理（消化）精密称取23g样品，移入干燥的100mL凯氏瓶中，加入0.2g硫酸铜，0.6g硫酸钾及10mL浓硫酸，稍摇匀后于瓶口放一小漏斗，将瓶以45角斜支于可调式电炉上，小火加热，待内容物全部炭化，泡沫完全停止后，加强火力，并保持瓶内液体微沸，至液体呈蓝绿色澄清透明后，再继续加热30min60min。取下放冷后，小心加水20mL，再放冷后，移入100mL容量瓶，并用少量水分次清洗凯氏瓶，洗液并入容
45、量瓶中，用蒸馏水稀释至刻度，混匀备用。同时做空白试验。蒸馏、吸收及滴定连接好定氮装置后，于水气发生器内装水约2/3处加甲基红指示剂数滴及数毫升浓硫酸，以保持水呈酸性，加入数粒沸石以防暴沸。向接收瓶中加入20mL0.01mol/L盐酸标准溶液及混合指示剂2滴，并使冷凝管下端插入液面下至少0.5cm，吸取5mL样品消化液由小漏斗流入反应室，并以23mL蒸馏水洗涤小漏斗使其流入反应室内，夹好小漏斗的橡皮管。将10mL40%氢氧化钠溶液倒入小漏斗中，并使其缓慢流入反应室，立即将夹子夹紧，并加水于小漏斗上以防漏气。夹紧螺旋夹，开始蒸馏，蒸气通入反应室使氨气通过冷凝管进入接收瓶内，蒸馏5min，移动接收瓶
46、，使冷凝管下端离开液面，再蒸馏1min，然后用少量水冲洗冷凝管下端。取下接收瓶，以0.01mol/L氢氧化钠标准溶液滴定至黄色为终点。同时吸取空白消化液做空白。根据所用氢氧化钠溶液的体积进行总氮计算。2.2.3 脂树种子中灰分含量的测定(1)实验原理将一定量的脂树种子粉末经55010高温灰化至有机物完全灼烧挥发后，称量其残留物即其灰分。(2)实验仪器、试剂及材料实验仪器AY220电子分析天平，岛津（香港）有限公司KSW-2D-11电阻炉温度控制器，沈阳市节能电炉厂试剂三氯化铁溶液（5g/L）实验材料粉碎后常温密封保存的脂树种子粉末(3)实验操作步骤 GBT 5505-2008 粮油检验 灰分测
47、定法坩埚处理取洁净干燥的瓷坩埚，用蘸有三氯化铁蓝黑墨水溶液的毛笔在坩埚上编号。然后将编号坩埚放入55010马福炉内灼烧3060min，移动坩埚至炉门口处，待坩埚红热消失后，转移至干燥器内冷却至室温，取出并称量坩埚的质量，再重复灼烧、冷却、称重，直至前后两次质量差不超过0.000 2g，记录坩埚质量。样品测定称取混匀试样23g，准确至0.000 2g，于处理好的坩埚中，将坩埚放在电炉上，错开坩埚盖，加热试样至完全碳化为止。然后将坩埚放在55010马福炉内，先放在炉口片刻，再移入炉膛内，错开坩埚盖，关闭炉门，在55010下灼烧23h。在灼烧过程中，应将坩埚位置调换一到两次，样品灼烧至黑色碳粒全部消失变成灰白色为止。移动坩埚至炉门处，待坩埚红热消